福建柏愈伤组织诱导与抗褐化研究

【目的】比较不同抗褐化剂减轻福建柏组织培养过程中褐化现象的效果,以提高福建柏愈伤组织培养的增殖分化能力。【方法】以福建柏鳞叶和茎段为外植体,通过单因素试验,研究0.0~2.5 mg/L NAA和2,4-D及0.0~3.0 mg/L IBA对愈伤组织诱导率与生长状态的影响;以福建柏茎段为外植体,采用单因素和多因素组合试验,研究100~2000 mg/L聚乙烯吡咯烷酮(PVPP)、100~1000 mg/L活性炭(AC)和V C以及不同质量浓度V C与AC组合,对愈伤组织污染率、死亡或褐化率及诱导率的影响;以诱导的愈伤组织为材料,采用单因素试验,研究100~1000 mg/L PVPP、100~300 mg/L V C、200~1000 mg/L AC、30~100 mg/L V B对愈伤组织增殖生长量、增殖率、褐化率及PPO、POD活性的影响。【结果】①不同质量浓度NAA、2,4-D和IBA对福建柏鳞叶愈伤组织的诱导率总体高于茎段,各生长素对福建柏鳞叶和茎段愈伤组织的诱导率均表现为NAA>IBA>2,4-D,所有处理中以1.0 mg/L NAA对福建柏鳞叶愈伤组织的诱导率最高,为83.33%;以0.5 mg/L NAA对茎段愈伤组织的诱导率最高,为61.11%;愈伤组织生长状态和抗褐化效果优劣依次为NAA、2,4-D、IBA。②仅100 mg/L V C+200 mg/L AC处理的愈伤组织污染率低于不添加抗褐化剂的对照;死亡或褐化率仅500 mg/L PVPP处理与对照相同,均为0.00%,其余处理均高于对照;诱导率则以不同质量浓度PVPP、1000 mg/L V C、100 mg/L V C+200 mg/L AC处理与对照相当或高于对照,其余处理均低于对照;愈伤组织生长状态总体以PVPP处理表现最优。③仅300 mg/L PVPP、200和400 mg/L AC处理的愈伤组织增殖率高于对照,增殖生长量仅100和200 mg/L PVPP、100 mg/L V C、200 mg/L AC处理高于对照;所有处理中以200 mg/L AC处理的愈伤组织增殖率和增殖生长量最高,分别为70.00%和10.07 g;各抗褐化剂对福建柏愈伤组织增殖效果的优劣依次为PVPP、AC、V C、V B。④不同抗褐化剂处理的愈伤组织褐变率均呈先增加后趋于稳定的变化趋势,但变化幅度存在显著差异;各抗褐化剂的抗褐化效果优劣依次为AC、PVPP、V C、V B。⑤不同质量浓度PVPP、V C、AC处理对福建柏愈伤组织PPO和POD活性的影响具有显著差异,但各处理PPO活性均与对照无显著差异,POD活性以500 mg/L AC处理显著高于其他处理。【结论】在福建柏愈伤组织诱导阶段,愈伤组织的褐化与生长素种类有关,生长素NAA、2,4-D适用于福建柏愈伤组织的诱导,IBA诱导的愈伤组织容易褐化,添加适量抗褐化剂能减少愈伤组织的褐化情况。在愈伤组织增殖培养阶段,适宜质量浓度的PVPP、AC作为抗褐化剂能有效减缓福建柏愈伤组织的褐化进程,保持愈伤组织的正常增殖生长,但高质量浓度的抗褐化剂会抑制愈伤组织的生长。

三角梅组培苗移栽炼苗试验

为提高三角梅组培苗的移栽成活率,以′中闽1号′三角梅组培生根苗为试材,采用正交试验探讨炼苗时间、杀菌剂浓度、基质、生根液浓度对三角梅组培苗移植移栽成活率、新叶率的影响。结果表明:不同炼苗时间、杀菌剂浓度、基质和生根液浓度对三角梅组培生根苗移栽成活率和新叶率均有极显著影响。三角梅组培苗′中闽1号′移栽的最佳处理组合为:三角梅组培苗移栽前进行强光闭瓶炼苗10 d,出瓶后清洗干净培养基、蘸ABT 1000倍液后栽植于泥炭土∶椰糠=4∶1的栽培基质中,管护期间每隔20 d喷洒1次1500倍液的异菌脲杀菌剂。研究结果可为三角梅组培苗工厂化育苗及移栽抚育管理提供参考。

不同基质配方对柚木组培苗移植效果的影响

以柚木无根组培瓶苗为扦插移植材料,选用了5种育苗基质,各设4个水平,按照正交实验设计L16（45）,开展了不同基质配比对快速培育柚木无性系苗效果的研究。结果显示：采用轻基质＋育苗穴盘进行柚木无根组培瓶苗移植,生根容易,成活率高达98.7%;各轻基质配比处理间,除了成活率没有显著差异外,苗高、地径、叶幅、苗鲜质量、苗干质量、根长和主根条数都达到极显著差异,各指标最佳处理分别是最低处理的2.19、1.73、2.20、9.10、7.19、1.82和2.38倍;蛭石不同水平对成活率有显著差异,泥炭土、蛭石、椰糠和黄心土不同水平对苗高有极显著差异;5种基质不同水平对鲜质量、干质量和主根条数都有极显著差异,对根长有显著或极显著差异;对成活率影响最大的是珍珠岩,对苗高、地径和叶幅影响最大的是椰糠,对鲜质量、干质量、根长和主根条数影响最大的是黄心土。以泥炭土︰蛭石︰珍珠岩︰椰糠︰黄心土=1～2︰1︰1︰2︰2为柚木无根组培瓶苗快速育苗的最佳轻基质配比。

美国红枫‘白兰地’的组织培养与快繁技术

以美国红枫‘白兰地’(Acer rubrum‘Brandywine’)的带腋芽的茎段为外植体,进行了组织培养与快繁技术研究,结果表明:1)外植体的最佳取材时段为3-5月,最佳消毒方案是用3%的NaClO处理8min,污染率仅为2.22%,存活率达91.11%.2)启动培养中,3因素对其影响的主次顺序依次为培养基,IBA,6-BA.在WPM,MS,1/2MS,DKW 4种培养基中,WPM对外植体启动培养影响显著高于其他3种,最佳培养基配方为WPM+IBA 0.5mg/L+6-BA 2.0mg/L.3)增殖培养的最佳培养基配方为WPM+0.002mg/L TDZ+0.4mg/L NAA,增殖系数为1.37.4)壮苗培养的最佳培养基配方为WPM+0.5mg/L NAA+1.0mg/L GA3,苗的长势最好,茎粗且伸长明显,叶大且绿.5)根诱导培养中,4因素对其影响的主次顺序依次为6-BA,GA3,培养基,IBA,最佳培养基配方为MS+2.0mg/L IBA+1.0mg/L GA3,生根率高达93.3%.6)组培苗的炼苗移栽以先闭盖锻炼6d,后开盖锻炼2d,再移栽到沙与腐殖质等比混合的基质中,存活率最高,达86.7%.

兔眼蓝莓组织培养过程中褐化与生根问题的探讨

以兔眼蓝莓茎尖和茎段形成的愈伤组织和长期继代培养的试管苗为材料,接种于改良的WPM和1/2WPM的培养基中,研究活性炭与Vc液对兔眼蓝莓外植体和愈伤组织形成中褐化的影响以及外源体、活性炭对无根苗瓶内生根的影响。结果表明,当培养基中加入Vc液并含100～200 mg·L-1的活性炭时,能有效防止外植体褐化的发生;当培养基中加入Vc液并含200～500 mg·L-1活性碳时,可有效防止愈伤组织褐化发生。蓝莓继代培养试管苗在1/2 WPM的培养基中添加0.2 mg·L-1IBA,并含100～200 mg·L-1活性炭时生根情况最为理想,经过7 d暗培养,30 d后生根率高达87.8%。

天台鹅耳枥的组织培养与快速繁殖

为了首次建立天台鹅耳枥的组织培养与植株再生体系,以其茎段、未萌发的新芽及萌发后的嫩芽、叶片等为外植体进行离体培养试验。结果表明,以新生的嫩芽为外植体,成功诱导不定芽的分化与增殖,最佳培养基配方为1/2 MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+PVP 0.2%。壮苗培养基配方为1/2MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.05mg·L-1;最佳生根培养基配方为1/4 MS+IBA1.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1。

植物生长调节剂对米槁愈伤组织诱导、组培苗生根的影响

【目的】探究不同种类及质量浓度植物生长调节剂对药用植物米槁愈伤组织诱导、组培苗生根的影响,寻找最适宜米槁愈伤组织诱导和组培苗生根的最佳培养基组合,为米槁大量繁殖提供技术支撑,加速米槁苗木生产,丰富米槁的无性繁殖体系。【方法】以米槁叶片和不定芽为外植体,采用正交试验设计,研究不同种类及质量浓度组合植物生长调节剂对米槁愈伤组织诱导和组培苗生根的影响。【结果】MS培养基适合米槁叶片愈伤组织诱导,不同质量浓度的2,4-D和6-BA均对米槁叶片愈伤组织诱导有显著影响,NAA的质量浓度无显著影响,2,4-D和6-BA是影响愈伤组织诱导的两个主要因素,当2,4-D质量浓度为1.0 mg/L、6-BA质量浓度为2.0 mg/L、NAA质量浓度为0.3 mg/L时,愈伤组织诱导率最高,达到了81.25%。1/2 MS培养基适合米槁不定芽组培苗生根,不同质量浓度的IBA和AC(活性炭)均对米槁不定芽组培苗生根有显著影响,NAA的质量浓度无显著影响,IBA和AC是影响组培苗生根的主要因素,当IBA质量浓度为0.1 mg/L、NAA质量浓度为0.5 mg/L、AC质量浓度为0.2 g/L时,组培苗生根率最高,达到了72.38%,且根系生长状况最好,生根较早,根系繁密,有须根,根长较长。【结论】米槁叶片愈伤组织诱导最佳培养基为MS培养基+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L+琼脂6.5 g/L+蔗糖30 g/L,2,4-D和6-BA比NAA更适合米槁叶片愈伤组织诱导;米槁不定芽组培苗生根最佳培养基为1/2 MS+NAA 0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L+AC 0.2 g/L+琼脂7 g/L+蔗糖30 g/L,IBA和AC比NAA更适合米槁不定芽组培苗生根。

黑荆树愈伤组织诱导、增殖与分化

以黑荆树叶片为外植体，MS培养基为基本培养基，研究了外源激素对愈伤组织诱导、增殖及分化的影响。结果表明：外源激素6-BA与IBA组合、6-BA与2,4-D组合、TDZ与IBA组合均可诱导愈伤组织，但诱导率差异达极显著水平；不同外源激素组合上诱导的愈伤组织，其增长率为165.21%～208.53%，其中以6-BA与IBA组合的增长率最大；在添加TDZ与IBA的培养基上易分化出不定芽，但不同培养基上诱导的愈伤组织对不定芽的分化率和芽的生长影响达极显著差异。综合考虑，筛选适宜愈伤组织诱导、增殖培养基为MS＋1.5 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L IBA，诱导率为43.36%，平均增量和增长率分别为1.04 g和208.53%；最适宜继代时间为18～21 d；最适宜愈伤组织分化培养基为MS＋0.05 mg/L TDZ ＋0.2 mg/L IBA，分化率为51.85%，每块愈伤组织上分化5～8个芽点。

南洋楹组培快繁技术优化研究

以南洋楹优树种子无菌苗单株作为初始外植体,通过均匀设计和正交设计试验筛选培养基配方,并对诱导增殖流程、培养条件、炼苗等技术环节进行了优化研究,建立南洋楹无性系规模化组培快繁技术。结果表明:南洋楹外植体在诱导培养基MS+6BA 0.5 mg/L诱导分化2周期后,转入增殖培养基MS+6BA 0.2 mg/L+NAA0.02 mg/L+蔗糖30 g/L,采用自然光源培养4周期,可显著抑制玻璃化现象,增殖倍数达4.1;生根培养基为1/2MS+NAA 0.01 mg/L+IBA 0.2 mg/L+蔗糖20 g/L,生根率72.3%;将生根与炼苗过程结合进行可增强植株抗性,移栽成活率提高至92.5%。

铁皮石斛组织培养研究进展

综述了铁皮石斛(Dendrobium officinale)组织培养研究进展,铁皮石斛的组织快繁主要通过种子无菌萌发、试管苗原球茎发生和试管苗器官发生3种途径;铁皮石斛的基本培养基为MS、B5、N6、RM和Fonnesbech,但对最适培养基的选择却不同,主要在于外植体来源不同所致;铁皮石斛在不同生长发育阶段所需激素的量和种类都不相同,目前,铁皮石斛组织培养中常使用的外源激素主要是生长素类(如IAA、IBA、NAA等)和细胞分裂素类(如BA、ZT和KT);添加剂的使用在铁皮石斛的组织培养快繁体系的建立中具有重要的意义,常用的添加剂为香蕉汁、椰子汁、马铃薯泥、苹果汁、荸荠汁等;此外,碳源、温度及光照对铁皮石斛组培苗生长发育都有影响。

油松体细胞胚胎发生技术研究进展

油松是我国北方地区重要的造林及用材树种,通常采用常规的种子育苗造林方式。实际工作中存在出苗不整齐、子代易变异且育苗周期长等问题,而体细胞胚胎发生技术作为一种新兴的无性繁殖技术可以解决这些问题。该文对过去20年来油松体胚发生的相关研究进行综述,总结了油松胚性愈伤组织的诱导、增殖、成熟以及遗传转化等阶段的最佳培养条件,为今后油松的大规模扩繁奠定基础。

油樟组织培养技术研究

以当年生油樟枝条为研究对象,探索了消毒剂种类、浓度及其作用时间、MS培养基、6-BA、NAA、IBA等5种因素对油樟茎段组织培养的影响,分析筛选出了一套能够产出具有优良素质油樟种苗的组织培养技术。结果表明:油樟茎段经10%84处理15min或15%84处理10 min两种方法进行消毒均能获得污染率<15%,且成活率>70%的无菌外植体;适合不定芽诱导的培养基为:蔗糖30 g·L^(-1)+卡拉胶6 g·L^(-1)+MS+6-BA 1.0 mg·L^(-1)+IBA 0.1 mg·L^(-1);适合不定芽增殖继代的培养基:蔗糖30 g·L^(-1)+卡拉胶6 g·L^(-1)+MS+6-BA 1.0 mg·L^(-1)+NAA 0.10 mg·L^(-1)+IBA 0.2 mg·L^(-1);生根培养基:蔗糖15 g·L^(-1)+卡拉胶6 g·L^(-1)+1/2MS+IBA 1.5 mg·L^(-1)+NAA 1.0 mg·L^(-1)。

照山白杜鹃组织培养研究

以照山白杜鹃(Rhododendron micranthum)试管苗的茎段为外植体,研究不同激素组合对其外植体诱导、丛生芽增殖及试管苗生根的影响。结果表明:最适丛生芽诱导培养基为Read+ZT 4.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+蔗糖(3%),诱导率达92.41%;最适丛生芽增殖培养基为Read+ZT 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖(3%),增殖系数达7.56;生根培养基为Read+IAA 0.5 mg/L+蔗糖(2%),生根率达92.5%;NAA不适宜照山白杜鹃生根诱导;将试管苗移栽到松毛土:泥炭土:河沙=1:2:1的基质中,成活率达89%。

轮叶蒲桃组织培养试验

采用轮叶蒲桃(Syzygium grijsii)优株带腋芽的茎段做为外植体进行组织培养试验,结果表明:在WPM培养基上,当NAA浓度为0.1 mg/L,BA浓度取0.4 mg/L时,轮叶蒲桃的芽诱导率高达80%;在1/2WPM+IBA 0.2mg/L培养基上生根效果明显,生根率达到75%,移栽成活率达80%以上。

红豆树的组织培养技术

以红豆树(Ormosia hosiei et Wils)优树根蘖苗移栽促萌形成枝条为外植体进行带牙茎段组织培养试验研究,结果表明:最佳外植体为半木质化嫩枝顶端的带牙茎段;最适诱导培养基为MS+BA 0.5 mg.L-1+NAA 0.05 mg.L-1,平均诱导率达52.05%;增殖培养阶段最适不定芽诱导培养基为MS+BA 2.0mg.L-1+NAA 0.1 mg.L-1。

文冠果离体培养技术研究

以文冠果带芽茎段为外植体,以MS配方为基本培养基,采用不同激素组合对其进行离体培养试验,结果表明:6-BA1.00 mg.L-1+NAA0.20 mg.L-1和6-BA1.00 mg.L-1+NAA0.50 mg.L-1的激素组合适宜诱导芽和增殖培养,分化率分别为90.4%和89.3%;苗高分别为1.96 cm和1.97 cm;增值倍率为4.5和4.8,丛生芽粗壮。而1/2MS+IBA0.50 mg.L-1为其最适生根培养基,生根率93.1%,平均生根4.8条,平均根长1.5 cm。生根苗移栽应严格控制温湿度,从成活率和成本综合考虑,园土炉灰=21是较为适宜的移栽基质,移栽30 d,平均苗高可达4.5 cm,成活率90%以上。

玉露花茎诱导的2种愈伤组织细胞学及分化研究

用暗培养的方法诱导玉露花茎脱分化,对诱导出的愈伤组织进行继代培养,得到2种愈伤组织。对2种不同形态的愈伤组织进行细胞学观察发现,一种为胚性愈伤组织,外形呈球形颗粒状,细胞排列整齐、紧密,细胞核染色较深,细胞能观察到明显的淀粉颗粒。另一种为非胚性愈伤组织,外形松软粗糙无固定形状,细胞大小不均匀且无固定形状,细胞核不明显,淀粉颗粒不明显。胚性愈伤组织在分化中经历了球形胚、子叶胚阶段,分化的芽体型较小,形态较为完整,继续培养时成苗速度较快;非胚性愈伤组织在分化过程中有典型的器官发生情况,大部分是先产生单个器官芽,但芽形态不完整,并且形状大小差异大,继续培养时成苗的速度慢。研究结果可为优化十二卷属观赏植物离体快繁技术体系、进一步创造新品种提供一定的技术支撑。

激素对蓝莓组培苗瓶外生根的影响

通过不同蓝莓品种,不同激素、不同激素浓度三因素对蓝莓组培苗瓶外生根进行正交试验研究,结果表明不同品种之间的生根性状指标均达到了差异极显著水平;方差分析并多重比较,激素处理以NAA 1000mg/L最佳。

周楸腋芽离体培养快繁技术研究

为研究周楸组织培养快繁技术,以周楸2号为材料,对带腋芽茎段离体培养不同阶段培养基中萘乙酸(NAA)、6-苄基腺嘌呤(6-BA)浓度分别设计4个水平,通过研究NAA和6-BA主效应及交互作用对腋芽诱导率、无菌苗增殖系数和NAA对无菌苗生根率的影响,以期明确周楸腋芽离体培养时最适激素条件。研究表明,周楸2号带腋芽茎段离体培养诱导培养基适宜的激素水平为NAA 0.010~0.015 mg/L,6-BA 0.6~1.2 mg/L;增殖培养基适宜的激素水平为NAA 0.15~0.20 mg/L,6-BA 0.8~1.6 mg/L;生根培养基适宜的激素水平为NAA 1.0~1.5 mg/L。

牛樟组培快繁体系的建立与优化

以牛樟带腋芽茎段为外植体,建立并优化了牛樟组培繁育体系,研究不同消毒处理、不同激素及配比对牛樟茎段不定芽诱导、丛芽增殖及瓶内生根的影响。结果表明:牛樟初诱导采用0.1%HgCl2+吐温-20消毒8 min污染率最低,腋芽正常萌发;牛樟带腋芽茎段最佳启动培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg·L-1+IAA 0.5 mg·L-1,在此培养基中不定芽培养13 d开始萌动,诱导率可达80.00%;不定芽继代培养基的最适宜配方为MS+6-BA 1.0 mg·L-1,在此培养基中不定芽生长健壮,愈伤组织少,增殖系数达到了3.83,在继代培养基中添加0.2 g·L-1的活性碳有壮苗和防止褐化作用;幼苗生根培养基的最适宜配方为MS+6-BA 0.1 mg·L-1+IAA 0.5 mg·L-1+0.2 g·L-1 AC,在此培养基中幼苗培养18 d开始发根,根系发达,平均单株根数达4.23,生根率达82.50%。上述组织培养技术条件,可有效提高牛樟茎段的不定芽诱导率和生根率,为牛樟产业化育苗奠定了基础。