眼斑芫菁幼虫肠道共生菌的多样性研究

【目的】研究眼斑芫菁幼虫肠道共生菌的多样性,并鉴定其相关功能,以探寻眼斑芫菁肠道共生菌在其生长发育中的作用。【方法】分别以人工饲料、蝗卵为食物饲喂眼斑芫菁幼虫,饲养至不同龄期的眼斑芫菁为材料,按相应龄期收集试验所需幼虫,提取眼斑芫菁幼虫肠道细菌基因组DNA,通过16S rDNA全长扩增子测序,分析其肠道细菌的多样性和相对丰度,并探究其肠道共生菌发挥的潜在功能。【结果】获得最终有效序列81 759条,聚类共获得230个OTUs,注释到17个门,27个纲,41个目,71个科,109个属。变形菌门(Proteobacteria)为3个组中的最优势门,各分组样品的优势菌属不相同,劳尔氏菌属为3个组的共同优势菌属。α多样性分析发现,蝗卵饲养的眼斑芫菁二龄幼虫(L.H2)肠道菌群多样性和丰度比四龄幼虫(L.H4)高,且均高于转接入人工饲料饲养的四龄幼虫(L.S4);α与β多样性分析结果均显示眼斑芫菁肠道内共生菌多样性各组内差异大,组间有一定差异,但不同组之间差异不显著(P>0.05)。功能分析结果发现,L.S4在氨基酸代谢、核苷酸代谢、环境适应、免疫系统等方面明显高于L.H4和L.H2,且L.S4的氨基酸代谢比L.H4显著增强(P=0.035)。【结论】明确了眼斑芫菁幼虫肠道菌多样性和群落结构受食物影响,其肠道细菌在代谢功能上能协助宿主适应相应的食物。研究眼斑芫菁幼虫肠道细菌多样性与食物之间的关系,为研究眼斑芫菁肠道微生物变化奠定了基础。

圈养林麝脓肿病病原菌分离鉴定及药敏分析

目的确定林麝化脓性疾病的主要病原菌,寻找有效的治疗措施(药物)。方法采用3种培养基对28个人工饲养的发病林麝脓灶进行病原菌的分离培养、细菌革兰氏染色、镜检,然后对分离病原菌进行16S rRNA基因PCR扩增及测序分析鉴定,再进一步用BIOLOG自动微生物鉴定系统对3种可疑菌进行生理生化鉴定,用昆明小鼠分组进行系列病理实验,最后用纸片扩散法测定病原菌对22种抗生素的敏感性。结果脓灶中共分离到12种细菌,其中化脓隐秘杆菌Arcanobacterium pyogenes、绿脓杆菌Pseudomonas aeruginosa、蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus的检出率分别为100.0%、21.4%、14.3%,其他菌的检出率较低。用BIOLOG自动微生物鉴定系统鉴定结果与16S rRNA鉴定结果完全一致;小鼠致病性实验中进行了脓液培养后注射,分离到单菌鉴定后进一步分别注射,剖检后进行接种划线鉴定并得到与注射前相同的病菌,确定了这几种菌均具有较强的致病性;药敏实验最终确定针对化脓隐秘杆菌的有效药物为环丙沙星,对这3种病菌的有效药物为克林霉素、环丙沙星。结论初步确定林麝脓肿病主要是由于化脓隐秘杆菌原发感染,进而引起其他病菌的继发感染和混合感染,最终导致病重死亡;环丙沙星等为敏感药物。

家养林麝四川莫尼茨绦虫病的流行病学研究

报告了家养林麝四川莫尼茨绦虫病的临床症状、感染季节与宿主感染年龄以及四川莫尼茨绦虫的自然中间宿主种类。并对家养林麝发生四川莫尼茨绦虫病的有关因素作了分析与讨论。

蚓激酶研究进展

蚓激酶作为中药地龙(即蚯蚓)的主要抗凝、溶栓成分,经动物试验及临床观察证实具有良好的纤溶、抗凝、溶栓和改善血流变等药理作用,并取得了较理想的效果。蚓激酶具有不良反应小、安全性高、疗效较显著、生产成本低等优势。论文综述了蚓激酶的分离纯化、理化及酶学特性、纤溶作用机理及临床应用等方面的研究成果。

林麝喉头后侧深部脓肿的诊断与治疗

采用流行病学分析、症状观察、触诊肿大部位以及对肿大部位进行穿刺等方法,对林麝喉头后侧的深部脓肿进行诊断。细菌分离培养结果表明:林麝喉头后侧的深部脓肿主要是由葡萄球菌引起的。对该病主要采取手术切开与针头穿刺相结合的方法,同时配合局部及全身用药,疗效可佳,治愈率高。

梅花鹿IFN-β1的原核表达及活性鉴定

为表达具有抗病毒活性的梅花鹿干扰素β1(IFN-β1),本研究通过PCR扩增梅花鹿IFN-β1基因,将其克隆至原核表达载体p ET-28a中,构建重组质粒p ET-IFNβ1,并将其转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导后,得到高效表达。SDS-PAGE与western blot分析结果表明,梅花鹿IFN-β1重组蛋白的分子量大小约为24 ku,表达产物主要为不溶性的包涵体,表达量占菌体总蛋白的59.02%。将Ni柱纯化的p ET-IFNβ1诱导表达产物复性后,细胞病变抑制法检测表明表达产物具有抗病毒活性,其抗病毒活性可以达到10×53.81U/0.1 m L。梅花鹿INF-β1的表达为梅花鹿INF-β1的应用奠定了基础。

吉林、黑龙江两省梅花鹿布氏杆菌病的血清学调查

应用血清学方法,对我国吉林、黑龙江两省梅花鹿成年鹿群未注射布氏杆菌病疫苗的874份血清进行了血清抗体检测,其抗体阳性率分别为8.87%、2 6.39%。这一数据表明,吉林省和黑龙江省的鹿群中存在着布氏杆菌病的感染。同时只对不同性别的梅花鹿进行了血清抗体检测,结果表明,梅花鹿公鹿和母鹿对布氏杆菌均易感。

中国圈养麝内寄生虫感染情况调查

为了掌握我国圈养麝内寄生虫感染情况,为圈养麝内寄生虫病防控技术的研究提供科学依据。本研究抽样采集圈养麝新鲜粪样,采用循序沉淀法、离心漂浮法和贝尔曼法进行粪样中寄生虫虫卵（或卵囊）和幼虫的检查。从四川、陕西、甘肃和湖北等地24个养麝场中抽样采集了1049只麝的新鲜粪样,共查到9种（类）寄生虫虫卵（或卵囊）和幼虫,总阳性率为71.21%。其中,球虫Eimeria sp.卵囊阳性率达44.61%,卵囊密度（OPG）为800~54 400;线虫卵（未定科属）阳性率次之,为11.73%,虫卵密度（EPG）为300~18 700;而肺线虫（网尾属Dictyocaulus sp.）幼虫、毛细线虫Capillaria sp.卵、毛圆线虫Trichostrongyloides sp.卵、食道口线虫Oesophagostmum sp.卵、绦虫Anoplocephalidae sp.卵、类圆线虫Strongyloides sp.卵和毛首线虫（鞭虫Trichuris sp.）卵的阳性率分别为6.01%、2.00%、1.81%、1.53%、0.95%、1.24%和1.33%。调查表明我国圈养麝感染的内寄生虫种（类）多,感染率较高,其中以球虫和线虫感染情况最严重。

3例人工圈养穿山甲死亡原因报告

为查明3只圈养穿山甲(Manis spp)MP2、MP7和MJ9的死亡原因,对其尸体进行了解剖,结果发现:MP2胃幽门处瘤状物将胃通向十二指肠的开口堵死,导致其胃内食物无法排空引起潴留,动物长时间不能进食而亡;MP7因舌头上的黏液将圈舍内垫料刨木花带入咽部使呼吸道堵塞窒息而亡;MJ9死于肠道寄生虫和长时间饥饿引起的营养衰竭。同时对穿山甲圈养管理和疾病防治提出了具体建议。

圈养条件下新疆马鹿两个亚种的肠道菌群比较分析

肠道菌群组成复杂,与宿主肠道内环境动态平衡和健康息息相关。马鹿是鹿科动物中分布最广的种类,亚种分化众多,但现有马鹿肠道菌群研究较少。为丰富马鹿肠道菌群数据,以马鹿的两个亚种为阶元,运用高通量16S rRNA基因测序技术检测了7头雄性天山马鹿和7头雄性塔里木马鹿的肠道微生物,对其核心菌群、结构组成、多样性及肠道微生物的差异进行分析,旨在了解不同马鹿亚种肠道微生物组成差异,为两亚种间肠道菌群的差异提供参考。研究结果表明,塔里木马鹿菌群多样性及丰度低于天山马鹿。厚壁菌门(Firmicutes)、放线菌门(Actinobacteria)、变形菌门(Proteobacteria)及拟杆菌门(Bacteroidetes)为两组马鹿的优势菌门。此外,天山马鹿肠道中分解蛋白质、脂质的拟杆菌门和变形菌门相对丰度高于塔里木马鹿,而分解植物纤维的双歧杆菌(Bifidobacterium)、瘤胃球菌科UCG 014(Ruminococcaceae UCG 014)的相对丰度低于塔里木马鹿。本研究对天山马鹿及塔里木马鹿肠道菌群组成进行初步了解,可根据研究结果调整其饲料配比,为马鹿饲养管理的改善提供参考。

林麝肺源致病性大肠杆菌O因子血清型鉴定及部分耐药基因的PCR检测

为调查林麝肺源致病性大肠杆菌O因子血清型以及相关耐药基因的流行状况,本试验采用玻板凝集反应法进行O因子血清型鉴定;同时用PCR方法检测耐药基因。结果显示:O血清型定型的有16株菌,分别属于9个不同的血清型,其中O78为优势血清型,占定型菌株的43.75%(7/16)。同时,29株菌皆携带多种耐药基因,其中磺胺类耐药基因sul1、sul2、sul3,喹诺酮类耐药基因aac(6')-Ib、qnrB,β-内酰胺酶类耐药基因blaTEM、blaCTX-M,氨基糖苷类耐药基因aac(3)-IIa、ant(3″)-Ia和四环素类耐药基因tet(B)检出率较高,检出率分别为100%、96.55%、96.55%、100%、86.21%、100%、65.52%、100%、96.55%和58.62%。本试验结果对林麝临床科学合理用药有重要指导意义。

几种药物对圈养林麝化脓隐秘杆菌菌膜的影响

化脓隐秘杆菌是林麝脓肿病的主要病原菌。用结晶紫染色法测定化脓隐秘杆菌菌膜形成能力,然后测定4种药物处理菌膜后的菌落形成单位(CFU),并对菌膜结构进行镜检。结果表明,91.7%的隐秘化脓杆菌能在48h内形成菌膜;环丙沙星(CIP)可以穿过菌膜有效杀死部分膜内细菌,但对菌膜结构几乎无影响;EDTA可以使菌膜形成泡状结构,但杀菌效果不理想;复合酚(CP)以及环丙沙星和EDTA复合物不仅能够有效的杀死细菌,还能够破坏菌膜结构。这说明环丙沙星和EDTA复合物可以作为彻底杀死化脓隐秘杆菌的有效药物,复合酚可以作为辅助手段用于日常消毒以消除麝场环境中菌膜的存在,从而有效的阻止化脓隐秘杆菌的传播和感染。

国外鹿科动物的寄生虫病研究概况

对引起世界各地尤其是北美洲和欧洲的鹿科动物寄生虫病的多种内寄生虫及外寄生虫进行了介绍。

林麝肠道乳酸菌及肠杆菌多态性分析及耐药性研究

为研究林麝肠道中乳酸菌和肠杆菌基因型及表型多样性并对其耐药性进行分析,本研究从10头健康成年林麝粪便样品中分离到22株乳酸菌和16株肠杆菌,通过16S rDNA进化分析和生理生化测定对分离菌株进行了鉴定,采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术分析了分离菌株的基因型并利用药敏纸片法进行了分离菌株的耐药性研究。本研究共分离到了11种细菌,分别为大肠杆菌Escherichia coli、阴沟肠杆菌Enterobacter cloaca、河生肠杆菌E.amnigenus、肺炎克雷伯氏菌Klebsiella pneumoniae、蒙氏肠球菌Enterococcus mundtii、耐久肠球菌E.durans、明串球菌Leuconostoc fallax、植物乳杆菌Lactobacillus plantarum、嗜酸乳杆菌L.acidipiscis、屎肠球菌E.faecium和食窦魏斯氏菌Weissella cibaria。其中大肠杆菌(n=11,28.9%)是林麝肠道中的优势菌群,肠球菌(n=10,26.3%)是林麝肠道中的优势乳酸菌群。PFGE分型结果表明肠杆菌分为7个基因型,乳酸菌分为9个基因型。本研究首次分析了林麝肠道中可培养细菌的基因型及表型并且对其耐药性进行了测定,结果表明林麝肠道中的原生菌群多态性明显,并且对目前常用的抗生素敏感,未检测到耐药菌株。

林麝副鼻窦蓄脓的诊断与治疗

通过对发病林麝的症状观察、流行病学分析、触诊肿大部位、对病麝所流鼻涕的成分直接观察,以及鼻孔的透气性能,分泌物性状等,对该病做出初诊。细菌培养,结果表明:林麝喉头后侧的深部脓肿是由葡萄球菌引起。对该病采取手术的方法,在林麝副鼻窦处切开小孔,通过对孔内清洗及对鼻窦和鼻腔进行冲洗等方法,配合局部及全身用药,疗效可佳,治愈率高。

草食动物常见疾病的诊断与防治研究

草食动物是指以植物为食的动物,因其食物多为纤维素和淀粉质,消化系统相应地演化出了特殊的结构和功能。然而,草食动物也会患上各种疾病,其中一些疾病可能会对它们的健康和生命造成威胁。因此,及时诊断和治疗草食动物的疾病是非常必要的。 本文旨在介绍草食动物常见病症的诊断和治疗方法,以便相关人员能够更好地了解和管理这些动物的健康。本文将介绍草食动物常见的消化系统、呼吸系统和泌尿系统疾病及其病因,诊断方法以及药物和手术治疗方法。最后,我们将探讨预防和护理的重要性,并提供一些实用的建议。

一例人工驯养林麝产后瘫痪性疾病的诊治体会

林麝属国家一级保护动物,数量稀少、药用价值极高,但在其疾病治疗方面可以借鉴的资料很少,部分疾病治疗只能参照羊等小反刍动物治疗方案。林麝产后瘫痪、产后截瘫、机械性损伤等疾病鉴别诊断难。本文通过对一例母麝产后瘫痪的诊断和治疗,简要阐明了林麝产后瘫痪、产后截瘫和机械性损伤的鉴别诊断、治疗方案和预防措施,以期为林麝产后瘫痪诊治提供帮助。

鹿源李氏杆菌的分离鉴定

通过对患典型败血症死亡的梅花鹿组织进行细菌培养和分离得到3株细菌,经细菌形态学、生化技术、动物试验和分子生物技术4方面的鉴定,确诊该菌为李氏杆菌。药敏试验表明,分离菌株对青霉素、磺胺类药物产生了较强的耐药性,对庆大霉素、环丙杀星、克林霉素、链霉素中度敏感,对头孢塞肟钠、丁胺卡那霉素高度敏感。

某林麝场林麝感染假结核耶尔森菌的诊治

为寻求四川宝兴某家养林麝死亡的原因及控制措施,采集一例病死林麝各组织器官进行病理切片观察和细菌分离,对分离到的病菌进行形态学观察、16S rDNA序列分析、小鼠致死试验、生化鉴定及药敏试验。结果显示,切片中各组织含有大量细菌团;从肠系膜淋巴结、肝、脾、肾和肺中只分离到1株病菌;16S rDNA测序分析发现该菌与耶尔森菌16S基因的相似性高达100%,生化及鉴别试验最终判定为假结核耶尔森菌。该菌对头孢噻肟、头孢西丁、丁胺卡那霉素等药物敏感。结果证实,此次林麝死亡的原因为假结核耶尔森菌引起的败血症,并及时应用敏感抗生素控制了病情。

主要危害麝类的化脓性、呼吸系统疾病及寄生虫病研究

对麝类常见的化脓性疾病、呼吸系统疾病和寄生虫病的临床症状、病理变化、病原学研究、流行病学分析及防治策略等方面的研究进展进行了综述。呼吁加强对麝类疾病的研究,在科学理论指导下保护发展麝类资源。