蓖麻蚕线粒体cox2基因的克隆、序列测定和分子系统学分析

利用兼并性引物克隆出蓖麻蚕线粒体cox2基因、tRNA Leu基因和cox1基因的部分片段。cox2基因编码框包含 6 85个核苷酸 ,编码 2 2 8个氨基酸的蛋白质 ;起始密码子为ATG ,终止密码子仅有 1个T组成 ;蓖麻蚕mtDNA的cox2基因中富含AT ,含量为 75 77% ,GC的含量为 2 4 2 3%。通过同源性比较 ,发现蓖麻蚕的cox2与柞蚕cox2同源性最高 ,核苷酸和氨基酸序列同源性分别是 89 0 %和 96 0 %。根据cox2氨基酸序列进行了 12种昆虫的分子系统学分析探讨。

木薯蚕蛹氨基酸构成分析

目的:分析木薯蚕蛹蛋白质含量及氨基酸构成,为木薯蚕蛹的利用提供依据。方法:凯式定氮法和氨基酸自动分析仪法。结果:测得木薯蚕蛹中蛋白质含量为(66.94±0.89)%,含有17种氨基酸,分别为谷氨酸(5.180±0.15)%、天冬氨酸(4.317±0.08)%、甘氨酸(3.431±0.06)%、亮氨酸(3.184±0.21)%、缬氨酸(2.662±0.07)%、苯丙氨酸(2.510±0.07)%、酪氨酸(2.489±0.08)%、赖氨酸(2.365±0.12)%、精氨酸(2.334±0.15)%、丙氨酸(2.205±0.18)%、异亮氨酸(2.166±0.19)%、脯氨酸(2.089±0.14)%、苏氨酸(1.901±0.16)%、丝氨酸(1.863±0.13)%、组氨酸(1.722±0.12)%、蛋氨酸(0.983±0.11)%、半胱氨酸(0.696±0.04)%。结论:木薯蚕蛹蛋白质含量丰富,且符合WHO/FAO所提出的参考蛋白模式。

ISSR方法在蓖麻蚕品种遗传多样性研究中的应用

采用ISSR技术对8个蓖麻蚕品种进行了基因组DNA多态性研究,并分析了其相互间的遗传差异.结果表明,所采用的19个ISSR引物中,有9个引物在供试的8个蓖麻蚕品种中都有扩增产物并能够很好重复,其中二碱基重复序列引物扩增效果要比三碱基和四碱基重复序列高,说明在蓖麻蚕基因组中二碱基重复序列的丰度可能比三碱基和四碱基重复序列的丰度高.这9个引物在8个蓖麻蚕品种中共获得ISSR标记76个,其中29个标记在品种间表现多态性.根据试验结果,用Nei的方法计算了蓖麻蚕品种间的遗传距离为0.068 1～0.270 3.根据各品种间的遗传距离,用UPGMA聚类分析软件绘制了聚类图.

蓖麻蚕基因转录表达分析的内参基因筛选

为了筛选能够稳定表达,适合蓖麻蚕基因转录表达分析的内参基因,根据鳞翅目昆虫基因分析中常用的内参基因肌动蛋白(β-non-muscle,β-actin)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyeeraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、18SrRNA、16SrRNA的序列设计特异性引物,分别对蓖麻蚕4个组织及9个不同发育时期的个体材料进行实时荧光定量PCR,制作标准曲线,采用相对定量的方法处理Ct值,结合NormFinder和geNorm软件分析以上4个候选内参基因在蓖麻蚕不同组织和不同发育时期转录表达的稳定性。结果表明:β-actin在蓖麻蚕血液、脂肪体、中肠、丝腺各组织,以及幼虫、蛹、成虫、卵各发育时期的表达最为稳定,适合作为蓖麻蚕基因转录水平研究的内参基因。

樗蚕和蓖麻蚕的DNA条形编码与系统进化分析

樗蚕（Philosamia cynthia cynthia）与蓖麻蚕（Philosamia cynthia ricini）均是鳞翅目大蚕蛾科吐丝营茧的昆虫,二者的血缘关系很近,成虫的外形也极其相似。为了获得用于樗蚕与蓖麻蚕分子鉴定的DNA条形编码,测定了二者的线粒体细胞色素酶C亚基I基因（COI）574 bp的DNA片段序列（GenBank登录号：FJ788507,FJ772004）,对序列特征及与同科其它绢丝昆虫同源序列的系统进化关系进行了分析。在大蚕蛾科绢丝昆虫中,樗蚕与蓖麻蚕COI序列表现出最强的碱基T偏好性（ATskew=-0.194）,二者的COI序列之间具有明显差异,共鉴定出25个变异位点,表明所测定COI序列可以作为各自的DNA条形编码。樗蚕与蓖麻蚕之间基于Kimura-2-Parameter的遗传距离为0.041,而与同科其它绢丝昆虫之间的遗传距离则在0.076~0.159之间,二者与惜古比天蚕（Hyalophora ce-cropia）之间的亲缘关系较近。

γ-射线及大肠杆菌诱导蓖麻蚕产生抗菌物质的研究

1.用γ-射线辐照和用大肠杆菌处理蓖麻蚕五龄幼虫和蚕蛹均能诱导血淋巴产生抗菌物质,两种诱导源诱导所得活性物质的抗菌活性相似。2.研究了五龄幼虫期和蛹期诱导产生抗菌物质的动力学,发现五龄幼虫在饷食后第2—4天诱导活力最高,产生抗菌物质的持续时间亦较长;蛹期则从化蛹当天至第4天之间诱导活力较高,并可持续15天左右,高峰期一般在诱导后2天至4天之间。3.对诱导后的蓖麻蚕血淋巴进行了电泳测活和葡聚糖凝胶初步分离,发现不论幼虫期或蛹期至少可得三个活性组分,其中既有类似于P_5的大分子抗菌物质,也有类似于P_(9A)和P_(9B)的抗菌多肽;并首次发现一种分子量约70000—75000道尔顿的新抗菌蛋白。

蓖麻蚕不同组织器官中胰蛋白酶抑制剂的种类与分析

胰蛋白酶抑制剂（TI）是鳞翅目昆虫体内广泛存在的一种蛋白酶抑制剂，主要功能是抑制胰蛋白酶的降解。采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和胰蛋白酶抑制剂活性染色，对18个蓖麻蚕品种5龄第5天的血液及其它组织中TI种类的分布进行了调查。经碱性聚丙烯酰胺凝胶电泳，在血液中共检测到8种TIs，分别命名为ETI-1～ETI-8，品种间存在多态性分布；在头和脂肪体中分别检测到1种TI；在体壁中检测到3种TIs。经酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳，在血液中共检测到4种TIs，分别命名为ETI-b1、ETI-b2、ETI-b3和ETI-b4，品种间种类分布无差异；在血液中检测到的TI包含了在头、脂肪体和体壁中检测到的TI种类。

蓖麻蚕滞育与过氧化氢代谢的关系

为了探讨蓖麻蚕滞育的机理，研究了蓖麻蚕蛹H2O2代谢的变化，并比较了在5℃冷藏滞育条件下的差异。结果表明，常温环境蓖麻蚕蛹期的H2O2含量呈减少趋势，第3～5天急速变化，超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性在第5天出现活性峰，故蛹期第3～5天是蓖麻蚕生理变化的一个敏感时期。第3天开始蛹滞育条件5℃冷藏，雄蛹在30d前后、雌蛹在80d左右H2O2含量出现快速改变；SOD和CAT活性一直呈下降趋势，但自30d开始CAT活性出现快速下降过程，5℃冷藏30d是蓖麻蚕蛹H2O2代谢的临界期生理时间，这与蚕蛹的30d冷藏阈值时间吻合。

猴结核病血清抗体检测方法的建立

目的目前活检猴感染结核病的检疫方法只有结核菌素试验。由于检测方法的单一性,结核菌素试验敏感性和特异性低,给灵长类结核病的管理带来困难。为此,开展了猴结核病血清抗体的检测方法。方法利用胞浆蛋白、结核菌素、Trehalose 6,6-’dimycolate(TDM)分别作为抗原建立猴结核病血清抗体ELISA检测方法,检测了28份自然感染血清和121份阴性血清,评价其应用价值。结果根据三种抗原对标本检测结果的敏感度和特异度,用受试者工作特性曲线(ROC)进行分析比较。胞浆蛋白、结核菌素、TDM三种抗原检测的敏感度分别为89.3%、75%与64.3%;特异度分别为93.4%、95.9%与88.4%。ROC曲线下面积都大于0.5(P<0.01)。结论表明三种抗原能用于抗猴结核病的ELISA检测,具有较好的准确性。其中,胞浆蛋白抗原的敏感性和特异性最高,是猴结核病血清抗体检测较好的一种抗原。

负氧离子对蚕的影响

采用ＡＳ系列负氧离子发生器，使蓖麻蚕、家蚕１～５龄幼虫生活在空气含负氧离子浓度＞５×１０４Ｎ／ｃｍ３的蚕室里，结果比对照蚕的食下率、消化率增大，生长发育极显著增快（Ｐ＜０．０１），饲料报酬增多，Ｈ２Ｏ２酶活力增强，蚕体强壮度增进，生命率显著增高（Ｐ＜０．０５），产茧量增加，可使养蚕增效。

蓖麻蚕染色体的核型研究

对蓖麻蚕雄蚕有丝分裂中期、减数分裂粗线期和雌蚕有丝分裂中期、减数分裂粗线期、双线期进行了染色体组型排列 ,并对不同时期染色体的相对长度进行了方差比较分析 ,结果发现 :不同时期染色体的核型基本一致 ,但也存在着明显差异的染色体。因此在考虑利用形态进行绢丝昆虫核型分析 ,以相对长度作为一个重要指标时 ,有必要将各个时期的核型相互参照。

雌雄蓖麻蚕减数分裂染色体的比较研究

以蓖麻蚕Philosamia cynthia riciniBoisduval为材料,全面比较了雌雄蓖麻蚕减数分裂前期I染色体的行为变化,从细胞学角度证明了雌蚕减数分裂染色体完全连锁,而雄蚕发生连锁交换;详细观察了雌蚕减数分裂I双线期过程中性染色体的动态变化,发现其存在着自身配对的过程,进而对其起源进化假说进行了探讨,认为其可能来源于一对同源常染色体片段的易位融合。

蓖麻蚕丝胶的溶解特性与组成结构关系的探讨

对蓖麻蚕丝胶的化学组成与聚集态结构进行了研究，认为蓖麻蚕茧丝中丝胶的难溶性与其丝胶包含着丰富的茧丝蜡和单宁物质有密切关系，而蓖麻蚕丝胶分子的聚集态结构的存在形式对其丝胶溶解性关系不大。

我国蓖麻蚕在应用研究方面的主要进展

蓖麻蚕原产印度。我国引进后通过驯化、选育种、开拓代用饲料、蚕种越冬、饲养技术、防病和茧丝利用等一系列的试验研究已取得了一批成果，并已应用于生产，取得了显著的经济效益和社会效益。蓖麻蚕已在我国安家落户，已成为次于桑蚕、柞蚕的第三大蚕。

广西现行蓖麻蚕品种茧层量性状稳定性的研究

对广西现行９个蓖麻蚕品种的产茧量性状进行了稳定性研究，结果表明，不同的蓖麻蚕品种其产茧量性状对环境的反应不一样。有两个品种属于对环境敏感的品种，其余７个品种属于对环境不敏感的稳定性品种。

蓖麻蚕营养成分的含量测定及食用安全性分析

为了解蓖麻蚕部分营养成分的含量和是否含有对人体有毒害的物质,以不同饲料种类育和不同发育时期的蚕为因素比较不同组合的成分含量,即将分别用蓖麻叶和木薯叶饲养所得到的熟蚕、预蛹和蛹进行鲜样检测,并对主要营养成分进行方差分析。用木薯叶饲养的蓖麻蚕,其各发育时期氨基酸含量高于用蓖麻叶饲养的蚕,且熟蚕>预蛹>蛹。不同饲料饲养蓖麻蚕的蛋白质和总糖含量的差异均极显著,脂肪含量差异不显著;蓖麻蚕在不同发育时期的蛋白质、脂肪和总糖含量差异均极显著。同种饲料饲养所得的蛹的无机元素含量最高,预蛹次之,熟蚕最低。用木薯叶饲养的蓖麻蚕,无机元素含量高于用蓖麻叶饲养的蓖麻蚕,所有样本的铅、砷、汞、镉4种元素含量均符合国家食品安全标准;用木薯叶饲养的蓖麻蚕,3种虫态鲜样的氢氰酸含量为0.5 mg/kg左右,低于我国农业行业标准对氰化物的含量的限值规定。本试验证实了食用蓖麻蚕的熟蚕、预蛹和蛹是安全的,也证明了蓖麻蚕不管哪种虫态,营养物质的含量是十分丰富的,可以针对各营养物质的需求来选择适宜的虫态进行烹饪。

结核病研究中的非人灵长类感染模型

许多种类的动物都被用于结核病的研究,每一种动物都有其优缺点,非人灵长类对结核分枝杆菌易感,通过气溶胶途径感染能发展成类似人类的疾病,包括肺的病变,疾病的不同进展过程,以及免疫特征。在体内和体外能表现T淋巴细胞的增殖反应,能通过接种BCG疫苗获得保护。因此,非人灵长类感染结核病的感染模型在研究结核病感染和免疫,探讨结核病感染过程中,结核菌是怎样摧毁机体的免疫系统;在评价肺结核病疫苗的有效性方面,是许多常规动物模型所不可替代的。然而,目前世界上对于结核病感染非人灵长类动物模型的研究报道较少,可利用的数据也缺乏,先进的免疫学技术还很少应用于结核病感染非人灵长类动物模型,严重限制了结核病的研究进展。因此,建立非人灵长类结核病模型,是目前人类结核病研究势在必行。

安徽省蓖麻蚕发展前景分析

根据安徽省蓖麻蚕养殖的历史、安徽省的气候、地理特征和蓖麻蚕试养结果,分析了安徽省发展蓖麻蚕的可行性,提出了蓖麻蚕在安徽省的发展建议。

蓖麻蚕的养殖及潜在毒素检测的研究进展

蓖麻蚕属于鳞翅目大蚕蛾科的一种昆虫,将蓖麻叶作为主要食物来源,以此实现自身各个阶段的生长发育。越来越多的地区和国家开始养殖蓖麻蚕。然而,蓖麻叶中含有多种有毒物质,蓖麻蚕是否对人体无害尚有待研究。简述了蓖麻蚕的养殖管理,对蓖麻蚕体内可能存在的蓖麻叶中的蓖麻碱、蓖麻毒蛋白、血细胞凝集素和变应原类毒素的检测方法进行简要概述,并对蓖麻蚕的有关食用方面进行了简单展望,以期为蓖麻蚕日后的食用安全性评估研究提供理论参考。

蓖麻蚕驯化休眠蛹内分泌的变化

蓖麻蚕驯化休眠蛹内分泌的变化刘廷印，李冬杰（河北省农林科学院蚕桑研究所承德０６７０００）曹梅讯，蒋容静（中国科学院上海昆虫研究所上海２０００２５）蓖麻蚕属纯多化性昆虫，无休眠期。在模拟“深秋环境”下，经“连代驯化”，可将其改造兼性休眠种。［１］休眠是...