酥瓜果实细菌性斑点病的病原鉴定

为明确安徽省淮南市地区酥瓜果实斑点病的病原菌,采用常规平板划线法从酥瓜果实病组织分离细菌,通过生理生化特征、分子生物学特性和致病性试验对其进行鉴定。结果表明,从采集的病果中获得36株菌落形态特征相似的细菌分离物,测试菌株均能诱导烟草叶片产生过敏性坏死。采用牙签刺伤法将测试菌株接种健康酥瓜果实,可导致接种点处产生水浸状病斑。BLAST结果表明,2株菌株的16S rRNA序列分别与短小芽胞杆菌Bacillus pumilus GR-8(CP009108),ATCC 7061(ABRX01000003)的同源性为99.93%和99.58%,2株菌株的gyr B基因序列与B.pumilus C4(CP011109)的同源性达99.39%。基于gyr B基因的聚类分析证实2株菌株与B.pumilus(C4和GR-8)紧密的聚在一个分支。生理生化试验结果进一步显示,该细菌与文献报道的短小芽胞杆菌的生理生化特征相吻合。结合细菌生理生化特征、16S rRNA和gyr B基因的序列分析,以及柯赫氏法则验证,确定引起酥瓜果实细菌性斑点病的病原为B.pumilus。