口蹄疫病毒VP1基因真核表达载体的构建及其在树突状细胞的表达

目的:构建口蹄疫病毒VP1基因的真核表达载体,转染并筛选稳定表达VP1的树突状细胞(dendritic cell,DC)。方法:将pMD-18-VP1克隆于pcDNA3.1(+)中,构建重组质粒,酶切鉴定,DNA测序证实序列正确后,利用脂质体将重组质粒转染DC,经含G418培养基筛选获得抗G418细胞克隆,用Western blot鉴定FMDV VP1基因在DC中的表达。结果:构建的pcDNA3.1-VP1真核表达载体经限制性内切酶酶切鉴定及序列分析证实了其序列的正确性,SDS-PAGE和Western blot结果显示G418筛选获得DC稳定表达VP1。结论:成功地构建了重组质粒pcDNA3.1-VP1真核表达载体,并在DC中得到稳定表达。