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结球甘蓝抗虫转基因植株及其后代的抗性表现 被引量:12
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作者 佘建明 蔡小宁 +5 位作者 朱卫民 张初贤 丁万霞 李建斌 李彬 朱祯 《江苏农业学报》 CSCD 2001年第2期73-76,共4页
应用农杆菌介导法将含有豇豆胰蛋白酶抑制剂 (CpTI)基因和新霉素磷酸转移酶 (NPTⅡ )基因的重组质粒导入结球甘蓝栽培品种春甘蓝“鸡心 2 3”和秋甘蓝“黑叶头”。对转基因当代植株 (T0 )及其自交后代 (T1、T2 、T3)群体进行卡那霉素抗... 应用农杆菌介导法将含有豇豆胰蛋白酶抑制剂 (CpTI)基因和新霉素磷酸转移酶 (NPTⅡ )基因的重组质粒导入结球甘蓝栽培品种春甘蓝“鸡心 2 3”和秋甘蓝“黑叶头”。对转基因当代植株 (T0 )及其自交后代 (T1、T2 、T3)群体进行卡那霉素抗性、抗虫性鉴定和分子检测。经PCR DNA分子杂交检测 ,确认抗虫基因———豇豆胰蛋白酶抑制剂基因已整合到受体植株的基因组中 ,并在有性生殖过程中传递给后代。卡那霉素抗性和抗虫性状在T0 代植株上得到表达 ;T1代植株中发生分离 ;T2 代中呈现出 3种不同类型的株系 :抗性纯合、杂合型和敏感性纯合株系 ;从T3 代中获得卡那霉素抗性和抗虫性纯合的株系。试验结果显示 ,卡那霉素抗性和抗虫性状在转基因植株自交后代中的表现基本符合显性单基因的分离规律。在T2 、T3 代抗虫性纯合的株系中 ,鳞翅目小菜蛾、甜菜夜蛾和斜纹夜蛾的 1~ 2龄幼虫校正死亡率为 6 %~ 10 0 % ,从中选出一批校正死亡率达 80 展开更多
关键词 结球甘蓝 转基因植株 豇豆胰蛋白酶抑制剂 新霉素磷酸转移酶 卡那霉素抗性 抗虫性
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结球甘蓝RAPD反应条件的优化 被引量:5
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作者 刘冲 薄天岳 +3 位作者 葛才林 任云英 陈锦秀 杨晓锋 《上海农业学报》 CSCD 2005年第3期114-117,共4页
以甘蓝(Brassicaoleraceavar.capitata)基因组DNA为模板,比较筛选RAPD扩增体系的各影响因素,优化了甘蓝的RAPD反应体系,调整了扩增程序。该体系反应总体积为20μL,其中25mmol/LMgCl22.0μL,10×PCRBuffer2.0μL,10mmol/LdNTP0.5μL,... 以甘蓝(Brassicaoleraceavar.capitata)基因组DNA为模板,比较筛选RAPD扩增体系的各影响因素,优化了甘蓝的RAPD反应体系,调整了扩增程序。该体系反应总体积为20μL,其中25mmol/LMgCl22.0μL,10×PCRBuffer2.0μL,10mmol/LdNTP0.5μL,5U/μLTaqE0.5μL,20ng/μLPrimer1.5μL,10ng/μL模板DNA3μL,灭菌双蒸水10.5μL。适宜的扩增程序为:94℃预变性5min;94℃变性1min,37℃复性1min,72℃延伸1.5min,40个循环;72℃延伸10min后15℃保存。 展开更多
关键词 甘蓝 RAPD 体系优化
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结球白菜幼胚培养技术研究
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作者 张广楠 邵登魁 +2 位作者 侯全刚 李江 李全辉 《北方园艺》 CAS 北大核心 2013年第8期48-50,共3页
以结球白菜亲本为试材,从胚龄选择、激素水平的筛选和生根培养基的筛选3个方面,进行了结球白菜幼胚培养技术研究。结果表明:胚龄为18~25d的幼胚最易培养,最佳激素水平为:MS+NAA 0.6mg/L+6-BA 1.5mg/L+30g/L蔗糖+0.7%琼脂,最适生根培养... 以结球白菜亲本为试材,从胚龄选择、激素水平的筛选和生根培养基的筛选3个方面,进行了结球白菜幼胚培养技术研究。结果表明:胚龄为18~25d的幼胚最易培养,最佳激素水平为:MS+NAA 0.6mg/L+6-BA 1.5mg/L+30g/L蔗糖+0.7%琼脂,最适生根培养基为:1/2MS+NAA 0.3mg/L+30g/L蔗糖+0.7%琼脂。 展开更多
关键词 结球白菜 幼胚 组织培养
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黄瓜花粉管通道法抗虫基因导入及卡那霉素抗性筛选 被引量:15
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作者 魏爱民 张文珠 +3 位作者 杜胜利 韩毅科 张桂华 刘楠 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2008年第6期54-57,共4页
研究了不同浓度卡那霉素(Km)对未转化黄瓜种子萌发及幼苗生长的影响,建立了转基因黄瓜卡那霉素抗性筛选体系。种子首先播在含Km 200 mg/L的1/2MS培养基中,能有效地抑制黄瓜幼苗生长,10 d后剪掉根系扦插移栽于蛭石中,能促使非转基因植株... 研究了不同浓度卡那霉素(Km)对未转化黄瓜种子萌发及幼苗生长的影响,建立了转基因黄瓜卡那霉素抗性筛选体系。种子首先播在含Km 200 mg/L的1/2MS培养基中,能有效地抑制黄瓜幼苗生长,10 d后剪掉根系扦插移栽于蛭石中,能促使非转基因植株衰弱或死亡,有效地加速筛选。应用该筛选体系对花粉管通道法获得的抗虫转基因黄瓜T0种子进行初步筛选,获得Km抗性植株,抗性植株筛选率为1.6%,其中8.9%经PCR分子检测为阳性植株,初步证实EQKAM抗虫基因已整合到黄瓜基因组中。 展开更多
关键词 黄瓜 花粉管通道法 卡那霉素
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结球甘蓝的离体再生及基因转化研究初报
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作者 柳建军 于洪欣 《山东农业科学》 2002年第1期18-19,共2页
以下胚轴为外植体 ,通过根癌农杆菌介导法将抗虫基因 (CpTI)导入结球甘蓝品种北早。共培养 2天后 ,转到MS +1 0mg/L 6 -BA +0 2mg/LNAA +4 0mg/LAgNO3 +10mg/L卡那霉素 +5 0 0mg/L羧苄青霉素的分化选择培养基上进行筛选。将筛选出的绿... 以下胚轴为外植体 ,通过根癌农杆菌介导法将抗虫基因 (CpTI)导入结球甘蓝品种北早。共培养 2天后 ,转到MS +1 0mg/L 6 -BA +0 2mg/LNAA +4 0mg/LAgNO3 +10mg/L卡那霉素 +5 0 0mg/L羧苄青霉素的分化选择培养基上进行筛选。将筛选出的绿色抗性芽苗培养生根 ,移栽成活 。 展开更多
关键词 结球甘蓝 下胚轴 根癌农杆菌 CPTI 基因转化 离体再生 抗虫育种
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露地越冬春甘蓝新品种“商甘蓝一号”的选育
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作者 韩灿功 任晓雪 +1 位作者 赵跃锋 秦伟 《北方园艺》 CAS 北大核心 2012年第6期179-180,共2页
"商甘蓝一号"是以‘商甘9401’和‘商甘9408’2个自交不亲和系交配育成的露地越冬春甘蓝新品种。该品种冬性强,耐抽薹,高产优质。国家区域试验中"商甘蓝一号"平均每667m2产量3 771.4kg,较对照"春丰"增产2... "商甘蓝一号"是以‘商甘9401’和‘商甘9408’2个自交不亲和系交配育成的露地越冬春甘蓝新品种。该品种冬性强,耐抽薹,高产优质。国家区域试验中"商甘蓝一号"平均每667m2产量3 771.4kg,较对照"春丰"增产21.7%,国家生产试验平均每667m2产量3 623.8kg,较对照"春丰"增产10.24%。 展开更多
关键词 露地越冬 春甘蓝 “商甘蓝一号” 一代杂种
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Screening Method for Transgenic Maize with Kanamycin Resistance 被引量:2
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作者 LU Meng-yu DONG Fu-shuang ZHANG Jun-min WANG Hai-bo 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2011年第7期954-957,共4页
[Objective]The paper was to establish simple and effective method to screen marker gene in maize with kanamycin resistance.[Method]Using inbred line "Chang 7-2" and hybrid "Zhengdan 958" of maize a... [Objective]The paper was to establish simple and effective method to screen marker gene in maize with kanamycin resistance.[Method]Using inbred line "Chang 7-2" and hybrid "Zhengdan 958" of maize as test materials,their seeds were soaked with different concentrations and volumes of kanamycin for3 and 4 d,respectively,the rate of albino seedlings and average seedling height after sowing for10 d were investigated.[Result]The rate of albino seedlings not only was related to kanamycin concentration,but also had relationship with solution volume during soaking process.The difference between inbred line and hybrid was no significant.When 100 ml of kanamycin solution with concentration of 200 mg/L was used to soak seeds for 3 d,the rate of albino seedlings basically could reach 100%.When 100 ml of kanamycin solution with concentration of 100 mg/L was used to soak 20 seeds for 3 d to carry out resistance screening,the accuracy was up to 84.8% after verifying the screening test of T1 transgenic maize plants.[Conclusion]The method was feasible,which could be used as a simple method for screening transgenic gene maize with kanamycin resistance. 展开更多
关键词 卡那霉素抗性 转基因玉米 筛选方法 筛选标记基因 郑单958 白化苗 试验材料 昌7-2
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