犬膀胱移行上皮癌伴发远端肋骨转移的病例分析

犬膀胱移行上皮癌是犬的恶性肿瘤,有50%的病例发生远端转移。临床接诊1例长期血尿并出现渐进性跛行的德国牧羊犬,经过临床基本检查、血液学检查(血常规检查和血液生化检查)、影像学检查(DR检查和CT检查)、细胞学检查等方法进行诊断,确诊为膀胱移行上皮癌并伴有远端肋骨转移。采用米托蒽醌和吡罗昔康联合化疗方案,6个月后病情恶化。该病例的诊治过程为膀胱移行上皮癌的诊断和治疗提供了参考。

可溶性T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域3(sTIM3)的生物学功能及与肿瘤免疫治疗的研究进展

T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域3(TIM3)是在多种免疫细胞中表达的一类免疫检查点蛋白,有膜型TIM3(mTIM3)和可溶性TIM3(sTIM3)两种形式。mTIM3和sTIM3可以结合同样的配体,但相较于mTIM3,对sTIM3的功能和作用机制了解尚少。临床上发现包括肿瘤在内的多种疾病患者的血浆sTIM3水平发生异常,目前的研究主要集中在将sTIM3作为生物标志物在肿瘤诊断和治疗监测中的潜力,而将其作为免疫治疗的靶点的研究开展较少。本文主要总结了sTIM3的产生、生物学功能及在肿瘤免疫治疗中的相关研究进展。

CD226、 TIGIT和CD96调节NK细胞功能参与机体抗肿瘤免疫

CD226是自然杀伤(NK)细胞表面的活化性受体,与具有免疫球蛋白和免疫受体酪氨酸抑制基序结构域的T细胞免疫受体(TIGIT)和CD96等分子通过竞争结合肿瘤细胞表面的CD155等配体,介导NK细胞的杀伤功能。虽然TIGIT和CD96在肿瘤微环境中有其他结合配体,但它们以更高的亲和力竞争结合CD115配体,并抑制NK细胞的活性,使肿瘤细胞逃避杀伤。因此,研究这三种NK细胞表面受体在不同肿瘤中的表达模式,并监测分析它们与配体的结合能力,有助于探索新的肿瘤治疗策略。本文总结了CD226、 TIGIT和CD96等NK细胞受体分子调节NK细胞功能在机体抗肿瘤免疫应答中的作用及其机制。

闭合型犬子宫蓄脓的诊断与保守治疗

犬子宫蓄脓是一种急性或慢性疾病，多发生于发情后期的成年母犬，可引起生殖系统与其他系统的损伤，表现出多种临床症状和复杂的病理变化。子宫蓄脓常常是在子宫内膜炎的基础上由子宫积液发展而来，因变性的子宫腺体分泌机能加强，

犬口腔乳头状瘤病理组织学变化

犬口腔乳头状瘤病是由犬口腔乳头状瘤病毒（COPV）引起幼犬的一种接触性良性肿瘤病[1]。在犬感染COPV后一段时间,局部口腔黏膜上皮增厚隆起,开始形成乳头状凸,随着病程发展,乳状凸成熟转变成菜花状瘤体[2]（中插彩版图1）。在这过程中,病变上皮组织细胞出现一系列形态、结构变化。

常规外科手术与使用高频电刀摘除犬乳腺肿瘤的比较

高频电刀（loop eletro-surgical excision proce-dure,LEEP）目前主要用于人医宫颈病变、扁桃体挤切术、消化道息肉、胆囊摘除术、顽固性鼻出血等疾病治疗,兽医临床应用报道很少,曾见犬阴道肿瘤及犬阴道前庭肿瘤治疗病例[1-2]。犬乳腺肿瘤是兽医临床常见病例之一[3],目前多采用外科手术摘除。但乳腺组织血液供应丰富,手术过程出血较多,LEEP可利用高频电流通过机体组织时产生热效应,进行组织切割并凝固血管止血[4]。因此,本文采用LEEP和外科手术法比较对犬乳腺肿瘤组织的摘除效果,以期获得临床应用启示。

犬毛母质瘤的病理学观察

毛母质瘤（pilomatricoma）是一种良性的皮肤肿瘤,来源于毛囊的毛母质细胞,由于正常毛母质的生长过程受到阻碍,其凋亡受到抑制,进而增殖、聚集而形成的一种良性上皮瘤，常单独发生，有恶变的可能。

饲料蛋白质在反刍动物瘤胃的降解及其影响因素

由于瘤胃细菌和原虫的作用,反刍动物利用蛋白质明显不同于单胃动物。饲料蛋白质进入瘤胃后,一部分被微生物降解为非蛋白氮,与饲料中原有的以及唾液中的非蛋白氮最终一起转变为氨。瘤胃微生物利用发酵生成的挥发性脂肪酸等作为碳架,并利用瘤胃发酵释放的能量(ATP)将氨合成微生物蛋白。微生物蛋白连同饲料蛋白质中的未降解部分(过瘤胃蛋白质),随着食糜流动进入真胃和小肠,被动物分泌的消化液(酶)分解为氨基酸,为动物体吸收和利用。大量研究表明,优质饲料蛋白质经过保护后,就能够满足高产反刍动物对过瘤胃蛋白质的需要,提高优质植物性蛋白质利用效率,动物的氮沉积及生产性能得到明显改善,同时根据瘤胃能氮平衡理论为在日粮中利用更多的非蛋白氮提供了可能。了解饲料蛋白质在反刍动物瘤胃的降解及其影响因素,可为制定过瘤胃蛋白质、氨基酸的技术措施提供依据。

犬肛周腺瘤病例

犬肛周腺瘤是一种变异的皮脂腺瘤,仅发生于犬,多见于未去势的老龄犬[1]。本实验室于2011年接受了一例西施犬肛门周围皮肤肿物,经诊断为犬肛周腺瘤,报告如下。

miR-181b-5p通过靶向结合PAX9促进人急性髓细胞性白血病细胞增殖并诱导其凋亡

目的 探究miR-181b-5p通过靶向结合配对盒基因9(PAX9)对急性髓细胞性白血病(AML)细胞增殖和凋亡的影响。方法 分别用基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库和肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库分析AML患者中PAX9的表达水平和预后的关系。在Kasumi-1细胞和AML5细胞中转染空载体(Vector组)或PAX9(PAX9组),CCK-8法检测细胞的增殖活性,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,Western blot法检测细胞周期蛋白依赖激酶2(CDK2)和细胞周期蛋白B1(CCNB1)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、 Bcl2相关X蛋白(BAX)的表达。生物信息学分析预测PAX9靶作用的微小RNA(miRNA)、荧光素酶报告系统验证其靶向作用,实时定量PCR检测PAX9 mRNA水平,Western blot法检测PAX9蛋白表达。在Kasumi-1细胞和AML5细胞中转染miR-NC(miR-NC组)或miR-181b-5p(miR-181b-5p组),在miR-181b-5p组细胞中进一步转染PAX9(miR-181b-5p联合PAX9组),采用前述方法分别检测细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡。结果 GEPIA和TCGA数据库显示AML患者PAX9呈低表达趋势并与患者不良预后相关。在Kasumi-1、 AML5细胞中,与Vector组相比,PAX9组细胞增殖活力、 S期细胞百分比、 CDK2、 CCNB1和Bcl2蛋白表达降低,G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡率、 BAX蛋白表达升高。双荧光素酶报告基因验证PAX9是miR-181b-5p的靶基因。与miR-NC组相比,miR-181b-5p组细胞增殖活力、 S期细胞百分比、 CDK2、 CCNB1和Bcl2蛋白表达升高,G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡率、 BAX蛋白表达降低。与miR-181b-5p组相比,miR-181b-5p联合PAX9组细胞增殖活力、 S期细胞百分比、 CDK2、 CCNB1和Bcl2蛋白表达降低,G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡、 BAX蛋白表达升高。结论 miR-181b-5p靶向抑制PAX9表达促进AML细胞增殖、延缓细胞凋亡。

具有中央记忆T细胞表型的新型CAR-T细胞的制备及其对GD2阳性人骨肉瘤细胞的杀伤作用

目的通过优化嵌合抗原受体结构制备具有中央记忆T细胞表型并靶向双唾液酸神经节苷脂(GD2)的新型嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞,检测其对GD2阳性骨肉瘤细胞的杀伤能力。方法构建由抗GD2单链抗体、CD28铰链区及跨膜序列、4-1BB胞内共刺激域和CD3ζ胞内段组成的新型嵌合抗原受体慢病毒载体,包装纯化慢病毒并感染Jurkat细胞,检测所得新型CAR-T细胞的感染效率、扩增能力、记忆表型以及不同骨肉瘤细胞株的GD2表达水平;慢病毒感染并筛选稳定表达荧光素酶和增强型红色荧光蛋白(eRFP)的GD2+MG63细胞系;荧光素酶实验检测新型CAR-T细胞对建系MG63细胞的杀伤能力。结果获得优化结构的新型CAR-T细胞,CAR阳性率达到92%以上;新型CAR-T细胞具有良好的体外扩增能力和中央记忆T细胞表型;杀伤实验显示新型CAR-T细胞能够有效杀伤GD2阳性的MG63骨肉瘤细胞。结论通过优化CAR分子结构成功制备的新型CAR-T细胞具有中央记忆T细胞表型,能够有效杀伤GD2阳性骨肉瘤细胞。

中药墓头回提取物抗肿瘤活性的实验研究

用中药墓头回（ＭＴＨ）中所含的皂甙、多糖、萜类等成份的４种提取物样品ＭＳ、ＪＰ、ＭＰ、ＭＴ，对移植性肿瘤肝癌（Ｈｅｐ）和艾氏癌（ＥＣ）鼠进行了体内抗肿瘤实验。结果表明，４种样品对Ｈｅｐ和ＥＣ均具一定的抑制作用，其中ＭＳ对Ｈｅｐ的作用较强，ＭＴ对ＥＣ的作用较强；小鼠胸腺和脾脏重量略有增加。

新城疫病毒和苦马豆素联合抗肿瘤试验中瘤组织的病理变化及IL-6的表达

【目的】运用免疫组化SP法,测定新城疫病毒(NDV)和苦马豆素(SW)联合治疗肿瘤时IL-6在肿瘤组织中的表达,探究生物因素治疗肿瘤过程中细胞因子的作用。【方法】通过建立S37肿瘤模型鼠,将48只S37肿瘤模型鼠随机分成4组,即NDV治疗组、SW治疗组、NDV联合SW治疗组和对照组,从建立肿瘤模型当日起,于第4,8,12和16天取各组肿瘤制作石蜡切片,用HE染色法和免疫组化法观察荷瘤机体中肿瘤的组织形态学变化及IL-6分布的差异。【结果】各治疗组在肿瘤病理组织学和IL-6分布上与对照组差异显著。从病理组织学变化和IL-6阳性反应的强弱可知,NDV弱毒和SW联用组的阳性反应最强,其次是NDV治疗组,最后是SW治疗组。【结论】SW和NDV联合治疗肿瘤的效果最好,在生物因素刺激下,IL-6在抑制肿瘤细胞方面具有一定作用。

CXCL13联合VEGFA过表达抑制荷黑素瘤和结肠癌小鼠的肿瘤生长

目的探究CXC趋化因子配体13(CXCL13)与血管内皮生长因子A(VEGFA)对肿瘤生长的影响。方法通过慢病毒包装及感染技术,构建稳定过表达CXCL13、VEGFA、CXCL13联合VEGFA的B16小鼠黑素瘤细胞和MC38小鼠结肠癌细胞。采用CCK⁃8、5⁃乙炔基⁃2′⁃脱氧尿苷(EdU)法、集落形成实验检测过表达后肿瘤的体外增殖能力。建立过表达CXCL13、VEGFA细胞的小鼠皮下荷瘤模型探索对体内肿瘤生长的影响。结果与对照组相比,体外单独过表达CXCL13、单独过表达VEGFA和联合过表达CXCL13和VEGFA对B16和MC38细胞增殖无明显影响。体内单独过表达CXCL13和单独过表达VEGFA对黑素瘤的生长无明显影响,而联合过表达CXCL13和VEGFA显著抑制黑素瘤的生长;在MC38结肠癌模型中,单独过表达CXCL13组和单独过表达VEGFA组的肿瘤体积和质量显著高于对照组,而联合过表达CXCL13和VEGFA组的肿瘤体积和体质量较单独过表达组显著减小。结论CXCL13联合VEGFA过表达抑制荷黑素瘤和结肠癌小鼠的肿瘤生长。

紫杉醇和多柔比星处理改变小鼠乳腺癌免疫微环境并抑制肿瘤细胞生长

目的探讨紫杉醇和多柔比星对小鼠乳腺癌免疫微环境的影响。方法用肿瘤药物应答相关基因表达谱及耐药特征分析数据库CTR-DB分析化疗药对乳腺癌免疫微环境的影响。用4T1细胞原位注射建立小鼠乳腺癌模型,分别用多柔比星和紫杉醇处理。测定小鼠肿瘤大小并绘制生长曲线。采用流式细胞术检测乳腺癌免疫细胞的数量,免疫组织化学染色法检测小鼠乳腺癌组织中乳腺癌抗原KI-67(ki67)、S100钙结合蛋白A9(S100A9)和基质金属蛋白酶9(MMP9)。流式细胞术检测紫杉醇组和多柔比星组中4T1细胞的周期。结果CTR_Microarray_75结果表明药物敏感的乳腺癌中免疫分值、细胞毒性淋巴细胞、B细胞谱系、CD8^(+)T细胞、树突状细胞(DC)、单核细胞谱系以及自然杀伤(NK)细胞等指标均比药物不敏感的乳腺癌高。通过乳腺癌小鼠生长曲线分析,发现紫杉醇和多柔比星均能显著抑制肿瘤体积的增长,而且紫杉醇的肿瘤抑制作用强于多柔比星。通过流式细胞术检测,我们发现紫杉醇和多柔比星均能抑制乳腺癌细胞ki67的表达,并使停滞在G2/M期的乳腺癌细胞增多,其中紫杉醇的作用明显强于多柔比星。多柔比星和紫杉醇均能导致CD45^(+)免疫细胞的增加和中性粒细胞的减少;而且紫杉醇诱导CD3^(+)CD4^(+)辅助性T细胞、CD3^(+)CD8^(+)细胞毒性T细胞、CD45^(+)CD19^(+)B细胞数量增加,而多柔比星诱导CD4^(+)CD25+调节性T细胞(Treg)增加。免疫组织化学染色结果表明紫杉醇对S100A9的抑制作用更强,而多柔比星对MMP9的抑制作用更强。结论紫杉醇和多柔比星可以有效抑制肿瘤细胞的生长,并调控不同的细胞浸润模式和不同细胞基质外成分,改变三阳性乳腺癌(TNBC)的免疫微环境。

马立克病病毒感染和致肿瘤作用的分子生物学

马立克病病毒感染和致肿瘤作用的分子生物学崔治中（江苏扬州大学农学院牧医系２２５００１）鸡马立克病病毒（ＭＤＶ）是疱疹病毒科的一种细胞结合性致肿瘤病毒。过去，将其归类于γ－疱疹病毒，但分子生物学研究表明，其基因组ＤＮＡ结构更类似于γ－疱疹病毒。１深入研...

动物年龄对其肿瘤发生的影响

甘肃省动物肿瘤生态学研究结果表明，年龄对动物肿瘤病的发生有明显的影响，并在不同动物种属及各种好发肿瘤中有着典型的特征。牛和马属动物的良性、恶性肿瘤的年龄高发期为５～１０岁；羊的良性肿瘤高发期为１～５岁，恶性肿瘤高发期３～５岁；鸡的良性肿瘤主要发生在１２月龄以上，恶性肿瘤多见于１２月龄以内。随着年龄的增长，各种好发肿瘤的发生情况可大体归为三类趋势：发病率先上升后下降、持续升高、由高降低。

肿瘤坏死因子体内抗瘤活性的研究

以Ｓ１８０瘤细胞株为靶细胞建立了动物肿瘤模型，分别以ＴＮＦ单用、ＴＮＦ－ＣＴＸ合用和脂质体－ＴＮＦ复合物三种给药方式，进行了肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）体内抗瘤试验。结果表明，ＴＮＦ－ＣＴＸ合用，具有协同抗瘤作用，且能减轻副作用；脂质体－ＴＮＦ复合物能明显减轻ＴＮＦ的毒性反应，而不影响ＴＮＦ的抗瘤作用。

犬基底细胞癌的病理组织学观察

基底细胞癌(basal cell carcinoma,BCC)是一种常见的低度皮肤恶性肿瘤,又名基底细胞上皮癌、基底细胞癌和侵蚀性溃疡。本文主要探讨皮肤基底细胞癌的临床病理诊断和鉴别诊断要点,为提高基底细胞癌的诊治水平提供依据。通过病理组织学观察,皮肤破溃、出血,肿瘤细胞成团块状增生,由结缔组织分割为不规则小叶状。细胞呈梭形、多边形及近圆形;细胞核圆形,核膜清晰,有一明显核仁,有一定异形性,偶见分裂相,作为确诊基底细胞肉瘤的主要依据,并对疾病的处理和治疗方法进行了归纳和总结。

干扰素抗肿瘤病机理的研究进展

家禽肿瘤和病毒感染性疾病的治疗一直是困惑禽病防治的难题之一。至今仍未有一类药物能特异性地有效杀灭家禽病毒性病原，干扰和抑制其病原的复制。据报道，中药制剂对某些病毒性禽病具有较好的治疗作用，但其作用机理还不太清楚。细胞因子干扰素（interferon，IFN）的出现及其临床试验证明，