反相高效液相色谱法制备HMC毒素纯品

本文采用反相高效液相色谱纯化制备了从玉米小斑病病菌Ｃ小种（ＨｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｒｉｕｍｍａｙｄｉｓＲａｃｅＣ）分离出来的毒素ＴｏｘｉｎＩ，经ＮＭＲ的结构分析证实此制备物纯度较高，达到结构分析要求。用氯仿提取含有ＨＭＣ的毒素培养滤液，经过多次ＴＬＣ展层层析（ＣＨＣｌ_３：ＭｅＯＨ＝９：１），刮取具有侵染活性的部分（Ｒ_ｆ＝０．４）溶解在小体积甲醇中备用。色谱柱为Ｗａｔｅｒｓ（制备型２５０ｍｍ×１０ｍｍ）填料为ＹＷＧ－Ｃ１８反相柱，粒度１０ｕｍ，流动相选用甲醇：水５５：４５，流速为０．８ｍｌ／ｍｉｎ，检测波长２７２ｎｍ，进样量每次１００ｕｌ，当主要峰出现时，收集合并冻干保存（保留时间９.５ｍｉｎ）。