对桑椹菌核病病原菌有拮抗作用的木霉菌菌株筛选及生防效果试验

桑椹菌核病是果桑生产的重要病害,筛选对病原菌有拮抗作用的木霉菌进行生物防治,对确保果桑生产的稳产与桑果的食用安全都具有重要意义。从不同果桑种植区域的桑椹菌核病发病桑园采集桑树根际土壤样品,通过土壤稀释涂布法及形态学特征观察分离到48株木霉菌。采用对峙培养的方法,研究48株初筛菌株对桑椹菌核病病原菌核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)的重寄生能力,筛选出20株具有较强拮抗能力的木霉菌菌株,并进行分子生物学分类鉴定,有7株菌株与哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、9株菌株与棘孢木霉(Trichoderma asperellum)、1株菌株与黄绿木霉(Trichoderma aureoviride)、1株菌株与橘绿木霉(Trichoderma citrinoviride)、1株菌株与绿木霉(Trichoderma virens)有较高的相似度。采用玻璃纸法检测20株木霉菌菌株中,有8株菌株的菌丝分泌物对核盘菌处理6 d内的抑制率稳定在80%以上。进一步从中筛选出哈茨木霉Tr16、绿木霉Tr48、棘孢木霉Tr50共3株拮抗作用明显的菌株,利用其发酵液进行桑椹菌核病的田间防效试验,结果显示Tr16和Tr50菌株发酵液的10倍稀释液对桑椹菌核病的防治效果分别为91.27%、82.53%,优于80%多菌灵500倍稀释液的防治效果,具有一定的实用开发潜力。

杏树枝木醋液的制取及其抑菌活性和化学成分分析

【目的】以杏树枝为原料热解制取木醋液,研究其抑菌活性和理化性质,为将杏树枝木醋液作为一种新型植物源抗菌剂提供理论依据。【方法】利用干馏热解的方法,依据木材热解的理论分别在90～170,170～370和370～450℃ 3个温度段收集粗制木醋液,经过静置、木炭粉吸附杂质、过滤等过程得到精制木醋液,并对其pH、有机酸含量和密度等理化性质进行测定。然后以黄瓜炭疽病菌（Colletotrichum lagenarium）、葡萄霜霉病菌（Plasmopara viticola）、棉花黄萎病菌（Verticillium dahliae）、辣椒疫霉病菌（Phytophthora capsici）和小麦赤霉病菌（Fusarium graminearum）等5种农林业常见致病病菌为靶标菌,对所得到的木醋液进行抑菌活性研究,并对170～370℃收集杏树枝木醋液的化学成分进行了GC/MS分析。【结果】90～170,170～370和370～450℃3个温度段收集杏树枝木醋液的pH分别为3.41,2.93和3.31;有机酸含量为3.66%,5.38%和2.89%;密度分别为1.01,1.05和1.02 g/mL。3个温度段木醋液抑菌能力的分析结果表明,170～370℃收集木醋液的抑菌能力较强。GC/MS分析发现,170～370℃收集木醋液的化学成分中,酚类的相对含量为55.06%,醛类的相对含量为12.66%,酸类的相对含量为7.33%;苯酚含量相对最高（15.02%）,其次为糠醛（相对含量为8.00%）和乙酸（相对含量为6.55%）。【结论】杏树枝木醋液抑菌能力最强的收集温度为170～370℃,其主要化学成分为苯酚及其他酚类化合物。

苦豆草中抑制杉炭疽菌分生孢子萌发的物质

预试验发现苦豆草地上部分乙醇提取物对杉炭疽菌有较强的抑制活性 ,进一步用不同溶剂 ,在不同 pH条件下萃取将苦豆草乙醇提取物分离为 4个组分。生测表明其生物碱部分对该菌的抑菌活性最强。将生物碱部分用氧化铝柱层析分离得到 7种单体结晶。用熔点、旋光度、红外、和GC MS得到的MS数据与文献相应数据对照鉴定了这 7种生物碱 ,它们分别是 :槐果碱、苦参碱、槐胺碱、莱曼碱、槐定碱、苦豆碱、野靛碱。用纸环法生测表明这 7种生物碱对杉炭疽菌分生孢子萌发均具有较强的抑制活性 ;它们的EC50 为 :苦豆碱 72 0 μg/mL ,野槐胺碱 1 98 0 μg/mL ,苦参碱 86 0 μg/mL ,槐果碱 2 4 0 μg/mL ,槐定碱 2 6 0 μg/mL ,莱曼碱 1 2 6 0 μg/mL ,而相同条件下的常用杀菌剂 75 %百菌清和 70 %甲基托布津的EC50 值分别为 82 0和 1 1 8 0μg/mL。

17种植物醇提物体外抗松木蓝变菌活性的研究

采用菌丝生长速率法对17种植物乙醇提取物进行体外抗松木蓝变菌——可可球二孢活性研究,结果表明:黄荆、马尾松、阴香、湖北海棠、羊耳菊等5种植物提取物对可可球二孢具有明显的抑制活性,且抑制率随浓度的升高而增强,其中马尾松、阴香、湖北海棠抑制效果增强最明显,在10 mg/mL的药剂浓度下分别达到69.96%、87.30%和66.07%,是抗可可球二孢引起的木材蓝变的植物源药剂开发潜力植物,可为进一步筛选具有较高抑制活性的植物源、新型、无污染的防木材蓝变剂提供科学依据。

油茶炭疽病拮抗真菌的分离与筛选

为防治油茶炭疽病,采用组织分离法从油茶炭疽病叶、病果中分离到病原菌,经柯赫法则验证是油茶炭疽病病原菌,根据其形态特征鉴定为胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides;采集油茶健康叶,通过分离筛选,共获得对油茶炭疽病菌具有较强拮抗作用的真菌3株,编号为C5、S2、H18,它们在PAD平板上对油茶炭疽病菌的抑制率分别为60.7%、60.0%、58.0%。

油茶炭疽病拮抗放线菌的筛选及其抑菌谱研究

从土样中分离到109株放线菌,采用对峙培养法、发酵产物活性测定及离体接种试验进行拮抗菌的筛选,结果表明:以油茶炭疽病菌作为指示菌,通过平板对峙培养初步筛选出抑菌效果较好的F1、F5、F9、F10、F22、F23、F38、F53 8个菌株,其抑菌带宽度在12.5～20.5 mm,占分离到放线菌总数的7.3%,其中F10抑菌效果最强;复筛表明8个菌株对供试的7种植物病原菌均有抑制作用,F9、F10对油茶炭疽病菌、油茶根腐病菌抑菌效果明显。菌株发酵产物的抑菌活性测定表明8个菌株的发酵液能完全抑制油茶炭疽病菌的生长,效果明显;发酵滤液抑菌率为5.6%～38.8%,效果不明显,抑菌率超过30.0%的只有F9、F10 2个菌株;发酵灭活液均无抑菌活性。离体接种试验表明F9、F10 2个菌株无伤接种防治效果达80%,而刺伤接种防治效果只有10%～20%,但发病程度轻。

珊瑚藻提取物对食用菌病菌及杂菌的抗菌活性

对珊瑚藻乙醇提取物的抗菌活性进行初步研究,测定了其对圆弧青霉、绿色木霉、黑曲霉菌丝生长的抑制作用。结果表明,浓度为0.001 g/mL的珊瑚藻乙酸乙酯相Rf 0.00条带48 h的抑制率最低,为11.4%;浓度为0.01 g/mL的珊瑚藻Rf 0.92条带部分对圆弧青霉96 h抑制率最高,达到了86.0%。GC-MS分析表明,珊瑚藻乙醇提取物成分以酯类为主。

用荧光半定量RT-PCR检测蚊溴氰菊酯抗性

目的:建立蚊对菊酯类杀虫剂抗性的PCR检测方法。方法:应用荧光半定量RT鄄PCR,检测经SSH结合cDNA芯片分离鉴定的淡色库蚊对溴氰菊酯抗性相关基因NYD鄄Tr在抗性品系与敏感品系中的表达水平。结果:经荧光半定量RT鄄PCR检测,NYD鄄Tr进入指数期的循环数抗性品系早于敏感品系,抗性品系组比敏感品系组先进入指数增长期。结论:以NYD鄄Tr作为靶基因,荧光半定量RT鄄PCR可区分淡色库蚊对溴氰菊酯抗性品系与敏感品系,亦即可检测淡色库蚊溴氰菊酯抗性。

杉木炭疽病拮抗菌AM53菌剂的研制及其林间防效

通过量筒法筛选助剂研制生防菌AM53的水分散性粒剂,并测定其林间防治效果.结果表明:水分散粒剂的最佳配方为:3.5%十二烷基硫酸钠(润湿剂),5%木质素磺酸钠(分散剂),4%硫酸铵(崩解剂),2%聚乙二醇(粘结剂),加水量16%-20%,高岭土补足100%.货架期试验结果表明,该粒剂常温下至少能贮存3-4个月.林间防治试验结果表明,AM53菌剂对杉木炭疽病有较好的防治效果.

冷杉精油对几种瓜蔬幼苗立枯病的防治效果

以天然巴山冷杉精油为主料,五氯硝基苯为辅料进行的西瓜、茄子、辣椒种子萌发及其幼苗立枯病防治试验结果表明:高浓度的冷杉精油对种子萌发有一定抑制作用。不同稀释倍液的冷杉精油对西瓜幼苗立枯病均具有一定的防治效果。1500倍液的五氯硝基苯和1000倍液冷杉精油混合使用对西瓜立枯病有良好的防治效果,较单独使用1500倍液的五氯硝基苯防效提高了33.3%。

绿粘帚霉与坚强芽孢杆菌对松赤枯病的协同生物控制

G．virens与B．firmus对松赤枯病的协同控制显示：（1）预先接种病原菌后（7天）再进行生物防治处理，防治效果在处理间差异不明显，浓度影响无显著差异，即使是两种生防制剂联合使用也未显著提高其防效，但不同树种间的感病性有明显差异；（2）颉抗菌与病原菌同时接种，对松赤桔病有一定防治效果，两菌联合有一定的协同作用。两种菌单独施用防效差异不显著，浓度变化对防效影响不大；（3）预先接种颉抗菌能显著提高防治效果，两种菌联合处理防效更优，感病树种（马尾松、云南松、油松）的感病指数可降至13～15，抗病树种的感病指数可控制在3％左右；在同一浓度下B．firmus与G．virens间无显著差异，在同一颉抗菌下，浓度愈高，防效愈高；（4）三种生防接种方式的平均效果分析表明，G．virens最高平均防效49．5％（黑松），B．firmus为50％（辐射松），两菌联合最高平均防效80％（辐射松）；在同一树种条件下，“预先接种颉抗菌”的方式显著高于“颊抗菌与病原菌同时接种”和“预先接种病原菌”，而“颉抗菌与病原茼同时接种”的方式也明显优于“预先接种病原菌”。从防治效果的绝对值来看，“预先接种病原菌”方式在实际生产中表现为病害已发生再进行生防菌处理，这种情况对松赤桔病的控制无实际意义。

粉拟青霉的生产及林间应用技术

针对云南重大森林害虫—纵坑切梢小蠹寄生真菌粉拟青霉的产业化关键问题,探讨该菌的生产工艺流程,生产步骤和相关的各项生产参数,以及生产中各个环节的具体操作方法和与之对应的质量检测内容、标准、方法;概述其林间应用技术,林间试验结果表明粉拟青霉对松小蠹具有较好的防治效果。

外生菌根真菌对病原菌拮抗作用机理研究进展

针对外生菌根真菌子实体组成的有效成分,外生菌根真菌对病原菌重寄生作用,产生抗生素、酶、化学抑制物质等几个方面,分析了外生菌根真菌拮抗病原菌的机理,为生防菌剂筛选提供依据。

植物生物碱的杀虫作用及应用

植物生物碱是植物在与昆虫协同进化过程中形成的一大类具有防御功能的次生代谢物质,在害虫综合治理中具有非常重要的作用。本文对植物生物碱的杀虫作用方式、作用机理和作为杀虫剂、昆虫拒食剂、驱避剂、产卵忌避剂的应用以及作为先导化合物在新农药创制中的作用做了综述,并对植物生物碱的研究前景进行了展望,提出了今后研究和开发应用中注意的问题。

鹅膏菌抑真菌活性成分的化学结构初探

【目的】研究鹅膏菌菌株AV对杨树烂皮病病原菌金黄壳囊孢菌的抑菌活性,并对抑菌活性物质的结构进行分析,为林木病害的防治提供理论基础。【方法】采用G-75葡聚糖凝胶层析法(洗脱液为pH 6.7的Na2HPO4-NaH2PO4)与G-25凝胶层析法(洗脱液为0.02mol/L乙酸铵)进行2次柱层析,分离得到鹅膏菌菌株AV的抑菌活性物质,然后对抑菌活性组分进行紫外扫描、傅立叶红外光谱及液相色谱-电喷雾电离质谱(LC/ESI-MS)分析,并采用生长速率法测定活性物质的抑真菌活性。【结果】鹅膏菌抑真菌活性物质中存在的主要官能团有-OH、C=O、-CH2-C=O、-NH-、-CH-和-NH2;LC/ESI-MS分析显示,该活性成分中有2个不同的化合物,分子质量分别为5 732.39和7 187.01u;从鹅膏菌分离得到的抑菌活性物质对金黄壳囊孢菌菌丝生长的抑制率为100%,对病原菌孢子处理8d后未见孢子萌发,而对照在5d即内萌发为菌丝团。【结论】鹅膏菌菌株AV对金黄壳囊孢菌具有较强的抑制作用,其抑菌活性物质为含有不饱和羰基或共轭烯烃结构的酰胺类物质。

5种药用植物提取液对杨树灰斑病抑菌活性研究

为筛选出对杨树灰斑病菌具有抑制作用的中草药抑菌活性物质,采用3次浸渍提取法对丁香、肉桂、厚朴、毛茛、兴安白芷5种中草药进行提取,采用生长速率法和孢子萌发法,测定了提取液对菌丝生长和孢子萌发的影响。结果表明,5种药用植物提取液对杨树灰斑病原菌均有不同程度的抑制作用,其中丁香、肉桂、兴安白芷提取物对病原菌的菌丝生长抑制效果较好,丁香提取液浓度在16 mg/mL时,对病菌菌丝生长抑制率可达到98.02%,同样浓度的肉桂、兴安白芷提取液抑制率也可达到91%以上;5种药用植物提取液对孢子萌发抑制作用强于对菌丝生长的抑制作用,其中丁香、毛茛对病原菌的孢子萌发抑制效果最好。说明5种药用植物75%乙醇提取液中含有抗菌成分,为生物防治杨树灰斑病提供参考。

花粉杀菌方法比较及紫外线杀菌工艺

以花粉为研究材料,通过比较湿热灭菌、微波处理、60Co辐照灭菌、乙醇灭菌、紫外线灭菌对细菌数目、VC保存率的影响。比较不同杀菌方式对花粉的影响结果表明:微波灭菌、60Co辐照灭菌灭菌效果较好;从VC保存率来看,乙醇灭菌、紫外线灭菌效果较好。研究了紫外线灭菌工艺,结果表明杀菌时间为3 h,紫外灯功率为32 W,照射距离为30 cm较合适。

苏云金芽孢杆菌菌种保藏

采用砂土管和滤纸片两种保藏方法，对分属31个亚种的61株有代表性的苏云金芽孢杆菌（Bacillusthuringiensis）经过1—23年保存后的菌体存活情况、形态特征及对林业主要害虫舞毒蛾（lymantriadispar）幼虫的杀虫活性进行了试验；并对苏云金芽孢杆菌5个亚种的标准菌株和保存不同年限后的11项生理生化特性及酯酶型进行了测定。

柞蚕杀菌肽对桉树青枯病假单胞菌的杀菌作用

桉树、木麻黄青枯病是广东省林业主要病害，近年为害猖獗导致严重损失。本文报道柞蚕杀菌肽Ｄ对桉树、木麻黄青枯病假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｏｌａｎａｃｅａｒｕｍ）的杀菌作用。以荧光黄染料隅联的杀菌肽作用于青枯病假单胞菌，用电镜及激光共焦扫描显微镜观察，发现杀菌肽能迅速地将菌体包围、作用于细胞膜，造成许多小孔并进入胞内，尔后损伤的小孔扩大形成喇叭口，内含物由此泄出胞外，最后菌体变成空囊而死亡。

披针叶黄华抗杉木炭疽菌活性物质研究

预试验中发现披针叶黄华地上部分乙醇浸提物具有抗杉木炭疽菌活性 ,进一步用不同溶剂 ,在不同 p H值下萃取得到 4个组分 .生测表明披针叶黄华中生物碱部分对杉木炭疽菌的抑菌活性最强 .其生物碱对杉木炭疽菌分生孢子萌发较对菌丝生长的抑制活性强 ,对杉木炭疽菌的分生孢子和菌丝的 EC50分别为 1 36.0 μg/m L和 1 555.0 μg/m