基于HPLC⁃DAD指纹图谱结合化学模式识别的红糖产地溯源方法

红糖作为一种功能食品,近年来需求量不断增长,然而市场上红糖的品质却良莠不齐,且缺乏科学的鉴别和评估方法来确保红糖的品质。该研究以我国5个红糖主产地(广西、广东、云南、贵州和香港地区)的55批红糖作为研究对象,通过构建高效液相色谱⁃二极管阵列检测器(high⁃performance liquid chromatography⁃diode array detector,HPLC⁃DAD)指纹图谱并结合共有模式法、相似度评价法和化学计量学法,建立一种能够准确追溯红糖产地的方法。研究发现,不同产地的红糖既有特有的HPLC⁃DAD指纹图谱也有共有的HPLC⁃DAD指纹图谱,特有的HPLC⁃DAD指纹图谱显示产地特有峰的保留时间具有明显的地域特性,与产地区分密切相关。产地共有指纹图谱共标定出9个共有峰,指纹图谱的相似度为0.473~0.915,表明虽然存在共有峰但共有峰峰面积存在明显差异(例如广东、广西、云南、贵州和香港地区的S2号共有峰的平均相对峰面积分别为47.592%、26.873%、814.853%、8.683%和3.111%)。共有峰峰面积的聚类热图显示不同地区的样品存在明显差异。此外,共有峰峰面积的主成分分析发现前3个主成分对产地区分的贡献率分别为59.9%、17.1%和11.6%,累计贡献率为88.6%,可以作为鉴别红糖产地的特征性指标。

HPLC-MS/MS测定食糖中4种合成着色剂

目的:建立高效液相色谱-串联质谱法(High Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry,HPLC-MS/MS)测定食糖中4种着色剂的分析方法。方法:样品经80%甲醇超声提取,再用PWA-2固相萃取柱净化后,经VP-ODS C_(18)柱(2.0 mm×150 mm,5.0μm)分离,以乙酸铵和甲醇为流动相,梯度洗脱,用HPLC-MS/MS检测。结果:4种化合物在考察范围内线性良好,相关系数均大于0.999;加标回收率在85.36%~102.30%,RSD为0.42%~2.72%;检出限为2~5μg·kg^(-1)。结论:该方法灵敏度高、分辨率高、分析速度快,适用于食糖中合成着色剂的快速筛查和定量分析。

高效液相色谱-串联质谱法测定白砂糖中的氯酸盐和高氯酸盐

目的:建立高效液相色谱-串联质谱法测定白砂糖中氯酸盐和高氯酸盐的方法。方法:样品经乙腈水振荡超声提取,离心后过膜。用Acclaim Trinity P1色谱柱对化合物进行分离,以乙腈和10 mmol·L^(-1)甲酸铵溶液梯度洗脱,在电喷雾负离子选择反应监测模式下检测,用同位素内标法定量。结果:氯酸盐在1.0~50.0 ng·mL^(-1)线性关系良好,相关系数为0.999 5;高氯酸盐在0.5~25.0 ng·mL^(-1)线性关系良好,相关系数为0.999 9。氯酸盐的检出限为0.61 mg·kg^(-1),回收率为89.0%~110.0%,精密度为0.54%~1.21%。高氯酸盐的检出限为0.38 mg·kg^(-1),回收率为86.0%~96.6%,精密度为0.36%~1.02%。结论:该方法的前处理简单快捷,灵敏度高,准确性可靠,稳定性好,可为白砂糖安全检测提供技术手段。

芍花鲜花饼的研制与工艺优化

以可食用芍花、白砂糖、面粉等作为主要原料,研究芍花鲜花饼的制作并优化其制作工艺。研究芍花添加量、白砂糖添加量、糯米粉添加量对芍花鲜花饼馅料感官品质的影响,使用单因素试验和正交试验,得出馅料最优配比。将馅料配比固定,研究油酥皮中的玉米油添加量、烘烤温度、烘烤时间对芍花鲜花饼感官品质的影响。结果表明,优化后的芍花鲜花饼制作工艺配方为馅料中芍花9 g,糯米粉12 g,白砂糖20 g,油酥皮中的玉米油23 g,烘烤时间20 min,烘烤温度180℃。此工艺下,制作的芍花鲜花饼口感良好,芍花清香,饼皮有层次,外形圆整,口感软糯,甜度适中。

红糖和赤砂糖中蔗糖分的检测方法研究

本文选用3种颜色的红糖/赤砂糖作为试验样本,通过研究不同的碱式醋酸铅粉加入量和称样量对蔗糖分的影响,以解决溶液颜色太深导致旋光读数不稳定的问题,从而提高蔗糖分检测结果的准确性。试验结果表明,碱式醋酸铅粉加入量太多反而会产生“铅误差”,减少称样量能较好解决此问题。

液相色谱-质谱联用技术测定无糖食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和乳糖

建立了无糖食品中葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的高效液相色谱-串联四极杆质谱联用测定方法。本方法以水提取样品,以Waters Carbohydrate Analysis柱(300mm×3.9mm,10μm)分离,流动相为水-乙腈(15∶85,V/V),电喷雾负离子MRM模式检测。方法的检出限为0.1g/kg;线性范围为2.5～125.0mg/L;加标回收率为86.2%～97.7%;相对标准偏差为3.1%～8.7%。

HPLC法测定盐酸催化甘蔗渣水解产物中的糖组分

建立高效液相色谱法测定甘蔗渣盐酸催化水解液中的糖组分。采用Aminex HPX-87P色谱柱(300mm×7.8 mm,粒径9μm,交联率8%),以超纯水为流动相,流速为0.60 mL/min,柱温75℃,进样量10μL。以峰面积定量,结果表明:D-葡萄糖、D-木糖、D-半乳糖、L-阿拉伯糖分别在0.5000~5.000 mg/mL(R=0.9996),2.000~20.00 mg/mL (R=0.9999),0.0260~0.2600 mg/mL (R=0.9991),0.2000~2.000 mg/mL(R=0.9996)范围内有良好的线性关系,平均回收率(n=9)分别为99.05%、99.53%,98.50%、98.63%,重复性实验中,4种糖含量的RSD(n=5)分别为0.13%、0.05%、0.86%、0.46%。本试验方法效率高、重现性及回收率好,可有效应用于甘蔗渣盐酸水解液糖组分的检测。

蔗糖测定的紫外分光光度新方法研究及应用

方法基于在酸性条件下,蔗糖水解生成果糖和葡萄糖,果糖受热破坏后,其产物在285nm处有较大的紫外吸收。通过试验,确定了最佳条件,并建立了测定蔗糖的新紫外分光光度法;其线性范围为0.27～31.2μg/mL,摩尔吸光系数ε为9.63×103L·mol-1·cm-1。该法简单、快速,准确度高,用于甘蔗汁中蔗糖含量的测定,结果满意。对蔗糖水解的机理进行了初步探讨。

花果山野生蕨菜多糖和黄酮的提取及含量测定

以连云港花果山野生蕨菜干粉为原料,通过正交试验选择最佳提取条件,用分光光度法测定总黄酮和多糖的含量。结果表明:蕨菜中多糖提取的最优条件为蕨菜与水料液比1:20(g/mL)、提取温度90℃、提取时间1.5h、提取次数2次。新鲜蕨菜干粉中多糖含量为1.39%,三月枯蕨菜干粉中多糖含量为7.08%;提取蕨菜中黄酮类物质的最优条件为蕨菜与70%乙醇比1:10(g/mL)、提取温度90℃、提取时间2h、提取次数2次,测得新鲜蕨菜干粉中总黄酮含量为4.90%,三月枯蕨菜干粉中总黄酮含量为3.11%。

适用于食品工业中的蔗糖-葡萄糖双功能生物传感分析仪的研究

由固定化蔗糖转化酶(INV),葡萄糖变旋酶(MUT)及葡萄糖氧化酶(GOD)的复合酶膜组成的过氧化氢双电极系统,可同时测定样品中蔗糖和葡萄糖的含量,蔗糖电极的葡萄糖干扰用差分法消除。每次进样量25μl,响应时间30s,蔗糖在0～400mg/dl,葡萄糖在0～200mg/dl范围内具有良好的线性关系,连续测定20次蔗糖和葡萄糖的变异系统分别为1.13%和1.05%。蔗糖测定回收率为99.62%～100.97%,蔗糖酶膜使用寿命半个月。

蒽酮-硫酸法快速测定蔗糖的研究及应用

直接利用硫酸与水发生水合作用时释放的热量,使反应体系自行升温,达到充分显色,从而免去了水浴加热步骤,使操作更为简便,测定速度提高.通过实验确定了最佳条件,改进了传统的蒽酮-硫酸法,发展并提出了新的蒽酮-硫酸法.其线性范围为0.53～12.96μg/mL,摩尔吸光系数ε为1 98×104L/mol·cm.该法简单、快速,准确度高,用于甘蔗汁样品测定,结果满意.

薄层色谱法快速分析乳果糖

以硅胶G板为固定相,正丁醇-乙醇-水(体积比5:3:2)为流动相,研究并建立了乳果糖的薄层层析快速分析方法。经过上行展开,苯胺-二苯胺-磷酸显色,根据葡萄糖、半乳糖、果糖、乳糖、乳果糖各斑点的R_f值和各自的斑点颜色定性。运用飞点扫描仪扫描乳果糖斑点的峰面积,并依据建立的标准曲线计算酶反应液中的乳果糖含量。在所选择的实验条件下,乳果糖的检测限为2μg,在2～30μg范围内,其斑点的峰面积与检测量具有一定的正相关性。用定量添加标准品的方法研究薄层扫描的准确度,其相对标准偏差为3.41%。此方法设备简单、操作成本低,可以应用于实验室的初期研究阶段。

薄层色谱-苯酚-硫酸法分析大豆低聚糖中棉籽糖含量

目的:采用比色法建立一种适用于大豆低聚糖中棉籽糖快速检测的方法。方法:运用薄层层析技术分离单糖与低聚糖,展开剂为V(乙腈):V(冰乙酸):V(水)=6:3:2,显色剂为苯胺-二苯胺-磷酸,点样量为5μL,层析显色后,苯酚-硫酸法比色测定。结果:薄层层析可将大豆低聚糖中蔗糖、棉籽糖和水苏糖等组分分开,通过苯酚-硫酸法分析其中的棉籽糖,线性范围为20～80mg/mL(R2=0.9932),精密度RSD为1.56%,平均加样回收率为98.14%,RSD为3.99%。结论:以薄层层析-苯酚-硫酸法检测食品或大豆低聚糖中棉籽糖含量,测定结果与HPLC法对照,相对误差为3.22%,可用于大豆低聚糖中棉籽糖的检测。

高效液相色谱法同时测定绿原酸及其五种主要代谢产物

建立一种同时测定绿原酸、咖啡酸、3-羟基苯丙酸(3-hydroxyphenylpropionic acid,3-HPA)、p-香豆酸(p-coumaric acid,PA)、阿魏酸(ferulic acid,FA)和马尿酸(hippuric acid,HA)含量的高效液相色谱方法。色谱柱为美国Agilent EclipseXDB-C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇和1%的冰醋酸水溶液,梯度洗脱;检测波长为320nm和253nm;流速为1mL/min。六种酚酸物质在一定范围内有良好的线性关系,相关系数为0.9979～0.9999,平均回收率为86.84%～101.56%,相对标准偏差为1.15%～2.29%。结果表明该方法快速、准确、灵敏度高,可用于绿原酸及其代谢物的检测。

食品中低聚异麦芽糖高效液相色谱检测方法研究

针对乳制品、固体饮料、糖果、保健品等食品中添加的功能活性成分低聚异麦芽糖,包括异麦芽糖(IG2)、潘糖(P)、异麦芽三糖(IG3)、异麦芽四糖(IG4)的检测,建立了水和乙腈为流动相,梯度洗脱,氨基色谱柱分离,蒸发光散射检测器(evaporative light-scattering detector,ELSD)检测食品中添加的低聚异麦芽糖含量的高效液相色谱方法。异麦芽糖、潘糖、异麦芽三糖、异麦芽四糖的线性工作范围分别为0.1～0.45mg/mL、0.1～0.45mg/mL、0.2～0.65mg/mL、0.1～0.35mg/mL,线性相关系数R2分别为1、0.9999、0.9998、0.9999。对不同类型的食品,四种低聚异麦芽糖的回收率在98.0%～105.0%之间,方法准确度高。室内重复性变异系数一般都低于10%;除了含量低的异麦芽四糖,室间再现性变异系数一般都低于10%,说明方法的重复性和再现性良好。该方法简单、易于掌握,测定结果准确,适于复杂食品基质中低聚异麦芽糖含量的测定。

β-呋喃果糖苷酶法合成低聚乳果糖工艺优化

目的:确定β-呋喃果糖苷酶合成低聚乳果糖的最佳工艺条件。方法:以蔗糖和乳糖为底物,利用β-呋喃果糖苷酶粗酶液合成低聚乳果糖,通过单因素和Box-Behnken试验,对酶法合成工艺进行响应面分析,得到酶法合成低聚乳果糖的最佳工艺参数。结果:最佳工艺条件为反应时间22.77h、pH7.0、反应温度35.0℃、底物质量浓度20.0g/100mL、底物与酶的体积比1:1,低聚乳果糖含量为22.70%。结论:Box-Behnken结合响应面优化果糖苷酶法合成低聚乳果糖工艺,模型可靠,方法可行。

蔗果三糖标准样品的研制

根据GB/T15000-2008《标准样品工作导则》的要求,建立蔗果三糖标准样品的研制方法。采用P-2凝胶色谱法结合制备高效液相色谱法从低聚果糖产品中制备得到蔗果三糖,然后通过红外光谱、质谱、核磁共振谱(1HNMR、13CNMR、HMBC、NMQC、COSY)对样品的结构进行鉴定并对核磁信号进行归属。将样品分装成130瓶后,采用高效液相-蒸发光散射法进行均匀性和稳定性检验,通过对8家具有资质的实验室联合测定结果的数据分析,评定出定值结果和不确定度。结果表明:蔗果三糖标准样品的稳定性和均匀性良好,定值结果为99.87%,置信度为95%的不确定度是0.36%。研制出的蔗果三糖标准样品符合国家标准样品研制工作导则的技术要求,可用于有关蔗果三糖和低聚果糖产品的检测和质量控制。

离子色谱法测定蔗糖中的微量SO_2

建立了离子色谱测定蔗糖中微量亚硫酸根(SO_2)残留量的方法。选择体积分数为1%的甲醛为亚硫酸盐的稳定剂。在 IonPac AS11分析柱上以8．0 mmol/L 的 NaOH 为淋洗液,进行抑制电导检测。结果表明,亚硫酸盐的浓度与其峰面积在0．25～5．0 mg/L 范围内呈良好的线性关系,相关系数为0．9990,检出限为0．05mg/ L。回收率92．5%～95．0%,RSD＜3．3%(n=5),该法用于实际样品的分析,结果令人满意。

发酵生产中还原糖和葡萄糖检测指标的分析

采用还原糖测定法和葡萄糖酶电极测定法，对谷氨酸发酵生产中淀粉糖原料和发酵液中还原糖和葡萄糖含量进行了测定，研究了其变化特点和意义。结果表明，淀粉糖液中葡萄糖惩原糖比值变化从80％～94．2％；发酵过程中，谷氨酸生产菌首先消耗葡萄糖，发酵28h，葡萄糖含量接近0，而还原糖含量为1．0％；还原糖测定仪用于发酵后期还原糖测定，精密度（RSD％）为2．21，对发酵后期的精确控制具有一定的应用价值。

固相萃取-高效液相色谱法测定白砂糖中丙烯酰胺

建立了固相萃取-高效液相色谱法测定白砂糖中丙烯酰胺助剂残留的方法。采用Oasis HLB和Ac- cBond ODS-C_(18)固相萃取柱对样品进行净化,在Spherisorb NH_2柱上以乙腈-水(体积比为75:25)为流动相进行分离,流速0.8mL/min,柱温25℃,检测波长200nm,对白砂糖中丙烯酰胺助剂残留进行了测定。方法的线性范围为25～1000μg/L,线性相关系数为0.9992。方法的检出限为6μg/L,低、中、高3个浓度水平的加标回收率为90.2%～93.8%,相对标准偏差<5.5%。该法用于白砂糖中丙烯酰胺的测定,结果令人满意。