二重PCR检测猪、鸡源致病性大肠杆菌、沙门氏菌磺胺类耐药基因(Sul1、Sul2、Sul3)的研究

利用二重PCR对临床分离的猪、鸡源致病性大肠杆菌103株和沙门氏菌33株的3个磺胺类药主要耐药基因Sul1、Sul2、Sul3进行了检测。结果表明,在19株耐SD的沙门氏菌中有17株检测出Sul1或Sul2基因,检出率为89.47%,与药敏试验的结果相比,符合率为89.47%;在56株耐SD的大肠杆菌中有53株检出耐药基因,与药敏试验的符合率为94.64%。二重PCR方法与常规PCR的结果符合率为98.5%,具有很高的一致性;与药敏试验也有很好的符合率,具有较高的特异性。整个试验过程只需7 h,比常规PCR节约7 h,检测速度有了较大的提高。

致病性大肠杆菌微胶囊口服疫苗的制备及对其免疫功能的评价

通过喷雾-界面配位改良法制备了大肠杆菌微胶囊口服疫苗,平均直径为10μm,包被率为65%;并通过体外试验证实了本疫苗能避免胃酸的破坏且肠溶性良好;利用淋巴细胞转化实验、玻板凝集试验、ELISA试验测定了其免疫效果,试验数据表明,大肠杆菌微胶囊口服疫苗能有效激活细胞免疫、体液免疫、黏膜免疫,可产生大量的IgA和IgG,并且使用方便,安全有效。

鸡舍内外环境中气载大肠杆菌同源性的分子鉴定

采用ANDERSEN-6级空气微生物样品收集器和RCS离心式采样器在5个鸡场舍内空气、舍外上风向和下风向不同距离收集气载大肠杆菌;并收集鸡的粪便,分离大肠杆菌。利用大肠杆菌基因间重复一致序列为引物的聚合酶链式反应（ERIC-PCR）分型技术,扩增不同测量点收集的大肠杆菌的DNA图谱。通过每个采样点的大肠杆菌的浓度变化以及大肠杆菌遗传相似性分析确认动物舍微生物气溶胶向舍外环境的传播。结果显示：5个鸡舍内空气中大肠杆菌的浓度远远高于舍外上风和下风向的大肠杆菌浓度（P〈0.05或P〈0.01）,但是舍外不同距离间的大肠杆菌浓度差异并不显著（P〉0.05）。同样,ERIC-PCR结果表明,从鸡的粪便中分离的大肠杆菌与从舍内空气中分离的部分大肠杆菌（34.1%）,以及从鸡场舍外下风方向分离到的多数大肠杆菌（54.5%）与从舍内空气或粪便中分离的大肠杆菌相似性可达100%。而从鸡舍上风向分离到的大肠杆菌与从舍内空气或粪便中分离的大肠杆菌相似性为73%-92%。从而说明来自动物体的大肠杆菌既能污染舍内空气,又能对其周围的环境构成污染。本研究揭示了微生物气溶胶的传播规律,具有公共卫生及流行病学意义。

贵州羔羊致病性大肠埃希氏菌血清型和致病因子的研究——大肠埃希氏菌的分离、血清型、致病因子和致病性试验

1997～ 1999年 ,对贵州册亨、水城、龙里、关岭 4个县的 330 0头份羔羊进行调查 ,收集羔羊腹泻病例 115例 ,初分离出肠杆菌 80株 ,经生化试验和致病试验初步鉴定出大肠杆菌 55株菌株 ,分离率为 4 8%。经小白鼠致病性试验 ,55株菌株都能引起发病死亡 ;并用其中的 CH9812 、SC993 8、CH985、CH9817、LL993 4、GL9886株菌株做家兔致病性试验、羔羊致病性试验 ,结果 ,6株菌株都能使羔羊、家兔发病死亡。对初分离 55株菌株做血清型鉴定 ,为 55株大肠埃希氏菌 ,分属为 O119、O2 4 、O8、O78、O10 1、O96种血清型 ,其中 O119和 O2 4 为主要“O”类型。每个血清型筛选出的 CH9612 、SC993 8、CH985、CH9817、L L993 4、GL988株菌 6株。用乳鼠胃内投服试验 ,测定出 6株菌具有产生热稳定性肠毒素的特性(ST)。