一株碱性果胶酶高产细菌的分离、系统发育分析和产酶条件的初步优化

从腐烂的苹果表皮筛选到一株碱性果胶酶的高产菌株,命名为WSHB04-02.分离菌株为革兰氏阳性细菌,有芽孢,菌落颜色为乳白色.分离菌株WSHB04-02的16SrDNA全序列分析表明,该菌株与Bacillussubtilus具有99%的相似性,并与其他13株产碱性果胶酶菌株的16SrDNA结果进行同源性分析,并构建系统发育树.发现菌株WSHB04-02在不含果胶类物质与Mg2+的培养基上能高产碱性果胶酶,在优化的培养条件下,碱性果胶酶的酶活达到34U/mL,在国内还未见报道.

果胶酶高产菌的筛选及发酵条件的优化

采用平板分离法从腐烂的大枣中筛选出果胶酶的高产菌株,通过L16(45)正交试验对该菌种的深层液体发酵条件进行优化.结果表明:该菌种深层液体发酵最适的发酵条件为葡萄糖添加量1%,蛋白胨0.5%,吐温-60添加量0.03%,发酵培养基初始pH值4.5,发酵温度40℃,在此条件下菌株的产酶能力可以达到10758U·mL-1.

果胶酶G5512菌株深层液体发酵中试及提取工艺研究

以炭黑曲霉(Aspergilluscarbonarius)AS3.396的高产果胶酶突变株G5512为生产菌,在500L发酵罐中进行深层液体发酵中试。结果表明,在发酵过程中分别进行补料和调节pH,能大幅度提高酶活性;同时进行补料和调节pH,以高酯果胶为底物时发酵液最高酶活性可达1248.17U/mL,以低酯果胶为底物时达2235.75U/mL,分别较出发菌株提高了约2倍和11倍。通过试验,还确定了从发酵液中分离提取果胶酶的最佳工艺流程:发酵酶液→超滤→酒精沉淀→真空干燥,其酶活性回收率在以高酯果胶为底物时达到89.3%,以低酯果胶为底物时为80.3%。

螺孢菌ZG9901的筛选及其产碱性果胶酶发酵条件研究

用筛选培养基从芦苇土壤中筛选到 7株碱性果胶酶产生菌株 ,经初筛和复筛得到产酶活性较高的一株菌株ZG990 1,初步鉴定为螺孢菌属Spirillosporaspp .最适摇瓶产酶条件是 :果胶 2 0g/L ,乳糖 2 0g/L ,蛋白胨 3g/L ,酵母膏 4g/L ,KH2 PO4 1g/L ,MgSO4 ·7H2 O 0 .0 4g/L ,MgCl2 0 .2g/L ,pH 9.0 ,32℃培养 36h达到产酶高峰 .图 7表 5参

嗜盐嗜碱菌Alkalibacteriumsp.F26产碱性果胶酶发酵条件的优化

对Alkalibacteriumsp.F26发酵产碱性果胶酶的培养基和培养条件进行了优化.考察了碳源、氮源、无机盐、表面活性剂及起始pH、发酵时间、温度等发酵条件的影响.经单因素和响应面分析试验得到适宜的发酵培养基为(组分g/dL):葡萄糖0.95,蛋白胨1,NaCl 6.3,MgSO4.7H2O0.02,K2HPO4.3H2O 0.1,NaCO31,吐温-80 1;培养条件为:250 mL三角瓶装液量25 mL,35℃,起始pH值11.25,培养24 h.在此优化条件下培养,酶活达1 015 U/mL.

果胶酶高产菌种的紫外诱变选育及其培养条件的响应面法优化

以果胶酶产生菌黑曲霉EIM6为出发菌株,初始果胶酶活为14 539 U/mL,经紫外诱变反复处理,摇瓶复筛和遗传稳定性试验,最终获得一株果胶酶高产菌株EIMU2。EIMU2菌株的形态特征发生了明显的改变,相较于原出发菌株EIM6,孢子色泽更黑,孢子团也较出发菌株大,菌丝与孢子上凝结有更多的液珠。复筛后EIMU2酶活为32 161 U/mL,较原出发菌株提高了1.212倍。进一步通过响应面法对EIMU2菌株的液体发酵培养条件进行优化。优化后的培养条件为甜菜渣1.83%,花生饼粉1.69%,(NH_4)_2SO_4 0.5%,K_2HPO_4 0.3%,CaCO_3 0.2%,MgSO_4 0.15%(w/v),接种量6%(v/v),装液量21.36 mL。优化的突变菌株产酶活性进一步提高至98 794.3 U/mL,提高了2.07倍。

高大毛霉制取果胶酶发酵条件实验

对高大毛霉(Mucor mucedo)制取果胶酶的发酵条件和酶的基本性质进行了研究. 发酵培养基组成为(g/L):小麦麸皮50,葵盘粉30,(NH4)2SO4 30,KH2PO4 2.5,MgSO4-7H2O 0.5,NaNO3 0.2,FeSO4-7H2O 0.01. 在培养温度30oC、初始pH 5.7、转速240 r/min条件下摇瓶培养3 d,酶活力达到275 U/ml. 该酶最适pH为5.0,最适作用温度为40oC,在pH为3.0-7.0范围内稳定.

黑曲霉产果胶酶特性的研究

果胶酶产生菌Ａｓ６．１０４系我所筛选而得优良菌株，本论文对该菌株产酶的特性，提取条件进行了研究。

微生物原果胶酶高产菌株的筛选及发酵特性的研究

从24种不同来源的样品中筛选得到一株编号为XZ3的原果胶酶高产菌株,其酶活达126.4U/ml。通过对菌落形态及孢子囊形态的观察,初步鉴定是曲霉属菌株。在不同发酵时间内测定发酵液中还原糖、pH、湿菌体重、PPase及 PGase活性。结果表明:该菌株发酵过程中,发酵液中的还原糖含量在菌体生长初期升高很快,在对数生长期又迅速下降;发酵液的pH保持恒定;菌体产酶与菌体生长几乎同步且PPase与PGase活性的变化规律一致,比值在一定范围内保持恒定。

果胶酶的分离提纯及某些性质研究

本文报导了一种制备高纯度果胶酶的方法,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测得其分子量为32000,用等电聚焦电泳法测得其等电点为pH8.0～8.2,用圆二色谱测得此酶呈无规则卷曲构象。

果胶酶对山楂果酒酿造过程中甲醇及主要杂醇油含量的影响

通过考察加酶时间和果胶酶用量,研究了果胶酶对山楂果酒酿造过程中甲醇及主要杂醇油含量的影响.结果表明:果胶酶对山楂果酒发酵过程中总糖及酒精度的变化没有显著影响;经果胶酶处理发酵的山楂果酒总酸高于未经果胶酶处理的山楂果酒;发酵前未经果胶酶处理的山楂酒样发酵过程中果胶含量呈先降低后稳定的变化趋势,但果胶含量仍在2 g/L以上;发酵前山楂酒样经果胶酶处理后甲醇含量增高,发酵后增加不明显,但其含量是未经果胶酶处理山楂酒样(对照样)的5.7倍,不同时间进行果胶酶处理对主要杂醇油含量影响不明显;发酵前和发酵后添加果胶酶,甲醇含量随着其用量的增加而增加,当其用量大于0.1 g/L时,甲醇含量增加缓慢,发酵后进行添加果胶酶对山楂果酒中主要杂醇油含量影响不显著.

超声波辅助提取脐橙皮果胶的研究

采用超声波辅助法提取脐橙皮果胶,通过单因素实验研究了影响提取脐橙皮果胶的主要因素及水平范围,通过正交实验确定了其最佳提取条件为:料液比(g∶mL)为1∶20,pH为2.0,超声波浸提温度为70℃,浸提时间为50min。在此条件下提取脐橙皮果胶,得率可达到21.30%。与传统的直接加热提取法相比,超声波辅助提取法是一种节能、省时、高效的提取脐橙皮果胶的好方法。

棉织物染整中不同果胶酶精练效果的比较研究

通过试验得出果胶酶应用的较佳工艺条件:酸性果胶酶A pH值3～5,温度30～60℃;碱性果胶酶B pH值7～9,温度40～60℃.在此工艺条件下比较2种酶的精练效果,并测定2种果胶酶酶活、SDS-PAGE电泳等,分析研究了它们的精练特点.结果表明:碱性果胶酶B分子质量小,酶的专一性更强,对棉纤维果胶物质去除具有较好的效果[碱性果胶酶B 0.025%(owf),JFC 0.2 g/L,果胶去除率>70%].

果胶酶高产菌株的紫外线及硫酸二乙酯的诱变育种

以HDYM-02为出发菌株,用紫外线及硫酸二乙酯进行诱变,从大量突变株中进行筛选,选育出2株产果胶酶性质稳定且酶活明显提高的突变株UV-21和DES-1,株相比其产酶期提前,前者在24 h时的酶活力为出发菌株的1.6倍,后者在12 h的酶活力为出发菌株的1.44倍。

果胶酶产生菌的选育

从自然界采样分离出 ７ 株果胶酶产生菌，并通过固态发酵培养，考察其产酶高低，选出一株酶活较高菌株，酶活为 ８０８ ｕ／ｍ ｌ。经初步鉴定为黑曲霉。

芽孢杆菌发酵产碱性果胶酶温度控制策略

采用自行筛选获得一株产碱性果胶酶芽孢杆菌WSH03-09,在小型发酵罐中研究了不同温度对碱性果胶酶分批发酵的影响.结果表明,在恒定39℃条件下,可获得最高酶活5.39u/mL,各温度条件下的菌体干重相差不多,最终均能达11.5g/L左右;在发酵前期,控制温度41℃时最有利于菌体的生长,而在产物合成期,控制37℃有利于获得较高的产物合成比速.在此基础上,提出分阶段温度控制策略,采用此温度控制策略进行碱性果胶酶的发酵,碱性果胶酶酶活达5.99u/mL,比采用单一温度下的最大值提高了11%,其它各项指标也有较大提高.

果胶酶中两种类型聚半乳糖醛酸酶的性质

比较了果胶酶中两种类型的聚半乳糖醛酸酶的性质。结果表明，它们活性的最适条件、酶的稳定性、某些金属离子对活性的影响、动力学数据、分子量及氨基酸组成等均有明显差异，但它们的活性相似，且都是酸性蛋白质。

果胶酶高产菌株Aspergillus niger3502的选育

采用紫外线和微波处理黑曲霉 (Aspergillusniger)孢子 ,获得 1株比出发菌株果胶酶产生能力提高 2倍的突变株 35 0 2 ;在用正交试验优选而得的最佳固体发酵条件下 ,酶活力达 2

碱性果胶酶的研制

本文对萝卜软腐欧文氏菌（ＥｒｗｉｎｉａＣａｒｏｔｏｖｏｒａ）生产碱性果胶酶条件进行了研究。结果表明：该菌株的最佳产酶及生长的培养基组成为：果胶０．３０％，谷氨酸钠０．９０％，硫酸铱０．１０％，磷酸二氢钾０．３０％，磷酸氢二钠０．１０％，硫酸镁０．０１０％及氯化钙０．０１０％。其最适发酵（摇瓶）条件为：起始酸度ｐＨ７．２～７．６，温度２８℃，摇瓶转速１８０ｒｐｍ，接种量５％（ｖ／ｖ）及放罐周期１０小时。

果胶酶产生菌原生质体高能电子诱变效应

目前果胶酶菌种选育多采用菌体诱变,本实验采用菌体的原生质体进行诱变,菌体原生质体经高能电子辐照(最适剂量为0.05×10~6rad),筛选出变异株16—1—1,此变异株生长发育旺盛,产酶性能显著优于亲株。经红外光谱分析,菌体孢子主吸收区为1125—1030cm^(-1),DNA分子主吸收区为1650—800cm^(-1),两者主吸收区极为相近,亲株原生质体经高能电子辐照后所产生的诱变株其红外吸收光谱表现出了某些峰值上的差异,DNA分子和果胶酶产生菌菌体孢子对红外吸收变化及诱变的相关性还有待进一步的研究。