猪沙门氏菌的分离鉴定及其耐药性分析

对哈尔滨地区规模化猪场沙门氏菌进行分离鉴定，分析其对β-内酰胺类药物的药敏试验结果及耐药情况。采用病原菌的形态学观察、生化鉴定和PCR鉴定，从600份哈尔滨地区规模化猪场猪直肠粪便中分离出沙门氏菌，运用Kirby-Bauer法检测分离菌对10种β-内酰胺类药物的敏感性。结果表明，在哈尔滨地区十市县的猪群中，沙门氏菌的总检出率为5.83%（35/600）；不同市县沙门氏菌的总分离率介于3.3%-18.3%；沙门氏菌的分离率与猪日龄有一定关系；对临床常用抗菌药物均表现出较高的耐药性，对氨苄西林100%耐药，对头孢他啶80%耐药，对头孢西丁、哌拉西林、头孢噻肟、头孢吡肟、氨曲南存在不同程度耐药，对碳青霉烯类敏感。结果表明，哈尔滨地区猪场存在不同程度的沙门氏菌感染，耐药现象严重。

仔猪口蹄疫母源抗体消长规律监测

在贵阳某规模化养猪场,随机选取20头仔猪,采用正向间接血凝试验(IHA)、液相阻断ELISA(LPB-ELISA)两种血清学方法,对O型口蹄疫母源抗体的消长规律进行监测和分析。结果表明,13日龄左右抗体效价最高,IHA、LPB-ELISA监测的抗体平均效价分别是2.76、2.74,母源抗体免疫合格率分别为90%、85%,在23日龄左右平均效价均为为2.45,母源抗体免疫合格率均为75%,大部分仔猪仍被母源抗体保护,随着日龄的增加,抗体效价呈明显的线性下降,到36日龄左右抗体平均效价分别是1.98、1.95,母源抗体免疫合格率均为55%,45%的仔猪抗体效价低于保护临界值。因此,36日龄确定为仔猪首次免疫时间。两种方法监测的结果无显著差异(P>0.05)。

清宫促孕灌注液的质量标准及临床试验

为建立清宫促孕灌注液的质量控制方法和评价其对母猪子宫内膜炎的疗效。用分光光度法测定制剂指标成分总黄酮的含量 ,并以 0 .1 %高锰酸钾溶液和缩宫素合用作对照 ,观察清宫促孕灌注液治疗母猪子宫内膜炎的临床效果。其结果 ,线性范围 0～ 49.96 8μg,平均回收率 1 0 1 .0 2 % (n=6 ) ,RSD为 0 .97%。清宫促孕灌注液对母猪脓性子宫内膜炎的治愈率为 96 .2 % ,疗效优于对照药物。含量测定方法简便、快速、准确、重现性好 ,可作为该制剂的质量控制标准 ;

异血胁区营养穴划注结合肠线脾俞穴埋植治疗仔猪营养不良研究初报

试验结果表明，异血胁腹营养穴划注配合肠线脾俞穴埋植，对仔猪营养不良有显著疗效。在所收治的２２４头病猪中，好转２１６头，有效率达９６４％，其中施术一次后即获痊愈者１８８头，显效率为８３９％。

血清学实验之液相阻断ELISA的注意事项

液相阻断ELISA用于检测家畜血清中的口蹄疫（FMD）抗体。主要应用于两个方面：一是检测FMD病毒感染,广泛用于国际贸易中;二是监测免疫抗体,评价FMD疫苗免疫效力,也就是疫苗免疫动物的抗强毒攻击能力。液相阻断ELISA试验操作虽比正向间接血凝试验（PHA）繁琐,但它的精确性、稳定性远远高于正向间接血凝试验。

中草药对仔猪早期断奶腹泻血液生化指标的影响

仔猪早期断奶腹泻是目前养猪业比较棘手的一种疾病。试验采用中兽医的辨证施治方法 ,选用黄芪、党参、白术、茯苓、甘草等中草药组方作为饲料添加剂饲喂仔猪 ,结果表明 ,日粮中添加中草药的仔猪腹泻率比对照组下降 34个百分点 ,断奶后 14d增重比对照组提高 15.4 % ,试验组仔猪的血液生化指标中 ,RBC、WBC、TP、IGG和 GLU的水平也有不同程度的提高 ,由此证实了中草药对仔猪早期断奶腹泻的防治作用。

天然中草药提取物抗猪繁殖与呼吸综合征病毒活性研究

为研究天然中草药对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的抗病毒活性,本研究以体外细胞培养体系为模型,在采用CCK-8法测定青黛(Indigo naturalis)、花椒(Zanthoxylum bungeanum)、卫矛(Euonymus ala-tus)和沉香(Aquilaria agallocha Roxb.)4种中草药提取物对细胞的半数毒性浓度(TC50)及最大无毒浓度(TC0)基础上,通过观察细胞病变效应(CPE),实时荧光定量RT-PCR方法检测病毒核蛋白基因(ORF7)mRNA表达量的变化,对天然中草药提取物抑制PRRSV增殖能力进行评价。实验结果分析显示:青黛、花椒、卫矛和沉香4种不同提取物的药物抗病毒选择指数(SI)分别为10.3,5.2,12.7,6。实时荧光检测病毒基因mRNA表达量变化结果表明:这4种天然中草药提取物在一定浓度范围内均能显著(P<0.05)抑制病毒NP蛋白基因(ORF7)的表达。本次研究结果证实,4种受试中草药提取物对PRRSV的增殖均具有显著(P<0.05)的抑制效果,以卫矛提取物的效果最佳。

24种中药对猪沙门氏菌的体外抑菌活性

采用纸片扩散法和平板稀释法分别测定了金银花、马齿苋、石榴皮等24种单味中药以及12个复方中药对3株猪沙门氏菌的体外抑菌效果和最低抑菌浓度(M IC值)。结果表明,抑菌效果与最低抑菌浓度值随着中药成分与菌株的不同而呈差异,金银花、诃子、黄芩等12种单味中药对猪沙门氏菌有显著的抑制作用,以黄芩、黄连、黄柏(三黄汤)为主的复方及含有诃子、苦参、白头翁的9个复方具有良好抑菌效果。

几种中草药的抗腹泻作用治疗仔猪白痢及其机理的研究

本实验观察了苦参、多头风轮莱和水蓼的抗腹泻作用并对其机理进行了深入探讨。实验结果表明：苦参和多头风轮莱极显著地（Ｐ＜０．０１）、水蓼显著地（Ｐ＜０．０５）降低了番泻叶所致小鼠大肠性腹泻的频率；水蓼极显著地（Ｐ＜０．０１）降低了蓖麻油所致小鼠小肠性腹泻的发生率和频率，多头风轮莱也能显著降低其发生率（Ｐ＜０．０５）；苦参、多头风轮莱和水蓼极显著或显著地抑制了乙酸所致家兔肠粘膜或小鼠腹膜的急性炎性渗出（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）；苦参还能极显著地抑制小肠的运动（Ｐ＜０．０１）。上述实验结果提示：苦参、多头风轮莱和水蓼可能都具有促进水、钠从肠腔向肠粘膜上皮细胞转运的作用，它们还可能对肠炎时的炎性渗出有抑制作用，此外，苦参对小肠运动的抑制作用必定也是其抗腹泻作用的重要机理之一。

猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型共感染对外周血单个核细胞促炎细胞因子mRNA表达的影响

将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)单感染和共感染6周龄健康仔猪,采用Real-ti me PCR技术对外周血单个核细胞(PBMC)中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α等促炎细胞因子的mRNA表达进行定量分析。结果表明,病毒感染后,PRRSV感染组、PCV2感染组IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α的mRNA表达水平均上调,其中PRRSV感染组的IL-6、IL-8显著上调,PCV2感染组的IL-6、IL-8和TNF-α显著上调;PRRSV/PCV2共感染组仅有IL-8和TNF-α的mRNA表达水平上调且差异显著;并且,PRRSV/PCV2共感染组IL-1β、IL-6和IL-8的mRNA表达水平均低于单独感染组,仅TNF-α的mRNA表达水平显著高于单感染组。结果提示,TNF-α的过量表达可能在PRRSV和PCV2协同致病机制中扮演重要角色。

中草药制剂对猪链球菌和大肠杆菌的体外抑菌效果

为了观察中草药对猪场常见病原菌的体外抑菌效果,选取20种单味中草药及其组配的5组复方药物,按常规法制备水提取物,采用试管2倍稀释法分别检测单味中草药及复方药物对猪大肠杆菌和猪链球菌的体外抑菌活性。结果表明:单味中草药及复方中草药对二者均具有一定的抑制作用。

腹腔镜直肠癌根治术近期疗效分析

目的:探讨经腹腔镜行直肠癌根治术的近期疗效。方法:30例经腹腔镜行直肠癌根治术,与同期行传统开腹手术20例作对照,比较2组患者手术时间、术中出血量、术后近期情况及随访的局部复发率和远处转移率。结果:腹腔镜组和传统手术组术中出血量分别为(160.9±70.3)mL和(300.2±50.5)mL(P<0.05);腹腔镜组术后肛门首次排气时间、下床活动时间均早于传统手术组(P<0.05);术后病理学检查和术后随访的疗效比较,差异无显著性(P>0.05)。结论:经腹腔镜行直肠癌根治术与传统开腹手术比较,近期效果满意且有其独特优点。

母猪喂服中药“白痢散”对仔猪白痢病的防治试验

根据中兽医辩证施治理论 ,选择了几种中草药 ,配制成专门防治仔猪白痢的制剂 ,名为“白痢散”.(1 )预防试验在 2 4头哺乳母猪 (共带仔 2 1 0只 )中进行 ,随机分成 3组 ,1组作为对照 (CK) ,其余 2组为处理组 .2个处理组的母猪从产后 3 -4d开始 ,每头每天分别饲喂 1 0 0和 1 5 0 g“白痢散”1次 ,连续 3 d,之后每隔 7d再喂 1次 ,直到断奶 .(2 )治疗试验在另外 2 2头哺乳母猪 (共带仔 2 3 1只 )中进行 ,分成处理组和对照组 ,处理组每头母猪每天喂 2 0 0 g“白痢散”1次 ,连续 3 d.试验结果表明 :(1 )“白痢散”在平板对分离的致病性大肠杆菌的平均抑菌圈直径为 1 2 .5 mm;(2 )预防试验中 ,2处理组分别获得90 .0 %和 81 .3 %的保护率 ,效果显著 (P<0 .0 1 ) ,与 CK相比 ,处理组白痢发病率分别下降 42 .8%和 3 4.1 % ,平均断奶窝重分别增加 6.88和 4.80 kg,而窝收益分别增加 78.2 0和 48.3 0元 ;(3 )在治疗试验中 ,治愈率和总有效率分别提高到 90 .5 9%和97.65 % .由此可见 ,通过母猪的饲料给药 ,“白痢散”对致病性大肠杆菌具有一定的抑制效果 ,可作为防治仔猪白痢的一种理想药物 ;使用“白痢散”

4味中草药的体外抗TGEV试验

【目的】探讨黄芪、黄芩、大黄、金钱草体外对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的抑制作用。【方法】采用传统的水提法制备黄芪、黄芩、大黄、金钱草等中药的提取液,测定其对PK-15细胞的最大安全质量浓度。采用细胞病变观察法确定4味中草药对TGEV致PK-15细胞病变的抑制作用,并通过MTT法计算药物的最小抗病毒质量浓度和抑制指数。【结果】黄芪、黄芩、大黄、金钱草的最大安全质量浓度分别为50,12.50,6.25和6.25mg/mL。黄芩、黄芪能抑制TGEV对PK-15细胞的吸附,抑制指数分别为8和4;大黄、金钱草能直接灭活TGEV病毒,抑制指数均为8。【结论】黄芩、黄芪、大黄、金钱草体外对TGEV均有抑制作用。

胞内劳森菌SYBR GreenⅠreal-time PCR检测方法的建立

【目的】建立检测胞内劳森菌的SYBR GreenⅠreal-time PCR方法,为猪增生性肠炎的准确诊断奠定基础。【方法】针对胞内劳森菌16SrDNA序列设计引物,扩增16SrDNA,构建pT-LI-16S重组质粒。以pT-LI-16S为模板建立检测胞内劳森菌的SYBR GreenⅠreal-time PCR方法,检测其特异性、敏感性和重复性,并用该方法对51份疑似增生性肠炎病例进行检测。【结果】建立的SYBR GreenⅠreal-time PCR方法特异性强,与大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和副猪嗜血杆菌等无交叉反应;在标准质粒含量为1.0×10^2-1.0×10^8拷贝/μL时,质粒含量与循环阈值（Ct）之间具有良好的线性关系（R^2=0.992）,最小可检测到10拷贝/μL的重组质粒;重复性检测显示其批内变异系数小于2%。该方法对粪便及小肠组织中胞内劳森菌的检出率分别为46.9%和84.2%,高于普通PCR的检出率（分别为40.7%和78.9%）。【结论】建立的SYBR GreenⅠreal-time PCR方法特异性强、敏感性高、重复性好,能对胞内劳森菌进行快速检测及定量分析,可用于猪增生性肠炎的诊断。

淋病奈瑟球菌的耐药性检测

目的了解淋病奈瑟球菌对临床常见药物的耐药性。方法采用琼脂稀释法测定13种抗菌药物对35株淋病奈瑟球菌的MICs;Nitrocefin(头孢硝噻酚)纸片检测β-内酰胺酶,并采用PCR测定其基因型。结果淋病奈瑟球菌对青霉素、四环素、环丙沙星与头孢呋辛的耐药率分别为65.7%、60.0%、88.6%与14.3%,对第3、4代头孢菌素、大观霉素非常敏感,耐药率均为0%;42.9%的菌株产生TEM型β-内酰胺酶。结论淋病奈瑟球菌对青霉素、四环素类和氟喹诺酮类的耐药性高,治疗宜选用第3、4代头孢菌素和大观霉素等,同时加强耐药性监测。