豇豆ISSR-PCR反应体系的建立

以豇豆为试材,用新型植物基因组DNA提取试剂盒提取豇豆DNA,选取Mg^(2+)、dNTPs、Taq DNA聚合酶、引物及模板DNA为主因素进行正交优化试验,从3个不同循环次数中筛选出最佳效果循环次数。结果表明:优化的反应体系为25μL的反应体系中Mg^(2+)1.0 mmol/L、dNTP 0.2μmol/L、Taq DNA聚合酶1.5 U、引物0.3μmol/L、模板DNA 45 ng,循环次数为40次。

基于AFLP分析的蚕豆DNA提取方法

蚕豆是高蛋白含酚类物质较多的作物，为了提取适于蚕豆AFLP分析的高质量DNA，采用改良CTAB法，以β-巯基乙醇和PVP抗氧化剂浓度为因素进行了试验。结果表明，用改良的CTAB法提取的蚕豆DNA质量较好，纯度高，OD260/OD280平均值为1.915，变幅在1.81-2.08之间，绝大多数集中在1.9左右。β-巯基乙醇和PVP对蚕豆DNA纯化具有替代作用，其中在CTAB提取液中加入1%β-巯基乙醇和0.5%的PVP或直接加入1%PVP后，提取的DNA纯度较高，OD260/OD280平均值分别为1.868、1.865，而且电泳谱带最清晰，最适于AFLP技术的要求。

N^+离子注入长豇豆对硝酸还原酶及氮代谢的影响

不同剂量的 N+ 离子注入长豇豆种子。豇豆开花结荚后 ,低剂量 N+ 离子处理能增加叶片的 NR活性 ,促进 NO-3 -N向氨基酸和蛋白质的转化 ;减少 NO-3 -N的积累 ,提高叶片蛋白质和氨基酸含量。高剂量N+ 离子处理抑制这种转化 ,豇豆结荚后期 ,叶片 NO-3 -N积累增多。

对长豇豆品种ISSR反应体系中4种关键成分的优化

对长豇豆ISSR反应中模板、引物、dNTP和酶的浓度进行了初步筛选,通过正交设计实验确定了这4种关键成分的最终浓度,即引物为0.2μM、模板为0.015ng/μL、dNTP各200μM/L和Taq聚合酶为0.5U时,ISSR扩增效果最好。研究为利用ISSR分子标记技术鉴定长豇豆种质资源奠定了基础。