鸽新城疫野毒株的分离及生物学特性研究

对分离的Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３３株鸽新城疫病毒进行了电镜检查、致病性指数测定、血凝试验（ＨＡ），与鸡新城疫Ｌａｓｏｔａ毒株的交叉血凝抑制试验（ＨＩ）、致病性试验。测得鸡胚半数感染量（ＥＩＤ５０）分别为１０－８．４１，１０－７．５３，１０－７．８３；鸡胚最小致死量（ＬＤ）均为１０－４；鸡胚平均致死时间（ＭＤＴ）分别为８０ｈ，９０ｈ，９６ｈ；１日龄雏鸡脑内致病指数（ＩＣＰＩ）分别为１．６０，１．５０，１．５５；分离毒株与Ｌａｓｏｔａ毒株和其相应血清的交叉凝集抑制试验有明显差异。将分离毒株分别接种１月龄鸽各３只，４～１０ｄ全部出现典型神经症状，１５ｄ内死亡。结果表明所分离的３株病毒为鸽新城疫病毒，在抗原性上与鸡新城疫病毒存在一定差异，对鸡也有一定致病力。为制定防制措施，研制鸽新城疫疫苗，控制新城疫流行提供了科学依据。

一株鸽新城疫病毒的分离鉴定

从江苏省某发病鸽场分离到1株病毒,经分离、鉴定为鸽新城疫。对该分离病毒进行了毒力和致病性等生物学特性分析。结果,该分离病毒连续传3代后的HA效价稳定在8㏒2以上,MDT为129.6h,ICPI为0.287,F基因核苷酸和转译氨基酸与传统Lasota株的同源性最高,与Kuwait256株最低。而F基因裂解位点的氨基酸组成与NDV强毒株的特征性结构一致(112R-R-Q-K-R-F117)。结论:(1)该分离病毒属于基因II型新城疫弱毒株;(2)F基因的裂解位点的特征性结构不完全决定鸽新城疫的毒力。

湖南省鸽新城疫病毒的分离与鉴定

用SPF鸡胚从疑似鸽ND病鸽群中分离到一株病毒,根据HA、HI及病毒中和试验结果表明该分离毒为鸽NDV。其生物学特性ICPI为1.38,IVPI为1.0,MDT为99.8h,表现出与鸡NDV不同的生物学特性。

信鸽新城疫病毒P／Anhui／1109株囊膜糖蛋白基因的遗传进化及氨基酸差异性位点分析

为分析流行于信鸽群中新城疫病毒致病株P／Anhui／I／09的分子遗传特性及其囊膜糖蛋白的差异性，采用RT-PCR法扩增其F和删基因开放阅读框（ORF），并与已公布的主要代表性毒株序列进行遗传进化分析及615个全长F基因和480个全长Ⅲ基因推导氨基酸序列比对分析，同时对P／Anhui／1／09株进行型内遗传关系分析。

鸽新城疫病毒的分离与鉴定

将分离的疑似新城疫病毒采用蔗糖密度梯度离心对病毒液进一步纯化,经透射电镜观察,可见该疑似病毒具有新城疫病毒直径大小相符的病毒粒子以及囊膜、纤突等形态特征。根据GenBank中注册的新城疫病毒F基因序列分别设计一对特异引物,采用RT-PCR方法扩增相应的目的片段,将cDNA片段分别克隆至pMD-18T载体进行序列测定,获得一株新城疫F基因的部分序列:长度为1625bp,属于基因Ⅶ型,F蛋白氨基酸的裂解位点为112R-R-Q-K-R-F117,具有典型的强毒株特征;F0氨基酸序列中有6个糖基化部位点和3个与病毒融合相关的重要抗原位点。

赛鸽新城疫病毒南京分离株的生物学特性及其F和HN基因的分析

从南京市某赛鸽公棚发病鸽脑组织中分离到1株鸽新城疫病毒,命名为Pi/NJ/CH/4416/2016(简称ND4416)。各项生物学特性试验结果表明,该分离株为鸽新城疫强毒,对鸽具有高致病性,对鸡的致病性相对较低。经RT-PCR扩增、测序得到分离株的F基因和HN基因序列。F基因分析表明,其裂解位点的氨基酸序列为^(112)R-R-Q-K-R-F117,是典型的强毒株共有序列。F、HN基因遗传进化分析发现,本次分离株的基因型为Class II,VIb亚型,且与目前国内流行株属于同一遗传分支,这些毒株与比利时流行株PPMV-1/Belgium/11-09620/2011(JX901124.1)的亲缘关系相近,推测近年国内流行毒株可能来源于比利时。本次分离毒株与弱毒疫苗株La Sota(AF077761.1)的遗传距离较远。生物信息学分析显示,该鸽源分离株HN蛋白第491~500位的一个线性抗原表位发生了改变,血清学试验也显示本毒株与La Sota疫苗株的抗原性差异明显,在一定程度上说明该鸽源毒株已经发生了抗原性变异。