2022年柳州市秋季高致病性禽流感集中免疫效果监测与评估

高致病性禽流感(H5和H7亚型)为禽类烈性传染病,危害性较大,被我国列为一类动物疫病。目前,疫苗免疫仍然是预防和控制高致病性禽流感的最有效方法。我国将高致病性禽流感列为强制免疫病种,实行强制免疫制度。由于高致病禽流感病毒容易发生突变,不同毒株间免疫保护性差异大,所以疫苗要与流行情况相匹配,免疫效果才能发挥到最大。

黄芪多糖、皂苷及益生菌复合物对感染大肠杆菌肉鸡肠道的保护作用

旨在评价黄芪多糖(APS)、皂苷(AS)与益生菌的复合物对肉鸡抗大肠杆菌感染能力的影响。选取1日龄的白羽肉鸡200只,随机分为空白组、受试物组、阳性组和模型组,每组50只鸡,试验期42 d。1~21 d,空白组和模型组雏鸡每日饲喂基础日粮并灌服生理盐水0.2 mL·只^(-1),受试物组饲喂含APS(1 g·kg^(-1))与AS(10 mg·kg^(-1))的试验日粮,并灌服益生菌复合菌液0.2 mL·只^(-1)(非解乳糖链球菌∶植物乳杆菌∶枯草芽孢杆菌=1∶1∶1,菌液浓度均为1×10^(9) CFU·mL^(-1)),阳性组雏鸡每天饲喂基础日粮中添加了50 mg·kg^(-1)盐酸多西环素可溶性粉的试验日粮。21 d时,受试物组、阳性组和模型组试验鸡均灌服0.2 mL·只^(-1)大肠杆菌O_(78)菌液(6×10^(8) CFU·mL^(-1))。在感染第0、1、7、14和21天(即试验期第21、22、28、35和42天)检测十二指肠和空肠组织结构、sIgA、炎性因子和氧化指标,同时检测盲肠内容物细菌数量。结果显示:1)除感染第0天外,模型组盲肠大肠杆菌数量均显著高于空白组、受试物组和阳性组(P<0.05),感染后第0、1、7、14和21天,受试物组鸡乳酸菌数量显著高于空白组、阳性组和模型组(P<0.05)。2)感染1和7 d时,受试物组和阳性组鸡十二指肠和空肠组织sIgA含量显著高于空白组和模型组(P<0.05);感染14 d时,受试物组鸡空肠组织sIgA含量显著高于空白组和模型组(P<0.05)。3)感染1和7 d时,受试物组和阳性组十二指肠、空肠的TNF-α含量显著低于模型组(P<0.05);感染7 d时,受试物组和阳性组十二指肠和空肠IL-10含量显著高于模型组(P<0.05);感染14和21 d时,受试物组和阳性组空肠组织IL-10含量显著高于模型组(P<0.05)。4)感染1、7、14、21 d时,受试物组、阳性组的十二指肠、空肠组织MPO活力显著高于空白组(P<0.05);感染1 d时,受试物组和阳性组空肠组织SOD显著高于模型组(P<0.05);感染7、21 d时,受试物组和阳性组十二指肠和空肠组织T-AOC显著高于模型组(P<0.05)。综上,在本试验条件下,APS、AS与益生菌复合物联合使用能增强雏鸡抗大肠杆菌感染能力,有替代抗生素的作用。

共表达膜结合型与可溶性H9N2亚型禽流感病毒HA蛋白的重组基因Ⅶ型新城疫病毒的构建及免疫效果评价

旨在构建能高效稳定表达H9N2 AIV的HA蛋白的重组基因Ⅶ型新城疫病毒,有望开发抗新城疫和H9N2亚型禽流感病毒的二联疫苗,为控制H9N2 AIV和NDV提供新的防御思路,对NDV疫苗载体的构建和优化有重要的参考意义。利用反向遗传技术,以rDHN3-mF为骨架,在病毒基因组的P和M之间的非编码区插入全长膜结合HA和另外一个带有截短跨膜结构域的可溶性HA蛋白,获得了能高效稳定表达H9N2 AIV的HA蛋白的基因Ⅶ型NDV减毒株重组病毒rDHN3mF-HA和rDHN3mF-2HA。通过鸡胚接种、Western blot、血凝效价(HA)及平均鸡胚致死时间(MDT)等试验来检测重组病毒的稳定性以及生物学特性,将重组病毒以10~6 EID_(50·)只^(-1)剂量免疫7日龄SPF鸡并测定血凝抑制(HI)抗体,在免疫后28 d对各组进行攻毒保护试验。结果显示:重组病毒在鸡胚中连续传至十五代后HA基因无突变发生;Western blot证明重组病毒可稳定高效地表达特异性的HA蛋白;重组病毒的生长曲线说明了重组病毒与亲本毒株具有相似的复制特性和低毒力特征;重组病毒免疫组的SPF鸡均能产生针对NDV或者H9N2 AIV的特异性HI抗体;攻毒保护试验结果:重组病毒均能对攻毒后的鸡产生100%保护效果;喉、肛拭子检测结果说明重组病毒可显著减少NDV与H9N2 AIV的体外排毒;气管与肺qPCR检测结果显示攻毒后3 d, rDHN3mF-2HA较rDHN3mF-HA更显著地降低了脏器中H9N2 AIV含量。本研究成功构建了共表达膜结合型与可溶性H9N2亚型禽流感HA蛋白的基因Ⅶ型重组NDV,为H9N2 AIV和NDV的一种新型重组基因工程二联活载体疫苗的研制与应用奠定了基础。

裂解性噬菌体对肉仔鸡感染肠炎沙门菌的治疗效果

旨在研究裂解性噬菌体S13-21对感染肠炎沙门菌肉仔鸡治疗效果及其对肉仔鸡生长性能、抗氧化能力、细胞因子及免疫球蛋白含量的影响。选用1日龄AA肉仔鸡72只,饲养至4日龄时随机分为4组,每组6个重复,每个重复3只鸡,即空白对照组(C)、沙门菌感染组(S)、噬菌体治疗组(S+P)和抗生素治疗组(S+A)。采用腹腔注射方式对S组、S+P组和S+A组肉仔鸡感染沙门菌,攻毒剂量为200μL·只^(-1)(1.0×10^(9)CFU·mL^(-1)),6 h后对S+P组和S+A组肉仔鸡进行治疗,按腹腔注射方式噬菌体剂量1 mL·只^(-1)(1.0×10^(12)PFU·mL^(-1)),抗生素剂量200μL·只-1(硫酸庆大霉素,800 IU·只^(-1)),连续治疗7 d,间隔12 h,治疗结束后第5天按重复称重并从每组随机选取6只屠宰取样。结果表明:1)试验结束时,S组肉仔鸡存活率仅为59%,与C组相比,体重极显著降低(P<0.01),脾重量增加但是差异不显著(P>0.05),血清和各组织T-SOD和GSH-Px活性极显著下降(P<0.01),MDA和细胞因子含量极显著增加(P<0.01)。2)与S组相比,S+P组肉仔鸡存活率提高25%以上,回肠和盲肠沙门菌载菌量极显著下降(P<0.01),除回肠部分指标外,血清和其余各组织中抗氧化指标、细胞因子和免疫球蛋白含量与S组相比差异显著(P<0.05)。综上所述,肉仔鸡感染肠炎沙门菌可破坏肠道黏膜屏障,造成生长受阻、组织损伤及全身性炎症反应,通过噬菌体治疗可专一性清除机体肠炎沙门菌感染,显著提高机体抗氧化能力和肠道黏膜屏障,缓解氧化应激和炎症反应,具有较强的保护作用,在一定程度上能够提高存活率,恢复肉仔鸡生长。

非编码RNA在传染性法氏囊病病毒感染中的研究进展

传染性法氏囊病(infectious bursal disease, IBD)是由传染性法氏囊病病毒(IBD virus, IBDV)引起的急性、高度传染性和免疫抑制性禽类疾病。近年来,随着新型变异毒株的出现,IBDV仍然威胁着全球家禽养殖业的健康发展,宿主和IBDV之间的“战役”似乎永不停息。因此,迫切需要制定一种更全面和更有效的策略来控制该疾病,而深入了解IBDV与宿主之间的相互作用,将有助于开发新型疫苗。非编码RNA(non-coding RNA,ncRNAs)是一类丰富的不编码蛋白质的RNA分子,其中包括微小RNA(microRNAs, miRNAs)、长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNAs)和环状RNA(circular RNA,circRNAs)。近年来,研究发现ncRNAs广泛参与IBDV与宿主的相互作用过程,在IBDV感染中发挥重要的调控作用。本文阐述了宿主miRNAs、lncRNAs和circRNAs在IBDV感染中的作用,以期为IBDV的感染与致病机制研究提供理论参考和新思路。

广西地方优质鸡禽白血病净化中检测蛋的个数之结果的差异性分析

禽白血病(avian leukosis,AL)是由禽白血病病毒(avian leukosis virus,ALV)引起的禽类多种肿瘤性疾病的统称[1-3],主要造成鸡群生长迟缓、产蛋率和受精率等生产性能降低和导致感染鸡只的免疫抑制,同时可诱发各种肿瘤从而引起成活率的降低,对养禽业危害巨大[4]。21世纪初,南方的一些地方优质鸡群中仍有AL发生,对养禽业生产带来了巨大的危害,其发病死亡率有些高达40%,疫情严重[5-6]。

家禽加工过程中利于弯曲菌存活的遗传决定因素

空肠弯曲菌 (Campylobacter jejuni) 是一种常见的食源性病原体,由该菌引起人的腹泻十分普遍。针对空肠弯曲菌在家禽加工过程中存活的研究发现,特定基因的突变显著降低了其在有氧、冷冻条件下的存活率,这表明这些基因赋予了空肠弯曲菌在有氧、冷冻中生存以及在鸡盲肠内定植的能力。在加工过程中,该细菌能够从家禽肠道内释放并污染肉类,并能长期存活并保持长时间的传染性。当消费者食用了未煮熟或被细菌污染的禽肉食品后,就可能存在感染空肠弯曲菌的风险。令人吃惊的是空肠弯曲菌能够在整个加工过程中存活下来,尽管它常常无法在这种加工和储存的条件下增殖,而且它们对大气中的氧气水平敏感,这将会降低细菌细胞的存活。

鸡传染性支气管炎病毒感染HD11细胞的转录组分析

旨在探究感染早期宿主细胞的天然免疫应答和抗病毒反应,本研究将鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)Beaudette株感染鸡巨噬细胞HD11,2 h后提取细胞总RNA反转录成cDNA,采用Illumina进行转录组高通量测序。结果显示,感染组筛选出1363个上调基因,653个下调基因。通过对差异表达基因GO和KEGG分析发现,IBV感染HD11细胞早期,差异表达基因大多与免疫反应、抗病毒作用有关,富集到的信号通路主要集中在细胞因子和细胞因子受体之间的相互作用、病毒蛋白与细胞因子或细胞因子受体之间的相互作用、TNF信号通路、MAPK信号通路等。随机挑选10个与免疫反应、抗病毒相关基因进行RT-qPCR验证,结果与转录组测序分析一致。本研究为进一步探究IBV致病机制和感染早期宿主细胞免疫反应奠定了基础。

大豆凝集素对小肠上皮细胞和红细胞凝集能力的研究

本文旨在测定纯化的大豆凝集素对兔和鸡小肠上皮细胞和红细胞的凝集活性。测定大豆凝集素对红细胞的凝集能力时，采用2％兔红细胞悬液，测定了使兔红细胞50％凝集的蛋白质浓度。测定对兔小肠上皮细胞的凝集能力时，采用荧光标记SBA与新鲜小肠上皮细胞结合后，观察荧光显微镜下荧光结合细胞比例的方法定量。经血凝试验结果表明，使兔红细胞50％凝集的SBA蛋白质浓度为2．50～3．69μg／mL，而SBA对鸡的红细胞没有凝集作用。SBA对兔小肠上皮细胞有结合能力，结合率为30％左右。试验结果说明大豆凝集素的血凝活性具种属特异性，用SBA与小肠上皮细胞的结合率作为评价其抗营养活性的指标具一定可行性。

禽大肠杆菌病流行情况及防治研究进展

禽大肠杆菌病能引起孵化胚及不同日龄的鸡死亡率增加,母鸡产蛋量下降,肉鸡生长速度下降、胴体合格率降低等。该病是人类食源性疾病之一,对食品安全和出口贸易都有重大影响。本文将从禽大肠杆菌病的流行情况和防治进展作一阐述。

重铬酸钾对基于DNA提取鉴定粪样中布氏和毒害艾美耳球虫感染类型影响的研究

为探究重铬酸钾(PD)对基于DNA提取鉴定粪便样品中鸡球虫感染类型结果的影响,将2.5%PD暂存的新鲜鸡粪样品随机分成4组,分别用3 mL PD、2 mL PD和1 mL ddH_(2)O、1 mL PD和2 mL ddH_(2)O、3 mL ddH_(2)O,以1 mL/次,先PD后ddH_(2)O的方法对鸡粪样品进行洗涤。洗涤结束后取上清液,测OD_(490)值;重悬沉淀,取200μL/管提取DNA,进行PCR扩增及其产物的琼脂糖凝胶电泳检测,同设阳性、空白对照和不同循环数对照。用超微量核酸蛋白浓度测定仪检测PCR产物浓度并进行统计学分析。结果表明:随ddH_(2)O洗涤次数增多,所得上清的OD_(490)值逐步降低,洗涤2次时,与ddH_(2)O对照组间差异不明显;对提取所得的DNA进行PCR扩增时,分别得到片段大小约为601 bp和702 bp的条带,空白对照组无此条带,且所用Nec-F/R引物的扩增较Bru-F/R引物的特异性高,36个循环数较30个和33个循环的电泳效果好,且所得PCR产物浓度间均差异不明显。结果表明,PD对基于DNA提取鉴定粪样中布氏艾美耳球虫和毒害艾美耳球虫两种鸡球虫感染类型的结果无明显影响,可用于流行病学调查样品采集。

鸡传染性法氏囊病的综合防治

鸡传染性法氏囊病(IBD)又称鸡传染性腔上囊病，是由传染性法氏囊病毒引起的一种急性、接触传染性疾病，它以法氏囊发炎、坏死、萎缩和法氏囊内淋巴细胞严重受损为特征，从而引起鸡的免疫机能障碍，干扰各种疫苗的免疫效果。近年来严重成为危害养鸡业发展的传染病之一，受到了人们普遍的关注。