禽偏肺病毒的研究进展

禽偏肺病毒病是由禽偏肺病毒(avian metapneumovirus,aMPV)引起的一种以急性上呼吸道感染、产蛋和蛋壳质量下降为特征的疾病。aMPV可感染鸡、鸭、鸽等多种禽类,在全世界范围内广泛流行,给养禽业带来了巨大的经济损失。本文从病毒基因组结构及其编码蛋白、流行现状、致病特性、病毒感染诱导的宿主免疫应答以及其诊断技术与疫苗等方面对aMPV进行综述,为今后该疾病的诊断和预防提供科学依据。

玉林市重组禽流感病毒三价灭活疫苗的免疫效果探究

高致病性禽流感属于一类动物疫病,也是人畜共患病,其病毒毒株为H5和H7血清亚型。高致病性禽流感自2021年在欧美及亚洲国家肆虐以来,对我国乃至世界养禽业都造成了巨大损失,其中危害最严重的是H5N8亚型禽流感[1]。为降低H5N8亚型禽流感对我国家禽的危害,农业农村部经过多重评估和临床试验,对禽流感H5+H7亚型三价灭活疫苗毒株进行了调整,并于2022年将新疫苗投入使用。

牛流行热病例的综合诊断

牛流行热又称三日热或暂时热,是由牛流行热病毒（BEFV）引起的急性热性传染病.主要症状为突然发病,高热,流泪,流涕,呼吸急促,流涎并带有泡沫,后肢行走不灵活甚至卧地不起,大部分病牛经过2～3 d的发热即可恢复,多呈良性经过.但该病流行广,发病率高,对生产性能影响大,导致部分病牛瘫痪甚至死亡,给发病牛场造成严重的经济损失.本病呈周期性流行,一般间隔3-4年发生1次较大规模的流行,以夏秋季蚊虫活跃期发生较多,尤其是天气闷热的多雨季或昼夜温差较大的天气容易引起流行[1].

山羊传染性胸膜肺炎的诊治

山羊传染性胸膜肺炎是山羊的一种高度接触性传染病,临床表现以高热、咳嗽、流鼻涕,以间质性肺炎病变为特征[6-7],俗称“烂肺病”.据报道[8],导致发病的病原主要为山羊支原体,山羊肺炎亚种（Mccp）、丝状支原体丝状亚种LC型（Mmm LC）、丝状支原体山羊亚种（Mmc）、绵羊肺炎支原体（Mo）及精氨酸支原体（Marginini）,其中中国的流行毒株主要为Mmc[1-3]及Mo[4].

家禽各种血清型细菌的耐药性不断上升

1沙门氏菌的情况2019年综合研究简报说明了从人、动物、生肉和屠宰场的肉禽产品样本中分离得到的各种细菌的耐药模式。结果表明,超过3/4的人源沙门氏菌(78%)对所测试的抗生素均无耐药性,但发现对环丙沙星的耐药性却不断上升。从2018年至2019年,人源沙门氏菌分离株对环丙沙星耐药性的比例从9%增加到11%,零售鸡中的分离株从18%增加到31%,鸡产品样本中的分离株从20%增加到30%,鸡盲肠内容物样本中的分离株从26%增加到32%。

微量血凝抑制试验监测技术在鸡新城疫防治中的应用

本文介绍了用微量血凝抑制试验方法监测鸡血清中鸡新城疫(ND)抗体效价在防治该病中三个方面的应用,为临床合理免疫、科学预防提供了依据。

禽衣原体病流行病学研究现状及诊断防治措施

禽衣原体病是由鹦鹉衣原体引起的一种全身性接触性传染病。早在1895年Morange首先使用鹦鹉热(Psittacosis)这一名词来描述人和鹦鹉的衣原体病。之后,Meyer(1941)将鹦鹉类以外其它禽类的衣原体病称为鸟疫(Ornithosis)。两者在病原学上是一致的,只是感染宿主不同,而叫法也不同。目前,除继续延用这两种名称外,人们还将家禽和野禽的此病统称为“禽衣原体病”。而人的鹦鹉衣原体感染传统上则一直使用“鹦鹉热”(主要是禽源性鹦鹉衣原体感染)这一名词。禽的衣原体病不但造成经济损失,并给公共卫生带来严重的危害。由于鹦鹉衣原体在禽类感染的宿主十分广泛,各种禽类在流行病学中相互作用又较复杂。对此,本文仅就近十年来家禽和观赏鸟类衣原体病的流行范围、病的发生、流行因素和流行形式,以及诊断方法和防治措施方面的问题,简述如下。

一起实验鸡发生鸡白痢沙门氏菌感染

从某实验鸡场购回1周龄SPF雏鸡200羽准备进行试验,饲养1周后爆发疾病,疑似鸡白痢,取病鸡肝脏经过前增菌,鉴别培养,细菌菌落形态观察,染色镜检、生化试验、血清学鉴定及16S rRNA基因序列测定,分离鉴定到了1株鸡白痢沙门氏菌,菌体型为O1,9,12,动力学试验显示该菌株不具有运动能力。结果提示,加强实验鸡场的沙门氏菌净化和接雏后的饲养管理对于保障实验动物的安全和动物实验的质量十分重要。

几种病毒与禽病原性大肠杆菌的人工联合感染

以 2种剂量的低致病性禽流感病毒 ( lowly pathogenic avian influenza virus,LPAIV)、传染性支气管炎病毒 ( infectious bronchitis virus,IBV)疫苗株 H1 2 0和 H52、新城疫病毒 ( Newcastle disease virus,NDV) La-sota株分别于气管内注射 1 0日龄易感鸡 ,2 d后 ,气管内注射禽病原性大肠杆菌 O37株 ( O78) ,连续观察 5d。结果 ,除 LPAIV单独感染组有 6 .2 5%的死亡率外 ,其余各病毒单独接种组均健活 ;大肠杆菌 O37株单独接种组的死亡率为 6 2 .50 % ;较高剂量的 LPAIV、IBV H1 2 0和 H52、NDV Lasota株与大肠杆菌 O37株有较强的协同致病作用 ,死亡率分别达到 81 .2 5%、1 0 0 .0 0 %、93.75%和 87.50 % ;而较低剂量的上述病毒则无明显的协同作用。 IBV。

中草药对禽大肠杆菌的体外抑菌试验

本文探讨定量分析单味及多味复方中草药的药理活性的方法,为临床应用提供理论依据。利用两倍稀释法测定16种中草药对4种禽大肠杆菌体外抑菌的MIC;并选取24种两味组合,12种3～5味组合进行试验。结果单味中药对禽大肠杆菌的体外抑菌的MIC在3.9g/L至375g/L之间;24种两味中药组合的MIC在11.7g/L至250g/L之间,少数组合对各血清型大肠杆菌有拮抗作用;12种3～5味中药组合的MIC在11.7g/L至46.8g/L之间,全部组合表现协同作用,显示中药配伍优势。

禽网状内皮组织增殖病琼脂免疫扩散抗原的研制及应用

禽网状内皮组织增殖病（ＲＥ）琼脂免疫扩散抗原为淡粉红色液体，具有良好的特异性，与抗鸡马立克氏病、鸡传染性法氏囊病、禽白血病、鸡传染性贫血病、鸡新城疫病毒标准阳性血清不发生交叉反应。抗原还具有良好的敏感性，在实验室对人工感染ＲＥＶ的ＳＰＦ鸡７天即可检出抗体，检出率为４０％，１４天检出率为１００％。抗原在３７℃保存７天，在１５℃保存１５天，在４℃保存３０天，在－２０℃至少保存１８０天，未见效价下降。用本抗原检查血清沉淀抗体来诊断ＲＥ，是一种特异，敏感简便的方法，适于在生产中推广应用。

应用六茜素与万菌杀星防治禽霍乱

针对六茜素在临床上存在的一些问题，对其进行了修饰，成功的研制出二代六茜素“万菌杀星”，并对其抗菌作用、毒性及临床效果比较。结果表明：万菌杀星对巴氏杆菌抗菌作用与制剂稳定性较六茜素强，而毒性较六茜素弱。

种鸡禽流感(H5+H9)二价灭活疫苗免疫程序的研究

本研究设计不同的免疫程序,用禽流感(H5+H9)二价灭活疫苗(H5N1Re-1+H9N2Re-2株)免疫黄羽种鸡,通过对H5亚型和H9亚型禽流感HI抗体滴度监测,探讨H5亚型和H9亚型禽流感HI抗体消长规律及禽流感(H5+H9)二价灭活疫苗的免疫程序。结果表明,用禽流感二价灭活疫苗免疫黄羽种鸡后,H5亚型和H9亚型禽流感HI抗体的消长规律基本同步,其抗体滴度阶段性峰值出现在免疫后的第21～28天。根据试验结果,建议用禽流感二价灭活疫苗免疫黄羽种鸡的免疫程序设为:首免(14d),0.3mL/只;二免(56d),0.5mL/只;三免(119d或开产前4周),0.5mL/只。

检测禽流感抗体的重组核蛋白间接ELISA方法的建立

以大肠杆菌系统表达的H9亚型禽流感病毒(AIV)核蛋白(NP)为抗原包被ELISA板,通过反应条件的筛选,建立检测禽流感抗体的重组核蛋白间接ELISA(NP-ELISA)方法。结果表明,抗原最佳包被质量浓度为7.56μg/ml,血清最适稀释度为1∶160,作用时间为60 min;辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗鸡IgG最适稀释度为1∶5 000,血清和酶标抗体最适作用时间为60 min。特异性试验结果表明,NP抗原可与H5、H7和H9亚型AIV特异性抗体发生反应,经NP-ELISA检测为阳性的H9亚型AI血清样品能够被H9亚型AIV阻断,而NP抗原与新城疫等4种疫病阳性血清不发生反应。对223份待检鸡血清进行检测,NP-ELISA阳性检出率为96.86%(216/223),而血凝抑制试验、琼脂免疫扩散试验结果分别为93.72%(209/223)和81.61%(182/223),表明NP-ELISA是检测禽流感型特异性抗体的一种特异、敏感、快速、经济的血清学检测技术。

禽源呼肠孤病毒诱导宿主免疫应答研究进展

禽源呼肠孤病毒是一类重要的禽类病原体,能引起感染家禽和水禽法氏囊、脾和胸腺等器官严重受损,造成免疫抑制,且易与其他病原体混合感染,极大地阻碍了全球养禽业的健康发展。天然免疫应答具有反应迅速、不针对特定抗原且作用范围广的特性,是当前免疫学和微生物学的研究热点。适应性免疫应答能够排除体内特异性抗原异物,抵抗相同病原体的再次入侵,是预防接种的免疫学基础。本文将从禽源呼肠孤病毒诱导宿主天然免疫应答和适应性免疫应答两方面,阐述此类病毒感染对宿主免疫系统的影响,以期为靶向病毒和宿主免疫反应的疫苗设计提供参考依据。

RT-PCR检测禽传染性支气管炎病毒

用２对已发表的引物和１对自行设计的引物对同一禽传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）Ｈ１２０株进行ＲＴ－ＰＣＲ，分别获得了Ｓ１基因上与引物设计相一致的１７２０、２２８、６０２ｂｐ的扩增片段。用自行设计的引物对７个毒株（Ｈ１２０、Ｈ５２、Ｍ４１、Ｃｏｎｎ、Ｇｒａｙ、Ｔ、Ｈｏｌｔｅ）和５个分离株（宜毒、上毒、云毒、ＨＫ、１１８）的含毒尿囊液或纯化病毒进行ＲＴ－ＰＣＲ，结果除Ｈｏｌｔｅ株和２个分离株（宜毒、云毒）外，其余均成功地扩增出６００ｂｐ的片段。用１．７、０．２、０．６ｋｂ３对引物对６个ＩＢＶ毒株和６个分离株的含毒尿囊液在相同和不同条件下进行ＲＴ－ＰＣＲ，结果３对引物分别扩增出３、５、９株ＩＢＶ，同时可将不同血清型的１２个ＩＢＶ株分成６种基因型。将ＩＢＶ分离株ＨＫ与标准株Ｍ４１经ＰＣＲ扩增、ＨａｅⅢ和Ｈｉｎｄ酶切、ＲＦＬＰ分析，表明属同一马萨诸塞血清型。３株ＩＢＶ（Ｈ１２０，ＨＫ，Ｍ４１）在鸡胚中繁殖，ＰＣＲ最早检出的时间为２０～２４ｈ。ＲＴ－ＰＣＲ提供了直接从尿囊液和感染鸡组织中快速检测病毒的新方法。

H9N2禽流感病毒陕西分离株HA基因的遗传变异分析

【目的】对H9N2禽流感病毒HA基因全序列进行分析,了解H9N2禽流感分离毒株HA基因的遗传变异情况。【方法】根据GenBank已发表的H9N2毒株的基因序列,设计了2对H9N2禽流感病毒HA基因特异性引物,运用RT-PCR方法对XL、LF和WN分离株进行了扩增,然后将PCR产物送出进行测序,用DNAstar 5.0软件对测序结果进行了分析。【结果】XL、LF和WN 3株H9N2分离株间HA基因的核苷酸同源性为99.7%-99.9%,推导氨基酸的同源性为99.1%-99.6%;分离株与参考毒株HA基因核苷酸的同源性为96.2%-99.0%,推导氨基酸的同源性为96.2%-98.6%。通过对3个H9N2分离株间HA基因核苷酸序列的比较,发现共有5个位点的核苷酸发生突变,其中4个位点核苷酸的改变导致相应的氨基酸发生突变。HA蛋白的7个受体结合位点比较保守,但是其在551-553位缺失了潜在的糖基化位点。【结论】3株H9N2分离株裂解位点氨基酸序列完全符合低致病性禽流感的特征RSSR↓G,但是LF裂解位点附近333位脯氨酸（Pro）突变为组氨酸（His）,即非极性氨基酸向极性带正电氨基酸（碱性氨基酸）转变,裂解位点的变化可能是H9N2禽流感病毒生物学特性改变的分子基础。

鸡源和鸭源减蛋综合征病毒DNA酶切图谱分析

采用差速离心法纯化鸡源和鸭源减蛋综合征（ＥＤＳ）病毒，酚－氯仿抽提法提取两种毒株的核酸。选取ＥｃｏＲⅠ、ＢａｍＨⅠ、ＢｇｌⅠ、ＢｇｌⅡ、ＫｐｎⅠ、ＰｓｔⅠ和ＨｉｎｄⅢ７种限制性内切酶，对两种毒株进行酶切图谱比较。结果显示，鸡源株酶切片段数分别为４，４，６，８，５，９，１０，共计４６个片段；鸭源株产生的酶切片段数分别为４，４，５，７，９，１０，８，共计４７个片段。两者的酶切结果除ＥｃｏＲⅠ完全相同外，其余均存在不同程度的差异。由此表明，鸡源和鸭源ＥＤＳ病毒虽然血清型相同，但在基因水平上存在较大的差异，属不同基因型。

琼脂免疫扩散试验和间接免疫荧光染色法在禽网状内皮组织增殖病流行病学调查中的应用

应用琼脂免疫扩散试验和间接免疫荧光染色法检测鸡血清中抗ＲＥＶ抗体有很强的特异性，用以检测黑龙江、山东、辽宁、广东等地１７０３份鸡血清，阴性率分别为１４％和２３％，证明上述四省均有禽网状内皮组织增殖病病毒感染。

湖南省部分地区禽隐孢子虫感染情况调查

从湖南省长沙、益阳、常德 3市 6个鸡场的 43 6只鸡 ,2个鸭场的 160只鸭 ,2个鸽场的 3 2只鸽 ,1个鹌鹑场的 3 0只鹌鹑采粪样检查。结果 ,3个市的鸡和鸭均有隐孢子虫感染 ,感染率分别为 4.5 9%和 3 .75 %。其中 2 18周龄鸡的感染率为 7.14%,2 5 60周龄鸡的感染率为 1.5 1%;AA鸡、伊莎鸡和艾维茵鸡的感染率分别为 5 .5 6%、5 .2 1%和 3 .3 3 %。罗曼鸡、长沙黄鸡为阴性。鸽和鹌鹑未查到隐孢子虫。剖检 2 0只隐孢子虫阳性鸡 ,取盲肠、腔上囊、小肠前段和中段、气管粘膜涂片镜检 ,感染隐孢子虫的标本分别占所检标本数为 85 .0 0 %、40 .0 0 %、45 .0 0 %和 0。