番茄育种研究主要进展——文献综述

对近年来国内外番茄育种研究在抗病、抗逆和品质改良方面所获得的主要进展进行了综述，并就我国今后番茄育种的主要研究方向进行了讨论。

番茄ACC合成酶cDNA克隆及其对果实成熟的反义抑制

利用ＲＴＰＣＲ技术克隆了ＡＣＣ合成酶多基因家族成员之一ＬＥＡＣＣ２编码区约１７ｋｂ的ｃＤＮＡ，经酶切图谱和序列分析鉴定无误后，反向插入到植物表达载体ｐＢｉｎ４３７中，构建了表达ＡＣＣ合成酶反义ＲＮＡ的二元载体。经农杆菌途径转化番茄“丽春”品种后，通过ＰＣＲ检测从抗卡那霉素再生植株中筛选到６株转基因植株，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交确证了外源基因是以单拷贝插入到番茄染色体中；对果实乙烯释放的测定结果表明转基因番茄果实的乙烯释放量仅为对照的３０％左右，在室温下转基因番茄果实采后保存６０ｄ以上仍然没有变红、软化。以上结果表明其反义ＲＮＡ在转基因番茄中的表达能有效地抑制乙烯的生物合成从而延缓果实成熟，表现出良好的耐储保鲜特性。对转基因植株子一代（Ｔ１）的分析结果进一步表明反义ＡＣＣ合成酶基因以典型的单基因方式传到子代。通过对子二代的分析已初步筛选到一个耐储藏的转基因番茄纯合品系。

低温胁迫对番茄苗期和花期若干性状的影响

低温门℃和12 t）下番茄种子和花粉的发芽率、下胚轴和花粉管生长速度、坐 果率均与品种耐寒性呈显著的正相关。在田问自然低温下，番茄的生长速度、开花、结果和授 粉受精能力受到不同程度的抑制，但在不同的品种间表现出了很大的差异，耐寒品种强于不耐 寒品种。

野生番茄耐盐性研究及其利用

将带有二叶一心的小苗扦插于附加不同浓度 Na Cl的 MS培养基中 ,研究不同番茄材料发根、植株生长以及 POD酶酶谱及其活性的变化 ,并通过花粉管导入技术将野生番茄的总 DNA导入到栽培种。研究结果表明 ,Lycopersicon pennellii LA71 6和 Lycopersicon pimpinellifoliumLA2 1 84始终具有相对高的生根率 ,在 1 50 mmol/L Na Cl胁迫 1 0 d时 ,相对发根率分别为 86.8%和1 0 0 %。参试的 4份野生种 ,在附加有 75mmol/L Na Cl的培养基上的株高和叶片数均高于对照 (无Na Cl) ,随着 Na Cl浓度的不断提高 ,株高和叶片数都下降 ,Lycopersicon pennellii LA71 6下降幅度最小。 4份野生种的耐盐性明显优于 2份栽培种 ,当 Na Cl浓度提高到 30 0 mmol/L时 ,4份野生种的鲜重可达对照的 0 .90、1 .0 7、1 .60和 1 .53倍 ,而 2份栽培种则为对照的 0 .55和 0 .33倍。当Na Cl浓度为 75mmol/L时 ,Lycopersicon peruvianum LA1 1 1和 Lycopersicon pennellii LA71 6材料 POD酶酶带数多于对照 2条和 1条 ,Lycopersicon cheesmanii LA1 66和 Lycopersicon pimpinellifoliumLA2 1 84则少于对照 1条和 3条。利用花粉管导入技术可以将野生番茄的 DNA导入到栽培番茄。

表达黄瓜花叶病毒外壳蛋白的转基因番茄及其对CMV的抗性

利用根瘤土壤杆菌Ｔｉ质粒转化系统，采用叶盘法将ＣＭＶ－Ｃｐ基因转入番茄细胞中，获得４２株转基因植株，经Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测，证明ＣＭＶ－ｃｐ基因已进入番茄核染色体中，并能正常表达。通过对转基因植株Ｒ１和Ｒ２代苗期人工接种ＣＭＶ鉴定，发现ＣＭＶ－Ｃｐ基因产物对ＣＭＶ有一定抗性，其抗性遗传符合孟德尔一对基因控制性状的遗传规律并能稳定遗传。

江苏省番茄晚疫病菌小种鉴定及品种抗性筛选

分离纯化72份采自江苏省的番茄晚疫病标样,获得番茄晚疫病菌菌株35株。采用亚洲蔬菜研究与发展中心提供的5个鉴别寄主进行生理小种鉴定,鉴定结果表明:江苏省番茄晚疫病菌的小种类型有T0、T1、T1.2、T1.2.3、T1.3.4,其中T1.2地理分布最广,出现频率最高,占鉴定总数的37.2%;其次为T1,占总数的34.3%;T1.2.3、T1.3.4和T0分别占鉴定总数的17.1%、5.7%和5.7%。采用优势小种T1.2对54份番茄品种或育成品系进行苗期喷雾接种,结果表明:高抗、中抗、高感品种分别占鉴定总数的14.8%、7.4%和77.8%,其中高抗材料均来自野生材料和野生材料杂交转育的后代,而江苏省生产上大部分主栽品种对晚疫病菌均表现为感病。因此,江苏省番茄生产应该高度重视抗病品种的引进和培育。

外源钙对低温胁迫下番茄幼苗生化指标及膜伤害的研究

以番茄为试材,研究了低温胁迫下外源钙对番茄幼苗生理生化指标及膜伤害程度的影响。结果表明:喷施钙盐后可以降低番茄幼苗电解质渗透率和丙二醛含量,同时增加番茄幼苗的可溶性蛋白质和可溶性糖的含量,说明钙在番茄幼苗抗冷调控过程中起了重要作用。

NaCl胁迫下番茄若干生理指标的变化

植物抗盐性指标是研究植物抗盐机理和抗盐能力的基础,研究以番茄为材料在0、501、001、502、00 mmol/LNaCl胁迫下分别于02、、46、8、d取番茄叶片进行生理指标的测定。结果表明:随NaCl浓度升高,植株叶片受影响加强,表现为:电导率、MDA含量先升高后降低;POD活性升高;叶绿素含量先降低后升高;游离脯氨酸含量升高,可溶性蛋白,可溶性糖含量先升高再降低。研究为深入改善番茄的胁迫耐受能力提供依据。

利用细胞筛选方法获得番茄抗晚疫病突变体的研究

以番茄品种Alpatieva 90 5a和品系Line 1的子叶、下胚轴为外植体诱导愈伤组织进行细胞育种 ,培养基中附加不同浓度的制霉菌素 (Nystatin)用于突变体的筛选 ,结果表明 :两个品种制霉菌素的临界致死浓度 (仅存活 2 %微型愈伤组织时的浓度 )分别为 14 0mg/L和180mg/L。再生植株分别在培养皿内 (试管苗 )和温室等条件下进行了抗晚疫病鉴定 。

类番茄茄与番茄属间有性杂交的研究

用类番茄茄与番茄属的 9个种进行有性杂交 ,通过人工离体胚培养获得栽培番茄‘粤农二号’×类番茄茄的F1植株。杂种近于不育。用栽培番茄、类番茄茄、野生番茄及(栽培番茄×野生番茄 )与之回交及杂交 ,获得与栽培番茄的回交子一代及与秘鲁番茄、多腺番茄、潘那利番茄、粤农二号×秘鲁番茄F1的杂种 ,但它们的能育性很低。用栽培番茄、野生番茄与它们再回交及杂交 ,未能得到与栽培番茄的二次回交子一代 ,只获得 (粤农二号×类番茄茄 )× (粤农二号×秘鲁番茄 )的F1与秘鲁番茄、多腺番茄的复合杂种。人工苗期接种黄瓜花叶病毒 (CMV)结果表明 ,类番茄茄及其与番茄属的远缘杂种对CMV有较强的抗性。

抗番茄黄化曲叶病基因ty-5序列变异及表达分析

番茄黄化曲叶病是番茄的主要病害之一,选育抗病品种是抵御该病害的重要途径。本研究对目前应用较少的抗番茄黄化曲叶病基因(ty-5)进行研究,对克隆片段进行序列分析,确定该基因在启动子区域和转录区域均存在碱基突变,并利用含有该基因的抗病材料AVTO1227对ty-5的表达进行分析,不同材料中ty-5及其等位基因Ty-5的表达量在接种番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)前后均没有显著变化。本研究为下一步针对ty-5翻译区域内单核苷酸变异导致其功能变化的研究提供了依据,同时也为抗番茄黄化曲叶病育种提供了有效的连锁标记。

转美洲拟鲽抗冻蛋白基因(afp)番茄致死温度测定及其在生态学上预测

将转美洲拟鲽抗冻蛋白基因第四代番茄及对照低温锻炼后，测定其苗期致死温度，发现转基因各组致死温度较未转基因对照明显降低１～２℃。说明转ＡＦＰ基因番茄抗寒力增强，为在北方提早育苗，定植，提早上市提供条件，具有明显经济效益。对几年来转基因后代的田间形态学观察、记录的结果进行了有效积温指标的计算，推测转基因番茄可能跨过一个积温带，扩大其栽培范围。

番茄苗期耐盐性相关指标的筛选研究

研究了番茄苗期耐盐性相关的指标,测定不同NaCl胁迫下不同耐盐性番茄品种苗期盐害指数、相对电导率、游离脯氨酸含量、过氧化物酶活性、过氧化氢酶活性、叶绿素含量、可溶性糖含量和丙二醛含量。结果表明:盐害指数、相对电导率、脯氨酸含量、过氧化物酶活性和过氧化氢酶活性可以作为番茄耐盐性筛选的指标。

亚精胺对盐胁迫下番茄种子萌发的影响

以白果强丰番茄品种为试材,研究了100 mmol/L NaCl盐胁迫下,0、0.1、0.25、0.35和0.5 mmol/L亚精胺(Spermidine,Spd)对番茄种子的发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数、MDA含量和相对电导率的影响。结果表明:在低浓度范围内,随着Spd浸种浓度的升高,番茄种子的发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数均逐渐升高,MDA含量和相对电导率逐渐降低。而高浓度的Spd浸种处理的番茄种子MDA含量和相对电导率增加,发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数降低,并低于对照处理。总之,当Spd浓度为0.25 mmol/L时作用效果最佳。

国外番茄抗病育种研究概述

国外番茄抗病育种研究概述张英杰（辽宁省农业科学院园艺所·沈阳）张举梅（黑龙江省农业科学院）张赓红（辽宁省农业科学院·沈阳第一作者简介张英杰，女，１９６３年８月出生。１９８７年毕业于北京农业大学园艺系果树专业。１９８７年８月分配到辽宁省农业科学院园艺所...

番茄双抗TMV和CMV基因工程的研究

在ＴＭＶ外壳蛋白（ＣＰ）基因的５′和３′端分别合成寡聚核苷酸引物Ｐ１和Ｐ２，并分别引入ＣｌａＩ和ＢａｍＨＩ位点，采用ＰＣＲ技术扩增ＴＭＶＣＰ基因，用ＣｌａＩＢａｍＨＩ消化后重组到ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＫＳ＋中，并将该基因与ＣＭＶＣＰ基因重组在同一个表达载体ｐＥ３上获得双价ＣＰ基因表达载体ｐＥＴＣ２，转化番茄，获得再生植株。通过点杂交、ＰＣＲ检测和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，证实２、１２和１３号为转ＴＭＶ和ＣＭＶＣＰ基因的工程植株。工程植株在温室中表现正常，比对照植株表现出明显的抗性。

抗番茄黄化曲叶病新品种苏粉15号选育及早春栽培技术

番茄新品种苏粉15号为无限生长类型的1代杂交品种,成熟果粉红色,约220 g,对番茄黄化曲叶病具有很高的抗性。对该品种的选育过程、品种特性和早春栽培技术进行详细介绍,为该品种的生产推广提供技术指导。

番茄不同品种抗青枯病研究

用南昌市郊区蔬菜技术推广站育成的两个新品种（Ｆ＿１）洪番１，２号及对照早丰、郑州８５３、西粉三号等品种（系）进行接种试验，结果表明：番茄不同品种对青枯病的抗性有很大差异，其中洪番２号和１号抗病性较强，其病情指数分别为１４．２和２０．０．经方差分析，多重比较ＬＳＤ测验，洪番１号与２号之间的差异性显著；洪番１号和２号与早丰、郑州８５３和西粉三号的病情指数均达到极显著差异。

不同番茄品种对青枯病的抗性研究

对６个番茄品种进行田间接菌试验比较，结果表明“湘引７９－１”是一个高抗青枯病的抗原材料，而“特罗皮克”、“５２４（九龙大红）”具有一定抗性，“大黄皮”、“强力米寿”、“强丰”为易感青枯病品种。