黄芪影响缺氧微环境中骨髓间充质干细胞增殖活性的PI3K-AKT信号通路分析

基于PI3K/AKT信号通路研究黄芪对缺氧环境中骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的细胞活性的影响。分别以黄芪冻干粉溶液低、中、高剂量(100、200和300μg·mL^(-1))干预低氧浓度(10%)环境中成骨分化培养的BMSCs,通过高内涵实时成像系统观察BMSCs动态增殖情况及分化代数;进行无标记示踪模拟细胞运动轨迹,分析各组细胞运动速度、位移距离和路程的情况;通过激光共聚焦显微镜观察细胞线粒体膜电位,通过免疫荧光和RT-PCR检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白和基因表达水平的变化。结果显示:与对照组相比,10%低氧浓度条件下BMSCs增殖减慢、分化代数减少,运动速度减慢,位移距离和路程减少,线粒体膜电位活性降低,p-PI3K、p-AKT蛋白表达降低,PI3K和AKT基因表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.01);与低氧组相比,黄芪冻干粉溶液干预后,能显著维持缺氧环境中BMSCs增殖和分化活性,运动活力升高,线粒体膜电位活性提高,p-JAK2、p-STAT3蛋白和PI3K、AKT基因表达升高,差异有统计学意义(P<0.05或0.01)。黄芪可能通过激活PI3K/AKT信号通路维持缺氧条件下BMSCs的增殖活性。

基于网络药理学分析小承气汤治疗马肠梗阻的作用机制

肠梗阻是马最常见的疾病之一,小承气汤是治疗肠梗阻的经典方剂。研究旨在通过网络药理学分析阐明小承气汤治疗马肠梗阻的作用机制。首先在中药系统药理学数据库中检索了小承气汤的全部化学成分和靶标,然后利用STRING、DAVID、NCBI数据库和Cytoscape软件构建化合物-靶点网络、蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络、靶点-通路网络,筛选小承气汤的活性化合物和靶标,建立治疗马肠梗阻的小承气汤网络图,研究分析小承气汤治疗马肠梗阻的GO、KEGG通路。结果表明,通过OB、DL和Caco-2筛选出16个有效化合物和32个对应靶标;小承气汤作用于马肠梗阻的PPI网络图包含45个靶点,主要关键靶点为TP53、ESR1、NCOA1、NCOA2、IGF1、MAPK14等,其中与马肠梗阻直接相关的靶点主要有TP53、ESR1、TGFB1、MMP9、HSP90AB1;共有24个基因本体(GO)条目和7条KEGG通路。说明小承气汤可能通过泽兰黄醇、决明内酯、胡萝卜苷_qt、β-谷甾醇、桉树醇、异橙黄酮等调控TP53、ESR1、NCOA1、NCOA2、IGF1、MAPK14等蛋白的表达。并通过肿瘤通路,MAPK信号通路,肿瘤蛋白聚糖,肿瘤坏死因子信号通路等治疗马肠梗阻。其作用机制有待进一步的生物学验证。

卡洛芬注射液安全性研究

为了研究卡洛芬注射液的安全性,选用新西兰白兔,采用皮下注射方法进行刺激试验,选用豚鼠进行皮肤致敏试验和全身致敏试验,观察卡洛芬注射液对白兔和豚鼠的安全性。结果表明,白兔每天皮下注射卡洛芬注射液(10 mg/kg)1次,连续7 d,受试物组和参比品组注射部位均出现发红和溃烂,组织病理学观察可见注射部位溃疡、真皮/皮下/肌肉炎症伴纤维化、表皮增生,恢复期末未见完全恢复,但受试物组恢复程度比参比品组略好;受试物组和参比品组的卡洛芬注射液激发豚鼠皮肤致敏试验和全身致敏试验中均未引起蓝斑等过敏症状。综上所述,受试物和参比品的卡洛芬注射液对动物注射部位均有明显的刺激性,但不会产生皮肤过敏反应,两者安全性基本一致。

复方中草药制剂对林下绿壳蛋乌鸡产蛋性能、蛋品质和血清生化指标的影响

本研究旨在探究日粮中添加不同水平的复方中草药制剂对林下绿壳蛋乌鸡产蛋性能、蛋品质、血清生化指标的影响。选取520日龄健康、体质量接近的绿壳蛋乌鸡560羽,随机分成4组,分别为对照组和试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组分别在基础日粮中添加0.5%、1.0%、1.5%的复方中草药制剂,试验期45 d。结果显示,日粮中添加不同水平的复方中草药制剂对林下绿壳蛋乌鸡的平均蛋重、平均产蛋率、绿壳蛋破损率有显著影响,其中Ⅱ组平均蛋重显著高于对照组(P<0.05),Ⅰ组、Ⅱ组平均产蛋率显著高于对照组(P<0.05),Ⅱ组绿壳蛋破损率显著低于对照组(P<0.05);日粮中添加不同水平的复方中草药制剂对绿壳蛋蛋黄相对重、蛋白高度、蛋黄水分含量、蛋黄指数及哈氏单位有显著影响,其中Ⅱ组绿壳蛋蛋黄相对重显著高于对照组(P<0.05),Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组绿壳蛋蛋白高度显著高于对照组(P<0.05),Ⅱ组、Ⅲ组绿壳蛋水分含量显著低于对照组和Ⅰ组(P<0.05),Ⅱ组绿壳蛋蛋黄指数显著高于对照组、Ⅰ组、Ⅲ组(P<0.05),Ⅱ组绿壳蛋哈氏单位显著高于对照组和Ⅲ组(P<0.05);日粮中添加不同水平的复方中草药制剂对林下绿壳蛋乌鸡的血清总蛋白(TP)、球蛋白(GLO)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)有显著影响,其中Ⅰ组、Ⅱ组血清TP含量显著高于对照组(P<0.05),Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组血清GLO含量显著高于对照组(P<0.05),Ⅲ组血清ALT活性显著高于对照组和Ⅰ组(P<0.05),Ⅱ组血清TC和TG含量显著高于对照组(P<0.05)。综上,日粮中添加不同水平的复方中草药制剂能改善绿壳蛋乌鸡的产蛋性能、蛋品质及血清生化指标,且以1.0%添加量的复方中草药制剂效果最佳。

西藏部分县域牦牛球虫寄生现状调查

为了调查西藏部分地区牦牛球虫病感染率、寄生球虫种类特征,采用饱和食盐水漂浮法检查西藏日喀则市(萨嘎县、亚东县)、那曲市(嘉黎县、聂荣县)和阿里地区(改则县)245份牦牛粪便样本内球虫。研究结果显示,各调查县域牦牛球虫感染率较高,平均感染率为71.43%,萨嘎县、亚东县、聂荣县、嘉黎县、改则县牦牛球虫感染率分别为82.61%(38/46)、80.25%(65/81)、68.97%(20/29)、68.18%(30/44)和48.89%(22/45);感染强度最高可达15000(OPG);牦牛球虫病呈现以混合感染为主的特点,阳性病例中混合感染率达100.00%,80.57%的患病牦牛同时寄生3种以上球虫;经鉴定,在样本中共发现6种球虫病病原,分别为邱氏艾美耳球虫(E.zuernii)、牛艾美耳球虫(E.bovis)、怀俄明艾美耳球虫(E.wyomingensis)、阿拉巴艾美耳球虫(E.alabamensis)、柱状艾美耳球虫(E.cylindrica)、拨克朗艾美耳球虫(E.bukidnonensis)。调查地区牦牛球虫感染率高,均呈现混合感染,且在调查区域内发现致病力很强的邱氏艾美耳球虫(E.zuernii)、牛艾美耳球虫(E.bovis),其对当地牦牛的危害值得深入研究。

浅谈青蒿素的药理效果及畜牧养殖应用

青蒿素是从植物黄花蒿中提取出来的抗疟疾的活性成分,青蒿素在对猪病的治疗中有特殊的疗效,在仔猪的饲料中添加青蒿活性提取物可以明显提高动物的抗病能力,能有效降低饲养成本,对牛羊前胃等内科疾病也有抑制作用。本文介绍了青蒿素类化合物的药理作用,并综述了其在畜牧养殖中的应用,以期为无抗时代养殖提供一定参考。

黄芩煎剂益生菌发酵液有效成份的分析

为研究单菌株及多菌株发酵后的黄芩煎剂对黄芩活性成分及化学成分的影响,本实验分别利用植物乳杆菌单菌株及植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌和黑曲霉3株益生菌分别对黄芩煎剂进行72 h液态发酵,最终获取单菌株和多菌株发酵液,再分别利用?KTAavant分子层析液相色谱和薄层色谱分别对各发酵样品成分种类和有效成分含量进行测定。分子层析色谱分析结果显示,经单菌株和多菌株发酵黄芩煎剂后,发酵液中各种化学成分的含量出现显著变化,与黄芩煎剂相比,发酵液中低分子量的化学组份含量明显增加,且多菌株发酵液中低分子量化学组份的含量显著高于单菌株植物乳杆菌发酵液(P<0.001)。薄层色谱分析结果显示,黄芩煎剂经单菌株和多菌株分别发酵后,黄芩煎剂中的活性成分均发生了明显变化,其中多菌株发酵液活性成分含量极显著高于黄芩标准对照药材(P<0.0001),多菌株发酵液活性成分含量极显著高于黄芩煎剂(P<0.0001),且多菌株发酵液中的有效成分含量极显著高于单菌株发酵液(P<0.0001)。本研究首次证实采用多菌株(植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌和黑曲霉)发酵黄芩煎剂可以有效提高药液中的活性成分和化学成分含量,为进一步研究黄芩的药用价值提供了重要参考。

猪副伤寒的中药防治研究进展

猪副伤寒是一种主要引起仔猪腹泻的细菌性疾病,主要症状为败血症和坏死性肠炎,给畜牧养殖行业造成巨大经济损失。该病主要病原沙门菌侵袭肠道时,诱导上皮细胞凋亡,损伤肠道屏障,且诱发巨噬细胞和内皮细胞焦亡,造成过度炎症,并抑制中性粒细胞溶菌酶释放,减弱机体抗菌能力。中医认为该病系湿热内蕴,弥漫三焦,脏腑气滞血瘀,水谷精微无法吸收,机体无力抗邪。目前,该病治疗以抗生素为主,但随着耐药问题日益加重及“减抗”、“替抗”政策的施行,清热类中药逐渐被应用于猪副伤寒的防治,且疗效确切。本文总结了中药防治细菌性肠道疾病、调控革兰阴性菌感染和调控细胞焦亡信号通路以控制炎症的相关研究,重点讨论了中药对肠道损伤修复的调控作用,揭示了中药能够从修护肠道屏障和抗炎以“扶正”,抑制细菌以“祛邪”2个方面调控猪副伤寒,提出猪副伤寒用药应以清热类为主,同时根据症状选择小复方更贴合临床,与抗生素协同使用或可提高疗效,减缓细菌耐药性产生,为中药防控猪副伤寒提供参考,为该病临床诊治提供依据。

岩藻多糖对大鼠氧化应激的缓解作用研究

为了探讨岩藻多糖对大鼠氧化应激的缓解作用,选择28只8周龄SD雄性大鼠,随机分为3个处理组,分别为对照组(n=10)注射生理盐水和饲喂维持日粮;氧化应激组(n=9)腹腔注射10 mg/kg BW的敌草快和饲喂维持日粮;氧化应激与岩藻多糖联合处理组(n=9)注射10 mg/kg BW的敌草快(diquat)并饲喂添加250 mg/kg岩藻多糖的试验日粮。试验第12 d,氧化应激组和联合处理组大鼠腹腔注射敌草快,建立氧化应激模型。试验结束后,采集血液、肝脏和脾脏组织样品。结果显示,饲喂岩藻多糖缓解氧化应激诱导的大鼠血清中天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)活性的升高,降低肝脏中丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量,并逆转由氧化应激诱导的肝脏组织中核转录因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、超氧化物歧化酶2(superoxide dismutase 2,SOD2)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GPx)基因表达的下调,从而提高总抗氧化能力(total antioxidant capacity, T-AOC)和GPx活性。此外,饲喂岩藻多糖能够逆转氧化应激诱导的大鼠脾脏组织中Nrf2和GPx基因表达的下调,从而提高大鼠脾脏组织中T-AOC及SOD和GPx的活性。因此,岩藻多糖通过Nrf2途径调控大鼠肝脏和脾脏的抗氧化酶活性来缓解大鼠氧化应激。

黄连生物碱对TGEV诱导的ST细胞炎症反应的调节作用

分别用质量浓度为100、50、25μg/m L的黄连生物碱(ACC)处理猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)感染的猪睾丸细胞(ST),采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞的活力;采用硝酸还原酶法检测NO含量;采用比色法检测总一氧化氮合成酶(TNOS)和诱导型一氧化氮合成酶(i NOS)活性;采用荧光定量PCR检测TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10等炎症基因的表达。结果表明:100、50μg/mL的ACC可极显著提高TGEV感染的ST细胞的存活率,25μg/mL的ACC可显著提高TGEV感染的ST细胞存活率;TGEV感染后ST细胞NO含量急剧升高,100、50μg/mL的ACC可极显著降低ST细胞TNOS和i NOS活性,25μg/mL ACC可显著降低TNOS和i NOS活性;ACC可极显著下调ST细胞TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10m RNA的表达水平。表明黄连生物碱可以降低TGEV诱导的ST细胞的炎症反应,缓解病毒对细胞的损伤。

猪流感病毒的流行现状及疫苗研究进展

猪流感(swine influenza,SI)是猪的重要呼吸道疾病之一,其特征为发热、咳嗽、呼吸困难、食欲不振等。临床上SI感染病死率较低,但常导致饲料利用率下降,生长性能差,可与其他病原体合并感染而引起高发病率甚至死亡。猪在流感种间传播中起着复杂且重要的作用,SI的发生不仅给养猪业造成巨大经济损失,对公共卫生也造成严重威胁。论文对近10年我国猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV)感染的流行病学、病毒进化、跨物种传播、疫苗研发等情况进行综述,分析了综合防控策略,为SI的风险评估和综合防控提供参考。

环形泰勒虫亚端粒编码可变分泌蛋白家族部分基因的研究进展

环形泰勒虫作为一种转化型泰勒虫,可感染牛单核巨噬细胞,并使其发生转化。目前,仅知环形泰勒虫通过劫持宿主细胞信号通路完成转化,但其转化机制尚未阐明。环形泰勒虫亚端粒编码可变分泌蛋白(SVSP)家族作为环形泰勒虫基因组的最大多基因家族,其在虫体-宿主相互作用中的功能尚不清楚。因此,本文通过对环形泰勒虫SVSP家族中部分基因的结构、表达特征、与宿主相互作用和可能发挥的功能进行总结,以期为环形泰勒虫-宿主相互作用机制和致病机理研究提供思路,同时也为癌症基础生物学研究提供借鉴。

基于网络药理学和分子对接探究凤尾草治疗炎症性肠病的作用机制

【目的】旨在通过网络药理学和分子对接的方法,研究凤尾草Pteris multifida Poir(.PMP)治疗动物炎症性肠病(IBD)的活性物质、分子靶点及作用机制,为后期研究凤尾草替代抗生素治疗动物IBD提供科学依据。【方法】通过TCMSP数据库检索凤尾草的有效化学成分和作用靶点,以“inflammatory bowel disease”为检索词通过GeneCards数据库检索疾病靶点,使用jvenn网站筛选出交集靶点。使用Cytoscape软件构建凤尾草治疗IBD的药物-有效成分-靶点网络图,并以凤尾草与IBD的交集靶点作为预测靶点,利用STRING数据库构建PPI蛋白互作网络,筛选出前6个核心靶点。通过DAVID数据库进行GO功能富集分析和KEGG信号通路分析。利用AutoTools软件对活性物质与核心靶点进行对接,并使用PyMOL2.6可视化。【结果】凤尾草的活性成分共11种,利用TCMSP及Swiss Target Prediction等多个数据库得到活性成分对应靶点共计209个。PPI网络拓扑显示,凤尾草主要作用于AKT1、TNF、IL 6等多个靶点。GO分析结果显示其主要作用于对外源性刺激的反应、细胞外区等通路。KEGG通路分析表明其可能通过p53信号通路、癌症信号通路等信号通路共同发挥作用治疗IBD。分子对接结果显示,除芦丁外,凤尾草中关键活性成分槲皮素、芹菜素、邻苯二甲酸二丁酯和木犀草素与AKT1、TNF、IL6等核心靶点均表现出稳定的结合能力。【结论】研究结果初步预测了凤尾草主要通过木犀草素、槲皮素、芹菜素等多种活性成分,调控AKT1、TNF、IL6、INS、IL1B和TP53等关键靶点,共同调节p53信号通路、PI3K-Akt信号通路、IL-17信号通路等通路共同治疗IBD。

太子参及提取物对动物免疫调节作用研究进展

太子参是一味传统中药,具有生津润肺、益气健脾的功效。现代研究表明其富含微量元素、氨基酸、糖类、苷类、环肽类、脂肪酸类、油脂类、挥发油类、甾醇类等多种活性成分,能有效提高动物免疫力。论文综述了近年来太子参及其提取物对动物免疫器官、免疫细胞、免疫分子以及肠道免疫作用的研究成果,为太子参的进一步研究、开发和利用提供参考。

白虎汤纳米相态相关研究进展

中药汤剂包含真溶液、纳米相态、乳浊液和混悬液,是一种复杂的多分散相体系。中药汤剂的有效成分主要存在于纳米相态中,与中药汤剂相比,中药纳米相态具有溶解性强、稳定性高、药效佳等特点。随着研究的深入,有学者提出汤剂中的纳米粒子可能起着增溶与靶向递送的作用。白虎汤是清热类经典方剂之一,被称为“寒剂祖方”,由石膏、知母、炙甘草、粳米四味药材配伍而成,用于治疗阳明经证或气分热盛证,现代临床上应用广泛。白虎汤纳米相态可能包裹药物有效成分,实现药物的靶向性治疗。研究发现白虎汤药液的纳米相态中主要药效成分的含量明显高于药液中的其他相态,纳米相态对汤剂中主要解热成分芒果苷、新芒果苷、钙离子、甘草酸和甘草次酸起到了增溶作用,纳米相态是白虎汤发挥解热作用的关键组分。本文从白虎汤纳米相态的形成理论、物质基础、分子表征、药理作用等方面进行综述,为深入探究白虎汤的作用机制、创制纳米相态制剂提供思路,为推动纳米技术在中药方剂创新中的应用提供参考。

染料木素-川芎嗪共晶在Caco-2细胞模型中的转运研究

旨在考察染料木素(genistein,GEN)、川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)、染料木素-川芎嗪共晶(GEN-TMP)及染料木素与川芎嗪的物理混合物(GEN+TMP)在Caco-2细胞模型中的转运特征;建立Caco-2细胞模型,并以细胞跨膜电阻和标志物渗漏检查等指标进行验证,采用高效液相色谱法,考察并计算安全浓度下药物的累积转运量、表观渗透系数和外排率,并探讨P糖蛋白(P-gp)抑制剂维拉帕米、乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistant protein,BCRP)抑制剂KO143和多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance-associated protein 2,MRP2)抑制剂MK571对转运的影响。结果显示,Caco-2细胞模型完整性与功能性良好,GEN浓度为40μg/mL时,GEN、TMP、GEN-TMP以及GEN+TMP的细胞存活率分别为90.06%、84.21%、97.60%和89.37%;GEN、TMP、GEN-TMP和GEN+TMP的表观渗透系数(P_(app))大于1.0×10^(-6)cm/s,属于吸收良好药物;GEN-TMP中GEN的累积转运量和P_(app)值分别为(2.78±0.11)μg和(8.61±0.33)×10^(-6)cm/s,比GEN的(1.92±0.15)μg和(5.96±0.47)×10^(-6)cm/s提高了44.79%和44.46%;GEN+TMP中GEN的累积转运量和P_(app)值与GEN无显著性差异。GEN只受BCRP的外排作用,GEN-TMP中的GEN同时受到P-gp和BCRP的外排作用,TMP、GEN-TMP和GEN+TMP中的TMP均受到MRP2的外排作用。结果表明,相同浓度下,GEN-TMP的细胞存活率高于GEN+TMP。GEN-TMP的吸收强于GEN和GEN+TMP中的GEN,共晶受外排蛋白的作用区别于GEN和GEN+TMP中的GEN,研究工作为共晶的转运研究提供了借鉴和参考。

基于16S rDNA测序分析中药复方石苦秦散对腹泻小鼠盲肠的影响

【目的】探明止泻中药复方石苦秦散对蓖麻油和番泻叶所致腹泻小鼠肠道微生物的影响,为研究石苦秦散止泻作用机制奠定基础。【方法】将70只小鼠分为正常对照组、阳性药物组、蓖麻油模型组、蓖麻油中药预防组、番泻叶模型组、番泻叶中药预防组和番泻叶中药治疗组,按试验设计进行灌胃处理后,观察各组小鼠腹泻情况,针对不同药物腹泻模型采集十二指肠、盲肠观察肠道病理变化,最后采集各组盲肠内容物进行16S rDNA测序。【结果】腹泻指数显示,灌胃1 h番泻叶中药预防组和中药治疗组均极显著(P<0.01)低于番泻叶模型组;蓖麻油模型灌胃2 h与正常对照组差异极显著。肠道病理变化主要为制造腹泻模型后黏膜下层有少量炎性细胞浸润,除正常对照组外其他组肌层和浆膜变薄。盲肠Alpha测序显示,蓖麻油造模后,中药预防组能显著提高盲肠菌群丰度和多样性;Beta多样性PCoA分析表明,蓖麻油模型组与其他组样本明显分开;物种分类显示,2种药物腹泻模型处理后中药预防组和治疗组均不同程度提高拟杆菌门(Bacteroidetes)、软壁菌门(Tenericutes)丰度,降低变形菌门(Proteobacteria)丰度;属水平在正常范围内,降低乳杆菌(Lactobacillus)和大肠杆菌(Escherichia)丰度,提高有益菌Mucispirillum和拟普雷沃菌属(Alloprevotella)丰度。【结论】蓖麻油和番泻叶小鼠腹泻模型使用中药复方石苦秦散预防和治疗后,可明显改善肠道微生物丰度,特别是炎症反应相关的微生物,说明石苦秦散可通过调整肠道炎症修复发挥止泻作用。

清乳化岩煎对动物乳腺肿瘤的保护作用及其机制研究

旨在探讨中药复方清乳化岩煎(QD)对动物乳腺肿瘤的保护作用及机制。检测清乳化岩煎对正常细胞(HC11、RAW2647、DC2.4)的安全浓度,探究其对乳腺癌细胞(A72、CMT-U27、4T1)体外增殖的抑制作用;流式细胞术检测4T1细胞凋亡情况。将BALB/c小鼠分为空白对照组,模型组及清乳化岩煎低、中和高剂量组(100、200和400 mg/kg),除空白对照组外,其余小鼠皮下注射4T1细胞建立乳腺癌转移瘤模型,各组灌胃相应药物14 d,期间记录肿瘤体积和生长状况,检测脾脏淋巴细胞增殖情况,观察肿瘤组织病理变化,缺口末端标记(TUNEL)法检测移植瘤细胞凋亡水平,免疫组化(IHC)法检测肿瘤组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)与热休克蛋白70(HSP70)蛋白表达,ELISA法测定肿瘤组织和血清中白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)的含量。结果显示:当清乳化岩煎浓度大于或等于5 mg/mL时,对A27、4T1细胞的增殖存在显著抑制(P<0.001);浓度大于或等于10 mg/mL时,对CMT-U27细胞呈现出显著性抑制(P<0.001);不同浓度的清乳化岩煎均可诱导4T1细胞凋亡(P<0.001)。与模型组相比,清乳化岩煎能够显著减小肿瘤体积(P<0.001),促进肿瘤细胞坏死,改善肿瘤对周围组织的影响,促进脾脏淋巴细胞增殖(P<0.001),促进肿瘤组织的细胞凋亡(P<0.001),显著降低肿瘤组织中MMP-9和HSP70蛋白表达(P<0.05),清乳化岩煎组小鼠血清和肿瘤组织中IFN-γ和TNF-α水平显著上升(P<0.05),IL-10含量显著下降(P<0.05)。研究表明,清乳化岩煎可通过调控细胞凋亡和增强机体免疫来抑制乳腺癌的发展,为中药治疗动物乳腺癌提供理论依据。

白术多糖对Cr(Ⅵ)诱导PK-15细胞凋亡和小鼠肾损伤的影响

为探讨白术多糖(RAMPS_(t))对Cr(Ⅵ)致PK-15细胞凋亡和小鼠肾损伤的保护作用,为临床中药多糖缓解重金属中毒导致肾损伤提供理论依据。采用RAMPS_(t)干预Cr(Ⅵ)所致PK-15细胞损伤,检测细胞存活率、ROS水平、线粒体膜电位、细胞凋亡率及Bax、Bcl-2蛋白表达水平,测定MDA、SOD和GSH含量。为了进一步验证RAMPS_(t)对Cr(Ⅵ)致小鼠肾氧化应激及凋亡的保护作用,检测肾组织中ROS、MDA、SOD、GSH的变化及Bcl-2、Bax的表达水平。结果显示,RAMPS_(t)缓解Cr(Ⅵ)引起细胞内ROS水平升高,线粒体膜电位下降,MDA水平升高及SOD、GSH水平降低,且减少细胞凋亡率。同时,RAMPS_(t)增强Bcl-2蛋白表达水平,降低Bax蛋白表达水平。RAMPS_(t)干预可抑制Cr(Ⅵ)致小鼠ROS、MDA水平升高和SOD、GSH水平下降;并且降低Bax蛋白表达水平,增加Bcl-2蛋白的表达水平,减轻Cr(Ⅵ)诱导的小鼠肾脏细胞凋亡。因此,RAMPS_(t)通过降低ROS水平,阻断氧化应激介导的线粒体凋亡途径,从而拮抗Cr(Ⅵ)致PK-15细胞和小鼠肾氧化应激及凋亡的作用。

新疆一枝蒿不同部位水提物的体外抗炎效果

为了探究新疆一枝蒿不同部位水提物的体外抗炎效果,本试验在体外用脂多糖(LPS)诱导小鼠单核巨噬白血病细胞(RAW264.7)构建炎症模型,采用水提法对新疆一枝蒿不同部位(叶、茎、花)进行提取,运用噻唑蓝(MTT)法检测新疆一枝蒿不同部位水提物对细胞活力度的影响,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测其对炎症相关基因TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表达的影响,Western blot检测其对TNF-α、IL-1β和IL-6蛋白表达的影响。结果显示,新疆一枝蒿叶、茎、花水提物分别在0.078~1.250、0.078~5.000和0.078~1.250 mg/mL的浓度范围内对RAW264.7细胞活力度无显著抑制作用。与LPS模型组相比,新疆一枝蒿叶、茎、花水提物浓度范围在0.313~1.250、0.625~2.500和0.625~1.250 mg/mL时,细胞活力度分别提高了23.12%~28.14%(P<0.01)、10.88%~18.62%(P<0.01)和16.13%~16.76%(P<0.05)。浓度为1.250 mg/mL的叶水提物可以极显著降低TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA和蛋白表达(P<0.01);浓度为0.625和1.250 mg/mL的茎水提物可以极显著降低IL-1β的mRNA和蛋白表达(P<0.01),以及IL-6和TNF-α的mRNA表达(P<0.01);浓度为0.625 mg/mL的花水提物可以极显著降低IL-1β和IL-6的mRNA和蛋白表达(P<0.01)。结果表明,新疆一枝蒿不同部位(叶、茎、花)水提物均有抗炎效果,本试验结果可为新疆一枝蒿的兽医临床应用提供参考依据。