英国史宾格犬酪氨酸关联蛋白1(TYRP1)基因多态性及单倍型研究

探讨英国史宾格犬毛色与酪氨酸酶相关蛋白1（TYRP1）基因的相关性。本研究采用DNA测序技术、AS-PCR以及PCR-RFLP对英国史宾格犬群体的TYPR1基因编码区进行多态性检测和基因分型,分析多态位点间的关系。结果表明：TYRP1基因编码区存在3个多态位点,T121A和P345△2个多态位点基因型频率分布符合H-W平衡,C991T位点基因型频率分布不符合H-W平衡。经χ~2独立性检验,T121A和P345△多态位点与犬2种毛色极显著相关（P〈0.01）;C991T位点与犬2种毛色显著相关（P〈0.05）。3个多态位点两两间连锁不平衡分析发现连锁不平衡系数｜D′｜值都为1。3个多态位点构成3种单倍型：AC△、TTP和TCP;得到6种单倍型组合,每一种单倍型组合决定犬特定的毛色类型。因此,本研究成功建立了犬毛色基因TYRP1编码区多态位点的检测方法,为进一步研究毛色基因型与犬的胆量大小的相关性提供了前期工作基础。

比格犬MC3R和MC4R基因多态性与体重相关性的研究

犬体重是重要的经济性状,为探讨犬MC3R和MC4R基因多态性与犬体重性状的关系,本研究利用PCR-R FLP、AS-PCR方法对120只比格犬MC4R基因T101N位点,MC3R基因的A167T位点,G291A位点的不同基因型与体重的关系进行最小二乘分析、结果表明:对于MC4R基因NN基因型的比格犬体重显著高于其他2个基因型(P<0.05),而MC3R基因中TT和AA基因型的比格犬体重则显著高于其他2个基因型(P<0.05)。在MC4R基因型一致时,NNTT和NNAA基因型的犬体重显著高于其他合并基因型(P<0.01),NNTTAA合并基因型的犬体重最高,MMAAGG基因型犬体重最低。实验结果表明,MC3R和MC4R基因可以作为犬体型的候选基因,可筛选MC3R和MC4R合并基因型的犬用于培育不同体重的犬。

不同温度对犬卵母细胞体外卵丘扩散及核成熟的影响

目前犬体外胚胎生产及克隆等技术由于受到卵母细胞体外成熟率低的影响而受到限制,实验旨在探索不同温度对犬卵母细胞体外卵丘扩散及核成熟的影响。从不同时期犬卵巢收集卵丘卵母细胞复合体(COCs),随机分成4组,置于TCM-199(Earle’s salts)+25 mmol/L HEPES+10%(v/v)FBS+10 ng/mL EGF+1 mg/mL L-半胱氨酸+1%青–链霉素成熟培养液中,分别在37.0、38.5、40.0℃条件下培养48 h,测定不同温度培养前后卵丘扩散及核成熟情况。结果表明:不同温度下,培养前后卵丘均显著性扩散(211.40μmvs359.64、377.25、373.23μm),但各处理组间无显著差异,不同温度下对犬卵母细胞核体外成熟率(10.73%、10.025%、14.35%)没有显著差异。说明培养温度只要在犬正常体温变动范围内,则温度对其卵母细胞卵丘扩散及体外培养成熟率均无显著影响。