春兰ISSR-PCR反应体系的优化

以春兰为材料，对影响ISSR-PCR扩增结果的因素如模板DNA、dNTPs、MgCl2、primer、Taq DNA聚合酶的浓度及引物退火温度、反应循环数进行了探讨，确立了适合春兰ISSR-PCR分析的最佳反应体系和PCR扩增参数：在15μL反应体系中含1×buffer，O．2mmol／L dNTPs，2．0mmol／LMgCl2，0．2μmoll／L引物，0．3UTaq DNA聚合酶，20ng模板DNA。PCR扩增程序：94℃预变性2．5min ；94℃变性45S，48-58℃退火（退火温度随引物不同而定）45s，72℃延伸2min，35个循环；72℃延伸5min。

春兰根状茎增殖及其分化影响因子

以春兰无菌根状茎为材料,研究不同激素配比及接种极向对其增殖和分化的影响。结果表明:添加2 mg/LKT有利于春兰根状茎增殖;横向平放接种处理的春兰根状茎分化数量显著高于倒接和正接处理;添加ZT能显著促进春兰根状茎分化。

文心兰切花品种组织培养快速繁殖技术研究

以新选育的文心兰切花品种的侧芽为外植体,探讨不同灭菌剂、外植体采样时间与季节对侧芽培养的效果以及含不同激素或有机复合物的培养基对原球茎的诱导与增殖、壮苗与生根的影响。结果表明,采用0.1%升汞与10%次氯酸钠组合对外植体的灭菌效果最好,能明显提高外植体的成活率;晴天上午11时或下午16时左右最适合采集外植体,外植体成活率达70%以上;夏、秋两季适宜于外植体的采集,并利于进行灭菌处理和原球茎的诱导与增殖。适宜于原球茎和丛芽增殖的培养基为MS+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.3mg/L;在增殖阶段,MS培养基中添加10%(W/V)椰子水有利于丛芽增殖,而10%(W/V)香蕉浆有利于原球茎增殖。在壮苗阶段,MS培养基添加10%(W/V)香蕉浆对壮苗效果最好,原球茎转化率高,小苗生长健壮;在生根阶段,以1/2MS+NAA 0.5mg/L+10%(W/V)香蕉浆的生根效果最佳,生根率达100%,且小苗生长健壮,移栽成活率达90%以上。

离体培养春兰原球茎增殖的影响因子研究

利用正交设计研究了培养基中6-BA、NAAI、BA以及活性炭、蔗糖和水质对春兰圆球茎增殖的影响。结果表明:春兰原球茎增殖的最优培养基为MS+6-BA2.0 mg.L-1+NAA0.01 mg.L-1+IBA0.01 mg.L-1+活性炭0.3 g.L-1+蔗糖30 g.L-1,其中,6-BA和NAA对其影响最大,方差分析达到了极显著水平。

大花蕙兰组织培养及快速繁殖研究

以8个大花蕙兰品种茎尖为材料，采用不同培养基对茎尖原球茎进行诱导、增殖和分化培养，探讨不同浓度6-BA和椰乳对原球茎诱导、增殖和分化的影响效果。结果表明。低激素水平培养基1／2MS＋0．5mg／L 6-BA＋10％椰乳＋2％白糖＋适量活性炭对诱导产生原球茎的效果很好，大部分品种的原球茎诱导率达80％以上；在增殖培养基中添加0．5～1．0mg／L 6-BA和15％椰乳，可明显提高5个品种的原球茎诱导率和增殖率。将多次增殖的原球茎转入1／2MS＋1．0mg／L 6-BA＋0．5mg／L NAA＋20％椰乳＋1％白糖的分化培养基，原球茎可继续增殖并分化形成许多类胚性的单极丛生芽，再经分化培养后可获得大量根苗完整的再生植株。因此，试验结果可为大花蕙兰的高效低成本组培快繁途径提供依据。