广西百色云耳野生菌株的遗传多样性分析

【目的】分析广西百色云耳野生菌株的遗传多样性,为其种质资源的保护及开发利用提供参考。【方法】从广西百色地区采集23个云耳野生菌株,进行人工栽培,期间观察测定其农艺性状;采用酯酶同工酶技术分析不同云耳菌株的酯酶同工酶酶谱多态性,并进行聚类分析。【结果】在23个云耳野生菌株中,子实体朵形为单生的菌株有16个、簇生的7个;耳片边缘平滑的菌株13个,波浪状的菌株10个;耳片背面筋道脉纹明显或较明显的有15个,不明显或无脉纹的有8个;耳片颜色为浅黄褐色的菌株4个,黄褐色的8个,黑褐色的11个;耳片大小(长×宽)为30.1~51.6 mm×20.5~41.7 mm,厚度0.95~1.44 mm,表明百色云耳的形态特征具有丰富的多样性;原基形成时间26~59 d,杂菌感染率0~51.1%,耳片干湿比10.1~14.1,第一潮产量8.2%~50.5%,表明不同菌株的原基形成时间、抗杂性、干湿比和产量等方面也具有丰富的多样性。23个云耳野生菌株共检测到19条谱带,有18种谱带类型,谱带的迁移率(Rf)为16.6~88.6,分布频率为4.3%~100.0%,其中有3条带是百色云耳酯酶同工酶的特征谱带。23个云耳野生菌株的遗传相似系数为0.68~1.00,在遗传相似系数为0.68时,可分为两大类群,其中大部分菌株的聚类结果与其地理位置吻合。【结论】广西百色云耳野生菌株具有丰富的遗传多样性,蕴含着较多的优异遗传性状,具有较大的开发利用潜力。

陕南10种黑木耳主要栽培种酯酶同工酶的研究

以陕南10种主栽黑木耳品种的营养菌丝为材料进行酯酶（EST）同工酶的分析。结果表明,供试的黑木耳菌株酶带数为3～5条,且相对迁移率为0.615和0.510处的2条酶带10个菌株都具有,其相似性在0.375～1.000之间。应用NTSYS-pc软件进行聚类分析,耳91和耳268、耳238和耳913的相似性系数为1.000,表明其亲缘较近;耳801和耳238、耳913、国兴1号的相似性系数仅为0.375,表明耳801与其他3株菌种的亲缘性关系均较远。研究结果为陕南黑木耳的亲缘关系和遗传育种研究奠定了理论基础。

木耳营养缺陷型突变株的诱变与鉴定——兼答林芳灿先生提出的部分问题

营养缺陷型菌株是进行原生质体融合研究的重要材料。梁平彦等(1981)曾报道,以需要酵母膏的营养缺陷型单倍体菌株为融合亲本,成功地获得了产黄青霉菌的营养互补二倍体。我们参考这一技术路线,进行了木耳营养缺陷型菌株的诱变与鉴定。首先顺利的鉴定出黑木耳菌株(A.a—1)是天门冬氨酸缺陷型;毛木耳菌株(A.p—243)由于其突变的遗传背景复杂(后来鉴定为腺嘌呤、脯氨酸和尼克酸三缺陷型),短时间内未能确定其是几种化合物的缺陷。但是做为融合亲本,只要该菌株在基本培养基不生长就基本符合要求。

大木耳优良新品种的选育

通过紫外线诱变育种等手段,选育出产量高、品质好的大木耳优良新品种“北京大木耳”。该品种鲜耳生物学效率达到66.23％～68.90％,高产者达到82.08％。在耳片的形态和解剖上,也有增大、增厚等变化。

银耳的诱变与营养缺陷型菌株的筛选

实验结果表明,银耳酵母状分生孢子对紫外线的效应为多靶单击类型,而对60Coγ射线的效应为单靶单击。紫外线诱变获得2个营养缺陷型菌株,其中1株T811经鉴定是肌醇缺陷型。突变体T811的生长迟缓期比野生型多3d,生长速度较慢。同时还提出了该突变体的应用前景。

ISSR技术在食用菌研究上的应用

ISSR分子标记是一种基于SSR基础上发展起来的新技术,具有很好的稳定性和多态性,且有操作简便、安全,成本低等特点。该研究回顾了ISSR分子标记在食用菌的遗传多样性、杂交育种、品种鉴定等方面的研究进展,指出其对菌种改良、保护菌种资源、规范食用菌市场管理等有重要的作用。在未来的工作中,不断改进现有的ISSR技术,并与其它分子标记技术结合应用,是发展食用菌分子水平研究的需要。

黑木耳原生质体再生株选育高产菌株研究

用1.5%溶壁酶将黑木耳双核菌丝脱壁再生。再生菌株经培养、观察、栽培及遗传特性研究后,证明有变异产生。现已从中选出一株优质、高产新菌株,且已用于生产。

二十个黑木耳菌株的酯酶同工酶分析

以20个(M1~M20)黑木耳菌株为试材,采用拮抗试验和酯酶同工酶试验分析了其遗传多样性,以期为辽宁黑木耳的亲缘关系和遗传育种研究提供参考依据。结果表明:试验共检出迁移率不同的谱带21条,20个菌株间的遗传相似系数变化范围在0.060~1.000。当遗传相异系数为0.50时,供试菌株被聚成3个类群,M1和M9自成一类,其余为第三类。说明绝大多数黑木耳菌株亲缘关系很近,且聚类分析结果与形态观察及拮抗试验结果基本一致。

毛木耳与黑木耳的原生质体融合育种

本文报道了毛木耳(A. polyiricha)与黑未耳(A.auricula)原生质体融合育种的研究结果。制备毛木耳与黑木耳营养缺陷型单倍体的原生质体。通过电融合及再生筛选,获得了8株在基本培养基上生长的野生型融合子。这一结果对探讨远缘杂交育种具有重要意义。

毛木耳液体菌种的应用研究

通过对毛木耳液体菌种粘度、振荡强度、静置、制种周期、成本、接种速度、出耳方面的实验，得出如下结论：用玉米面取代琼脂调整培养液粘度完全可行，以添加４０％为佳；振荡强度１４０～１８０转／分为好；培养液接种后静置与不静置差异不显著；用液体菌种代替固体制种，可缩短生产周期约４倍，母种成本下降３倍，原种或栽培种成本下降２７％，接种速度提高２．５倍；出耳液体制种略高于固体制种。

RAPD技术在木耳属杂交种及原生质体融合子鉴定分析中的应用

本研究以ＲＡＰＤ（ＲａｎｄｏｍｌｙＡｍｐｌｉｆｉｅｄＰｏｌｙ－ｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡ）技术为主，比较分析食用菌木耳属（Ａｕｒｉｃｕｌａｒｉａ）种内杂交种．种间原生质体融合子与其亲本菌株的ＰＣＲ（ＰｏｌｙｍｅｒｓｅＣｈａｉｈＲｅａｃｔｉｏｎ）扩增的ＤＮＡ片段之间差异，并辅以其它手段，如核相及核数目观察，同功酶鉴别，以期建立完整有效的检测技术系列，确证其杂交种融合子的真实性及可靠性。在ＲＡＰＤ分析中，用于测试的１０种随机引物仅有４种引物与供试菌株的ＤＮＡ模板具有较好的结合能力，其中１种引物可用于检测杂交种及其亲本，另外３种引物可用于检测融合子反亲本。检测结果显示：３个供试杂交种中有２个为真杂合子，１个为假杂合子；２个供试融合子均为非稳定杂合子。与常规方法鉴定结果比较基本相符。因此，ＲＡＰＤ技术提供了一种快速、简便、准确的杂交种及融合子的鉴别方法。

毛木耳子实体不同部位组织分离试验研究

为提高毛木耳的分离成功率和分离质量，对毛木耳不同部位组织进行分离试验，结果表明：同一木耳子实体的不同部位菌丝在同一培养基内其生长速度及长势存在着差异，以幼嫩子实体距基部1～3cm处的组织作分离材料分离出的菌丝不仅生长速度快，而且长势旺盛。

银耳极性测定的初步研究

以福建省古田县银耳为材料 ,经担孢子弹射 ,稀释分离法获得 2 8个银耳芽孢单孢分离物。单孢配对试验发现 ,由同一银耳子实体可得到 4种不同交配型的银耳芽孢 ,它们之间的交配反应受两套因子控制 ,A(a)和B(b) ,其中A因子控制配对芽孢萌发管的产生 ,B因子控制配对产生的萌发管能否形成具锁状联合的双核菌丝。配对结果表明 。

毛木耳和黑木耳多孢子杂交育种

毛木耳和黑木耳是同属的两个种,但它们的生长发育条件要求不同,由孢子萌发成单核菌丝所需的时间也不同。一般毛木耳孢子萌发的时间短,在马钤薯培养基上,培养温度18～25℃条件下,毛木耳发芽时间约6天,黑木耳发芽时间约8天。这是用肉眼观察,以培养基表面看到小白点为准,实际上镜检小白点往往已有锁状联合,所以上述的天数是偏高的。因此,确定多孢子接种的时间,要略为提前些。正确掌握从接种到萌发成单核菌丝所需的时间,与杂交能否成功有着密切的关系。因为在多孢子杂交中,在同一斜面试管上,有很多孢子发芽成单核菌丝,很快与对应的单核菌丝相遇,通过锁状联合而结合成双核菌丝。实现毛木耳与黑木耳的菌丝联合,两种孢子萌发的时间一定要相近,才能得到预期的效果。

房县黑木耳菌种发芽试验研究

本试验研究表明，目前房县黑木耳三个主要菌种，即８７５＃、８２０６＃和黄天菊花的发芽率分别为６４．０８％、５９．４３％、５８．２８％．不同菌种在不同海拔高度的耳杆上的发芽率不同．

黑木耳液体菌种试验初报

制备液体菌种,周期短、产量高、菌龄整齐、成本低廉,是食用菌工厂化生产的新途径。1986年9月,我们开始培养黑木耳(Auricularia auricula)液体菌种,并进行了转接段木栽培试验,现已初见成效。

我国黑木耳国认品种种质基础及黑木耳育种技术现状

对23个国认黑木耳品种种质基础信息进行了分析,结果发现这些黑木耳品种主要来源于东北群体和华中南群体,育种的主要技术手段是分离驯化,而杂交育种等技术应用较少。此外,对我国黑木耳新品种选育技术手段和研究现状进行了分析。最后,提出了黑木耳新品种选育的工作方向和未来的工作重点。

基于ITS序列分析秦巴山区黑木耳菌株的遗传多样性

通过黑木耳菌株的ITS序列分析,对秦巴山区44个黑木耳菌株进行遗传多样性研究。采用CTAB法提取黑木耳菌株基因组DNA,进行PCR扩增,对扩增产物测序,并通过软件ClustalX 1.83和MEGA 5.0进行序列比对以及系统发育树的构建。结果表明:秦巴山区黑木耳菌株遗传多样性较丰富,部分菌株之间同源性较高,甚至可能为同一品种,当相似系数为0.002时,聚类为5个分支,其中耳268与其它菌株亲缘关系较远,为今后秦巴山区黑木耳菌株的遗传多样性及优良品种的遗传育种奠定了理论基础。

木屑与玉米粒混合培养基制备黑木耳二级种

用玉米粒培养基制备黑木耳二级种具有方法简便、材料易得、发菌怏等特点,能在较短时间内解决菌种生产中的急需。但此菌种菌丝细弱,易老化。为克服这一不足,笔者采用木屑与玉米粒混合培养基制备黑木耳二级种,取得了一定的效果。

黑木耳、毛木耳、紫木耳之间亲缘关系的研究

通过多种同工酶的分析和比较，对黑木耳［Ａｕｒｉｃｕｌａｒｉａａｕｒｉｃｕｌａ（Ｌ．ｅｘＨｏｏｋ．）Ｕｎｄ－ｅｒｗ．］、毛木耳［Ａｕｒｉｃｕｌａｒｉａｐｏｌｙｔｒｉｃｈａ（Ｍｏｎｔ．）Ｓａｃｃ．］、紫木耳［Ａｕｒｉｃｕｌａｒｉａｓｐ．］之间的亲缘关系进行了详细研究。初步确定紫木耳并非独立种，而是黑木耳的变种。