5-羟色胺对瘤背石磺低氧胁迫的调节作用

【目的】分析外源5-羟色胺(5-HT)对低氧胁迫瘤背石磺(Onchidium reevesii)氧化应激水平和存活率的影响,探究5-HT在瘤背石磺应对低氧胁迫的调控作用。【方法】分别利用免疫组化和实时荧光定量PCR检测瘤背石磺体内5-HT含量和5-羟色胺受体基因(5-HTR)的相对表达量;采用酶联免疫吸附(ELISA)和实时荧光定量PCR检测瘤背石磺血淋巴中5-HT含量及各组织5-HTR基因的相对表达量。比较低氧胁迫期间(0、3、6、9、12和24 h)瘤背石磺存活率;通过注射5-HT及磷酸盐缓冲溶液(PBS)分析瘤背石磺在低氧胁迫下应激相关酶活性及表达量差异。【结果】5-HT及其受体在瘤背石磺肝胰腺、胃、性腺、肠道、腹足和肌肉中均有分布。受到低氧胁迫的影响,5-HTR基因在各组织中相对表达量也发生改变,随着低氧胁迫时间的延长,5-HTR基因高相对表达量组织从腹足、肠道、胃变为性腺组织。低氧胁迫下瘤背石磺血淋巴中5-HT产生响应,其含量先下降—上升—下降的变化趋势。注射5-HT使瘤背石磺在低氧胁迫时有更好的存活表现,在低氧刺激9 h后,注射5-HT组的瘤背石磺存活率高于注射PBS处理和低氧处理。用5-HT刺激瘤背石磺低氧胁迫9 h后发现,注射外源5-HT可降低瘤背石磺氧化应激水平,提高其抗氧化酶活性和表达量及总抗氧化能力。【结论】瘤背石磺受低氧胁迫后,其体内5-HT及其受体会产生响应,参与生理调节;注射外源5-HT可提高瘤背石磺的低氧耐受能力和存活率。

低氧和复氧对瘤背石磺肠道健康的影响

【目的】分析低氧和复氧对瘤背石磺肠道组织结构、能量代谢和微生物菌群的影响,探究其低氧抗逆和复氧恢复机制,为潮间带生物的抗逆及恢复机制研究提供理论参考。【方法】分别设常氧组(对照组)、低氧组和复氧组,在低氧胁迫4、8、12和24 h后复氧6、12、18、30和42 h,观察瘤背石磺肠道组织结构变化,测定乳酸含量、乳酸脱氢酶(LDH)和酸性磷酸酶(ACP)活性,同时分析肠道微生物群落变化情况。【结果】随着低氧胁迫时间的延长,瘤背石磺肠道组织中杯状细胞数量明显增加,至24 h时杯状细胞几乎遍布整个上皮层,复氧后逐渐恢复至正常水平。肠道组织的乳酸含量随低氧胁迫时间的延长呈上升趋势,LDH活性呈先升高后降低的变化趋势,分别在胁迫24和12h时达最高值,且与对照组间存在显著差异(P<0.05,下同),而ACP活性呈先升高后降低再升高的变化趋势,在8 h时降至最低值,且显著低于对照组;复氧后乳酸含量、LDH活性和ACP活性均有所恢复。肠道微生物菌群结构和菌落相对丰度因低氧条件而改变,门水平上优势菌群由对照组的厚壁菌门(Firmicutes)变化到变形杆菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)和弯曲杆菌门(Campylobacterota);属分类水平上优势菌落从气单胞菌属(Aeromonas)变化到弧菌属(Vibrio),复氧后厚壁菌门(Firmicutes)又恢复优势地位;虽然复氧后菌落的相对丰度呈回升状态,但总体丰度仍低于对照组。LEfSe分析结果显示,对照组与低氧8 h组有20个显著差异群落,且主要集中在内生单胞菌属(Endozoicomonas)和弧菌属等;对照组与复氧组有39个显著差异群落,主要集中在黄杆菌科(Flavobacteriaceae)和幽门螺杆菌科(Helicobacteraceae)等。【结论】低氧影响瘤背石磺肠道组织结构,导致肠道菌群发生改变,进而影响肠道的抗氧化功能和非特异性免疫功能。

珠母贝线粒体全基因组密码子偏好性分析

【目的】探究珠母贝(Pinctada margaritifera)线粒体全基因组密码子的使用偏好性,明确密码子偏好性的影响因素,为提高珠母贝外源基因表达效率及种质资源保护与遗传育种的研究提供理论依据。【方法】选取珠母贝线粒体基因组中大于300 bp的10条非重复编码序列,利用CodonW 1.4.2、Excel、SPSS 22.0等软件分析序列的密码子偏好性参数,以同义密码子相对使用度差值(△RSCU)> 0.08以及在高表达基因库中RSCU值>1.00为标准筛选最优密码子。【结果】珠母贝线粒体基因组密码子第1位GC(GC1)比例为35.2%~51.8%,平均值为45.6%;第2位GC(GC2)比例为35.8%~46.8%,平均值为40.0%;第3位GC(GC3)比例为37.7%~51.8%,平均值为44.1%;总GC比例为41.1%~47.5%,平均值为34.9%。密码子的适应指数(CAI)为0.119~0.181,平均值为0.151。密码子的偏好性指数(CBI)为-0.184~-0.04,平均值为-0.1048。最优密码子使用频率(FOP)为0.259~0.359,平均值为0.322。有效密码子数(ENC)为39.72~54.35,平均值为47.46。总平均亲水性Gravy)为0.216 6~1.038 5,平均值为0.7412。相对密码子使用度(RSCU)> 1.00的密码子数目为26个,主要以U(T)/G结尾。中性绘图、ENC-plot绘图和对应性分析均表明,珠母贝线粒体基因组密码子偏好更多受选择压力的影响。AGG、AUU、CCU、GAG、GCU、UGA等6个密码子为最优密码子。【结论】珠母贝线粒体基因组密码子偏好以U(T)/G结尾,筛选的6个最优密码子主要以U(T)/G结尾。珠母贝线粒体全基因组密码子的偏好性为弱偏好性,自然选择是偏好性形成的主要影响因素。

盐度胁迫对魁蚶稚贝血淋巴渗透压及鳃Na^+/K^+-ATP酶活力的影响

文章研究了盐度胁迫下魁蚶(Anadara broughtonii)稚贝(壳长25~35 mm)血淋巴渗透压和鳃Na+/K+-ATP酶活力的变化。结果显示,突变胁迫下,盐度20、25、35、40组的稚贝血淋巴渗透压均在48 h内显著降低或波动升高后趋于稳定,盐度15组则需96 h完成波动调整。以日变幅5渐变至高盐40过程中,稚贝血淋巴渗透压在48 h内趋于稳定;低盐15组仅需72 h完成渗透压调节,调整时间显著小于突变组。盐度突降胁迫下,各处理组稚贝鳃Na+/K+-ATP酶活力12 h后显著升高,24 h分别达到最大值,随后快速回落并稳定在高于对照组水平;盐度骤升胁迫下,鳃ATP酶活力波动降低,在12~24 h达到最小值后稳定在低于对照组水平。低盐(15)和高盐(40)渐变组的鳃ATP酶活力变幅均小于突变组。盐度胁迫下鳃Na+/K+-ATP酶活力的响应方式不同,即低盐胁迫时活力增强,高盐胁迫时活力降低。采用盐度渐变的驯化处理更有利于魁蚶稚贝应对盐度胁迫。

几种微藻对珠母贝面盘幼虫生长和存活的影响

研究了不同浓度的湛江等鞭金藻(Isochrysis zhanjiangensisHu&Liu)、亚心形扁藻[Platymonas subcordiformis(Wille)Hazen]、小球藻(Chlorellasp.)以及这3种微藻以一定的比例混合后(简称混合藻)对珠母贝面盘幼虫生长和存活的影响.结果表明:幼虫对3种微藻都能摄食,但4种饵料相比,以湛江等鞭金藻和混合藻的饵料效果为好,亚心形扁藻在面盘幼虫发育到93μm时可以投喂,小球藻饵料效果较差,不宜单独作为面盘幼虫的饵料;湛江等鞭金藻、亚心形扁藻和混合藻的浓度对面盘幼虫生长和存活都有显著影响,小球藻对其没有显著的影响.湛江等鞭金藻和混合藻适宜的投喂浓度分别为1 000-1 500个/?3和1 500-2 000个/?3,在适宜浓度下,湛江等鞭金藻组面盘幼虫最大生长速度、存活率和壳初率以及幼虫进入壳初的时间分别为5.663μm/d、69.34%、63.68%、6d,混合藻组为6.28μm/d、69.46%、54.49%、5-6 d.

墨西哥湾扇贝稚贝盐度适应性的研究

在室内控制条件下，观察不同海水盐度对墨西哥湾扇贝（Argopecten irradians concentricus Say）稚贝存活及生长的影响，并将168h50％死亡的盐度作为适宜生存临界盐度，将增长率为最佳增长率30％时所对应的盐度作为适宜生长临界盐度。结果表明：在稚贝壳高4．38mm±0．31mm，水温25．4～27．8℃，pH值7．8～8．2下，墨西哥湾扇贝稚贝适宜生存盐度为23．6～35．7，最适生存盐度为26．0～31．3；适宜生长盐度为23．9～35．8，最适生长盐度为28．7～31．3。在盐度变化超出最适范围时，、墨西哥湾扇贝稚贝对低盐更为敏感，高盐比低盐对稚贝存活、生长、增重的影响小。当盐度为28．7时，墨西哥湾扇贝稚贝具有最高的相对存活率（100％）、壳高日增长率（0．1162mm·d^-1）及体重日增长率（1．95mg·d^-1）。当盐度在最适范围之外升高或降低，稚贝的存活率、壳高及体重日增长率也随着降低。

盐度与pH对长肋日月贝幼虫存活及生长的影响

【目的】探讨长肋日月贝幼虫发育的适宜环境因子,为其规模化繁育及种质资源保护提供参考依据。【方法】分别进行不同海水盐度和p H对长肋日月贝直线铰合幼虫存活及生长的影响试验,采用两点法与回归分析法进行长肋明贝幼虫的生存和生长适宜盐度及生存和生长适宜p H界定。【结果】盐度与p H对长肋日月贝直线铰合幼虫的存活及生长有显著影响（P〈0.05）。长肋日月贝直线铰合幼虫的生存适宜盐度为23.20‰～38.02‰,最适盐度为25.00‰～35.00‰;生长适宜盐度为22.53‰～37.99‰,最适盐度为25.00‰～35.00‰。长肋日月贝直线铰合幼虫的生存适宜p H6.6～8.8,最适p H 7.0～8.5;生长适宜p H 6.3～8.6,最适p H 7.5～8.5。【结论】长肋日月贝直线铰合幼虫耐低盐能力较弱,其育苗场选址以盐度变化幅度在25.00‰～35.00‰的沿岸为宜,尽量将盐度维持在其存活及生长最适范围内,并防止育苗期间海水盐度与p H骤降。

长肋日月贝个体发生观察及人工育苗初步试验

首次报道了长肋日月贝(Amusium pleuronectes)的诱导产卵及幼虫、稚贝培育。用阴干-流水刺激法,成功诱导亲贝产卵、排精。对胚胎和幼虫发生进行了观察。水温23.0～25.0℃,经诱导产卵的受精卵20h可发育至D形幼虫。水温22.0～24.0℃时,D形幼虫经11d培育到眼点幼虫期。投放附着基后,眼点幼虫在10d内附着完毕。水温18.0～24.0℃时,稚贝经30d培育平均壳长达(2.0±0.18)mm。此试验共培育壳长(2.93±1.15)mm稚贝49.6万粒。

pH和氨氮对毛蚶稚贝生长与存活影响的初步研究

采用实验生态学方法,研究了pH和氨氮对毛蚶稚贝生长和存活的影响。结果表明：毛蚶稚贝生存的适宜pH范围为7.5--8.5,pH为8.0时生长及存活最好;氨氮浓度越高,毛蚶存活率越低;毛蚶稚贝对氨氮具有较高的耐受性,在实验条件下,毛蚶稚贝对氨氮24,48,72,96h的TLm分别为96.33,74.16,43.63,20.36mg/L,安全浓度为2.04mg/L。

大连獐子岛海域虾夷扇贝养殖容量

现场测定了獐子岛海域的叶绿素a浓度、初级生产力的季节性变化和养殖虾夷扇贝的种群结构；采用生物沉积法，测定了不同规格的虾夷扇贝的滤水率和虾夷扇贝的基本生物学特性。调查结果显示，叶绿素浓度在1．23～2．85mg·m^-3范围内，均值为（1．78±0．57）mg·m^-3；初级生产力的平均值为（76．6±41．9）mgC·m^-2·d^-1，虾夷扇贝单位个体的滤水率为（0．55±0．25）L·h^-1。结合虾夷扇贝的年产量、海域面积和有关的水文状况等数据，计算了食物限制性指标的数值，摄食压力和调节比率在0．05和1．0之间，而滤水效率小于0．05。结果显示，由于该海域的叶绿素浓度和初级生产力水平较低，海水流速大，因此，水交换带来的悬浮颗粒物为主要食物来源。目前的虾夷扇贝的养殖量（32亿粒）接近生态容量，如果开展筏式养殖，利用整个海域的水体，养殖量增大20倍的空间并达到养殖容量，预计年产量将达到256亿粒。

管角螺稚贝对亚硝酸盐耐受力研究

水温29℃时研究了管角螺(Hem ifusus tuba)稚贝[壳高(1.22±0.14)mm]在不同盐度和pH下对亚硝酸盐毒性的耐受力。试验结果表明,pH和盐度越低,亚硝酸盐对稚贝的毒害作用越大。水体pH为6.7、7.3、8.0和8.8时,亚硝酸盐对管角螺稚贝的96 h半数致死质量浓度(LC50)(95%可信区间)分别为188 mg.L-1(167～213 m.gL-1)、213 m.gL-1(195～231 m.gL-1)、254 m.gL-1(231～271 m.gL-1)和304 m.gL-1(284～321 m.gL-1),相对应的安全质量浓度(SC)为18.8 mg.L-1、21.3 m.gL-1、25.4 mg.L-1和30.4 m.gL-1,pH8.8时亚硝酸盐对稚贝的SC是pH 6.7时的1.6倍;盐度在16、19、23和28时,亚硝酸盐对管角螺稚贝的96 hLC50(95%可信区间)分别为151 m.gL-1(138～178 m.gL-1)、171 mg.L-1(159～192 mg.L-1)、265 mg.L-1(246～282 m.gL-1)和296 m.gL-1(278～323 m.gL-1),相对应的SC分别为15.1 m.gL-1、17.1 m.gL-1、26.5mg.L-1和29.6 m.gL-1,盐度28时亚硝酸盐对稚贝的SC是盐度16时的近2倍。

施氏獭蛤稚贝对高温和干露的耐受性研究

针对南方沿海夏季高温对贝类种苗存活的影响,研究了北部湾海域施氏獭蛤自然群体人工繁育的稚贝对高温和干露的耐受性,以期为高温期稚贝培育和运输提供参考。试验结果表明：（1）施氏獭蛤稚贝的成活率在水温30~35℃时,存在显著的温度效应,随温度升高,稚贝存活率快速下降,组间差异显著（P〈0.05）,高温敏感起始点为31℃,高起始致死温度为31.87℃,温度为33、34、35℃时,100%致死的时间分别为6d、4d和2d,7d后,稚贝不再死亡;（2）无沙干露组各温度维持100%存活的最长时间分别为20℃组18h,30℃组9h,10℃组6h,有沙干露组只有20℃组在15h内可维持100%存活,30℃组和10℃组在6h内已出现死亡。研究结果表明,无沙干露和20℃较适合稚贝的长途干露运输。研究结果为施氏獭蛤养殖海域的选取、稚贝的长途运输提供科学依据考。

中国仙女蛤人工育苗试验

2009年在福建平潭进行了2批次中华仙女蛤人工育苗试验。结果表明,亲贝性腺发育成熟程度与催产方法是影响中国仙女蛤亲贝催产成功率和排放率高低的主要因素;在2批亲贝的平均鲜出肉率分别为(31.6±2.0)%和(32.8±2.3)%的前提下,采用阴干、碘钨灯照射提高亲贝体温、流水刺激相结合的物理综合刺激方法可有效地催产中国仙女蛤并培育出健康苗种。但中国仙女蛤亲贝排精产卵的个数比例较小,即亲贝的排放率较低,2批次育苗的排放率分别仅为16.7%和26.7%。2批次共培育出平均壳长为2.87±0.14mm的中国仙女蛤苗种1 331×106cfu。

栉江珧亲贝室内升温促熟培育技术的研究

研究了栉江珧种贝在繁殖期之前提早入池培育,通过逐渐升温和强化营养等技术措施,促使栉江珧种贝提早成熟产卵排精。实验证表明,可以根据室内培养期间的肥满度变化,来决定诱导产卵排精时间,当肥满度达到50%以上时,即可进行诱导产卵排精,其个体平均产卵量为800万粒。闭壳肌指数的变化情况跟肥满度变化情况正好相反,但不如肥满度明显。

诺氟沙星在淡水青虾体内药物代谢动力学研究

在(26±1)℃的水温条件下,青虾一次性肌肉注射25mg/kg诺氟沙星后,用反相高效液相色谱法测定青虾血淋巴和肌肉组织中诺氟沙星含量。青虾血淋巴药一时曲线和肌肉药一时曲线均可以用二室开放模型来描述,诺氟沙星在青虾血淋巴液中的主要药动学参数为:分布相半衰期t1/2α为1.66h,消除相半衰期t1/2β为1.69h,达峰时间T(Peak)为1.82h,峰浓度C(max)为6.0081μg/mL,曲下面积AUC为30.75μg·mL-1·h-1,吸收相半衰期t1/2ka为1.66h。肌肉中的主要药动学参数为:分布相半衰期t1/2α为0.08h,消除相半衰期t1/2β为4.42h,达峰时间T(Peak)为0.03h,峰浓度C(max)为16.72μg/mL,曲下面积AUC为12.34μg·mL-1·h-1,吸收相半衰期t1/2ka为0.08h。结果表明青虾肌注诺氟沙星后,能比较迅速的被吸收,并且在组织中维持较高的药物浓度。

手术对马氏珠母贝生化指标的影响

采用全自动生化分析仪,测定插核手术前后马氏珠母贝外套膜外腔液和血液生化指标变化。结果显示:马氏珠母贝外腔液和血液中均不含谷丙转氨酶(ALT)、白蛋白(ALB)、直接胆红素(D-BIL)、尿酸(UA)、载脂蛋白A(APOA)、载脂蛋白B(APOB)和Cu,血液中还不含碱性磷酸酶(ALP);术前外腔液和血液各项指标相比,谷草转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、球蛋白(GLB)、尿素氮(BUN)、葡萄糖(GLU)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、肌酸激酶(CK)、Ca、P、Mg、K、Na、Cl含量相近,无显著性差异(P>0.05),其余14项指标均有显著性差异(P<0.05);术后,除肌酐(Cr)、总胆红素(T-BIL)、间接胆红素(I-BIL)、BUN、GLU、HDL-C、LDL-C、Ca、Mg、Na、Cl外,其余17项指标均存在显著差异性(P<0.05)。经插核手术后,外套膜外腔液中除T-BIL、I-BIL、BUN、HDL-C、LDL-C、Ca、Mg、Na、Cl无显著变化外,其余19项指标均发生显著性变化,ALP、LDH、α-羟丁基酸脱氢酶(α-HBDH)、Zn显著升高(P<0.05),其余15项显著降低(P<0.05);血液中BUN、CK、aLpa、Zn、Ca、Mg、Na、Cl无显著变化,GLU、T-BIL、I-BIL显著升高(P<0.05),其余13项指标显著降低(P<0.05)。外套膜组织中ALP、Zn和Co各值均显著大于术前(P<0.05),Mg和Cu无明显变化。

舟山近海紫贻贝生物学性状初步研究

对274只紫贻贝的壳长、壳宽、壳高、体重、软组织湿重、软组织干重等进行了测量分析,结果表明:紫贻贝壳长与壳重关系为W=0.368 61L2.63529,壳长与软组织湿重的关系为WW=0.206 3L2.72 023,壳长与软组织干重的关系为DW=0.0363L2.69236,壳长与壳宽关系为SW=0.047 91+0.371 05L,壳长与壳高关系为H=0.378 37+0.454 44L,软组织含水率为WP=83.33034%±2.486 59%;雌雄群体在壳长、壳宽、壳高、体重等指标上无显著性差异。

不同地理种群栉孔扇贝营养成分的比较分析

[目的]分析和评价辽宁、山东、江苏、广东4个不同地理种群栉孔扇贝的营养成分。[方法]用常规方法分析其软体部一般营养成分 用氨基酸分析仪分析氨基酸组成。[结果]蛋白质含量以山东种群最高 粗脂肪和灰分以辽宁种群最高 水分含量以广东种群最高。氨基酸的组成非常全面,各地理种群栉孔扇贝干物质中氨基酸总量由大到小的变化顺序为山东（761.9 mg/g）〉广东（755.6 mg/g）〉江苏（752.1 mg/g）〉辽宁（741.1 mg/g） EAA/TAA比率在36.15%~37.64% 呈味氨基酸的含量较高,变化范围为306.9~312.6 mg/g。钾、磷、钙、镁、铁等元素的含量丰富。[结论]不同地理种群的栉孔扇贝一般营养成分、氨基酸及矿物元素含量虽存在一定差异,但与其他一些双壳贝类相比,栉孔扇贝是高蛋白、氨基酸和矿物元素含量较丰富的海洋食品。

长牡蛎养殖技术及常见问题

介绍了长牡蛎养殖的主要技术环节,总结了其养殖中的常见问题及解决方法,以期对于指导海水贝类养殖健康发展具有重要意义。