轻基质配比对春兰生长和生理生化特性影响的综合评价

为解决传统春兰栽培基质保水、保肥性能差及成本高、生产运输不方便等影响春兰产业化生产的问题,探讨将松鳞与泥炭土作为春兰栽培基质利用的可行性。将松鳞与泥炭土按质量比1∶0(D_(1)处理)、4∶1(D_(2)处理)、3∶1(D_(3)处理)、2∶1(D_(4)处理)、1∶1(D_(5)处理)、1∶2(D_(6)处理)、0∶1(D_(7)处理)配制成7种轻基质配比,并以传统硬基质配方植金石-仙土(质量比3∶1)作为对照(CK),分析轻基质对春兰植株生长指标、光合指标、生理指标和酶活性的影响,并用主成分分析法对各基质配比效果进行评价。结果表明,D_(2)~D_(5)处理的理化性质均属于理想基质范畴,能够保证春兰组培苗的正常生长。D_(4)~D_(5)处理与CK浇水频率以6 d左右为宜,D_(6)~D_(7)处理的浇水频率以8 d左右为宜,D_(1)~D_(3)处理则需要较高的浇水频率。D_(1)、D_(4)、D_(5)、D_(6)处理的新芽数、新芽率均显著高于对照,其中最高的为D_(4)处理,新芽数为3个/盆,新芽率为100%。净光合速率最高的为D_(4)处理,最低的为D_(6)、D_(7)处理,均与对照有显著差异。基质配比影响春兰植株养分的累积和抗氧化活性。不同配比基质的理化性质与春兰的壮苗指标、生理指标及光合指标密切相关。以测定的春兰生长、生理生化指标进行主成分分析,各基质配比的优劣排序为D_(4)处理>D_(5)处理>D_(3)处理>D_(1)处理>D_(7)处理>D_(6)处理>CK>D_(2)处理。综合来看,用D_(4)处理条件栽培春兰具有植株长势好、增殖率高的丰产特性,相比硬基质,其新芽率、根干重、壮苗指数、叶绿素含量、净光合速率、可溶性糖含量、SOD活性分别提高650.19%、49.30%、51.44%、13.93%、47.89%、57.81%、18.16%;同时,该基质成本降低了86.5%,质量降低了60.4%。建议选用松鳞与泥炭土质量比为2∶1的基质配比,用于低成本基质的开发及春兰的高品质栽培。研究结果不仅可以降低春兰规模化生产运输的成本,还可以为我国春兰的高品质栽培提供技术指导。

基于SCAR分子标记和倍性鉴定兰属花卉的研究

基于特异性片段扩增(SCAR)和倍性鉴定兰属花卉,为杂交育种亲本选配奠定基础,以兰属花卉的27个大花蕙兰和31个国兰品种为试材,通过SCAR分子标记和流式细胞仪进行亲缘关系和倍性检测,构建系统进化树。SCAR分子标记构建的系统进化树结果显示:58个品种聚为3支,第1支包括8个大花蕙兰品种(福娘、523、红袍等)和16个国兰品种(碧龙红素、汗血宝马、出水芙蓉等),第2支为11个大花蕙兰品种(金玉满堂、日本香兰、红双喜等)和6个国兰品种(一代天骄、春兰麻壳素、如意素荷等),第3支包括8个大花蕙兰品种(616、黄金岁月、杨贵妃等)和9个国兰品种(碧龙奇莲、西蜀道光、大雪素等);倍性鉴定结果显示:27个大花蕙兰品种中有7个二倍体(日本樱花、绿翡翠、梦境等)、16个三倍体(黄金岁月、蝶影、日本香兰等)、4个四倍体(英雄、523、福娘等)。部分大花蕙兰和国兰品种亲缘关系较近,可用作杂交育种亲本,但由于大花蕙兰倍性较为丰富。因此,大花蕙兰作为杂交育种亲本,选配时需进行倍性鉴定。综上,SCAR分子标记能高效、全面和精准鉴别兰属花卉间的亲缘关系,结合倍性鉴定,可为高效杂交育种奠定基础。

菌根真菌对干旱胁迫下建兰生理生化、根系脂肪酸组成及水分利用的影响

菌根真菌具有增加宿主植物耐旱性的能力,但关于菌根真菌对宿主脂肪酸(FAs)组成的潜在调控机制仍知之甚少。采用盆栽试验,设置充足水分(WW)和干旱处理(DS),研究接种角担菌(CE)、胶膜菌(TU)和蜡壳菌(SE)对干旱胁迫下建兰(Cymbidium ensifolium)抗氧化系统、水分利用及脂肪酸组成的影响;探讨菌根真菌缓解兰花干旱胁迫的生理机制,为兰花栽培提供理论依据。结果表明,3株菌根真菌均能与建兰构建共生关系,但在干旱胁迫下菌根真菌存活率均显著降低。在WW和DS条件下,接种菌根真菌均显著提高了根系不饱和脂肪酸(C14:1、C17:1、C18:2、C20:3n3、C20:4n6、C22:2)含量,显著降低了饱和脂肪酸(C18:0、C20:0、C24:0)含量,使得FAs不饱和比例增加。DS条件下,菌根真菌提高了抗氧化酶(SOD、CAT、POD)活性、H2O2含量及水分利用参数(WUE、RWC),降低了丙二醛(MDA)及超氧阴离子自由基(O-2·)含量,并上调了相关FAs去饱和酶基因(CyFAD2、CyFAD6、CyFAC9、CyFAZ15)的表达。综上,干旱胁迫下,菌根真菌通过调节FAs去饱和基因的表达从而影响相应脂肪酸含量,导致根系脂肪酸的不饱和指数增加,并调节丙二醛和超氧阴离子自由基含量,最终降低氧化损伤;整体来看,干旱胁迫下以接种胶膜菌(Tulasnella sp.)效果最佳。

蝴蝶兰WRKY57基因的克隆、亚细胞定位及响应脱落酸功能分析

WRKY转录因子是植物生长发育及胁迫反应的重要调节因子,然而关于蝴蝶兰(Phalaenopsis aphrodite)WRKY家族的功能知之甚少。以蝴蝶兰品种满天红为试验材料,分析蝴蝶兰转录因子PaWRKY57的理化特性、亚细胞定位、组织表达及在脱落酸(ABA)处理下的响应机制,结果表明,从P.aphrodite克隆得到的PaWRKY57长度为2049 bp,编码682个氨基酸,为不稳定的亲水蛋白,亚细胞定位显示PaWRKY57位于细胞核内。结构域分析和同源性比较表明,PaWRKY57蛋白具有WRKYGQK结构域,属于WRKY家族Ⅲ型亚家族;系统发育分析表明,PaWRKY57与水稻OsWRKY47亲缘关系最近。qRT-PCR分析显示,PaWRKY57在叶片中表达水平最高,在ABA处理下表现出“升—降—升—降”的表达模式。与野生型品系(WT)相比,PaWRKY57过表达植株的抑生植物激素(ABA、GAs)含量增加,叶绿素与促生植物激素(BR、IAA)含量降低,从而导致叶片黄化明显、植株衰老加快;在此基础上喷施ABA后,上述现象进一步加剧。综上,PaWRKY57是一个响应ABA信号的转录因子,受ABA信号介导调控蝴蝶兰的衰老过程。

基于iPBS和ISSR分子标记的兜兰属同色组种质鉴定及遗传多样性分析

【目的】基于引物结合位点扩增(iPBS)和简单序列重复间DNA多态性(ISSR)分子标记对兜兰属同色组种质进行鉴定及遗传多样性分析,筛选出可靠的种质鉴定方法,为兜兰属种质鉴定、遗传多样性分析及分子育种提供科学依据。【方法】采用iPBS和ISSR分子标记对47份兜兰属同色组种质进行种质鉴定,并分析其亲缘关系和遗传多样性,挖掘可用于鉴别3个近缘种的分子标记。【结果】利用7条iPBS引物共扩增出117个位点,其中多态性位点100个,多态性比率为85.47%;47份供试种质的遗传相似系数为0.73~0.97;在遗传相似系数0.76处可将47份供试种质划分为三大类群,其中6份难鉴定种质与已知的文山兜兰聚为第Ⅱ类群,第Ⅰ类群包含了所有巨瓣兜兰种质,第Ⅲ类群包含了所有的同色兜兰种质。7条ISSR引物共扩增出115个位点,其中多态性位点111个,多态性比率为96.52%;47份供试种质的遗传相似系数为0.68~0.94,在遗传相似系数为0.73处可将47份供试种质划分为三大类群。第Ⅰ类群包括11个巨瓣兜兰种质,第Ⅱ类群包括表型难鉴定的6份种质及13个文山兜兰种质,第Ⅲ类群包括17个同色兜兰种质。iPBS和ISSR单独聚类结果和二者综合聚类分析结果略有差异,但种质聚类鉴定结果具有较高的一致性,均将47份兜兰属同色组种质分为三大类群,且6份难鉴定个体均与文山兜兰聚为一类,巨瓣兜兰和同色兜兰各自聚为一类。3个聚类分析结果均表明,文山兜兰与同色兜兰的亲缘关系较近,与巨瓣兜兰的亲缘关系较远。【结论】iPBS和ISSR分子标记均可用于兜兰属近缘种间的种质鉴定及遗传多样性分析,二者结合分析的方法可在DNA水平上更准确有效地鉴定易混淆种质,多种标记联合数据的聚类分析结果,能更全面客观地反映种质间的遗传多态性及亲缘关系。

蝴蝶兰茎尖脱毒再生体系建立与优化

以蝴蝶兰茎尖为外植体进行组织培养,研究培养基中无机盐浓度、糖浓度、激素比例及外植体大小对其茎尖生长点成活率及脱毒效果的影响。结果表明,蝴蝶兰茎尖组培脱毒外植体大小为0.2~0.4 mm,并附带1个叶原基,可脱除ORSV病毒。适当降低培养基中无机盐与6-BA浓度有利于提高茎尖生长点的成活率。培养基中添加15 g/L的绵白糖有利于茎尖的成活及生长。1/3MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA为最适宜的蝴蝶兰茎尖培养基。

石斛兰茎段组织培养再生体系的初步建立

以石斛兰无菌苗茎段为外植体,通过在MS基本培养基中加入不同浓度的6-BA和NAA,筛选最佳培养基配方,从而初步建立石斛兰茎节的组织培养再生体系。结果表明:诱导茎节分化的最佳培养基是MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L,分化率为89.5%;最佳增殖培养基是MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.2 mg/L,增殖倍数为5.16;最佳生根培养基是1/2 MS+6-BA0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L,生根率为100%;移栽后成活率为97%。

建兰MYB基因家族鉴定及在盐胁迫下的表达分析

植物MYB家族是最大的转录因子家族,在植物胁迫反应中起着重要作用。基于全基因组分析,对建兰(Cymbidium ensifolium)MYB家族成员进行鉴定和生物信息学分析,并分析相关基因在不同盐胁迫类型下的表达情况。结果表明,从建兰基因组中共鉴定出136个CeMYB转录因子,包括27个1R-MYB、102个R2R3-MYB、5个3R-MYB和2个4R-MYB。通过与拟南芥MYB进行系统发育得到20个基因簇,表明这些CeMYB可能具有多种生物学功能。亚细胞定位、染色体定位及保守域显示,136个CeMYB分布在18条染色体上,大多数CeMYB位于细胞核中,且具有典型的氨基酸序列重复;基序预测分析表明,多个保守元件主要位于CeMYB的N端,表明它们的功能相对保守。转录组表达分析表明,S13亚家族的CeMYB61和CeMYB89可能是调控盐胁迫的关键基因,qRT-PCR验证进一步表明,CeMYB61、CeMYB89在不同组织中表现为根系>假鳞茎>叶片>花序,其表达水平、模式与植株Na+浓度分布一致,证实CeMYB61、CeMYB89是建兰耐受盐胁迫的指示基因。研究为进一步探索MYB基因的潜在机制及盐胁迫下候选基因的挖掘提供了理论基础。

外部因子对蝴蝶兰叶片原球茎状体发生的影响

对影响蝴蝶兰叶片原球茎状体 (PL B,Protocorm - like- body)发生和植株再生的外部因子进行了研究。结果表明 :BA是决定原球茎状体发生的主要因子 ;苹果汁、香蕉汁和椰子汁明显促进原球茎状体的形成 ;在 MS+BA5mg/L+椰子汁 15%的培养基中 ,蝴蝶兰叶片原球茎状体的诱导率可达 6 0 %以上 ;活性炭可有效防止外植体叶块变褐死亡 ;多效唑 1.5mg/L可促进再生植株根的形成 ,使叶片变厚变短变绿 ,使试管苗移栽成活率达

彩心建兰花枝茎节离体培养的研究

以彩心建兰的花芽为试验材料，选取幼嫩花枝上部茎节切段。

兜兰属植物杂交育种研究进展

兜兰属(Paphiopedilum)的杂交育种已有150多年的历史,目前已有20262个杂交种在英国皇家园艺协会(RHS)登录。对兜兰属植物的种质资源、杂种登录,杂交方法、杂交亲本的选择、属间杂交、不同兜兰种类在花色遗传育种中的作用、杂交育种存在的问题等进行了综述,并结合我国兜兰属植物育种现状,提出了我国兜兰属植物育种的方向。

基本培养基及凝固剂对文心兰试管苗生长发育的影响

以薄叶系文心兰Alha‘lwanaga’茎尖诱导形成的原球茎 (Protocomlikebody ,以下简称PLB)进一步分化形成的幼苗为试材 ,比较不同培养基类型 (MS ,1/ 2MS ,VW )及不同种类凝固剂 (琼脂、Gellangum)对幼苗生长的影响 .结果表明 :实验用基本培养基类型中 ,幼苗的生长以MS较好 ,Gellangum作凝固剂时优于琼脂 .同时证明 ,培养时幼苗愈小 ,其基部PLB形成率愈高 .幼苗分化形成后 ,进一步培养以株高

木兰科木兰属、含笑属植物杂交授粉技术的初步研究

木兰科（Ｍａｇｎｏｌｉａｃｅａｅ）树种以花大色艳、香味浓郁著称，多数可视为园林绿化珍木［１］。国产木兰科植物１００多种，除少数外大多处于野生状态，甚或已近濒危［２］。近年来一些单位开展了引种栽培工作，以保护木兰科基因资源，发掘其潜在价值。选择和杂交是...

不同光谱的LEDs对蝴蝶兰组培苗生长的影响

研究新型光源LEDs(Light emitting diodes)辐射的红蓝等光进行不同光质配比组合后,对蝴蝶兰组培苗各形态指标、色素含量、碳氮代谢及抗氧化酶系活性的影响。结果表明,单色红光处理的蝴蝶兰组培苗徒长,RBG(红光/蓝光/绿光)处理组全部生根,单色蓝光处理的组培苗根系活力最高。红蓝组合和单色蓝光处理的叶片色素含量高于白光,叶绿素a/b比值、叶绿素a/类胡萝卜素比值随着R/B比率的降低而减小。可溶性糖、蔗糖、游离氨基酸和淀粉的含量及C/N(碳氮比)在单色蓝光下均高于单色红光处理。

蝴蝶兰组培不定芽增殖条件的优化

以黄花蝴蝶兰的花梗腋芽诱导出的不定芽为外植体,利用正交设计法研究了培养基的无机营养、TDZ、有机添加物和蔗糖4种因素对不定芽增殖的影响。结果表明:蝴蝶兰不定芽增殖的最佳培养基配方为KC+TDZ 0.20 mg/L+椰子水200 mL/L+蔗糖14 g/L+柠檬酸30 mg/L,其中有机添加物的种类和浓度对不定芽增殖的影响最大。

墨兰及其杂种的组织培养与快速繁殖

针对墨兰及其杂种常规分株繁殖慢、种子在自然状况下极难萌发的情况，以仙殿白墨及其它与象牙白、西藏虎头兰杂交所得的杂种的胚，仙殿白墨与其杂种Ｆ１代的茎尖、花芽、幼叶、根进行离体培养。结果表明，胚培养以１／２ＭＳ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋１０％椰子汁培养基萌发效果较好，发育到一定时期的早期胚即能萌发；茎尖、花芽培养在ＭＳ＋６－ＢＡ０５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０５ｍｇ／Ｌ＋０５％活性炭培养基上诱导原球茎比较适合，根与幼叶离体培养未诱导出原球茎；根状茎增殖在以花宝一号、花宝二号、蛋白胨等为主要原料并附加０５％活性炭的自制Ｇ３培养基上长得粗壮且繁殖速度快；根状茎出芽诱导在Ｂ５＋６－ＢＡ２～３ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０２ｍｇ／Ｌ＋０５％活性炭培养基上效果最好；生根壮苗以１／２ＭＳ＋ＮＡＡ２０ｍｇ／Ｌ＋１０％苹果汁＋１０％香蕉汁＋１０％活性炭培养基能达到较理想的效果；蔗糖浓度生根培养时以２％较佳，其它培养以３％较好。仙殿白墨杂交种的胚萌发率比仙殿白墨略低，萌发期略长；但其花芽与茎尖的原球茎诱导、根状体增殖、根状茎出芽、生根壮苗培养、生长势、抗逆性等方面均具有杂种优势。

不同氮、磷、钾水平对蝴蝶兰养分吸收及生长发育的影响

为提高蝴蝶兰的观赏品质,以蝴蝶兰品种F101530为试材,研究在了不同氮、磷、钾配比条件下,蝴蝶兰生长发育及其体内氮、磷、钾含量的差异。结果表明:蝴蝶兰植株体内氮、磷、钾含量与所施肥料的氮、磷、钾水平呈正相关。氮、磷、钾比例为3∶1∶1(高氮)条件下,蝴蝶兰植株的叶片数最多,鲜重、干重较重,花茎长且粗;氮、磷、钾比例为1∶3∶1(高磷)条件下,蝴蝶兰的假鳞茎直径最大,花枝数最多;氮、磷、钾比例为1∶1∶3(高钾)条件下,蝴蝶兰的单枝小花数最多。

石斛组织培养与栽培技术的研究

研究结果表明，Ｎ＿６、ＭＳ等１４种培养基对曲茎石斛、铁皮石斛的种胚成苗率、种胚苗生长有显著作用，其中以Ｎ＿６为佳。在１／２Ｎ＿６培养基内添加香蕉汁（１５０ｍｇ／Ｌ），石斛种胚苗生长最好；若添加２ｍｇ／Ｌ或１ｍｇ／ＬＮＡＡ，可提高石斛种胚苗分蘖率６～７．１４倍。选曲茎石斛或铁皮石斛的茎尖、茎段、充实幼叶及其种胚、鳞叶期原球茎、种胚苗、幼根为外殖体，可培育出大批组培苗。栽培试验结果表明，石斛组培苗在特殊的环境条件下，５月上中旬栽培。用苔藓或腐乳质土覆盖幼根，成活率达９５％以上，且生长发育良好。

基质与氮磷钾比例对蝴蝶兰(Phalaenopsis hybridium)生长发育的影响

试验于温室进行 ,利用正交试验及灰色关联度分析 (综合评价指数 ) ,研究了四种代用基质与施肥方法对蝴蝶兰生长发育的影响。结果表明 ,蕾期施肥和基质类型是影响蝴蝶兰开花数量的主要因子。灰色关联度最高 (Ri=0 .6 9337)的处理组合是水藓基质施肥 2 0 0(N ,mg/L) ,N P (P2 O5) K (K2 O ) =15 15 15,现蕾后以磷钾肥加微量元素处理 ;其次是锯末+沙 ,施肥 2 0 0 (N ,mg/L) ,N P K =2 0 10 10 ,现蕾前用磷钾肥加微肥处理 ;三是花生壳 +沙 ,施肥量 10 0 (mg/L) ,N P K =15 15 15。沙 +KD 1型高吸水树脂基质的Ri

6种兰科植物菌根的显微及超微结构研究

【目的】探讨6种兰科植物地下营养根的形态解剖结构特征、菌根真菌侵入方式及在菌根内的分布和消长状况,为菌根真菌与兰花共生的相互关系提供理论依据。【方法】利用光学显微镜和电子显微镜连续切片的方法,用分离自野生状态的菌根真菌菌株CLB113和CLB111接种春兰(Cymbidium goeringii)、墨兰(Cymbidiumsinense)、虎头兰(Cymbidium hookerianum)和卡特兰(Cattleyasp.)、齿瓣石斛(Dendrobium devonianum)、长距石斛(Dendrobium longicornu)种子繁育组培苗,使共生形成菌根,观察菌根形成途径及结构,并与自然状态下的菌根结构进行比较。【结果】经光学和电子显微镜观察发现,菌根与非菌根(组培苗根)在根的基本结构上没有明显区别,两者之间的主要差异在于根中是否有入侵的菌根真菌,在皮层细胞中常见到分布不匀、形状不一、着色较深的菌丝结;不同兰科植物真菌的入侵方式不同,地生兰菌根真菌是通过破坏根被组织侵入根皮层细胞,而附生兰菌根真菌是通过通道细胞进入;在光镜下观察到的菌丝结,在电镜下是真菌菌体围绕皮层细胞核所形成的。【结论】兰花与菌根真菌的共生机理是,菌根真菌侵入兰花的皮层细胞内,使其中存在有大量新定殖的菌丝和正在被消化的菌丝,随着菌丝及菌丝团被逐渐消解吸收,伴随新菌丝的生长和侵入,内生真菌可不断地为兰花提供营养,促进兰花快速生长。