慈姑蛋白酶抑制剂基因转化小白菜获抗虫转基因植株

通过根癌农杆菌的介导将慈姑蛋白酶抑制剂基因（ＡＰＩ）导入小白菜（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｃａｍ ｐｅｓｔｒｉｓｓｓｐ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓＬ．）。Ｋａｎａｍ ｙｃｉｎ 筛选浓度为１０～１５ ｍ ｇ·Ｌ－ １，抑制农杆菌生长的抗生素选用Ｃａｒｂｅｎｉｃｉｌｌｉｎ，浓度为３００～５００ ｍ ｇ·Ｌ－ １。小白菜带柄子叶被农杆菌感染后，抗性芽的诱导频率为０．２％ ～２．０％ 。加入适量的ＡｇＮＯ３ 不仅可以抑制过度生长的农杆菌，还可以使抗性芽的诱导频率约提高到５％ 。试验获得转基因植株９７ 株。其中８１ 株ＰＣＲ 检测为阳性。部分转基因植株经ＰＣＲＳｏｕｔｈｅｒｎ 及ＲＴＰＣＲ 的进一步分子检测分析，证明ＡＰＩ基因已被整合进小白菜植株的基因组中。转基因小白菜的叶片离体饲虫初步试验结果表明：对鳞翅目害虫菜青虫的生长发育有一定的抑制作用，其幼虫摄食转基因植株叶片后，平均体重、体长均分别比对照（摄食非转基因植株叶片）减轻和短小，且约有２７．８％ 的幼虫不能正常羽化，而对照全部正常羽化。

不结球白菜抗病育种的研究——Ⅱ.TuMV 抗源鉴定与筛选

1984～1988年以87个不结球白菜自(近)交系为原始材料,进行了芜菁花叶病毒(TuMV)抗性鉴定,并选留无症或轻症单株进行了4轮系谱选择.试验结果表明,未经筛选的原始材料均为高感,在高感群体中选择无症或轻症单株进行系谱选择后,抗病性逐渐提高,选择效应随品种和世代而异。经4轮系谱选择后获得15个抗芜菁花叶病毒的株系,作为抗源加以保存和有效利用。

不结球白菜抗病育种的研究 Ⅶ.矮抗四号新品种的选育

１９９１～１９９４年在抗芜菁花叶病毒（ＴｕＭＶ）和霜霉病研究工作的基础上，利用杂种优势育种技术，以抗病矮脚黄雄性不育两用系为母本，以９３Ｒ－３７（自交系）为父本，选育出综合性状优良的矮抗四号三抗新品种。其特点：（１）丰产：夏季、秋季生产试验平均产量分别达４２．２和６３．４ｔ／ｈｍ２，比对照矮杂一号和矮抗一号分别增产２２．９％和２５．１％；（２）抗病：ＴｕＭＶ、霜霉病、黑斑病人工鉴定病情指数分别为１．８５（ＨＲ），１５．４８（Ｒ）和１０．１０（ＨＲ）；（３）优质：Ｖｃ含量比对照提高５．２％，有机酸含量低于对照，叶片和叶柄可溶性固形物含量均高于对照矮抗一号；（４）耐热：热害指数低（９．７５），比对照矮杂一号（４２．５０）降低了３３５％；叶片厚为０．５５ｍｍ，是对照的１．４９倍。

转化CaMV基因Ⅵ芸薹属蔬菜植株抗病性鉴定及其遗传分析

以转化CaMV弱株系Bari 1基因Ⅵ的大白菜、菜薹、紫菜薹和花椰菜植株为试材 ,研究了CaMV弱株系Bari 1基因Ⅵ所提供的遗传工程交叉保护及其遗传规律。结果表明 ,在转化CaMV弱株系Bari 1基因Ⅵ的大白菜、菜薹、紫菜薹和花椰菜植株中 ,4 8.0 8%对CaMV强株系CABB BJI具有较强的抗性 ,5 1.92 %表现为敏感。抗性基因 (CaMVBari 1基因Ⅵ )在自交代 (S1)中大多数 (76 % )表现为典型的孟德尔单基因显性遗传 ,部分株系的抗性出现了15∶1,1∶1,1∶3和

优质抗病青菜新品种“小叶青”的选育

于１９８６～１９９４年，利用现有青菜种质资源，通过杂交实现基因重组，并经连续多代自交纯化，选育出两个高代自交系，自交系间再杂交复配育成了一个新品种“小叶青”。每一自交子代及最终配制的组合均严格进行室内、田间“三抗”性（抗ＴｕＭＶ、霜霉病和黑斑病）鉴定。所育成的“小叶青”抗病性强，商品性状与市场要求相吻合，产值比“矮抗青”提高２０％左右。

白菜对病毒病霜霉病黑斑病的三抗性鉴定与筛选标准

白菜对病毒病、霜霉病和黑斑病苗期人工接种和田间自然诱发相结合的三抗性鉴定与筛选方法标准包括品种试材安排，接种体准备，接种苗龄，接种顺序，病原适比浓度，鉴定与筛选环境条件，病害的诱发措施和管理，调查方法及病情分级标准，抗病与感病指标，筛选技术和规程等。

气温对不结球白菜低温敏感型胞质雄性不育性的影响

甘蓝型油菜POL细胞质雄性不育源在十字花科蔬菜雄性不育转育中普遍存在对低温敏感的难题[1,2,3]。本试验拟研究不结球白菜POL雄性不育性受气温影响的变化规律、影响的临界温度、低温影响至育性表达的时间,同时筛选对低温敏感程度低的胞质雄性不育系,确定适宜的播种期,为该...

抗虫转基因白菜类蔬菜作物培育研究进展

就影响白菜类蔬菜作物离体培养再生频率的主要因素 (如植物基因型、激素浓度及其配比、外植体类型和生理状态等 )与不同抗虫基因 (如 Bt基因、蛋白酶抑制剂基因和雪花莲凝集素基因等 )在白菜类蔬菜作物中的应用作简要综述。

白菜抗芜菁花叶病毒(TuMV)鉴定及抗源筛选

[目的]筛选出抗芜菁花叶病毒(Tu MV)的白菜种质资源。[方法]选取8份白菜高代自交系种质材料,在3叶期人工磨擦接种Tu MV-C4株系,进行抗/感病表型调查、d CAPS功能标记筛选以及ELISA试验鉴定。[结果]1600011-1、1600043-3、1600045-3和1600331-3为Tu MV感病材料;1600031-2、1600067-2、1600105-1和1600485-2为Tu MV抗病材料。[结论 ]研究鉴定了大白菜抗Tu MV的性状,为大白菜抗Tu MV育种提供了抗源材料。

小白菜苏云金芽孢杆菌CryIB基因的遗传转化

用限制酶 ＳｐｈⅠ和 Ｅｃｏ ＲⅠ消化质粒 ｐ Ｂ Ｙ Ｔ Ｅ Ｓｐ１０１－ １和ｐ Ｂ Ｑ Ｘ，将ｐ Ｂ Ｑ Ｘ 上的经改造过的苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因 Ｃｒｙ Ｉ Ｂ取代 ｐ Ｂ Ｙ Ｔ Ｅ Ｓｐ１０１－ １上的 Ｇ Ｕ Ｓ基因，得到一个中间克隆ｐ Ｂ Ｉ Ｗ Ｉ Ｑ－ １．用限制酶 ＨｉｎｄⅢ消化质粒ｐ Ｂ Ｉ Ｗ Ｉ Ｑ－ １，回收含 Ｃｒｙ Ｉ Ｂ基因的５１ ｋｂ Ｄ Ｎ Ａ 片段，插入质粒ｐ Ｂ Ｉ Ｎ１９的 ＨｉｎｄⅢ位点，构建成具卡那霉素抗性的植物表达载体 ｐ Ｂ Ｉ Ｗ Ｉ Ｑ－ ５．用三亲结合法将质粒 ｐ Ｂ Ｉ Ｗ Ｉ Ｑ－ ５转入农杆菌 Ｅ Ｈ Ａ１０５．通过农杆菌介导的方法将 Ｃｒｙ Ｉ Ｂ 基因导入小白菜． Ｐ Ｃ Ｒ 扩增、 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ 和 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分析表明：杀虫晶体蛋白基因 Ｃｒｙ Ｉ Ｂ已整合到小白菜基因组中。

Brassica campestis对黑腐病抗性的遗传

黑腐病由黄单胞杆菌属细菌Xantho-monas campestris PV.campestris侵染所致,是世界性的十字花科病害,尤其在甘蓝上危害严重.在中国,黑腐病目前已成为白菜的重要病害.1986年,北京因白菜黑腐病流行,造成20%减产,严重影响了白菜的生产和供应.黑腐病是一种维管束病害,它的症状特征是引起维管束坏死变黑.病菌从幼苗子叶叶缘的气孔侵入,引起发病,逐渐枯死或蔓延至真叶。