RT-PCR技术诊断猪瘟的应用研究

应用反转录_聚合酶链反应 (RT_PCR)对猪瘟进行诊断应用研究。应用RT_PCR对来自广西不同地区的 135份疑似猪瘟病料进行检测 ,84份诊断为阳性 ,阳性率 6 2 .2 %。从百色、柳州地区等采集的健康猪扁桃体和淋巴结共 2 76份 ,经RT_PCR检测 ,37份为阳性 ,阳性率为 13.4 %。其中健康猪扁桃体带毒较高 ,2 4 6份扁桃体中有 35份阳性 ,占 14 .2%。采自柳州健康猪的 2 6份淋巴结材料全为阴性 ,只有邕宁县的 1份健猪淋巴结阳性。结果表明 。

孔雀石绿间接竞争ELISA检测方法的建立

采用无色孔雀石绿(Leucomalachite green,LMG)单克隆抗体建立了水产品中孔雀石绿(Malachite green,MG)残留的间接竞争ELISA(ciELISA)检测方法。结果表明,LMG-McAb最佳稀释倍数为1∶80 000,包被抗原最佳质量浓度为0.80μg/mL;竞争反应时的LMG理想稀释液为40%乙腈水溶液;标准曲线呈线性相关,相关系数R2=0.9823,最适检测范围1 ng/mL^256 ng/mL,最低检测限为1.29 ng/mL,批内和批间变异系数分别为4.307%和4.566%;鳗鱼肉样的平均添加回收率为90%~110%;该检测方法与隐性结晶紫、孔雀石绿、结晶紫的交叉反应(CR%)分别为40.67%、13.50%和5.89%,与其他抗生素无交叉反应。

琼脂扩散沉淀反应检测菌毛抗原的初步研究

用琼脂扩散沉淀反应检测了大肠杆菌菌毛抗原。结果表明 ,用巴比妥钠 -HCl缓冲液制备的琼脂平板 ,在菌毛孔与抗菌毛血清孔之间出现一条明显的沉淀线 ,而用 80 g/L的NaCl配制的琼脂板在菌毛孔与抗菌毛血清孔之间则无沉淀线。由此提示 ,用巴比妥钠

对鸡卵黄免疫球蛋白两种提取方法的比较

本文比较了水稀释-饱和硫酸铵沉淀法(法一)和水稀释-冰乙醇分级沉淀法(法二)分离提纯鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)的产率、纯度及抗体效价。结果表明:两种方法提取的IgY纯度均较高,法一纯化的IgY的产率及蛋白活性相对更好。

鸡胚中沉积的尿酸盐对血凝试验的影响

在新城疫La Sota半成品检验过程中，发现接种后培养120h的活胚，经过-20℃低温速冻1h，有的鸡胚尿囊液中有尿酸盐产生，且出现的几率比较大，而经过2～8℃低温冷冻24h的鸡胚，产生白色尿酸盐的几率相对小一些。凡是有尿酸盐产生的鸡胚，均没有血凝现象产生。但用含有尿酸盐的尿囊液接种鸡胚，继续增殖，会有病毒大量复制，试验说明有新城疫病毒存在的尿囊液中，若有尿酸盐沉淀，则血凝现象会被遮盖。