羔羊超数排卵与胚胎体外生产技术研究进展

自从幼畜体外胚胎移植(JIVET)技术问世以来,因其在优秀种畜快繁、育种世代间隔缩短、遗传资源保护等方面具有广阔的应用前景,引起了很多科研机构的关注。为提高JIVET的生产效率,研究人员对该技术的多个环节进行了探索,但总体效率还不是很高。论文就羔羊超数排卵与胚胎体外生产技术实施中的关键环节,即羔羊超排供体的年龄、超排季节生殖激素的使用、羔羊超排反应、卵母细胞发育效率、卵母细胞的基因表达、体外胚胎的冷冻耐受性和卵母细胞及受精卵培养体系的优化等影响因素进行总结与分析,提出羔羊超排存在的问题并展望其发展前景,为这一技术能在更多家畜繁殖领域的应用和商业化生产提供参考资料。

不同培养系统牛体外受精囊胚的质量评价

采用双重荧光分染方法 ,结合免疫外科手术 ,对来自TCM 199和SOF培养系统的牛体外受精囊胚质量进行了评价。结果显示 ,TCM 199培养系统的囊胚发育率为 31.9% (335 / 10 74 ) ,平均细胞总数为 73.1,内胚团细胞数为 16 .8,其中生存细胞占 99.5 % ;SOF培养系统的囊胚发育率为 2 0 .9% (2 4 8/ 1186 ) ,平均细胞总数为 5 6 .2 ,内胚团细胞数为 11.3,其中生存细胞占 96 .5 %。证实 ,使用TCM 199生产的囊胚质量和囊胚发育率优于SOF培养系统。

不同培养条件对牛核移植胚胎体外发育的影响

[目的]进一步优化牛核移植胚胎的体外培养体系。[方法]在培养液中添加谷胱甘肽和胚胎培养的0～3d采用5％O2浓度，在不同培养条件下对牛核移植重构胚胎进行体外培养，测定卵裂率、8细胞发育率、桑椹胚率以及囊胚发育率。[结果]结果表明，试验组B的8细胞发育率（38.3％）、桑椹胚率（17．0％）和囊胚率（8.5％）与对照组A（17．9％、1．3％、1．3％）差异显著（P〈0．05）。试验组B和试验组c的桑椹胚率（17.0％、11.8％）、囊胚率（8．5％、7．8％）与对照组A（1．3％、1．3％）均差异显著（P〈0．05）。[结论]在培养液中添加谷胱甘肽和胚胎培养的0～3d采用低O2浓度（5％O2），能够提高牛核移植胚胎的体外发育率。

影响杜泊绵羊超数排卵效果的因素分析

对53只杜泊绵羊实施超排处理，系统分析了供体羊年龄、胎次、重复超排、两次超排间隔时间、胚胎回收部位和季节对超数排卵效果的影响。结果表明，24月龄以上羊平均回收胚胎数显著高于8～12月龄羊（8．71：7．18）（P〈0．05）；8-12月龄羊可用胚胎所占比例显著高于13-24月龄羊（95．29％：75．96％）（P〈0．05）。经产二胎羊平均回收胚胎数显著高于初产羊（8．71：7．00）（P〈0．05）；初产羊可用胚胎所占比例显著高于经产一胎羊（96．14％：75．88％）（P〈0．05）。第三次超排处理平均回收胚胎数显著少于首次和第二次处理（8．71：8．10：7．00）（P〈0．05）；首次超排处理平均可用胚胎数高于第二次和第三次超排处理（7．47：5．90：5．00）（P〈0．05）。两次超排间隔10个月可用胚胎所占比例显著高于间隔1个月（92．14％：77．09％）（P〈0．05）。从输卵管平均回收胚胎数显著多于从子宫角平均回收胚胎数（10．14：8．22）（P〈0．05）。秋季超排处理平均可用胚胎数和可用胚胎所占比例均显著高于冬季（7．53：5．97）（91．67％：74．90％）（P〈0．05）。

马胚胎附植及其分子调控研究进展

胚胎附植是处于活化状态的囊胚滋养层细胞与处于接受态的母体子宫上皮细胞之间逐步建立组织和生理上联系的过程。马(马属动物)在该过程中先后存在侵入性的绒毛膜带(子宫内膜杯)和非侵入性的尿囊绒毛膜(微子叶型上皮绒毛膜胎盘),是一种集侵入性与非侵入性胚胎滋养层于一体的哺乳动物。多种分子共同调节妊娠母马的胚胎附植过程。作者综述了马胚胎附植特点、过程与相关分子调控的研究进展,对减少母马妊娠早期胚胎丢失与流产具有重要参考价值。

奶牛胚胎移植中生殖激素含量变化及黄体发育状况与移植效率的关系

本研究通过测定奶牛血中相关激素水平,针对胚胎移植中对受体母牛生理状况判断时卵巢触诊法的主观性和盲目性,以相关激素水平为指标来判定受体牛的生理状态,研究胚胎移植受体黄体和生理状况及妊娠之间的关系。通过试验证实,利用黄体触诊法选择受体牛虽然有非量化的弊端,但是实际生产操作中仍然是可行的。

奶牛性别控制胚胎移植试验

试验的目的是研究分选X型冻精与常规冻精品质的比较,结果显示:分选X精子的精液密度、活率、存活指数等各方面指标均明显低于常规冻精(P<0.05);使用4支分选X型冻精进行体内受精胚胎生产,结果对排卵数小于17枚的供体母牛进行体内受精胚胎生产效果良好,大于17枚则部分未受精;分选X型冻精奶牛鲜胚双胚移植与分选X型冻精奶牛鲜胚单胚移植进行比较,结果性控奶牛鲜胚双胚移植与单胚移植产犊率差异不大,双胚移植经济效益较高;分选X型冻精与常规冻精所产母犊比较,结果性控胚胎移植所产犊牛初生和60日龄各项指标与常规冻精所产犊牛差异不显著(P>0.05)。

杜泊绵羊和波尔山羊冷冻胚胎引进移植扩大试验

从南非引进杜泊绵羊(218枚)和波尔山羊(104枚)冷冻胚胎,以本地小尾寒羊(165只)和奶山羊(114只)为受体,经同期发情处理,分别向受体羊子宫角内植入1～2枚解冻的可用胚胎。结果表明:绵羊受胎率为36.7%,其中单胚受胎率为23.3%,双胚受胎率为46.8%。山羊受胎率为31.3%,其中单胚受胎率为25.0%,双胚受胎率为45.8%。胚胎移植绵羊和山羊双胚的受胎率均高于单胚(P<0.05)。而且与自然繁殖的羔羊相比,1～3月龄体重和平均日增重基本一致(P>0.05),羔羊的生长发育正常,经济效益显著。

家畜体外受精技术与研究方法

本文综述了家畜体外受精技术的研究方法和意义,着重介绍了体外受精技术流程、技术要点和操作手法,简述了家畜体外受精主要技术内容的理论基础,并展望了牛体外受精技术的发展前景。

家畜受精卵移植的研究和应用

家畜的受精卵移植最早的成功实验,是1934年在绵羊、山羊方面进行的,1951年牛、猪的受精卵移植事例也相继报道,关于马受精卵移植的试验,1970年才首次报道.60年代以来,对家畜胚胎的采集、保存、移植等技术环节进行了大量的试验研究,取得了不少进展.70年代以来,受精卵移植技术可以说发展到畜牧生产中实际应用的阶段,特别是牛的受精卵移植,发展很快.

家畜胚胎移植技术在我区畜牧业生产中的战略地位

胚胎移植也称“借腹怀胎”，指的是将一头雌性家畜（供体）的受精卵或早期胚胎移植到另一头雌性家畜（受体）体内，使之继续发育为与供体动物具有相同基因型的后代。常规胚胎移植技术过程主要包括：供受体母畜的选择，供体的超数排卵及授精处理，胚胎的采集和保存，受体的...

不同黄体支持方法对体外受精-胚胎移植结果的影响

目的研究不同黄体支持方法对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结果的影响,并探讨促性腺激素释放激素类似物(GnRH-a)在黄体支持中的临床效果。方法回顾性分析352个IVF/ICSI-ET周期的资料,其中单用黄体酮125例(A组),口服联合阴道用孕酮107例(B组),在B组基础上于取卵后6天加用一次注射用醋酸曲普瑞林0.1 mg皮下注射120例(C组),比较三组IVF-ET的结果。结果 A组与B组间临床妊娠率、种植率以及验孕日孕酮(P)和促绒毛膜性腺激素(HCG)水平差异无统计学意义(P>0.017);C组的生化妊娠率、临床妊娠率、种植率以及验孕日P和HCG水平显著高于A组和B组,差异有统计学意义(P<0.017);三组间宫外孕、流产率、卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论口服联合阴道用孕酮法的临床效果等同于肌肉注射黄体酮法,但前者使用方便,患者较易接受。而GnRH-a在黄体支持中的新应用显示了其较好的临床效果。

浅谈胚胎移植室内灭菌操作

笔者在从事胚胎移植室内操作的学习和实践中,深切体会到胚胎移植室内的灭菌操作往往是一个被忽视的环节,尤其大多数初学者操作起来又常常不得要领。为此笔者简要总结了胚胎移植室内的准备和灭菌操作要点,以供参考。

冻融卵裂期胚胎移植中过夜培养对临床妊娠结局的影响

目的探讨冻融卵裂期胚胎移植中过夜培养对临床妊娠结局的影响。方法 2011年12月至2012年12月在我院生殖医疗中心接受玻璃化冷冻的卵裂期胚胎移植患者共237个周期,其中胚胎解冻时间为移植当日128个周期(A组),过夜培养109个周期(B组),比较两组的胚胎种植率、临床妊娠率、流产率。结果 A组胚胎种植率低于B组(P<0.05),而临床妊娠率和流产率与B组,差异无统计学意义(P>0.05)。结论将胚胎提前解冻培养过夜,观察解冻后胚胎的进一步发育情况,可提高胚胎种植率,为临床选择移植胚胎提供有意义的参考。

黑萨福克和杜泊绵羊超数排卵效率比较及分析

本试验的目的是比较黑萨福克和杜泊绵羊超数排卵效率的差异,并进一步分析差异产生的原因。20只黑萨福克绵羊和10只杜泊绵羊用FSH递减法超数排卵,获得的胚胎用于移植103只受体。结果表明,黑萨福克绵羊平均回收胚胎11.0±7.1枚,杜泊绵羊14.3±6.7枚,差异不显著(P>0.05);移植2枚可用胚的黑萨福克组和杜泊组产羔受体绵羊,可用胚发育效率无差异(75%和80%,P>0.05);整体水平上,黑萨福克绵羊获得后代的几率显著低于杜泊绵羊(44.7%和88.9%,P<0.05)。说明两品种绵羊回收的胚胎数量没有差异,但质量有差异;黑萨福克超数排卵效率低于杜泊绵羊,但与母羊繁殖力无关,可能因公羊精液品质或者输精方式所致。

水牛体外胚胎移植技术研究

本文以每头次 2枚体外胚胎 (鲜胚或冻胚 )移植受体母牛 4 5头计 84头次 ,试验结果表明 ,鲜胚移植受胎率为 3 6 .2 % ( 2 5 / 6 9) ,平均每头受体移胚 1 .82次 ,产下 2 1头试管水牛 ,繁殖率为 5 5 .3 % ( 2 1 / 3 8) ;冻胚移植受胎率为2 0 .0 % ( 3 / 1 5 ) ,平均每头受体移胚 2 .1 4次 ,产下 3头冻胚试管水牛 ,繁殖率为 4 2 .9% ( 3 / 7) ,共生产 2 4头试管水牛 ,全部成活。其中 3头冻胚试管水牛 ,2例试管双胞胎和

MicroRNA调控胚胎植入研究进展

植入是胚胎与子宫内膜识别、接触并依附于子宫内膜上或进一步侵入、包埋于子宫内膜中的过程,是哺乳动物生殖生理的重要环节,这一过程对于胚胎能够在子宫持续的发育并最终获得成功的妊娠是必需的。成功的植入需要同步发育的正常胚胎、容受性的子宫内膜及母胎的和谐对话来实现。胚胎植入过程复杂而短暂,参与调控的因素有很多,包括microRNA。论文介绍了与植入相关microRNA的最新研究进展,包括microRNA对胚胎发育、子宫内膜的容受性等方面的作用,将为我们理解植入机制提供新的视角。

H-Y抗血清的制备及其在小鼠胚胎性别鉴定上的应用

建立了完善的检测H-Y抗体的CELISA法。首次获得了C57BL/6小鼠对H-Y抗原的抗体应答曲线。高效价的H-Y抗血清明显地提高了小鼠胚胎性别鉴定的准确率。

免疫外科法制备牛供体细胞核胞体及其核移植研究

本研究利用自制的兔抗牛脾细胞免疫血清裂解供体细胞膜而获得核胞体,结果表明,自制的免疫血清可以成功的裂解供体细胞膜而获得核胞体。将该法制备的核胞体应用于牛体细胞核移植的胞质内注射中,从而为核移植中供体细胞核胞体的获得提供一种新的思路。在比较不同供体细胞对重构胚发育的影响时,结果表明,颗粒细胞与耳成纤维细胞构建的重构胚卵裂率没有显著差异(62.62%versus67.89%,P>0.05),囊胚率也没有明显的差异(23.88%versus18.92%,P>0.05);在4℃低温冷藏一定时间的供体细胞与未经冷藏的供体细胞,其卵裂率和囊胚率都没有显著性差异(63.34%versus62.03%;26.67%versus24.45%,P>0.05);同样,耳成纤维细胞也得到相同的结果(70.76%versus66.67%;21.74%versus19.56%,P>0.05)。颗粒细胞构建的重构胚在注核后3～5h进行激活较1～3h有更高的卵裂率,表现出显著性差异(73.91%versus56.52%,P<0.05),囊胚率无显著性差异(23.53%,versus15.38%,P>0.05)。

马胚胎移植现状

马的胚胎移植自七十年代首次移植成功以来有了很大的进展．目前，胚胎回收率达５５－８０％，移植妊娠率为７０％。而低生殖力的母马在其胚胎回收率．受体妊娠率及维持妊娠方面均较低．手术移植与非手术移植的妊娠率稍有不同。受体母马排卵时间在供体排卵前１－２天至排卵后２－３天的妊娠率比较高．卵巢摘除的母马用孕酮处理与供体同步排卵的前提下，也可以成功的作为胚胎受体．利用垂体制剂、促性腺素释放激素等类药品超排并不是很有效．每周期平均只有３个卵泡排卵．通过胚胎切割可以产生双驹，但成功率低；桑椹期较囊胚期胚胎冷冻效果好．胚胎在４℃保存２４小时其活力并未丧失。将体外受精的卵母细胞移植到受休进一步研究。