优质观赏百合品种“索邦”愈伤组织培养研究

以观赏百合优质品种"索邦"鳞茎为材料进行愈伤组织培养研究,并成功获得再生植株。结果表明:最佳灭菌方法为75%乙醇30 s+0.1%Hg Cl215 min,污染率仅为30.00%;最佳再生培养基为1/2 MS+2.0 mg/L 2,4-D,平均再生苗数为10.3;再生苗最佳生根培养基为B5+0.10 mg/L NAA,平均生根数为22.7条。

植物激素对东方百合试管苗鳞片分化不定芽的影响

以Tiber、Rodina、Constanta试管苗鳞片为材料,研究不同激素种类及浓度对试管苗鳞片分化不定芽的影响。结果表明,细胞分裂素对东方百合鳞片分化能力的影响在品种间存在差异,其中6-BA对Tiber和Rodina鳞片分化不定芽的作用效果最好,只是在适宜的浓度水平上因品种不同有所差异。KT对Constanta鳞片分化不定芽的作用效果最好。生长素对3种东方百合试管苗鳞片分化不定芽质量影响差异不明显,只是在分化系数上有所差异。适合3种东方百合试管苗鳞片分化不定芽的培养基分别为MS+0.2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D(Tiber)、MS+1.0 mg/L6-BA+0.2 mg/L IAA(Rodina)、MS+1.0 mg/L KT+0.5 mg/L 2,4-D(Constanta)。

百合鳞片全基质包埋试验

以百合品种索蚌、西伯利亚和曼尼萨为试验材料,对不同品种、不同鳞片层、不同激素及不同草炭来源的包埋繁殖子球技术进行研究。试验结果表明:索蚌比曼尼萨和西伯利亚品种更适宜鳞片包埋繁殖;索蚌的外层鳞片生成子球数较多,且子球体积较大;0.5 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L BA处理有利于索蚌外层鳞片产生较多、较大的子球;铁岭西丰或丹麦品氏草炭是较理想的包埋基质。

渥丹组织培养技术研究

为了保护渥丹野生资源,加快其繁殖速度,开展以渥丹鳞茎为外植体的组织培养技术研究,筛选不定芽诱导、增殖及生根的最佳培养基,并进行移栽试验。结果表明,渥丹鳞茎的中部鳞茎片适宜不定芽诱导,采用先预处理鳞茎再整体灭菌的方法,中部鳞片的污染率为10.0%,诱导和增殖培养基均为MS+0.1mg/LKT+1.0mg/LNAA+30g/L蔗糖+6g/L琼脂,诱导率为100%,增殖系数为2.78;渥丹试管苗诱导生根培养基为1/2MS+0.5mg/LNAA+1.0g/LAC+20g/L蔗糖+6g/L琼脂,生根率为100.0%,平均根数4.1条,平均根长为3.69cm,同时该处理的生根试管苗移栽成活率为100.0%。

玉扇组织培养研究

以玉扇(Haworthia truncata)叶片、花茎为外植体,通过筛选分别得出叶片和花茎的最佳消毒灭菌方法为:75%乙醇浸洗30 s,0.1%氯化汞处理5~7 min和75%乙醇浸洗30 s,0.1%氯化汞处理3~5 min。选用6-BA(细胞分裂素)、NAA(萘乙酸)和KT(激动素)对不同生长途径的激素配比与浓度进行正交组合筛选,得到不同取材部位在不同分化途径中最适宜的愈伤组织诱导、不定芽诱导和愈伤组织分化的激素配比方案,愈伤组织诱导率最佳方案为花茎,MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.5 mg/L KT;叶片,MS+0.3 mg/L NAA+0.5 mg/L KT;出芽率最佳方案为:花茎,MS+0.1 mg/L NAA+0.5 mg/L KT;叶片,MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+1.0 mg/L KT;愈伤组织分化率最佳方案为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.5 mg/L KT。选用NAA、IBA、蔗糖添加量和活性炭添加量对生根培养基进行正交组合筛选,得到最佳生根培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA+3.0 mg/L IBA+10 g/L蔗糖+7 g/L活性炭,所诱导的根系健康,植株饱满,移栽成活率可达80%以上。

杂交百合组培苗生根移栽技术的研究

以东方百合杂交后代西伯利亚×生日快乐和莱奥多×西伯利亚组培苗为试材,在组培阶段采用正交设计对其进行生根试验。结果表明,最适合西伯利亚×生日快乐和莱奥多×西伯利亚生根的培养基配方都为1/2MS+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L;移栽基质和营养液的筛选试验结果表明,适合西伯利亚×生日快乐组培苗移栽的最佳基质为V(珍珠岩)∶V(草炭)∶V(蛭石)=1∶1∶1,喷施的营养液为MS;适合莱奥多×西伯利亚组培苗移栽的最佳基质为V(珍珠岩)∶V(草炭)∶V(蛭石)=1∶2∶1,喷施的营养液为MS。

铁炮百合离体再生体系的建立

以铁炮百合无菌苗的叶片、鳞片为外植体,进行铁炮百合再生体系的研究。结果表明:鳞片的诱导分化能力高于叶片,鳞片分化培养基(MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA、MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA)的分化率高达90.98%。用叶片为外植体,不同部位对不定芽的诱导影响较大,以叶片中部分化能力最强,上部次之,下部最差。叶片分化培养基为MS+1.0 mg/L BA+0.2 mg/L NAA,分化率为85.36%。2,4-D浓度对愈伤组织的诱导影响显著,愈伤诱导培养基以MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D为佳,愈伤率达80%以上。

OT百合Conca d'Or无病毒原原种直接再生体系建立

OT百合品种Conca d’Or在生产中应用广泛,但病毒病危害严重,组织培养技术是获得无病毒种球的主要方式,因此亟需建立Conca d’Or无病毒原原种直接再生体系。以Conca d’Or种球为试材,应用RT-PCR技术检测获得无CMV、LSV、LMoV病毒的种球,剥取其中外层鳞片通过组培获得无菌试管苗,以无菌苗鳞片为次级外植体,研究不同植物生长调节剂对试管内小鳞茎直接再生的影响。无病毒小鳞茎试管内直接再生最适培养基为MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.05 mg/L KT,诱导率与诱导系数分别为100.00%、5.81;小鳞茎膨大最佳培养基为MS+90 g/L蔗糖;生根最优培养基为MS+0.1 mg/L NAA+0.1 mg/L IBA,移栽成活率可达100.00%。本研究建立了观赏百合Conca d’Or无病毒原原种试管鳞茎高效直接再生体系。