柑桔矮化砧木的生理生化预选指标研究

以74－1枳、紫花宜昌橙、Rusk枳橙、香橙、Troyer枳橙、江南柑、92号红桔和蟹橙为标准系列砧木，研究了它们的生理生化特征，从中筛选出了茎还原性糖含量、叶片还原性糖含量、叶片氨基酸含量、茎蛋白质含量、叶片过氧化物酶活性5个柑桔矮化预选指标和叶片可溶性糖含量、叶片蛋白质含量2个辅助预选指标．

柑桔砧木矮化预选指标的解剖学研究

以74—1枳、紫花宜昌橙、Rusk枳橙、香橙、Troyer积橙、江南柑、92号红桔和蟹橙为标准系列砧木,研究了它们的解剖学特征,从中筛选了根皮率、根导管总面积、栅海比、叶气孔密度4个砧木矮化预选指标和皮率、木质率、根导管密度、叶主脉导管数4个辅助预选指标.利用这些指标,可把31种砧木分为矮化砧、半矮化砧、半乔化砧与乔化砧4类.

辐射诱育柑桔无核品系的遗传性及同工酶研究

1963年以10KR^(60)Co-γ射线辐照锦橙干种子选育的14个优良株系无核性状的遗传性,结果表明,辐射MV_2代群体种子数具有较高的遗传力;14个株系的无核性状已基本稳定。对花瓣、叶片过氧化物酶和酯酶同工酶的数值化分析和统计分析表明,(1)对照与14个株系间同工酶谱和异度超过甜橙品种(系)间相异度。(2)过氧化物酶同工酶谱带数与种子数呈极显著正相关,二者符合直线回归方程y=a+bx,因而过氧化物酶同工酶谱带数可作为较准确地预选和鉴定无(少)核突变体的生化指标。

柑桔RAPD技术体系建立与体细胞杂种鉴定

通过优化反应条件，建立起柑桔ＲＡＰＤ分析技术体系，并成功地应用于体细胞杂种鉴定。柑桔ＲＡＰＤ以Ｍｇ２＋为１．５ｍｍｏｌ／Ｌ、〔ｄＮＴＰｓ〕为１００μｍｏｌ／Ｌ时扩增稳定，效果良好。用１６个引物扩增〔哈姆林甜橙（＋）粗柠檬〕融合植株，体细胞杂种表现为双亲谱带之和。结合染色体计数，可将〔Ｐａｇｅ桔柚（＋）粗柠檬〕融合再生的体细胞杂种（异源四倍体）、叶肉亲本类型及同源融合植株区别开来。

柑桔果皮色泽遗传的研究

对63个杂交组合1876个杂种单株的果皮色泽进行了连续多年的调查统计,结果表明,黄色性状呈隐性遗传,受rryy基因控制;橙色性状的基因型为异质结合,在供试亲本中共有Rryy、rrYY、rrYy 3种基因型;红色基因R的表达必须以橙色基因Y为前提,只有具备R-Y-基因型时杂种才能出现红色性状。因此,要获得优良的红色品种,其亲本之一须具有R基因,而另一亲本须具有Y基因,或者亲本一方是红色品种。

砧木对柑桔嫁接幼树早果影响的生理生化研究

本文研究了枳和红桔两种砧木对柑桔嫁接幼树结果早晚影响的生理生化差异。1.枳砧树较红桔树至少提早二年开花,枳砧树的单叶面积、株高、新梢生长量和干径均小于红桔砧树;2.花芽生理分化期枳砧树叶片的可溶性糖、淀粉及还原糖的含量均高于红桔砧树,叶片总氮含量变化不大,但在花芽形态分化期,砧木对叶片可溶性蛋白质含量的影响较大。叶片C/N比值与花芽形成存在一定相关关系。10月上中旬各因子二种砧木树的相对含量有一明显逆转过程,3.花芽生理分化期枳砧树叶片内源玉米素和脱落酸含量高于红桔砧树,赤霉素(GA_3)低于红桔砧树,整个试验期间,Z/GA_3和ABA/GA_3比值均为枳砧树高于红桔砧树。

柑橘种间体细胞杂种植株遗传变异研究

对６年生哈姆林甜橙＋粗柠檬和４年生伏令夏橙＋宜昌橙种间体细胞杂种遗传变异进行了研究。体细胞杂种气孔较大，密度较小，染色体数为四倍体（２ｎ＝４ｘ＝３６）。ＰＯＸ、ＰＰＯ、ＧＯＴ和ＳＯＤ４种同工酶图谱上，体细胞杂种为双亲酶带之和。ＲＡＰＤ分析显示，体细胞杂种含有双亲的谱带。同一融合组合不同单株在叶形指数、气孔特征、染色体数目、同工酶和ＲＡＰＤ图谱上表现一致。

柑桔原生质体融合再生叶肉亲本型植株的遗传分析

叶肉亲本（粗柠檬）型植株叶形指数、气孔特征与亲本粗柠檬无异，与同组合体细胞杂种差异显著。染色体计数为二倍体（2n=2x=18）。过氧化物酶（POX）、多酚氧化酶（PPO）、谷草转氨酶（GOT）同工酶图谱与粗柠檬一致。RAPD分析表明，在具多态性的54个随机引物中，大多数引物（52个）上的图谱与粗柠檬相同。但OPW－12上，叶肉亲本型植株含有哈姆林甜橙的特征谱带。OPV－04扩增产物显示，叶肉亲本型植株间存在细微差别。说明叶肉亲本型植株的遗传物质绝大多数来自叶肉亲本粗柠檬，少量来源于胚性悬浮系亲本哈姆林甜橙。

柑桔茎尖嫁接操作方法的改进及研究

通过大量摸索试验，对影响茎尖嫁接成活率的关键步骤嫁接操作方法作了改进。改进的“⊥”压法能使供试品种嫁接成活率提高到６０％～８０％，而对照成活率则为３８．５％～５８．１％；采用不同浓度的６－ＢＡ（６－苄氨基嘌呤）作茎尖预处理，在３个品种试验中发现用０．５ｍｇ／ｋｇ的６－ＢＡ预处理１０ｍｉｎ成活率明显优于对照。试验还在试管苗移栽、最佳消毒条件的确定、试管苗提早结果几个方面作了有益的尝试。

柑桔原生质体融合及遗传转化的研究进展

柑桔原生质体再生及融合,为克服柑桔杂交育种中所遇到的珠心胚干扰、杂交不亲和问题提供了有效手段,使柑桔的品种改良上有所突破。迄今已获得20个种(品种)的原生质体再生植株。叶肉原生质体植株的再生使这一技术具有更广泛的应用价值。已经获得有10个属间和5个种间的体细胞(胞质)杂种,不仅丰富了柑桔属的基因资源,同时为品种改良和遗传研究提供了十分珍贵的材料。遗传转化技术的兴起,为柑桔育种提供了新的手段,柑桔基因文库的建立以及DNA探针的制备,为进一步进行柑桔遗传研究和品种改良开辟了崭新的领域。

柑桔果形遗传的研究

对２１个杂交组合、１０４９株一代植株果形调查测定表明，柑桔一代杂种果形呈连续性变异。杂种果形指数与亲中值及母本果形指数均呈极显著正相关，果形呈趋中或趋扁变异。圆形果和椭圆形杂交后，果形指数略低于亲中值；扁圆形果与椭圆形果或圆形果杂交，果形为趋中变异，果形传递可达１００％。

枳砧柑桔类不同嫁接组合亲和性研究初报

研究了16个柑桔类品种对枳砧的亲和效应。结果表明:柑桔类不同品种及同一种群内不同品种对枳砧亲和力与其果实含酸量成正相关,与其果实含糖量及糖/酸比成负相关。亲和良好型砧木较接穗增粗率是亲和中等型的0.53～0.35倍、是亲和力差的0.5～0.23倍;而树体生长量是亲和力差的1.49倍;每平方米营养面积产量是亲和力差的2.38倍,且主侧根发育明显优于亲和力差型;解剖结构上,亲和良好型在砧穗维管束间形成维管束桥,而亲和力差者未见维管束连通。不亲和型砧穗接合部位异常膨大,且其上有许多深裂纹。对嫁接亲和性机理问题进行了讨论。

柑桔属随体染色体系统演化研究

对柑桔属６０个分类群的随体染色体观察表明，依随体的形态分为三类：具缢痕的大随体（Ｃ）、大随体（Ｌ）及小随体（Ｓ）。其随体组合分为１１类：ＣＣ，ＬＬ，ＬＬＬＬ，ＳＳ，ＬＳ，ＬＬＳ，ＬＬＬＳ，ＣＣＳ，ＣＳＳ，ＣＬＬ，Ｌ￣ａＳ，同形染色体特征表明，枸橼（Ｃｉｔｒｕｓｍｅｄｉｃａ）、柚（Ｃ．ｇｒａｎｄｉｓ）及宽皮柑桔（Ｃ．ｒｅｔｉｃｕｔａｔａ）是三大基本核型，宜昌橙（Ｃ．ｉｃｈａｎｇｅｎｓｉｓ）归入大翼橙类更合理。具缢痕的大随体染色体实质上是异形的双着丝点染色体，其起源可能是由最原始的Ｘ＝１０的芸香科植物通过染色体融合而产生；而宽皮柑桔中的小随体则可能是通过大随体大的结构重组而衍生。

原生质体融合获得柑桔种间体细胞杂种

粗柠檬(Citrus jambhiri Lush)叶肉原生质体与哈姆林甜橙(C.sinensis L.Osbeck)胚性悬浮细胞系原生质体经PEG诱导融合,培养7天时原生质体恢复分裂。再生的胚状体在含有GA_3的培养基中萌发出茎芽。茎芽经生根诱导成为完整植株。对首批再生的5棵植株进行染色体检查,结果表明,全为四倍体,2n=4x=36。淀粉胶电泳分析过氧化物酶同工酶,结果显示这5棵植株为体细咆杂种。粗柠檬和哈姆林甜橙在该位点上均为同质结合,基因型分别是MM和FF。体细胞杂种含有双亲的酶带,基因型为MMFF。杂种植株生长旺盛,根系发达,叶片及植株形态介于双亲之间。本文对其作为砧木品种的可能性等问题作了讨论。

墨西哥来檬与伏令夏橙种间体细胞杂种的育性研究

墨西哥来檬(Citrus aurantifolia)叶肉原生质体与伏令夏橙(C.sinensis)悬浮细胞系原生质体融合再生的体细胞杂种,移栽到土壤中2年后开始开花。该杂种花器官正常,每花药的花粉量比亲本少。醋酸洋红染色测定表明,52.9％的花粉可育,与高值亲本相近,花粉发芽率为21.2％。双亲的染色体不正常现象在体细胞杂种的减数分裂中观察到。对第一年所挂的4个果之一进行解剖,发现果实多汁,种子6粒,多胚。

提高柑橘茎尖微芽嫁接成活率的研究

由于黄龙病的迅速蔓延,使我国南方柑橘生产遭到严重的威胁,而防治这类病害的根本性措施是培育无病苗木。1972年美国Murashige T.et al.首创STG(Shoot-tip Grafting)茎尖嫁接技术,1975年L.Navarro对STG作了改进,并证明STG可以脱除柑橘衰退病、鳞皮病、顽固病和裂皮病。我国陈駉、蒋元晖等研究表明STG也可脱除黄龙病病原,并较热处理、抗生素疗法具有更广泛的应用价值。

柑桔VA菌根真菌繁殖及接种技术的应用研究

本研究初步探明了在一定条件下菌根真菌的活动范围，菌根真菌在枳苗中的侵染时间及镜检时存在的时间差，同时选出了效果最好且简单易行的菌根其菌繁殖与接种方法。该方法不是单纯的菌根真菌纯培养扩大，而是将菌剂繁殖与适用的接种技术紧密结合的一套利用寄主过渡不断繁育出大量带菌根苗，从而获用菌剂扩大效果，且可省去生产应用中接种工序的新方法。

宽皮柑桔两个分类群的核型及C带带型分析

利用去壁低渗法和 BSG 法首次研究了宽皮柑桔两个分类群的核型及 Giemsa C 带带型。结果表明,道县野桔和朱桔均为18染色体数和2A 核型,且以末端带为主。核型公式分别为2n=18=14m(2SA7)+4sm 和2n=18=12m+(1SAT)+6sm(1SAT)。还从随体染色体和异染色质含量的变异探讨了宽皮柑桔的基本种模式。

用根癌农杆菌离体转化柑桔

由椪柑试管实生苗切取的外植体同根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)的野生型菌株B_6S_3在28±1℃且黑暗的条件下共培养,3天后,将感染的外植体置于附加500mg/l羧苄青霉素的无激素MT培养基上。2周后,叶片、茎段和子叶产生出瘤组织,频率分别为60.0％、4.6％和20.8％,而对照不产生瘤组织。通过在无激素培养基上的生长和章鱼碱的产生鉴别和确认转化组织。结果证明,T-DNA编码的激素合成酶基因和章鱼碱合成酶基因已在碰柑转化组织中得到了转移和表达。