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牛源麦氏弧菌ASP基因的克隆与原核表达
1
作者
林永润
李章程
+5 位作者
刀丽梅
程方俊
曹立亭
蒋梦娜
孙莹莹
张婷婷
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第7期884-889,共6页
为获得牛源麦氏弧菌重组碱性丝氨酸蛋白酶(ASP),笔者扩增并构建了以麦氏弧菌FD39-1的ASP基因为插入片段的重组表达质粒p ET32a-ASP,将该质粒转化至大肠杆菌Rosetta中诱导表达并纯化,采用SDS-PAGE与Western-blot技术检测目的蛋白是否表...
为获得牛源麦氏弧菌重组碱性丝氨酸蛋白酶(ASP),笔者扩增并构建了以麦氏弧菌FD39-1的ASP基因为插入片段的重组表达质粒p ET32a-ASP,将该质粒转化至大肠杆菌Rosetta中诱导表达并纯化,采用SDS-PAGE与Western-blot技术检测目的蛋白是否表达成功。结果显示,扩增的ASP基因与GenBank中相应基因序列(Kp126900.1)的同源性达100%。ASP基因在大肠杆菌中成功表达,表达蛋白相对分子质量大小约为58 ku,与预期一致。Western-blot显示在预期位置出现阳性条带。本研究为麦氏弧菌ASP的生物学特性与亚单位疫苗的制备奠定了基础。
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关键词
麦氏弧菌
丝氨酸蛋白酶
克隆
原核表达
原文传递
题名
牛源麦氏弧菌ASP基因的克隆与原核表达
1
作者
林永润
李章程
刀丽梅
程方俊
曹立亭
蒋梦娜
孙莹莹
张婷婷
机构
西南大学荣昌校区动物医学系
重庆市兽医科学工程研究中心
出处
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第7期884-889,共6页
基金
"十二五"国家科技支撑计划项目(2011BAD36B00)
重庆市重点科技攻关资助项目(cstc2012jcsfjfzhX0021)
重庆高校创新团队建设计划(CXTDG201602003)
文摘
为获得牛源麦氏弧菌重组碱性丝氨酸蛋白酶(ASP),笔者扩增并构建了以麦氏弧菌FD39-1的ASP基因为插入片段的重组表达质粒p ET32a-ASP,将该质粒转化至大肠杆菌Rosetta中诱导表达并纯化,采用SDS-PAGE与Western-blot技术检测目的蛋白是否表达成功。结果显示,扩增的ASP基因与GenBank中相应基因序列(Kp126900.1)的同源性达100%。ASP基因在大肠杆菌中成功表达,表达蛋白相对分子质量大小约为58 ku,与预期一致。Western-blot显示在预期位置出现阳性条带。本研究为麦氏弧菌ASP的生物学特性与亚单位疫苗的制备奠定了基础。
关键词
麦氏弧菌
丝氨酸蛋白酶
克隆
原核表达
Keywords
Vibrio metschnikovii
serine protease
cloning
prokaryotic expression
分类号
S852.651.5 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
牛源麦氏弧菌ASP基因的克隆与原核表达
林永润
李章程
刀丽梅
程方俊
曹立亭
蒋梦娜
孙莹莹
张婷婷
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2017
0
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已选择
0
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参考文献
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