运用套式PCR检测传染性喉气管炎病毒核酸

选择鸡传染性喉气管炎病毒保守TK基因的蛋白编码区域 ,设计并合成了一对外引物和一对内引物 ,建立并优化了检测鸡传染性喉气管炎病毒DNA的套式PCR法。通过检测ILTV感染的鸡胚绒毛尿囊膜、实验室病料和临床病料 ,结果表明 ,套式PCR法能检测出ILTV感染后的非免疫鸡胚和SPF鸡胚绒毛尿囊膜研磨液中的被稀释了10 5倍的病毒 (约 1fg的ILTVDNA) ,攻毒后第 10天还能从非免疫鸡和SPF鸡气管拭子中检出ILTV ,第 10天非免疫鸡气管拭子中ILTV的最大检出率为 7/ 10 ,第 10天SPF鸡气管拭子中ILTV的最大检出率为 8/ 10。对非免疫鸡和SPF鸡的气管拭子中ILTV最佳检出时间均在攻毒后第 5天。对临床样品中的ILTV的最大检出率为 7/ 7。经过核酸杂交验证 ,套式PCR法具有很高的特异性和敏感性 ,为从分子水平探讨ILTV的发病机理、临床早期快速诊断提供了新的研究手段。