苦瓜McMLO11基因克隆及其表达模式分析

【目的】克隆苦瓜McMLO11基因并研究其在白粉病和非生物胁迫下的表达规律,为阐明其在逆境调控中的作用提供参考。【方法】从苦瓜叶片中克隆McMLO11基因,利用生物信息学对其分子特征进行分析,并采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法,检测McMLO11基因在苦瓜不同组织(茎、卷须、老叶、嫩叶、根)及白粉菌侵染和盐、干旱胁迫下苦瓜真叶中的表达模式。【结果】苦瓜McMLO11基因含有1个1662 bp的开放阅读框(ORF),共编码553个氨基酸;McMLO11属于MLO基因家族,包含典型的Mlo超家族保守结构域。McMLO11蛋白的相对分子质量为63.83 ku,理论等电点为8.53,含7个跨膜域,无信号肽,属于不稳定蛋白;其二级结构主要由无规则卷曲和α-螺旋组成。系统进化树分析表明,McMLO11与黄瓜、南瓜、冬瓜等瓜类的MLO同源性较高。qRT-PCR检测发现,Mc-MLO11基因在苦瓜不同组织中的相对表达量依次表现为茎>卷须>老叶>根>嫩叶;与对照相比,白粉菌侵染后苦瓜叶片中的McMLO11表达量升高,至接种24 h达到峰值,推测其在白粉菌侵染苦瓜的早期产生应答反应;与对照相比,在盐胁迫6 h和干旱胁迫12 h时苦瓜叶片中的McMLO11相对表达量达到峰值,分别为对照的56.7和9.07倍,提示McMLO11基因可积极响应干旱和盐诱导。【结论】成功克隆了苦瓜McMLO11基因,其表达具有组织特异性,该基因可能参与白粉菌胁迫和多种非生物胁迫的调控过程。

多样性苦瓜资源果实品质评价分析

为促进苦瓜种质资源的优势利用,对82份苦瓜种质资源的11项果实品质指标进行评价分析。运用高效液相色谱(HPLC)鉴定多样性苦瓜资源果实中果糖、葡萄糖、苹果酸、莽草酸、柠檬酸、富马酸、L-抗坏血酸、脱氢抗坏血酸等品质成分的含量,统计变异幅宽以及资源分布规律,进行成分相关性分析和资源聚类分析,并采用熵值法对各品质指标进行权重分析和价值评价,构建标准化值加权法的品质综合评价模型。结果表明,82份苦瓜种质资源的果实品质指标变异性较强且多呈近似偏/正态分布。其中,脱氢抗坏血酸、莽草酸和总抗坏血酸的变异系数最大,分别为1.13、0.83、0.79,各品质指标除果糖、脱氢抗坏血酸和总抗坏血酸含量外均呈近似偏/正态分布。相关性分析表明,各品质指标间均存在相关性,其中可溶性固形物含量与含水率显著负相关,可溶性糖含量与苹果酸含量、富马酸含量显著正相关,总抗坏血酸含量与可溶性糖含量、苹果酸含量及富马酸含量显著负相关。系统聚类分析将苦瓜种质资源划分为3个类群,一类群口感佳(糖酸含量高),二类群干物质含量高、口感适中,三类群营养物质抗坏血酸丰度高。依据构建的品质综合评价模型,分别筛选出4份综合品质较好及10份单项品质性状优良的资源。综上,苦瓜资源多样性丰富,基于品质分析及模型构建,为选育口感佳、营养足的新品种奠定材料基础。

苦瓜杂种优势利用初报

本文主要探讨苦瓜杂种优势利用的效果。试验结果表明，苦瓜一代杂种具有一定优势，因此，通过杂交组合选配可以育成具有丰产、早熟、优质、抗病的苦瓜一代杂种。本研究于１９８１年春利用强雌系（５）号作母本，通过组合力测定，选育出优良的杂交组合‘夏丰’１９８２～１９８４年全省夏秋苦瓜区试中，三年产量均比对照种‘江门大顶’增产，增幅为２９．０～５４．７％。在制种方法上主要以强雌系作母本，辅以人工去雄，提高一代杂种种子质量，是目前较经济可行的方法，为苦瓜杂种优势利用找到一条可行的途径。

早熟苦瓜新品种衡杂苦瓜1号的选育

衡杂苦瓜１号是以Ｂ０８为母本，Ｂ０２为父本育成的早熟苦瓜一代杂种，表现早熟、丰产、抗逆性强、品质优等优良特性．露地早熟栽培或春季保护地栽培，从定植到始收４３ｄ左右，夏秋栽培定植到始收４０ｄ左右，一般产量５２５００～８２５００ｋｇ／ｈｍ２，前期产量、总产量、品质性状显著优于衡阳早熟苦瓜和蓝山苦瓜．

苦瓜新组合白玉3号的选育

白玉 3号苦瓜是以T - 976 8和F - 96 4 6两个自交系配制而成的一代杂种。早熟 ,从定植到初收只需4 0d左右 ,植株雌花率和座果率都达到 85 %以上。前期单位面积产量达 80 0kg以上 ,总产量 35 0 0kg左右。平均单果重 4 2 0 g左右。果实圆筒形 ,长 2 5cm左右 ,粗 6 .5cm左右 ,果面瘤状突起粗大 ,果皮洁白、油亮 ,果肉味甘脆、微苦 ,是一抗逆性。

RAPD技术鉴定苦瓜杂种一代的研究

利用RAPD技术对苦瓜杂种一代顶优苦瓜及其父母本的特异性进行分析,结果引物OPU19扩增的OPU19-1600bp片断在父本和F1中出现,在母本中不出现;对该一代杂种的F2、B1、B2代进行的遗传分析表明:OPU19-1600bp片断可能与父本的某一对基因连锁,在F2、B1、B2代中符合孟德尔一对显性基因的分离规律,从而证实其可用于区分杂交种与母本的自交种。

大顶苦瓜新品种翠绿三号的选育

翠绿三号大顶苦瓜是广东省农科院蔬菜研究所以优良自交系江门大顶A11作母本、优良自交系南海大顶D12-3-1作父本配制而成的大顶苦瓜一代杂种。瓜短圆锥形、绿色,圆条瘤相间,以条瘤为主,条瘤粗直;瓜长14.7cm、横径7.5 cm、肉厚1.1 cm,单瓜重264.0 g;瓜形美观,肉质爽脆、苦味适中,品质优良;苗期鉴定表现中抗枯萎病和白粉病;一般每667 m2产量2 500 kg,适宜华南地区春、秋季种植。

苦瓜育种及相关基础研究进展

苦瓜虽然栽培历史悠久,但其育种及相关遗传基础研究起步较晚,落后于葫芦科其他主要瓜类蔬菜,目前主要集中在3个方面:一是产量、品质、熟性、主要果实性状及其他相关经济性状等的遗传研究;二是抗病性及其遗传基础研究;三是DNA分子标记在苦瓜遗传育种研究中的应用。近年来,许多学者采用品种提纯、有性杂交、杂种优势和诱变育种等方法,通过对耐冷凉、抗病、丰产、早熟、强雌系等苦瓜品种进行选育,育成一批表现较好的苦瓜品种,如大肉一号、桂农科一号和桂农科二号、玉5号、早优苦瓜、早绿苦瓜、农优1号、新科3号苦瓜、强雌品种"Q11-2"和"屿强-2"等。由于苦瓜的遗传育种研究基础相对比较薄弱,今后应加强对苦瓜主要性状遗传规律的研究,如主要性状的表现、杂种二代及以上性状的分离比例、主要性状的遗传力等;加强对苦瓜种质资源的收集、鉴定、评价,尤其是从苦瓜发源地引进种质资源;加强苦瓜分子育种的研究,如指纹图谱数据库、遗传多样性的研究及种质资源的创新利用等方面;建立苦瓜高效组织培养再生体系和高效苦瓜遗传转化体系,采用分子育种手段进行种质资源创新或品种改良;利用化学或物理方法处理愈伤组织以获得抗病、耐冷凉育种材料,或利用花粉小孢子进行培养等。苦瓜发源地国家之间或与苦瓜栽培国家之间应加强合作与交流,共享部分苦瓜种质资源,为苦瓜育种提供更多的基因来源。

苦瓜和菜豆种子的超干燥贮藏研究

本试验用氯化钙为干燥剂，将苦瓜种子合水量降至5.58％、4．09％、3．45％和2．71％，菜豆种子含水量降至7.44％、5．56％和4.55％。在室温下密闭贮存各批种子，6个月后检测种子生活力和活力，结果表明：低含水量的苦瓜种子生活力和活力保持较高水平，超干处理能够提高苦瓜种子的耐藏性：各批菜豆种子中，含水量为7．44％的种子生活力和活力最高，含水量低于5．56％的种子生活力和活力下降，因此，菜豆种子不宜进行超干燥贮存，但适度干燥有利于延长菜豆种子的贮藏寿命。

用离体培养无性繁殖苦瓜

切取由苦瓜种子形成的试管苗的顶芽及带芽茎段，移植于附加４～６ｍｇ／ＬＺＴ或４～６ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ的ＭＳ培养基上，可以促进芽的增殖，形成芽簇，每月每株可增殖４苗；移植于附加４ｍｇ／ＬＺＴ及０．５ｍｇ／ＬＫＴ或附加４ｍｇ／ＬＺＴ及ＬＨ（水解乳蛋白）的培养基上，每月每株可增殖５苗．将幼苗接转于ＭＳ＋ＺＴ０．５ｍｇ／Ｌ的培养基上，生长健壮．丛芽生根选用大量元素减半的ＭＳ培养基，蔗糖浓度为２％效果最好，生根率达８０％，移栽成活率为８０％．

苦瓜性别表现研究概况及展望

苦瓜性别表现研究概况及展望汪俏梅，曾广文，蒋有条（浙江农业大学园艺系杭州３１００２９）苦瓜（ＭｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａｒａｎｔｉａＬ．）是葫芦科苦瓜属一年生蔓性草本植物。原产于东印度，在非洲、印度、日本及我国南方各省普遍栽培。苦瓜作为蔬菜主要以食用嫩瓜...

苦瓜子叶节丛生芽的诱导

以苦瓜(MomordicacharantiaL.)子叶节为材料,建立了苦瓜高效再生体系,并比较了不同基因型、不同激素浓度配比、苗龄和肌醇浓度对不定芽诱导率的影响。结果表明:子叶直立、略微分开,颜色呈浅绿色时子叶节诱导率最高;培养于MS+3.0mg/L6-BA+0.2mg/LIAA中的子叶节诱导率最高;不同基因型的诱导率有一定差异,以“南屿”苦瓜子叶节诱导率最高;添加一定浓度的肌醇可以促进不定芽的分化;低浓度6-BA的培养基有利于芽的伸长;低浓度IAA有利于不定根的发生,生根率高达91.7%。

苦瓜离体再生体系建立的研究

以MS为基本培养基,附加不同浓度的激素组合进行苦瓜离体再生体系的研究。结果表明:种子去壳洗净浸泡5min,用70%酒精浸泡1min,洗净后0.1%HgCl2消毒10min的灭菌效果最好;通过愈伤组织诱导不定芽没有取得成功;利用无菌苗不同部位直接诱导不定芽,子叶节效果最好,最高诱导率达到100%,最适宜诱导培养基是MS+6-BA 2mg/L+IBA 0.02mg/L和MS+6-BA 4mg/L+IBA 0.01mg/L;最适生根培养基为1/2MS+IBA 0.2mg/L。

抗白粉病苦瓜新品种“桂农科三号”的选育

"桂农科三号"是以MC1-M5为母本、MC_(39)为父本配制而成的苦瓜一代杂交种。该品种早熟、强雌性、耐冷凉、抗白粉病、中抗枯萎病;瓜皮色油绿,瓜型圆筒形,肩平蒂圆,大直瘤,长约30.0cm,横径6.0cm,平均单瓜质量420g;667m2产量约为3 300kg,适合春提早和秋延后栽培。

苦瓜主要农艺性状的相关性和主成分分析

对 2 1份苦瓜种质材料的 15个主要农艺性状进行了相关性和主成分分析。相关分析结果表明 :第一雌花节位、雌花率、雌花开花期和单株结瓜数与前期产量极显著相关 ,单株结瓜数、前期产量、雌花率、第一雌花节位和雌花开花期与总产量极显著相关 ;主成分分析结果表明 :前 4个主成分 (早熟因子、果实因子、生长势因子和瓜长因子 )对变异的贡献率达 79.77%。为苦瓜亲本的性状选择提供了依据。

强雌系苦瓜长季节杂交制种技术

介绍了利用强雌系苦瓜进行制种的技术,从播种、育苗、移栽、肥水管理、授粉、收种、晒种等8个方面进行阐述,特别介绍了制种关键技术及注意事项;同时阐述了强雌系苦瓜越夏长季节栽培技术的要点。

苦瓜新品种桂农科一号和桂农科二号的选育

根据华南地区对苦瓜春提早和秋延后栽培的需求选育出2个早熟、耐冷凉气候的苦瓜新品种,分别命名为桂农科一号和桂农科二号。2个品种表现为早熟,强雌性,第1雌花节位低,连续结瓜能力强,主侧蔓均可结瓜;在气温为12～23℃条件下,能正常开花结果;瓜皮油绿色;瓜型圆筒形,肩平蒂圆,大直瘤,商品性好。桂农科一号瓜长约35.0cm,横径8.0～9.0cm,肉厚1.2～1.4cm,平均单瓜重380g,产量约49500kg.ha-1;桂农科二号瓜长约30.0cm,横径8.0～10.0cm,肉厚1.3～1.5cm,平均单瓜重450g,味甘微苦,产量约52500kg.ha-1。2个品种均适宜在华南地区春秋露地和大棚种植。

‘翠妃’苦瓜子叶不定芽诱导研究

以‘翠妃’苦瓜的子叶作为外植体,研究了子叶苗龄、子叶的部位、暗培养、硝酸银浓度等影响子叶不定芽诱导的主要因素。结果表明:以9d左右的苗龄诱导不定芽效果最好,适合不定芽诱导培养基是MS+BA1.0mg.L-1+NAA0.2mg.L-1;子叶不同部位不定芽的再生率差异显著,在子叶基端外植体临近下胚轴的部位诱导效果最好,不定芽诱导率为54.21%;暗培养对子叶不定芽诱导有显著的促进效果,暗培养7d可将不定芽再生率提高到77.44%;AgNO3对不定芽再生有明显的抑制作用,当浓度达到6mg.L-1以上时,子叶块上就没有不定芽再生,只长有少量的根;不定芽在MS+BA0.5mg.L-1+NAA0.1mg.L-1上增值效果较好,增值倍数为5.40。

“优佳4号”苦瓜新品种选育

"优佳4号"苦瓜是以"黑子大顶"苦瓜和"百万发"苦瓜2个品种杂交后经过系统选育而成。该品种早熟,果实短棒形,条状瘤与粒状瘤相间,瓜皮绿色,有光泽;苦味中,苦瓜皂甙含量高,比对照"青丰绿皮"苦瓜高126.65%,平均667m2产量为3 100.2kg,比对照"青丰绿皮"苦瓜增产12.3%,可作为苦瓜茶专用品种推广应用。

早熟苦瓜新品种湘苦瓜1号（湘丰1号）的选育

湘苦瓜１号（湘丰１号）是以８９０１－１－４为母本，００３－２－３为父本育成的苦瓜一代杂种，具有早熟、丰产、优质等优良性状。春季保护地或露地早熟栽培，从定植到初收约４５天，夏秋季栽培，从定植到初收约４２天；早熟栽培一般６６７ｍ２产量３０００ｋｇ，春播延秋栽培产量可达６５００ｋｇ；其前期产量、总产量、品质性状显著优于株洲长白苦瓜。目前已在湖南、湖北、四川、江西。