利用SSR标记进行家蚕部分品种资源的指纹图谱分析

【目的】通过构建家蚕品种资源的指纹图谱,研究品种间的亲缘关系。【方法】用35个SSR标记研究96个家蚕品种资源的指纹图谱。【结果】这些SSR标记在家蚕品种间表现出丰富的多态性,等位基因数量在3～28个,平均为12.77个,多态性指数(PIC)在0.299～0.919,平均0.71。根据各品种的指纹图谱,用Nei(1978)的方法计算了各品种间的遗传距离,最大为0.1983,最小为0.0641,并用UPGMA方法进行了聚类,得到的分子系统图与传统意义上的形态分类方法接近但存在一些微小的差异。根据遗传分析结果,探讨了家蚕的起源与进化关系。【结论】SSR标记是适于进行品种资源的指纹图谱分析和分子标记辅助育种的一种标记,可在家蚕核心种质资源库的构建中发挥主要作用。

家蚕对核型多角体病的抗性及遗传规律的研究

试验研究了家蚕对ＮＰＶ病的抵抗性及其遗传规律，结果表明：家蚕品种间存在抗性差异，幼虫期的攻毒发病率与全龄虫蛹率成极显著的负相关，抗性对感性呈不完全显性，是由两对以上基因控制的，至少有一对为主效基因，再一次证明有偏父遗传现象，其狭义遗传力为３６．１％。

家蚕蛹期雌雄生殖腺蛋白质双向电泳比较分析

分析家蚕Bombyxmori雌雄生殖腺细胞蛋白质,有利于发现性别分化相关的功能蛋白质,探讨生殖腺发育相关基因的表达调控机理。本研究利用蛋白质双向凝胶电泳和图像分析技术,分析家蚕蛹期第2天的雌雄生殖腺细胞蛋白质。结果表明:在雄蚕生殖腺蛋白质电泳图谱中共检测到435个蛋白斑点,其中特异性蛋白斑点73个,占总蛋白斑点数的16.8%;雌蚕生殖腺的电泳图谱中有417个蛋白斑点,其中特异性蛋白斑点55个,占总蛋白斑点数的13.2%。雌雄能匹配的蛋白斑点有362对,匹配率达85.0%。

AFLP标记在研究家蚕遗传多态性方面的应用

AFLP是一种多态检出效率很高的分子标记技术，在构建遗传图谱，遗传多态性研究，重建分子系统演化树，品种鉴定，基因克隆等众多研究领域有着其它分子标记技术不可比拟的优势。本文在前人用AFLP技术对植物多态性研究的基础上，将AFLP用于家蚕的遗传多态性研究，结果发现在家蚕中同样具有丰富的AFLP标记的多态性。由此暗示AFLP技术亦适合研究家蚕等昆虫类动物的遗传多态性，构建遗传图谱，或用于其分子生态学，分子进化和分类等方面的研究。此外本文还探讨了适合于家蚕等昆虫的AFLP分析的实验条件。

一种导入蚕限性标记基因的有效方法

介绍了一种回交结合标记基因选择 ,转移蚕限性品种标记基因的方法。利用这种方法可以较快地把一个限性系统中性别控制基因导入普通蚕品种 。

家蚕卵线粒体DNA限制性内切酶长度多态性研究

利用 2 9种限制性内切酶对 34个不同品种家蚕卵mtDNA进行酶切分析 ,发现一化、二化品种与多化品种的HaeⅢ酶切图谱有差异 ,但不同的地理品种间没有出现酶切多态性现象。另外 ,一些家蚕品种的受精卵和非受精卵mtDNA在BglⅠ和PstⅠ酶切下 ,呈现不同的酶切带型。同时 。

基因枪喷射技术在家蚕外源基因转移中的应用

自从J.C.Sanford建立了基因枪喷射转移外源基因技术以来,已经在动植物基因工程领域内得到了广泛的应用,并有许多获得成功的实例。自1984年前田进利用家蚕生产出α-干扰素后,人们对转移基因家蚕的研究表现出极大的兴趣,相继开展了家蚕受精卵为受体的外源基因转移技术的研究。据田村和尼古拉耶夫,A.I.研究报道。

家蚕胚胎伴性温敏性的遗传研究

试验用新九与伴1等4个温敏性的品种杂交，将其F1代蚕种用高温干燥条件催青，结果雄蚕正常孵化，雌蚕几乎不孵化，表明伴1等品种具有控制催青温敏性表达的基因存在。用华1与伴1组配的F1、F2及F1与亲本回交的14个组合作遗传分析，认为催青敏感性状由位于Z性染色体上的一个主基因控制，呈隐性的伴性遗传。

柞蚕幼虫蓝体色和青绿体色的遗传规律分析

柞蚕（Antheraea pernyi）幼虫体色是柞蚕新品种选育的重要形态标记性状。已知柞蚕幼虫体色的控制基因G（g）、Y（y）、R（r）位于不同染色体上,非等位基因间存在互作关系。以幼虫体色分别为蓝色、青绿色的柞蚕品种胶蓝、青皮为研究材料,与幼虫体色分别为白色（基因型rryygg）、黄绿色（基因型rryy GG）的柞蚕品种小白蚕、青6号配制胶蓝×小白蚕、青皮×小白蚕、胶蓝×青6号和胶蓝×青皮的正反交F1、F2、F3和BC1等组合进行杂交试验,调查分析柞蚕幼虫蓝体色和青绿体色的遗传方式。通过胶蓝与小白蚕杂交试验的幼虫体色分离规律,推测柞蚕幼虫蓝体色与白体色的控制基因存在1对差异基因,将柞蚕幼虫蓝体色基因命名为B,则柞蚕品种胶蓝幼虫的体色基因型为rryygg BB;通过青皮与小白蚕杂交试验的幼虫体色分离规律,推测柞蚕品种青皮幼虫青绿体色的基因型为rryy GGBB;通过胶蓝、青6号和青皮3个品种间杂交试验的幼虫体色分离规律,推测蓝体色基因B与黄绿体色基因G分别位于不同连锁群,为独立遗传;当基因B与基因G共存（rryy G_B_）时,柞蚕幼虫体色表型为青绿色,属不完全显性遗传。

家蚕卵突变体“明”死卵(l-e^m)的卵壳构造和遗传分析

在家蚕品种"明"中发现一种卵突变体,其卵产下后10 min左右即出现失水凹陷,1 h左右完全失水,全部溃死。解剖观察母蛾卵巢管,卵在其内排列整齐,大小和色泽都与正常卵无异;电镜观察死卵,精孔、后极部与正常卵无差异,但卵壳表面凹陷处网格皲裂,其切面的中层可见有裂纹。遗传分析表明:该家蚕卵突变体由一个隐性遗传基因控制,纯合致死,遵循伪母性遗传模式。该突变体是一个不同于溃卵(Grcol)突变体的卵壳新突变,暂命名为"明"死卵(lethal egg of"ming",l-em)。

家蚕胚胎期对高温干燥催青耐受性的遗传分析

本文运用完全双列杂交的方法 ,估测了家蚕在胚胎期对高温干燥催青条件耐受性的有关遗传参数。家蚕种对高温干燥催青的耐受性 ,在原种间和杂交组合间有明显差异。耐受性是一种遗传性性状 ,由遗传基因控制。经估算的广义遗传力大于狭义遗传力。有超显性现象。控制家蚕对高温干燥催青的耐受性的基因数目不少于两个。显性效应大于加性效应。显性效应为非单向性的。显性位点上的基因分布为不对称性。

家蚕染色体工程及其应用研究——Ⅳ.家蚕人工单性生殖

按张果(1952)的方法,用46℃水浴处理家蚕未受精卵18分钟,获得发育卵,进一步对30多个蚕品种和杂交种,对热处理卵的孵化、生长情况作了比较,发现蚕品种间热处理效果差异大。先后饲养近2万条热处理后代,全是雌蚕,标记基因证实它们的基因型和母本相同,在AcmaypoB(1973)的基础上,将热处理卵发育成雌蛾的未受精卵,再次用热处理继代成功,连续用这种方法继代,已获得几个雌蚕无性繁殖系(clonc),处理卵的孵化率逐代提高,蚕也一代比一代好养,按Stronnikov(1975)方法,用-11℃或-17℃冷冻30分钟,处理了30多个蚕品种或杂交种的未受精卵,获得一些雄蚕,用标记基因作遗传分析,结果表明它们都是纯合体,进一步饲养这种雄蚕,用雄核发育方法继代成功。

温敏性品种雌雄蚁蚕蛋白质双向电泳图谱差异分析

为探讨温敏性品种限伴雌雄蚁体蛋白组分的差异,对刚孵出的雌(黑色)、雄(赤色)蚁体蛋白用双向电泳的技术和方法进行蛋白组分的比较分析。结果显示:在易溶蛋白中,雄蚁和雌蚁分别检测到269和250个蛋白点,能相互匹配的蛋白点占86.71%,特异蛋白雄蚁有43个,雌蚁有25个。在难溶蛋白中,雄蚁和雌蚁分别检测到370和427个蛋白点,能互相匹配的占80.10%,雄、雌蚁的特异蛋白分别为52个和106个。结果表明雌雄蚁体的蛋白组成存在差异。

金定鸭胚胎期骨骼肌发育模式及MRFs家族基因表达变化研究

MRFs(Myogenic regulatory factors,MRFs)家族包括肌分化因子Myo D、肌细胞生成素(myogenin)、生肌决定因子Myf5和Myf6,它们参与肌肉发生发育的各个环节。研究采用Real-time PCR方法研究了金定鸭胚胎期13、17、21、25和27日胚龄MRFs家族基因在骨骼肌中的表达变化,并分析其表达变化与胚重、骨骼肌发育的相关性。金定鸭胚重及骨骼肌重发育模式显示胚重在胚胎期呈持续增加趋势,但胸肌在胚胎中后期显示出较腿肌滞后的增重变化。MRFs家族基因在胚胎期骨骼肌中均能检测到表达,Myo D m RNA在21日胚龄前腿肌中的表达量高于胸肌,而在胚胎发育后期(25及27日胚龄)胸肌中表达量渐渐高于腿肌。胸、腿肌中myogenin m RNA的表达与胚重、胸、腿肌发育重量变化均呈强的负线性相关。上述研究结果首次揭示了鸭胚胎期骨骼肌中MRFs家族基因表达具有显著的时空性,推测Myo D m RNA在胸、腿肌中的表达变化可能与胸、腿肌增重表型差异有关,研究结果为进一步深入研究MRFs家族基因在胚胎期骨骼肌发生过程及其调控机理中的功能提供一定的理论依据。

家蚕Jc油蚕基因的发现和连锁分析

在蚕品种东3291选育过程中．发现了一种中等透明度的油蚕突变，其在第1龄眠中死亡率约为21．16％。经遗传和连锁分析表明：该油蚕性状受一对隐性基因控制，基因位于第5连锁群，且与该连锁群的其它油蚕基因不同，是一个新的油蚕突变，命名为Jc油蚕（JcTranslucent），基因记号：ojc。

家蚕虎斑易位系(ZW·^(⌒Ze))染色体的研究

以家蚕虎斑易位系ＺＷ·Ｚｅ⌒的卵巢为材料，仿今井（１９８０）涂片法制片，Ｇｉｅｍｓａ染色。光学显微镜下观察粗线期染色体，发现末端分开呈不对称的“Ｙ”字形二价染色体或提前分离的二价染色体，其分离较其它二价体显著提前，推测其为性（ＺＷ）染色体，组型分析该特异性二价染色体位于第１３号。这对于利用家蚕丰富的突变材料，进行染色体研究，进而绘制细胞学染色体图具有重要意义。

家蚕茧层荧光色的遗传分析

自生化遗传学立场，对家蚕茧荧光色与品种、性别和蔟中温湿度的关系以及遗传机制进行了研究。发现纯黄荧光色对纯紫荧光色为不完全显性；茧荧光色受多对基因控制，支配黄荧光色的至少有Yf-1和Yf-2两对基因，支配紫荧光色的至少有Vf-1和Vf-2两对基因；纯合型荧光色品种受蔟中温湿度影响小，而来合型荧光色品种则受其影响大，其主要机制是各荧光物质相对含量和少数荧光物质种类发生改变；在茧荧光色性别标记系统“东34限”中，其雌雄茧层中所含荧光物质的种类相同，但有三种黄荧光物质和一种紫荧光物质的相对含量雌雄间差异较大。

蓖麻蚕和栗蚕的性染色体研究

根据在蓖麻蚕（ｐｈｉｌｏｓａｍｉａｃｙｎｔｈｉａｒｉｃｉｎｉ）（♀）和栗蚕（Ｄｉｃｔｙｏｐｌｏｃａｊａｐｏｎｉｃａ）（♀）减数分裂前期所观察到的ｘ（Ｚ）染色体的长度和在全套染色体中的序号以及栗蚕Ｘ染色体的异染色质区域等特征，认为蓖麻蚕的ＸＯ型可能是由ＸＹ型中的Ｙ染色体缺失所致，而栗蚕的Ｘ染色体则可能是由Ｘ和Ｙ染色体融d合为一条而成。

家蚕α淀粉酶基因的多态性研究

【目的】从分子水平研究不同家蚕品种间淀粉酶基因多态性差异,为家蚕的育种选择和遗传进化研究提供有力的证据。【方法】根据网上基因数据库中的家蚕α淀粉酶基因序列(序列号:U07847),在第4和第5外显子区设计了一对特异性引物,在1个镇江野蚕和6个不同的家蚕品种基因组内进行PCR扩增,发现了该基因区域在不同品种间的多态现象。【结果】根据所得基因测序结果信息,用Clustalx软件进行分析并构建了分子系统树。其聚类结果在一定程度上也比较符合家蚕地理和化性的分布,而且镇江野蚕和家蚕品种距离较远。【结论】家蚕淀粉酶是一个为家蚕的起源和进化密切相关的分子标记基因,值得更深入的研究和探讨。

脂类代谢相关基因CROT、HADHB、SREBPREBP2在鸡胚胎期的表达特征分析

采用实时荧光定量PCR技术,以GAPDH为内参,检测鹿苑鸡在胚胎期9、11、13、15、17、19、21日胚龄时肝脏中CROT、HADHB、SREBP2 3个基因的表达量变化。结果显示:肝脏中CROT表达量最高的是21日胚龄(E21)胚胎,且其表达量随着日胚龄的增加先上升后下降然后又上升,其中2个峰值所对应的是E13和E21胚胎,CROT表达量最低的是E17胚胎;HADHB基因表达与CROT相似,表达量最高的是E21胚胎,最低的是E17胚胎,表达量随着日胚龄的增加先上升后下降然后又上升;SREBP2基因在肝脏中表达量最高的也是E21胚胎,与其他日胚龄胚胎的表达量差异极显著。结果揭示了鹿苑鸡胚胎肝脏中CROT、HADHB、SREBP2 3个基因m RNA的表达特征,为从分子水平了解鸡脂类代谢的调控规律奠定理论基础。