褪黑素通过SIRT3/SOD2途径改善高龄卵巢功能减退女性颗粒细胞线粒体功能和减轻氧化应激

目的研究褪黑素在体外培养中改善高龄卵巢功能减退女性颗粒细胞线粒体功能、减轻氧化应激状态的作用及可能机制。方法收集在2022年3月至6月期间在郑州大学第二附属医院生殖医学中心接受辅助生殖技术助孕患者取卵后废弃的卵泡液,提取壁层颗粒细胞,按患者年龄分为高龄组(年龄≥38岁,6例)和年轻对照组(年龄<35岁,6例)。使用透射电子显微镜观察颗粒细胞的线粒体超微结构,通过ATP检测试剂盒检测细胞内ATP,实时荧光定量PCR检测线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)拷贝数,JC-1荧光探针检测线粒体膜电位,MitoSOX?Red线粒体氧化物指示剂检测活性氧含量,Western blotting法检测SIRT3、SOD2的蛋白表达。将高龄组的颗粒细胞样本根据随机数字表法分为褪黑素处理组和空白对照组(各5例),检测在体外培养颗粒细胞时添加褪黑素1μmol/L后线粒体上述检测指标与空白对照组的差异。转染siRNA下调颗粒细胞内SIRT3,检测褪黑素添加前后上述检测指标并与阴性对照组比较。结果高龄组颗粒细胞的线粒体超微结构与年轻对照组相比存在明显差异,线粒体结构显示不清,线粒体嵴少见且不规律排列,ATP水平(P=0.012)、mtDNA拷贝数(P=0.005)和线粒体膜电位(P=0.009)显著低于年轻对照组,活性氧含量显著增加(P=0.003),SIRT3和SOD2水平显著降低(P<0.001和P=0.002),差异均有统计学意义。经褪黑素体外培养后,线粒体超微结构有所恢复,ATP水平(P<0.001)、mtDNA拷贝数(P=0.038)和线粒体膜电位(P=0.002)高于空白对照组,SIRT3和SOD2水平高于空白对照组(P=0.011和P=0.031),活性氧含量低于空白对照组(P<0.001),差异均有统计学意义。siRNA转染后的颗粒细胞SIRT3的表达显著下调(P<0.001)。经褪黑素处理后,细胞内ATP水平、mtDNA拷贝数和线粒体膜电位均低于未下调SIRT3的阴性对照组(P<0.001、P=0.001、P<0.001),活性氧含量高于阴性对照组(P<0.001),差异均有统计学意义。结论在体外培养中添加褪黑素可以改善高龄卵巢功能减退女性颗粒细胞的线粒体功能和氧化应激状态。褪黑素除了直接抗氧化作用,还可通过调节SIRT3和SOD2水平来降低活性氧含量。

卵巢储备功能正常患者应用PPOS与激动剂长方案的每取卵周期累积活产率比较

目的比较激动剂长方案和高孕激素状态下促排卵(progestin-primed ovarian stimulation,PPOS)方案在卵巢储备功能正常患者中的每取卵周期累积活产率。方法回顾性队列研究分析了2017年1月至2019年12月期间在同济大学附属上海市第一妇婴保健院生殖医学科接受体外受精/卵胞质内单精子注射(in vitro fertilization/intracytoplasmic sperm injection,IVF/ICSI)助孕的年龄小于40岁且卵巢储备正常(月经周期正常、卵泡刺激素<10 U/L、窦卵泡计数>5)的女性。主要结局指标为促排卵之日起18个月内的累积活产率。结果共995例患者纳入分析,其中使用PPOS方案509例(PPOS组),激动剂长方案486例(激动剂长方案组)。两组患者的基本特征以及临床和实验室指标基本相似,但PPOS组的不孕年限[3(2,4)年]较激动剂长方案组[3(2,5)年]更短(P=0.015)。激动剂长方案组中有372例(77%)进行了鲜胚移植,获得临床妊娠218例、活产197例。新鲜胚胎每移植周期临床妊娠率、持续妊娠率和活产率分别为58.6%(218/372)、54.0%(201/372)和53.0%(197/372),而PPOS组没有进行鲜胚移植。在研究期间,PPOS组共进行冻融胚胎移植(frozen-thawed embryo transfer,FET)662个周期,在激动剂长方案组中共进行257个FET周期。激动剂长方案组FET周期移植周期活产率为42.8%(110/257),显著高于PPOS组[31.1%(206/662),OR=0.727,95%CI:0.607~0.871,P<0.001]。PPOS组在所有FET周期中的胚胎种植率[29.2%(293/1004)]低于激动剂长方案组[34.5%(157/455),OR=0.846,95%CI:0.721~0.992,P=0.041]。在一个完整的IVF/ICSI周期(包括新鲜胚胎及随后所有冷冻胚胎)后,PPOS组在18个月随访期内的累积活产率[40.5%(206/509)]显著低于激动剂长方案组[63.2%(307/486),OR=0.641,95%CI:0.565~0.726,P<0.001]。与PPOS组相比,激动剂长方案组从促排卵到妊娠和活产的平均时间均显著缩短(均P<0.001)。在Kaplan-Meier分析中,激动剂长方案组累积持续妊娠达到活产率显著高于PPOS组(long rank检验,P<0.001)。Cox回归分析调整其他混杂因素后显示采用的刺激方案与累积活产率密切相关(OR=1.917,95%CI:1.152~3.190,P=0.012)。结论在卵巢储备正常的女性中,采用PPOS方案相比传统的激动剂长方案而言累积活产率更低,达妊娠/活产时间更长。

高龄妊娠对孕产妇心理及子代神经行为发育的影响及相关机制研究进展

随着生活方式、婚育观念及生育政策的变化,我国高龄孕妇比例快速攀升。高龄妊娠和高龄所致的母体压力状态是孕妇心理健康及其子代神经行为发育的独立危险因素。本文系统阐述了胶质细胞源性神经营养因子、下丘脑-垂体-肾上腺轴、5-羟色胺系统、催产素等影响高龄孕产妇心理及子代神经行为发育的作用机制及潜在干预手段,目前的干预手段主要包括人工补充剂、抗抑郁药物、体育锻炼、营养素补充等,但疗效有限且部分治疗措施有较高的不良反应发生风险,目前尚缺乏具有针对性的、系统的干预措施。未来研究中应进一步深入探究相关发病机制并提出更加安全有效的干预措施,保障高龄孕产妇心理健康及其子代的长期健康发展。

多囊卵巢综合征患者外周血PD-1、PD-L1表达水平及其与细胞因子相关性研究

目的探讨多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者外周血程序性细胞死亡蛋白1(programmed cell death protein 1,PD-1)和其配体PD-L1表达水平与细胞因子相关性。方法利用GEO数据库中GSE54248数据集筛选出PCOS中差异表达PD-1/PD-L1通路相关基因,对其进行GO和KEGG通路富集分析。采用病例对照研究,选取2022年1月至2023年6月期间在新疆医科大学第一附属医院生殖医学中心就诊的105例PCOS患者(记为PCOS组)和109例非PCOS患者(记为对照组)作为研究对象,利用QBPlex流式高通量多因子检测技术检测两组外周血PD-L1、PD-L2、PD-1和细胞因子表达水平。采用Pearson法进行相关性分析。结果PCOS组患者外周血中PD-1水平[2.890(0.020,4.540)ng/L]显著低于对照组[3.370(2.460,4.360)ng/L,P=0.008];PD-L1水平[9.820(8.860,10.880)ng/L]显著低于对照组[10.410(9.700,11.160)ng/L,P=0.001];PD-L2表达水平在两组间差异无统计学意义(P>0.05)。在GSE54248数据集筛选出26个差异表达基因,主要富集在PD-1/PD-L1通路、1型T辅助细胞(T helper cell 1,Th1)和2型T辅助细胞(T helper cell 2,Th2)分化、参与炎症反应的细胞因子的产生等通路。与对照组相比较,PCOS组患者外周血中白细胞介素(interleukin,IL)-5、IL-9、IL-25、IL-10、生长刺激表达基因2(growth stimulation expressed gene 2,ST-2)和颗粒酶B(Granzyme B)浓度显著降低,IL-8、IL-1RA和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)浓度显著升高,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。PD-1与IL-1RA、ST-2和TNF-α水平呈正相关(r=0.270,P=0.005;r=0.213,P=0.029;r=0.291,P=0.003),与IL-9、IL-25和Granzyme B水平呈负相关(r=-0.322,P<0.001;r=-0.211,P=0.031;r=-0.369,P<0.001)。PD-L1与IL-9、IL-25和Granzyme B水平呈正相关(r=0.254,P=0.009;r=0.330,P<0.001;r=0.340,P<0.001),与IL-10水平呈负相关(r=-0.373,P=0.009)。结论PCOS患者外周血PD-1和PD-L1下调表达,可能与Th1/Th2细胞因子失衡相关,是治疗PCOS的潜在分子生物标志物。

影响睾丸3β-羟基类固醇脱氢酶的内分泌干扰物及其作用机制进展

睾丸3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-hydroxysteroid dehydrogenase,3β-HSD)是一种类固醇生成酶,催化3β-羟基类固醇转化为3-酮类固醇。目前已克隆了人类的两种不同亚型,HSD3B1和HSD3B2;其中,HSD3B2位于睾丸中,表达3β-HSD2。HSD3B2是一种双底物酶,可与辅因子NAD^(+)和3β-类固醇结合。许多内分泌干扰物,包括工业化合物(邻苯二甲酸盐、双酚类、全氟烷基物质和二苯甲酮类)、杀虫剂和杀菌剂(有机氯杀虫剂和有机锡)、食品添加剂(丁基羟基苯甲醚、白藜芦醇、棉酚、黄酮和异黄酮、类姜黄素和查尔酮类)和药物(依托咪酯、甲羟孕酮和酮康唑)可抑制睾丸中3β-HSD的活性,可能干扰雄激素合成。本文总结了3β-HSD的独特睾丸亚型,其基因、化学、亚细胞、位置以及直接抑制睾丸3β-HSD的内分泌干扰物及其抑制模式,期望为临床研究雄激素调控方法及以雄激素为靶点的药物研发提供参考。

NDP基因变异携带合并未分化结缔组织病及血栓患者通过PGT-M成功助孕1例

目的总结Norrie病家系合并女方为未分化结缔组织病及血栓患者通过胚胎植入前单基因遗传学检测(preimplantation genetic testing for monogenic,PGT-M)助孕临床诊疗经验。方法报道通过生殖遗传、生殖医学、眼科、风湿内科及产科多学科诊疗,对1例NDP基因第2外显子杂合缺失合并未分化结缔组织病及血栓病的患者进行家系构建、促排取卵、胚胎检测、冻融胚胎移植、羊膜腔穿刺、孕期及围产期监测的临床经过。结果该患者成功妊娠并足月分娩1名健康女婴。结论通过对该夫妇进行多学科诊疗管理,1个周期的PGT-M助孕使患者顺利获得健康的后代,减轻患者的心理和生理负担。

左旋肉碱在卵母细胞成熟和早期胚胎发育中的生物学作用

卵母细胞质量差是导致女性不孕的主要原因之一, 寻找改善卵母细胞质量的调节剂越来越受到重视。目前已有大量研究表明左旋肉碱在调节女性生殖能力方面具有重要功能。鉴于此, 本文综述了左旋肉碱在卵母细胞成熟和早期胚胎发育中的关键作用及其调控机制, 包括活化脂肪酸进行β-氧化来调节能量代谢、抗氧化防止氧化损伤和抑制细胞凋亡等, 及左旋肉碱在改善卵母细胞质量和早期胚胎发育中的研究进展。

卵巢过度刺激综合征患者胚胎发育及临床妊娠结局研究

目的探讨辅助生殖技术中发生卵巢过度刺激综合征(ovarian hyperstimulation syndrome,OHSS)患者的胚胎发育及临床妊娠结局。方法对2019年8月至2021年8月期间在安徽医科大学第一附属医院妇产科行体外受精/卵胞质内单精子注射-胚胎移植治疗的4080个周期的病例资料进行回顾性队列研究。按照是否发生OHSS分为OHSS组(n=524)与对照组(未发生OHSS患者,n=3556);524个OHSS周期依据是否合并多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)分为OHSS合并PCOS亚组(n=231)和OHSS合并非PCOS亚组(n=293)。比较各组之间的基础资料、胚胎发育结局及临床结局。结果①OHSS组患者年龄[(30.7±3.6)岁]小于对照组[(31.5±4.8)岁,P<0.001]、获卵数[(28.2±5.7)枚]、优质胚胎率[52.7%(4982/9463)]、优质囊胚率[54.0%(5059/9371)]、生化妊娠率[75.0%(393/524)]、临床妊娠率[69.5%(364/524)]和活产率[58.0%(304/524)]显著高于对照组[(12.5±6.7)枚、49.8%(14042/28204)、51.4%(14279/27797)、59.5%(2115/3556)、54.1%(1924/3556)、43.6%(1550/3556),均P<0.001]。②OHSS合并PCOS亚组患者年龄[(30.2±3.1)岁]低于OHSS合并非PCOS亚组[(31.1±4.0)岁,P=0.009];雌二醇[165.0(101.0,222.5)pmol/L]水平显著高于OHSS合并非PCOS亚组[141.0(81.0,202.0)pmol/L,P=0.005];优质胚胎率[56.3%(2413/4284)]、囊胚形成率[67.1%(2846/4239)]和优质囊胚率[57.7%(2445/4239)]均显著高于OHSS合并非PCOS亚组[49.6%(2569/5179)、60.3%(3092/5132)、50.9%(2614/5132),均P<0.001]。结论OHSS与年龄呈一定的相关性,其发生不会影响胚胎的发育,不增加不孕症患者的不良妊娠结局,是否合并PCOS不影响OHSS患者的妊娠结局,但在辅助生殖技术中我们仍要尽量避免OHSS等不良事件的发生。

宫腔粘连分离术对冻融胚胎移植后产科结局的影响因素分析

目的分析宫腔粘连分离术(transcervical resection of adhesion,TCRA)对冻融胚胎移植(frozen-thawed embryo transfer,FET)后患者产科并发症的影响及其相关因素。方法采用回顾性队列研究,收集2015年4月至2022年5月期间在南京医科大学附属妇产医院生殖医学中心行自体卵母细胞FET治疗并至少活产1名新生儿患者的临床资料。根据宫腔情况分为3组,对照组:正常宫腔形态(712例);宫腔粘连(intrauterine adhesion,IUA)组:IUA患者未行TCRA治疗(45例);TCRA组:IUA患者行TCRA治疗(51例)。通过倾向性评分匹配(propensity score matching,PSM)探讨3组患者宫腔情况与产科并发症的关系,并通过多因素logistic回归方法分析与TCRA相关的产科并发症的危险因素,采用校准曲线、受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线对构建的多因素logistic回归模型的效能进行评估。结果①在PSM前,3组间子宫内膜厚度、有无瘢痕子宫、妊娠次数、分娩次数、流产次数、人工流产次数和移植胚胎数的差异均有统计学意义(均P<0.05);在PSM后,基线特征在各组间达到平衡,TCRA组和IUA组的胎盘植入性疾病(placenta accreta spectrum disorders,PAS)发生率[48.8%(20/41);45.2%(19/42)]显著高于相应的对照组[24.7%(18/73),P=0.016;22.8%(18/79),P=0.019]。②多因素logistic回归分析显示子宫内膜厚度(OR=0.79,95%CI:0.69~0.90,P<0.001)、妊娠次数(2次,OR=2.25,95%CI:1.33~3.82,P=0.003)、子宫内膜准备方案(促性腺激素释放激素激动降调节联合激素替代疗法,OR=2.29,95%CI:1.16~4.52,P=0.017)、瘢痕子宫(OR=2.19,95%CI:1.39~3.45,P<0.001)和宫腔情况(IUA和TCRA,OR=2.11,95%CI:1.07~4.17,P=0.031;OR=2.70,95%CI:1.37~5.31,P=0.004)是PAS发生的独立预测因子。③预测PAS发生的多因素logistic回归模型的ROC曲线下面积为0.732(95%CI:0.686~0.778),并且校准曲线的结果经过内部验证表明预测风险和实际结果之间具有良好一致性(P=0.540),表现出良好的区分度和校准度。结论TCRA术后患者的前置胎盘、产后出血、胎膜早破等产科并发症的发病率与正常宫腔形态患者相同。然而,TCRA显著增加了采用FET助孕治疗的IUA患者发生PAS的风险。

圆形精子注射技术应用研究进展

圆形精子是成熟精子的前体细胞,具有单倍体的遗传特性,通过卵胞质内圆形精子注射(round spermatid injection,ROSI)技术可以使卵母细胞受精并发育成胎儿。1996年,第一例通过ROSI技术出生的婴儿诞生,但临床应用一直在成功与失败中反复交替。至今,ROSI技术尚未广泛应用于临床,主要原因在于ROSI技术出生效率低,且出生婴儿的安全性未得到充分验证。ROSI技术在解决部分非梗阻性无精子症患者生育生物学后代的问题上展现出广阔的应用前景。本文对ROSI技术的应用研究进展进行综述,以期更全面系统地认识ROSI技术,推动其在临床更高效、更安全地应用。

辅助生殖技术中年轻低预后患者不良妊娠结局的非预期因素分析

卵巢低反应会引起不良妊娠结局,是目前生殖领域亟须解决的难题之一。造成卵巢低反应患者不良妊娠结局的因素较多,除可预知因素如年龄、子宫因素及医源性因素外,我们也应重视那些非预期的因素如促排卵不当、基因缺陷、环境因素、不良生活习惯、体质量指数等,为提高年轻低预后患者的活产率提供临床指导。本文将从卵巢刺激方案、基因缺陷、体质量指数以及其他非预期影响因素进行阐述。

肠道微生物群与早期自然流产病因相关性的研究进展

肠道微生物在维持宿主体内代谢稳态及宿主代谢性疾病发生发展过程中发挥重要作用,其通过代谢物与宿主相互作用,对机体代谢和免疫调节等生理病理过程产生影响。早期流产是常见妊娠并发症之一,占所有临床妊娠的10%~15%。既往研究表明,肠道微生物群在妊娠并发症的病理生理过程中发挥着重要的作用,有望成为早期自然流产临床预防和治疗的新候选者。早期自然流产与肠道微生物之间的相关性得到越来越多的关注,但肠道微生物群影响早期自然流产的机制需要进一步研究。本文综述了肠道微生物群与早期自然流产发病原因的相关性,显示其可能通过调节人体内分泌、免疫功能、子宫环境参与了早期自然流产的发生发展,希望能够为临床诊治及研究提供新的思路。

不同暴露窗口空气污染对体外受精妊娠结局的影响

目的探讨不同窗口期空气污染物暴露水平与体外受精(in vitro fertilization,IVF)/卵胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)患者妊娠结局之间的关系,并探索对空气污染物暴露敏感的时间窗。方法对2014年1月至2021年12月期间在哈尔滨医科大学附属第一医院生殖医学科接受首次新鲜卵裂期胚胎移植的2071例40岁以下不孕症患者的资料进行回顾性队列研究。按促性腺激素(gonadotropin,Gn)启动日是否供暖将患者分为供暖季组和非供暖季组,比较两组的基线资料和妊娠结局。按IVF/ICSI治疗时间线划分为4个离散的暴露时间窗:暴露窗1,即Gn启动前75 d到Gn启动日;暴露窗2,即Gn启动日到取卵前一天;暴露窗3,即取卵日到第3天胚胎移植日;暴露窗4,即胚胎移植日到血清人绒毛膜促性腺激素检测日。分别计算每个患者在各个暴露窗口期6种空气污染物[细颗粒物(fine particulate matter,PM_(2.5))、可吸入颗粒物(inhalable particulate matter,PM_(10))、二氧化氮(nitrogen dioxide,NO_(2))、二氧化硫(sulfur dioxide,SO_(2))、一氧化碳(carbon monoxide,CO)和臭氧(ozone,O_(3))]的日平均水平。主要结局指标是持续妊娠率。采用多因素逻辑回归模型研究不同暴露窗口期的空气污染物暴露水平与妊娠结局之间的关联,并针对重要的混杂因素进行调整。结果供暖季组的生化妊娠率[51.7%(465/900)]、临床妊娠率[45.2%(407/900)]、持续妊娠率[38.2%(344/900)]和活产率[36.1%(325/900)]均显著低于非供暖季组[56.3%(659/1171),P=0.037;51.2%(599/1171),P=0.007;44.3%(519/1171),P=0.005;41.3%(484/1171),P=0.016]。在4个时间窗都可以观察到SO_(2)和NO_(2)暴露与持续妊娠呈显著负相关,SO_(2)每增加一个四分位间距(interquartile range,IQR),对应aOR和95%CI分别为0.92(0.85~0.99)、0.92(0.87~0.99)、0.93(0.87~0.99)和0.93(0.87~0.99)。对于NO_(2),每个IQR增量的aOR和95%CI分别为0.83(0.72~0.95)、0.87(0.77~0.97)、0.90(0.81~1.00)和0.85(0.77~0.95)。在暴露窗1和4,PM10暴露与持续妊娠可能性降低显著相关(aOR=0.86,95%CI:0.75~0.98;aOR=0.89,95%CI:0.80~1.00)。在暴露窗1,PM2.5暴露与持续妊娠呈显著负关联(aOR=0.86,95%CI:0.75~0.99)。此外,在除暴露窗3之外的所有暴露窗口中都观察到NO_(2)暴露与临床妊娠失败显著相关(暴露窗1:aOR=0.85,95%CI:0.74~0.97;暴露窗2:aOR=0.88,95%CI:0.79~0.99;暴露窗4:aOR=0.89,95%CI:0.81~0.99)。没有显示CO和O_(3)对妊娠结局的影响。结论空气污染物暴露会降低IVF/ICSI鲜胚移植周期持续妊娠的可能性,并且在IVF助孕之前的窦前卵泡到窦卵泡阶段,这种影响同样存在。在几乎所有暴露窗口中都观察到,NO_(2)暴露与临床妊娠和持续妊娠失败显著相关,提示NO_(2)可能是与IVF妊娠结局相关的主要空气污染物。

卵母细胞玻璃化冷冻对胚胎发育及移植结局的影响

目的探讨玻璃化冷冻卵母细胞行卵胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)对胚胎发育及妊娠结局的影响。方法回顾性队列研究分析郑州大学第三附属医院生殖医学科2015年10月至2022年12月期间行ICSI助孕周期患者的临床资料。纳入玻璃化冷冻卵母细胞解冻行ICSI助孕的周期95个(记为冷冻卵子组)和同期新鲜卵母细胞行ICSI助孕周期5830个(记为新鲜卵子组),冷冻卵子组按照冷冻方法分为二步法亚组与桥接法亚组。利用1∶3倾向性评分匹配(propensity score matching,PSM)后得到冷冻卵子组94个周期,新鲜卵子组282个周期,比较两组ICSI后受精、胚胎发育情况及移植后临床妊娠结局。采用多重线性回归分析影响卵子存活率的相关因素。结果PSM匹配后,冷冻卵子组的正常受精率[69.59%(572/822)]、正常卵裂率[95.63%(547/572)]、可利用胚胎率[74.41%(407/547)]、优质胚胎率[36.38%(199/547)]、可利用囊胚形成率[37.08%(89/240)]及卵子利用率[37.00%(407/1100)]均显著低于新鲜卵子组[74.26%(1875/2525),P=0.009;97.97%(1837/1875),P=0.002;84.65%(1555/1837),P<0.001;50.08%(920/1837),P<0.001;51.68%(537/1039),P<0.001;61.58%(1555/2525),P<0.001],总受精率、多原核受精率及卵子退化率差异均无统计学意义(均P>0.05)。冷冻卵子组卵裂期胚胎移植数[(1.91±0.28)枚]和晚期流产率[10.53%(4/38)]显著高于新鲜卵子组[(1.72±0.45)枚,P=0.001;1.14%(1/88),P=0.048],卵裂期胚胎着床率、生化妊娠率、临床妊娠率及早期流产率差异均无统计学意义(均P>0.05)。冷冻卵子组中二步法亚组的卵子存活率[55.95%(188/336)]、卵子退化率[6.38%(12/188)]、可利用囊胚形成率[5.08%(13/59)]及卵子利用率[26.49%(89/336)]与桥接法亚组[82.98%(634/764),P<0.001;3.00%(19/634),P=0.032;41.99%(76/181),P=0.006;41.62%(318/764),P<0.001]相比,差异均有统计学意义,两亚组间总受精率、正常受精率、多原核受精率、正常卵裂率、可利用胚胎率及优质胚胎率差异均无统计学意义(均P>0.05)。多重线性回归分析影响卵子存活率的因素结果显示促排卵方案(β=-19.730,t=-2.06,P=0.043)、卵子冷冻数(β=-1.417,t=-3.10,P=0.003)及卵子玻璃化冷冻方法(β=33.872,t=5.04,P<0.001)对卵子存活率的影响差异具有统计学意义。结论卵母细胞玻璃化冷冻对胚胎发育造成了不利的影响,胚胎移植后妊娠结局与新鲜卵母细胞相似,但其围产期结局的安全性仍需要进一步的研究证实。

miR-515-5p靶向ITLN2对子宫内膜基质细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨微小RNA-515-5p(miR-515-5p)是否可靶向内凝集素2(lectin 2,ITLN2)影响子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)子宫内膜基质细胞(endometrial stromal cells,ESCs)的增殖、迁移和侵袭。方法收集2020年12月至2021年12月期间在济宁医学院附属医院生殖医学科就诊治疗的24例EMT患者的在位内膜和异位内膜组织及18例行腹腔镜手术的非EMT患者的正常内膜组织。RT-qPCR检测内膜组织miR-515-5p、ITLN2 mRNA相对表达量;Western blotting法检测内膜组织中ITLN2蛋白表达量。原代分离、培养EMT患者的ESCs,利用Lipofectamine 2000试剂转染ESCs,并将其分为空白组、miR-515-5p抑制剂组、miR-515-5p抑制剂阴性对照(negative control,NC)组,CCK-8法检测细胞增殖情况;划痕愈合和Transwell实验分别评估细胞迁移、侵袭能力;双荧光素酶报告基因检测miR-515-5p和ITLN2的靶向关系;RT-qPCR技术检测各组细胞miR-515-5p、ITLN2 mRNA相对表达量;Western blotting技术检测ITLN2、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)蛋白相对表达量。结果EMT患者在位和异位子宫内膜组织miR-515-5p相对表达量显著高于正常子宫内膜组织(均P<0.001),ITLN2 mRNA相对表达量显著低于正常子宫内膜组织,异位子宫内膜组织ITLN2 mRNA相对表达量显著低于在位子宫内膜组织(均P<0.001),EMT患者异位子宫内膜组织ITLN2蛋白质水平显著低于EMT在位和正常子宫内膜组织(均P<0.001),EMT患者在位子宫内膜组织ITLN2蛋白质水平显著低于正常子宫内膜组织(P<0.001)。miR-515-5p抑制剂组细胞存活率[(54.71±2.78)%]、划痕愈合率[(38.31±3.78)%]及侵袭数[(286.67±25.15)个]、miR-515-5p相对表达量、IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白相对表达量均显著低于空白组[(100.00±0.00)%,P<0.001;(84.08±5.14)%,P<0.001;(515.67±22.19)个,P<0.001;P<0.001;P=0.012;P=0.010;P<0.001],ITLN2 mRNA和蛋白相对表达量均显著高于空白组(P<0.001;P<0.001)。经生物信息学分析和双荧光素酶报告基因检测,ITLN2为miR-515-5p的潜在靶基因。结论降低miR-515-5p水平可抑制EMT患者ESCs增殖、迁移和侵袭,这可能与靶向提高ITLN2表达进而降低炎症因子水平有关。

PGT-SR后囊胚形态学评分与冻融单囊胚移植活产的相关性分析

目的探讨胚胎植入前染色体结构重排检测(preimplantation genetic testing for chromosome structural rearrangements,PGT-SR)后囊胚形态学评分对冻融单囊胚移植活产的影响。方法回顾性病例对照研究分析2015年3月至2021年1月期间于郑州大学第一附属医院生殖医学中心行PGT-SR助孕后冻融单囊胚移植患者的临床资料,共1412个移植周期。依据是否获得活产分为活产组(n=634)和未活产组(n=778),根据囊胚扩张度、内细胞团和滋养层细胞形态对囊胚进行评分,比较各形态学参数的活产率差异。通过二元logistic回归评估每个形态学参数对单囊胚移植活产的预测价值。再依据囊胚发育天数分为第5天囊胚(n=977)和第6天囊胚(n=435),进一步探究第5天和第6天囊胚的不同扩张度分期的活产。结果活产组的不孕年限[(2.88±2.41)年]比未活产组[(3.18±2.67)年,P=0.028]短。活产组的移植日内膜厚度[(10.12±2.03)mm]和第5天囊胚移植周期比例[75.6%(479/634)]比未活产组[(9.78±1.76)mm,P=0.003;64.0%(498/778),P<0.001]高;两组间内膜准备方案、囊胚扩张度和滋养层细胞等级构成比比较差异均有统计学意义(P=0.008、P=0.002、P=0.015)。两组间内细胞团等级构成比差异无统计学意义(P=0.236)。调整相关混杂因素后,二元logistic回归分析结果显示,与1~2期相比,3期、4期的活产率显著升高(aOR=1.894,95%CI:1.056~3.394,P=0.032;aOR=1.970,95%CI:1.046~3.709,P=0.036),内细胞团和滋养层细胞等级并不是活产的独立影响因素(aOR=1.480,95%CI:0.790~2.772,P=0.221;aOR=1.242,95%CI:0.952~1.621,P=0.111)。内膜准备方案、囊胚发育天数和内膜厚度同样是活产的独立影响因素,与激素替代方案相比,自然周期方案的活产率显著升高(aOR=1.425,95%CI:1.028~1.975,P=0.033);与第6天囊胚相比,第5天囊胚的活产率显著升高(aOR=1.448,95%CI:1.068~1.963,P=0.017)。进一步分析相同囊胚发育天数的不同扩张度分期的活产,结果显示,第5天囊胚的不同扩张度分期间的活产率差异有统计学意义(P=0.002),3期、4期和6期的活产率[51.1%(360/704)、50.3%(87/173)、58.3%(7/12)]均高于1~2期[28.1%(16/57),均P<0.0125]。结论行PGT-SR助孕后冻融周期单囊胚移植时,建议优先选择扩张度为3~4期的第5天囊胚移植,选择自然周期内膜准备方案可获得更高的活产率。

高强度聚焦超声消融治疗子宫腺肌病的研究进展

子宫腺肌病(adenomyosis,ADS)是育龄期妇女常见的良性疾病,主要症状为痛经、月经量增多、子宫增大和不孕等。近年来随着ADS确诊患者的年轻化及生育政策的调整,保留生育功能的治疗方法逐渐受到重视。高强度聚焦超声(high-intensity focused ultrasound,HIFU)消融以其非侵入性、高准确性和可重复性等特点,较好地保留了子宫结构与功能的完整性,在保留生育功能的ADS治疗中展现出优势。HIFU消融治疗明显改善ADS患者的临床疗效以及妊娠结局,提高HIFU消融治疗ADS病灶的消融率更有益于上述结果。此外,HIFU消融相较其他微创治疗在保护生育力方面也具有一定优势。本文围绕HIFU消融治疗ADS保留生育功能的临床应用和研究总结作一综述。

肠道微生态与生殖障碍性疾病的相关研究进展

当前育龄人群的生殖健康面临前所未有的挑战,不孕不育的患病率和不良妊娠结局的发生率逐年上升。肠道微生态作为人体的关键组成部分,在一系列正常生命活动的进行中发挥着重要作用。肠道微生态的紊乱已被证明参与多种疾病的进程,越来越多的研究表明,肠道微生态的紊乱与生殖障碍性疾病的发生发展有关。因此,本文将总结肠道微生态与女性生殖障碍性疾病的相关研究进展,为其防治提供新的策略,为提升育龄女性的生育力提供新的思路。

饮用水中消毒副产物对成人生殖功能影响的研究进展

消毒副产物(disinfection by-products,DBPs)是饮用水消毒过程中消毒剂与水中的化学物质发生化学反应生成的化合物。目前已经鉴定的DBPs有700多种,其中含量最高的是三卤甲烷和卤代乙酸。DBPs的安全性问题已经引起了人们的广泛关注,目前研究已证实其具有细胞毒性、遗传毒性、致癌性、发育毒性。近年来DBPs对生殖功能的损害也逐渐引起人们的重视。本文从毒理学和流行病学两方面综述DBPs暴露对成人生殖功能影响的研究进展,并对其今后的研究方向进行相关讨论和展望。

微生态与健康生育

健康生育是社会之关切,微生物菌群可从各方面密切影响女性全生命周期的生殖健康。菌群失调可通过调控机体炎症、免疫及代谢等过程,导致或加重生殖内分泌疾病、不孕症、肿瘤、不良妊娠结局等,甚至影响子代健康。本文重点关注生殖道及肠道菌群对女性全生命周期的生殖健康影响,以期从菌群角度更好地了解女性健康。未来,深入解析菌群平衡和稳态对健康生育的预防和保护机制,对推动生殖障碍疾病的诊疗具有重要意义。通过菌群干预手段,建立生殖障碍疾病诊治新策略的临床转化体系,对提高生育全周期的健康水平具有深远影响。