平菇和香菇原生质体融合育种研究简报

平菇和香菇原生质体融合育种研究简报李成一，王秉峰，卢洪英，路等学（甘肃省科学院生物研究所兰州７３００００）平菇、香菇皆属四极性异宗结合的食用菌类，其异核双核体菌丝（简称异核体）均具“锁状联合（Ｃｌａｍｐｃｏｒｍｅｃｔｉｏｎ）”结构。异核体菌丝经酶解后...

平菇杂种优势表现及其性状构成

通过不完全双列杂交对８个平菇亲本菌株的１６个杂交组合进行１８个数量性状的杂种优势及其相关研究，结果表明：平菇大多数性状的组合平均表现为无显性，第２茬产量、总产量等性状表现正向优势，间歇期、发菌期、第１茬成形期等性状表现负向优势，但不同组合性状优势表现存在明显差异。杂种优势构成基础在于出菇期、间歇期等生育期性状负向优势和菌丝生长速度、单菇重、菇数、盖径、盖厚、各茬产量等性状的正向优势。

平菇与香菇属间原生质体融合的研究

通过分离和出菇试验,获得了纯化的平菇(Pleurotus sapidus)和香菇(Lentinus edodes)单孢系。用溶壁酶去细胞壁制备成原生质体。以PEG为融合诱导剂,诱导两者原生质体融合。1988年获得了可以出菇的融合子。这些融合子形成的子实体,从形态、生长习性和菌伞的颜色特征上都与双亲有明显的差异。大部分氨基酸含量介于双亲之间。同功酶分析也显示出融合子呈现与双亲不同的酶带。融合子出现的上述新性状,可能是平菇与香菇的原生质体基因重组的结果。

用RAPD方法对平菇、香菇属间原生质体融合子的研究

ＲＡＰＤ是一种新的分子生物学技术。本实验用２８个随机引物对平菇、香菇及其融合子进行ＰＣＲ扩增，在融合子谱带中，有６４条与平菇相同（与平菇的相似指数ＳＩ＝７０．６％），１４条与香菇相同（ＳＩ＝３３．６％），另外有２６条谱带为双亲与融合子所共有。本实验结果说明融合子是双亲融合的产物，但在融合过程中，从双亲获得的遗传信息不等。本实验首次在食用真菌中获得了原生质体融合的分子生物学证据。我们认为，在食用菌研究中，ＲＡＰＤ将是一种有重要价值的分析方法。

平菇新品种选育

利用单孢杂交、辐射诱变、原生质体融合几种生物技术，选育（佛罗里达侧耳×杂交３号）、（佛罗里达侧耳×野生１号）、（佛罗里达侧耳×姬菇）三个优良品系，产量较新本及推广品种显著增产，经酶谱鉴定为杂交品系．同时进行了平菇与香菇属间原生质体融合．

杨树菇液体发酵工艺研究

以菌丝体生物量为测定指标,筛选出杨树菇液体培养的最适氮源为蚕蛹粉,最适碳源为可溶性淀粉;确定了杨树菇最佳液体培养基配方为:蚕蛹粉4%,可溶性淀粉3%,KH2PO40.1%,MgSO4·7H2O0.3%;适宜装液量32%,起始pH7.0,接种量15%,液体发酵周期7d。

珍稀共生食用真菌松茸DNA指纹研究

利用RAPD分析技术研究了中国主产区野生松茸的DNA指纹图谱。从 4 0个随机引物中筛选到 16个扩增效果好、重复性稳定的引物以介导不同来源的 2 0个松茸子实体DNA的扩增 ,均得到清晰可辨的DNA指纹。分子数据分析表明供试松茸在 72 %相似水平上聚成一大类 ,支持关于云南、四川、吉林的松茸是一个相同物种的结论。

平菇麦粒菌种的技术改进

平菇纯麦粒菌种易污染、积水、破裂发粘和老化。我们经过近3年的实验,改煮沸为浸泡,拌入稻麦草粉等添加剂,并在瓶底垫0.5cm厚的干料,用米糠、、棉籽壳、草粉作封口料,打孔接种,大大减少了制种难度,污染率小于5％。满瓶日数为原来的一半,最快为一周;菌种不积水,麦粒不破裂;制种成本降低10—15％。这种方法稍加改变和调整,可用于双孢蘑菇麦粒种的大规模生产。也可用于金针菇、黑木耳、黄背木耳、香菇、猴头等的麦粒菌种制作。

鸡腿蘑液体菌种培养及应用研究

研究结果表明,培养鸡腿蘑液体菌种的适宜培养基配方为蔗糖2%,玉米粉3%,麦麸4%,酵母粉0.5%,KH2PO40.25%,MgSO4·7H2O0.1%,pH6.2;最适培养条件是250mL三角瓶装液量60mL,接种量5%,摇床转速120r min,培养6d。利用液体菌种扩繁固体生产种,可以明显缩短菌种生产周期。

香菇菌丝原生质体分离与再生条件的研究

在25—26℃下培养5—6天的菌丝体,以0.8mol/L甘露醇作为渗透压稳定剂,用1.5％溶壁酶液酶解1.5—2小时,所得原生质体的产量较高,最高可达4×10~7个/ml以上。上述条件分离的原生质体,再生率也较高。原生质体再生的温度以26℃为最佳。不同的再生培养基明显地影响原生质体的再生率。在完全培养基中加入麸皮浸出液可显著提高香菇菌丝原生质体的再生率,其中,以添加5％麸皮浸出液的效果最好。显微观察结果表明,在液体培养基中,香菇菌丝原生质体的再生是不同步的。一般要培养20小时以后才能见到出芽,而且原生质体的再生形式也是多种多样的。

平菇与香菇融合子后代子实体的细胞学研究

平菇(Pleurotus sapidus)、香菇(Lentinus edodes)及其融合子后代子实体的细胞学观察表明:平菇、香菇的担子细胞及核分裂行为均属正常,而融合子后代的担子细胞发生异常,其担子细胞顶端出现粗大伸长的担子梗,其中有的形成一个孢子。处于终变期的染色体收缩成小球状,其数目多于双亲染色体,分裂后期出现落后染色体,融合子后代子实体不形成孢子印,镜检发现有少数孢子。融合子所产生的孢子与双亲的孢子相比较,在形态特征及大小上均有较显著的差异。

香菇和凤尾菇原生质体融合初探

选用经高温灭活的香菇原养型双核原生质体作供体亲本 ,以带有脯氨酸( Prol)营养缺陷型标记的凤尾菇单核原生质体为受体亲本 ,对其原生质体融合情况进行研究。结果发现 ,两亲本原生质体的融合再生率为 0 .1 0 6%,部分融合子菌丝细胞多核 ,无锁状联合。对该融合子再进行原生质体分离、再生 ,得到了具有新的生理特性的菌株材料。

三种大型真菌深层培养产物的开发应用及有关检测

本研究开发的灵芝（Ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ）、金针菇（Ｆｌａｍｍｕｌｉｎａｖｅｌｕｔｉｐｅｓ）和香菇（Ｌｅｎｔｉｎｕｓｅｄｏｄｅｓ）发酵醪液可以液体菌种形式用于栽培，也可以经提制加工为营养液；作为液体菌种，定植及长速均优于传统工艺的固体菌种；提制的灵芝、金针菇、香菇营养液氨基酸及多糖含量分别达到１１．１２ｍｇ／ｍｌ及１２ｍｇ／ｍｌ、１３．０５ｍｇ／ｍｌ及６ｍｇ／ｍｌ、１８．５１ｍｇ／ｍｌ及１４．７５ｍｇ／ｍｌ。动物实验证明，灵芝营养液具有抗疲劳作用；香菇多糖粉具有较好的免疫功能并能减轻环磷酰胺免疫抑制剂的抑制作用。三种营养液可用于食用真菌型饮品的工业化生产。

香菇与平菇的融合子后代性状分离研究

本项研究对香菇和平菇进行单孢分离,对二者单孢经过三纯化实验,淘汰有锁状联合和出菇的非单孢无性系。将纯化的香菇和平菇单孢系制备成原生质体,用PEG作聚合剂,使香菇和平菇单孢系的原生质体进行异源融合。经过生物技术操作后获得了属间融合子。融合子F_1代出现性状分离。统计融合子F_3代形态性状,有97％为中间性状,出现2％的平菇性状,仅有1％的香菇性状。经过融合子1—3代性状观察,中间性状基本不稳定,而生物效率低于平菇。

菌糠栽培草菇

菌糠栽培草菇丁凤珍（江苏省农科院蔬菜研究所南京）随着食用菌生产的发展，每年均有大量栽培过各类菇的培养基下脚料─—菌糠，被当作废料抛弃，既浪费了资源，又污染了环境。据江苏省农科院饲料食品研究所分析，采收过四次菇的平菇菌糠，仍含有丰富的纤维素、蛋白质、脂...

核桃良种嫁接繁殖技术

核桃是世界四大坚果之一 ,核桃仁富含脂肪、蛋白质、多种维生素和微量元素。近年来 ,由于国家农业产业结构调整 ,退耕还林政策的实施 ,以及核果市场行情好 ,果实耐贮耐运、易加工等优点 ,果农对发展核桃呈现极高的热情 ,核桃良种苗木出现供不应求的局面。文章着重阐述了砧木培育、良种接穗的采集和贮藏、温室及电热温床设施的准备。

小姬菇组织分离的初步研究

试验研究了小姬菇的组织分离 ,结果表明 ,从未经消毒的子实体上取的菌块组织表现较好的生长趋势 ,且染菌率较低 ;该菇体的菌丝适于在麸皮玉米粉培养基上生长 .

平菇遗传标记筛选初探

本实验以0.5%的溴化镉溶液自然选择法和8-MOP-紫外光(30W)复合处理法,分别对平菇孢子进行处理,初步获得抗性菌株。