鸭源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及药敏试验

目的:从疑似禽霍乱的4只病死鸭的病料中分离并鉴定多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm),并通过药敏试验筛选敏感药物用于治疗。方法:无菌采集肝脏组织病料,接种至普通营养琼脂、麦康凯及血琼脂培养基上进行病原菌的培养、分离纯化;对纯化后的分离菌进行革兰染色、镜检,提取其核酸作为模板,进行16S rRNA基因的PCR鉴定;圆纸片扩散试验测定分离菌株对18种抗菌药物的敏感程度。结果:在血琼脂培养基上分离菌株表现为稍微隆起、表面光滑、湿润、灰白色、露珠样、半透明的圆形菌落,但在普通营养琼脂和麦康凯培养基上不生长。革兰染色镜检显示分离菌为一种革兰染色阴性、菌体两端着色深、中间着色较浅的球状短小杆菌。PCR扩增16S rRNA出现1 500 bp的目的条带,其序列分析与Pm菌株Q的16S rRNA基因的相似性为99.86%;药敏试验表明,分离菌株对米诺环素敏感性最高,抑菌圈直径达19 mm,对四环素、强力霉素、庆大霉素、氨苄西林、头孢哌酮表现中度敏感,其他药物均为耐药。结论:本研究从一例疑似禽霍乱的病死鸭中分离鉴定出1株多杀性巴氏杆菌,分离菌株对米诺环素较为敏感,建议用于临床治疗。

脱氢表雄酮改善高脂饲料诱导的肉鸡肝损伤和炎症反应

目的:探讨脱氢表雄酮(Dehydroepiandrosterone,DHEA)对饲喂高脂饲料肉鸡生长性能、肉质、肝损伤和炎症反应的影响。方法:选择200只15日龄青脚麻鸡,随机分为5组,其中对照组(CK组)饲喂基础饲料,高脂饲料组(HFD组)、DHEA低剂量干预组(L-DHEA组)、DHEA中剂量干预组(M-DHEA组)、DHEA高剂量干预组(H-DHEA组)在饲喂高脂饲料的基础上同时添加0、5、15、45 mg/kg DHEA。试验期间,测定鸡的体质量、生长性能、屠宰率、胸肌pH、肉色、肝脏相对质量、肝脏出血分数及血清ALT、AST、胆碱酯酶(CHE)活性、血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、前白蛋白(PA)、尿酸、肌酐、C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)含量等指标。结果:与对照组相比,高脂饲料能提高肉鸡的体质量、平均日增重、屠宰率、肝脏相对质量(P<0.05)和肝脏出血分数(P<0.05),但降低胸肌b*值;同时,高脂饲料显著提高血清ALT活性(P<0.05)与CRP、IL-6水平。与HFD组相比,添加DHEA后饲喂高脂饲料肉鸡的体质量、日均体增重、料重比有降低趋势,而胸肌a*、b*值则有上升的趋势;同时,DHEA能够提高血清ALB、PA含量,并降低血清ALT、CHE活性和CRP、IL-6水平。结论:高脂饲料可诱导肉鸡发生肝脏损伤、炎症反应和FLHS,在高脂饲料中添加DHEA能够有效改善高脂饲料诱导的肉鸡肝损伤、炎症反应,缓解高脂日粮引起的鸡FLHS,DHEA添加量为15 mg/kg时综合效果更好。

基于时序聚类CEEMDAN-LSTM的轨道短时客流预测

目的:高效精确的短时客流预测是城市轨道交通运营管理的重要前提,为提高短时客流预测精度,提出一种基于时序聚类的CEEMDAN-LSTM组合模型。方法:以DTW距离为度量标准,采用Kmeans算法对客流时序进行分类,在此基础上通过CEEMDAN算法进行时序分解以弱化样本噪声干扰,再将分量输入到LSTM模型中进行预测。结果:CEEMDAN-LSTM模型在3类客流时序下的预测误差均小于其他4个基线模型,并能有效反映短时客流的变化趋势;考虑时序聚类的预测模型的预测精度与时效性均优于不分类下的预测模型。结论:以合肥南站地铁的短时进站客流数据为例进行实证分析,证实客流时序聚类对预测精度提升的贡献,并与SARIMA、RF、XGBoost、LSTM等4个预测模型比较,CEEMDAN-LSTM模型具有较高的预测精度,且能有效反映实际客流曲线的变化趋势。

土壤-西甜瓜系统中硒的空间分布特征及其与环境因子的关系

目的:探究大兴农业发展区硒的富集情况和空间分布特征及影响因素。方法:分别测定土壤和西甜瓜中Se含量,分析其与土壤理化性质、地形参数和植被覆盖度的关系。从数理统计和空间特征两方面,主要采用相关性分析、通径分析和地理加权回归方法进行数据分析。结果:研究区表层0~20 cm土壤Se含量平均值为(0.28±0.07) mg/kg,略低于中国背景值0.29 mg/kg,土壤含硒水平以足硒为主,西甜瓜Se含量平均值为(0.05±0.04) mg/kg, 62.5%的作物样品中Se含量高于0.04 mg/kg。结论:总体而言,全磷、全盐量和地形湿度指数(TWI)对土壤Se含量和空间分布影响较强,同时,受地区不同种植模式影响,土壤硒含量与西甜瓜硒含量呈较弱相关性,硒在作物中的富集受根系土壤中磷的含量及赋存形态影响较大,且Ca2-P是影响土壤Se含量的重要无机磷源。

镉诱导雏鸡肝脏的损伤作用

目的:旨在观察镉对雏鸡肝脏的损伤作用,为预防、治疗和诊断镉致雏鸡肝损伤提供依据。方法:200只1日龄健康爱拨益加雏鸡随机分为空白对照组、CdCl_(2)处理组(低、中、高剂量),每组5个重复,每个重复10只。CdCl_(2)处理组分别灌服35、70、140 mg/kg·BW的CdCl2溶液。雏鸡染镉24 h后,心脏采血处死动物并分离肝组织,利用苏木精-伊红染色观察肝组织病理变化,测定血清中转氨酶活性与肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)含量,比色法测定肝组织中氧化应激指标。结果:35、70 mg/kg CdCl_(2)处理可引起雏鸡血清中转氨酶活性显著提高(P<0.01),雏鸡肝细胞出现空泡变性、炎性浸润和细胞坏死等病理改变;GSH含量、SOD活性显著降低(P<0.01),MDA含量急剧升高(P<0.01),血清中炎性细胞因子IL-1β、IL-6与TNF-α含量显著升高(P<0.01)。结论:CdCl_(2)可导致雏鸡肝组织出现氧化应激,并伴随炎症反应。

基于改进YOLOv5算法的密集动态目标检测方法

目的:提出一种基于YOLOv5改进的检测算法,解决密集动态目标检测精度低及易漏检的问题。方法:在YOLOv5的主干网络中使用QARepNeXt结构提高深度学习模型训练速度;引入S^(2)-MLPv2注意力机制改善遮挡情况下检测效果差的问题;将具有动态聚焦机制的边界回归损失函数Wise-IoU替代原有损失函数提高收敛速度。结果:以密集人群场景为例,验证改进算法相较现有算法具有更高准确率、更低漏检率,保证了原算法的实时性。结论:通过替换网络结构、引入注意力机制并更新损失函数,可有效提升算法准确率,降低漏检率。

G型产气荚膜梭菌的分离鉴定及其在鸡坏死性肠炎发病模型中的应用

目的:探讨不同诱导因素对鸡坏死性肠炎(Necrotic enteritis,NE)的诱发效果,以便建立鸡坏死性肠炎的发病模型。方法:以安徽省某规模化鸡场采集的病鸡肠道样品中分离出的G型产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,C.perfringens)(CPG-AH5株)为病原菌,分析单独或联合感染毒害艾美耳球虫对在饲喂高蛋白饲料(添加鱼粉)和不饲喂高蛋白饲料条件下,诱发鸡坏死性肠炎的影响。结果:无诱导因素时,1.1×10^(9)CFU/mL剂量下CPG-AH5株感染可造成肠道损伤(平均病变评分为1.5±0.85分);单一诱导因素(鱼粉或球虫)不能有效促进CPG-AH5株的感染,肠道病变与无诱导因素条件下无显著性提高(2.0±1.15、2.4±1.08,P>0.05);多个诱导因素(鱼粉和球虫)联合诱导可有效促进CPG-AH5株的感染,与无诱导因素和单一诱导因素相比肠道病变显著性提高(3.6±0.52,P<0.001)。结论:鱼粉和球虫联合诱导可显著促进G型产气荚膜梭菌的感染,提高肠道病变。本研究建立了一种鸡坏死性肠炎发病模型,有利于对鸡坏死性肠炎发病机制的研究,为疫苗及药物的后续研发和筛选评价提供了新的技术支撑。

基于重组核衣壳蛋白的猪德尔塔冠状病毒间接ELISA检测方法的建立

目的:建立一种关于猪德尔塔冠状病毒(Porcine Deltacoronavirus, PDCoV)抗体的检测方法。方法:对猪德尔塔冠状病毒的核衣壳蛋白(N)进行原核表达,通过Western Blot、SDS-PAGE等方法,对重组蛋白进行鉴定;在获得正确表达的重组蛋白后,以此为抗原,对ELISA反应条件进行优化,并对其特异性、敏感性、重复性进行测试,最终建立ELISA检测方法,并对临床样品进行检测。结果:优化后的抗原包被浓度为2μg/孔,37℃孵育1 h;1%BSA 37℃封闭1 h;一抗稀释最佳浓度为1∶1 600,孵育时间为1 h;酶标二抗最佳孵育时间为60 min。重组蛋白能与猪德尔塔冠状病毒血清发生特异性反应,所建立的检测方法具有优良的敏感性、特异性、重复性。结论:本研究建立了一种针对猪德尔塔冠状病毒的间接ELISA检测方法,为猪德尔塔冠状病毒的抗体水平检测及疾病的防控提供了一种有效的方法。

平衡赖氨酸和蛋氨酸的低蛋白日粮对育雏期皖西白鹅血液生化和胸腺结构的影响

目的:探究平衡赖氨酸和蛋氨酸的低蛋白日粮对育雏期皖西白鹅血液免疫指标和胸腺结构的影响。方法:选用180只1日龄皖西白鹅作为研究对象,随机分为6组,每组30只;试验采用3×2因子设计(不同蛋白水平:20%、18%、16%,分别平衡赖氨酸、蛋氨酸),于14和28日龄分别采集血液和胸腺,研究不同氨基酸平衡模式及蛋白水平对育雏期皖西白鹅血液免疫指标以及胸腺结构的影响。结果:14日龄时,D组MCV、MCH显著高于E、F组(P<0.05);F组血清TP、ALB、AST含量显著高于D、E组(P<0.05),D组UA极显著高于F组(P<0.01);A组TG含量显著高于B、C组(P<0.05);28日龄时低蛋白组ALP显著高于高蛋白组。14与28日龄各组胸腺器官指数无显著差异(P>0.05);结构变化不明显(P>0.05)。结论:低蛋白日粮平衡氨基酸可以提高育雏期皖西白鹅的蛋白质利用率,降低尿酸沉积,且对胸腺发育没有负面影响。

纤维水平对皖西白鹅血液生理生化指标、血清细胞因子及胸腺组织结构的影响

目的:研究纤维水平对皖西白鹅血液生理生化指标、血清细胞因子及胸腺组织结构的影响,探究皖西白鹅饲粮适宜的纤维添加量。方法:选择200只皖西白鹅进行试验,随机分为3%、5%、7%、9%、11%纤维水平组,每组5个重复。结果:28日龄7%、9%和11%纤维组WBC极显著高于5%纤维组(P<0.01),7%、9%纤维组WBC极显著高于3%组(P<0.01)。28日龄皖西白鹅9%和11%纤维组CRE-E极显著高于3%和5%组(P<0.01),11%纤维组CRE-E显著高于7%纤维组(P<0.05),7%组CRE-E显著高于3%组(P<0.05)。14日龄皖西白鹅3%纤维组IL-10和IFN-γ极显著高于其他试验组(P<0.01);28日龄皖西白鹅3%纤维组IL-10、IFN-γ水平极显著高于其他试验组(P<0.01),3%纤维组IL-6显著高于9%组(P<0.05)。28日龄皖西白鹅5%、7%皮质面积显著高于3%、11%组(P<0.05),7%纤维组皮髓比极显著高于3%组(P<0.01),5%组皮髓比显著高于3%组(P<0.05)。结论:饲粮中添加7%、9%纤维水平可提高皖西白鹅白细胞、红细胞等细胞水平,提高CRE-E、TG、TC、HDL、LDL等与氨基酸和脂类代谢相关指标,降低IL-10、IFN-γ、IL-6等炎症反应相关因子水平,可促进胸腺发育。本试验条件下,以免疫指标为判断依据,育雏期皖西白鹅饲粮纤维水平为6.83%~8.66%为宜。

限饲对断奶前湖羊母羊隐性乳房炎和部分血液生化指标的影响

目的:通过断奶前限饲精料,探讨母羊营养和抗氧化等指标变化。方法:选择28只健康的2胎次哺乳期湖羊母羊,随机均分为Ⅰ和Ⅱ组,每只羊哺乳期饲喂精料0.8 kg/d。Ⅰ组羊自分娩第42天开始将每只羊精料降至0.26 kg/d;Ⅱ组羊在分娩第42~45天精料降至0.12 kg/d,第46天始,精料增加至0.26 kg/d。母羊断奶时间为第45天。分娩第41天精料调整前(d1)和第43天(d3)、第45天(d5)、第47天(d7)、第49天(d9),固定每组5只羊,颈静脉采血,抗凝离心和取样,置于-20℃保存,其中d5、d9全群羊空腹采血2 mL,抗凝置于4℃保存。d5收集乳房奶样置于-20℃保存。结果:相较于Ⅱ组,Ⅰ组白细胞总数高(P>0.05),d5的奶中体细胞数低(P>0.05),d7的结合珠蛋白含量高(P<0.05)。血浆Fe含量在组间无显著差异(P>0.05)。在所对应时间点,总蛋白、白蛋白、尿素氮和尿酸浓度,Ⅰ和Ⅱ组之间差异均不显著(P>0.05)。d1、d3和d52组葡萄糖、总胆固醇和甘油三酯指标均渐降低,尿素氮含量、总抗氧化能力呈增高趋势。Ⅱ组d5和d9的总抗氧化能力均低于Ⅰ组(P<0.01),Ⅱ组羊尿酸量持续增高。d92组甘油三酯量差异显著(P<0.05)。不同于Ⅰ组,Ⅱ组谷胱甘肽过氧化物酶活性递减。Ⅰ组d7和Ⅱ组d5的过氧化氢酶活性最高,其中Ⅱ组d5的酶活性高于Ⅰ组(P<0.05)。Ⅱ组d5丙二醛含量低于Ⅰ组(P<0.05)。结论:母羊在断奶前限饲精料未诱发临床乳房炎,相比过度限饲,精料降至0.26 kg/d的母羊在停止泌乳后的营养代谢能够避免高尿酸性抗氧化反应。

根皮素对热应激肉鸡腿肌肉品质和抗氧化性能的影响

目的:探讨饲料中添加根皮素对热应激环境下肉鸡腿肌肉品质及其抗氧化性能的影响。方法:选取160只体质量相近的22日龄AA肉鸡,随机分为NT、HT、LT和PT等4组,每组4个重复,每个重复10只。其中,NT为对照组,饲养温度为(23.0±0.61)℃,相对湿度为50.8%±5.41%;HT、LT、PT为热应激组,饲养温度为(30.5±0.69)℃,相对湿度为89.7%±6.70%,NT和HT饲喂基础日粮,LT、PT分别饲喂在基础日粮中添加100、200 mg/kg根皮素的日粮。在肉鸡42日龄时每个重复随机挑选3只肉鸡,屠宰后进行腿肌肉品质及抗氧化性能的测定。结果:与HT相比,NT肉鸡腿肌亮度、滴水损失、失水率、蒸煮损失、MDA水平均显著下降(P<0.05),CAT、GSH、GSH-Px、T-AOC水平均显著上升(P<0.05)。与HT相比,PT肉鸡腿肌亮度、肌滴水损失、失水率、蒸煮损失、MDA水平均显著下降(P<0.05),CAT、GSH、GSH-Px、T-AOC水平均显著上升(P<0.05)。与HT相比,LT的T-AOC水平显著上升(P<0.05)。结论:饲料中添加根皮素可有效改善热应激对肉鸡腿肌肉品质及抗氧化性能的影响,且以添加200 mg/kg效果较好。

血清4型禽腺病毒Fiber-1蛋白截短表达及多克隆抗体制备

目的:制备血清4型禽腺病毒(FAdV-4)Fiber-1基因截短蛋白多克隆抗体,为FAdV-4病的诊断、检测及致病机制研究奠定基础。方法:对FAdV-4的CH/AHMC/2015分离株Fiber-1基因序列(MG148335.1:30459-31754)进行信号肽、疏水性和抗原决定簇分析,截取具有较高免疫原性的片段,设计合成特异性引物,以CH/AHMC/2015分离株基因组DNA为模板进行PCR扩增,获得截短Fiber-1(sFiber-1)基因片段,将其连接至原核表达载体pET-32a,验证后转化至大肠杆菌BL21感受态中,诱导表达sFiber-1蛋白。纯化后的蛋白与佐剂乳化后免疫SD大鼠,制备多克隆抗体,并测定多克隆抗体效价。用Western-blot检测抗体免疫原性。结果:成功构建了sFiber-1的原核表达载体,获得FAdV-4的sFiber-1重组蛋白,经SDS-PAGE鉴定,重组sFiber-1蛋白大小约为52 kDa,主要以包涵体形式表达;间接ELISA法测得sFiber-1多克隆抗体效价为1∶2^(13);Western blot结果显示制备的多克隆抗体能特异性识别出重组sFiber-1蛋白。结论:本研究成功表达了FAdV-4的重组sFiber-1蛋白,制备了具有较高免疫活性的sFiber-1多克隆抗体,可为FAdV-4的检测及诊断奠定基础。

基于数字孪生的奶牛场三维可视化平台研究与实现

目的:为提升奶牛场生物安全等级,设计一种基于数字孪生的奶牛场三维可视化平台。方法:利用数字孪生技术将物联网、大数据等技术进行融合,实现对奶牛场信息的实时监测。使用三维建模软件构建奶牛场三维模型,结合网页前端和场景渲染等技术,实现实体奶牛场与孪生奶牛场的互联互通,构建虚拟的奶牛场三维可视化平台,对奶牛场的养殖环境、奶牛健康、牛舍实时情况等进行监测。结果:本研究初步实现了奶牛场实时监测、数据实时传输、信息三维可视化等功能。结论:本研究构建的奶牛数字孪生三维可视化平台有助于提高奶牛场智能管理水平,加快奶牛养殖数字化方向发展。

鲜食玉米果穗的物理力学特性

目的:针对鲜食玉米在机械脱粒过程中存在籽粒破损的问题,研究对籽粒造成挤压破坏的最小挤压力和实现玉米籽粒与玉米芯分离的最小轴向及径向剪切力。方法:采摘3个不同时期的果穗,利用万能拉压型试验机对果穗开展挤压及剪切试验。结果:结果表明,果穗的籽粒会经历3个阶段,即籽粒的形变、破损、爆浆阶段。在不同采摘期,含水率均值分别在71.51%±2.00%、64.96%±2.00%、50.21%±2.00%的条件下,籽粒破损临界点所对应的试验力的平均值分别为81.7、644.5、960.4 N;轴向剪切试验结果表明,果穗所受到的轴向剪切力的平均值分别在25.3、60.8、234.1 N时,第1、2排籽粒被完全切除;径向剪切试验结果表明,单籽粒果穗被径向切除的试验力的平均值分别为20.5、12.1、6.8 N。结论:本研究获得的重要物理力学参数可为鲜食玉米脱粒机关键部件的设计提供理论依据和参考。

刚地弓形虫核糖体蛋白L35A基因克隆与生物信息学分析

目的:克隆刚地弓形虫核糖体蛋白L35A基因,并运用生物信息学方法分析和预测RPL35A蛋白的结构与功能。方法:利用PCR技术扩增刚地弓形虫RPL 35 A基因,并通过ProtParam、ProtScale、TMpred和Signa IP预测RPL35A蛋白的理化性质、亲疏水性、跨膜区和信号肽等一级结构,通过MEGA 6.0和DANSTAR软件分析RPL35A蛋白的保守性。用NPSA SOPMA和Swiss-Model预测RPL35A蛋白的二级和三级结构。并通过PSORT、CD-Search、DUT和IEDB数据库预测RPL35A蛋白的亚细胞定位、结构域、翻译后修饰位点和抗原表位等。结果:刚地弓形虫RPL 35 A基因片段大小为339 bp,编码112个氨基酸,蛋白质分子式为C 579 H 940 N 176 O 151 S 2,相对分子质量为12847.04,理论等电点为10.94,无跨膜区和信号肽,为亲水性不稳定蛋白,在不同虫株间高度保守。二级结构主要有无规则卷曲和延伸链。RPL35A蛋白亚细胞定位于线粒体,有9个磷酸化位点、12个O-糖基化位点和6个潜在的B细胞抗原表位。结论:刚地弓形虫RPL35A蛋白具有潜在的免疫原性,可作为刚地弓形虫疫苗和药物靶点研究的候选分子。

复方参芪颗粒的制备工艺及其质量控制

目的:优选复方参芪颗粒的最佳配方和制备工艺,并对其质量控制进行初步研究。方法:以颗粒的吸湿率、成型率、流动性和口感为评价指标,按不同权重综合评分,以综合得分为响应值,结合响应面法分析,优选配方和制备工艺;用高效液相色谱法测定黄芪甲苷的含量。结果:浸膏与辅料比例为1∶4,甘露醇与乳糖比例为4∶3,矫味剂用量为0.20%,成型率、吸湿率、休止角分别为96.86%、2.52%、27.60°,颗粒微甜,可接受;黄芪甲苷的线性回归方程为y=1.321 9x+1.113 3,R^(2)=0.999 6。黄芪甲苷在1.994~7.976μg范围内具有良好的线性关系。结论:此方法重现性好,优选的复方参芪颗粒制备工艺切实可行;黄芪甲苷含量测定方法线性关系良好,可用于其质量控制。

一株鹅源腐生葡萄球菌的分离鉴定、药敏试验、耐药基因及毒力基因检测

目的:查明某养殖户送检的以腿部肿胀为特征的16日龄病鹅病原菌,分析其抗生素耐性、毒力基因携带情况。方法:取病鹅腿部肿胀处的组织液,进行病原菌分离鉴定、药敏试验、耐药基因及毒力基因检测。结果:从病鹅腿部肿胀处的组织液中分离培养到1株球状、不规则排列的G_(+)菌。通过16S rRNA基因序列分析,确定为腐生葡萄球菌。药敏试验显示该菌对妥布霉素、庆大霉素、环丙沙星敏感,对链霉素、复方新诺明等药物耐药。耐药基因检测得出该菌含有卡那霉素类耐药基因aadA1、头孢菌素类耐药基因blaCMY-2、磺胺类耐药基因sul1。毒力基因检测得出该菌携带肠毒素基因seb、耐热核酸酶基因nuc、溶血素基因hla、毒素休克综合征毒素1基因TSST-1。结论:该鹅患病部分病原菌为腐生葡萄球菌,毒力强,治疗时应优先选用妥布霉素。

异亮氨酸缓解猪睾丸支持细胞氧化应激作用

目的:研究异亮氨酸缓解过氧化氢诱导的猪睾丸支持细胞氧化应激的保护作用,并确定不同浓度异亮氨酸对缓解氧化应激导致的睾丸支持细胞活力下降的最佳浓度,及最佳异亮氨酸浓度对猪睾丸支持细胞的增殖、凋亡和抗氧化水平的影响。方法:利用CCK-8法检测细胞活力,筛选在氧化应激模型下异亮氨酸保护猪睾丸支持细胞的最适浓度。应用流式细胞术检测最适异亮氨酸浓度下支持细胞的周期和凋亡情况。应用试剂盒检测总超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,T-SOD)、总抗氧化能力(Total Antioxidant Capacity,T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione Peroxidase,GSH-Px)和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的表达量。结果:与氧化应激丙氨酸等氮对照组和其他浓度氧化应激异亮氨酸组相比,32 mmol/L氧化应激异亮氨酸组细胞增殖活力显著升高。与氧化应激不加药组和氧化应激丙氨酸等氮对照组相比,氧化应激异亮氨酸组细胞分化G_(0)/G_(1)期比例相对较低,S期和G_(2)/M期比例无明显差异。与氧化应激不加药组相比,氧化应激异亮氨酸组细胞凋亡比例呈显著降低,与氧化应激等氮对照组相比,氧化应激异亮氨酸组细胞凋亡比例无明显差异。与无氧化应激丙氨酸等氮对照组和氧化应激丙氨酸对照组相比,异亮氨酸极显著增强T-SOD的活性,也极显著增加氧化应激异亮氨酸组T-AOC,而对GSH-Px和MDA没有显著影响。结论:在本试验条件下32 mmol/L异亮氨酸效果最佳,有效缓解氧化应激导致的细胞活力下降、细胞周期紊乱和细胞凋亡。

叠氮化钠及甲氧咪草烟对水稻幼胚愈伤组织成活、丛生芽分化及生根的影响

目的:研究不同浓度叠氮化钠(NaN_(3))及甲氧咪草烟(Methotrexate)对水稻幼胚愈伤组织成活、丛生芽分化及生根的影响。方法:以优质水稻品种‘润珠香占’幼胚愈伤组织为外植体,用1、2、3、4 mmol/L叠氮化钠处理水稻幼胚愈伤组织8 min后,将其分别接种到含0.001、0.005、0.010、0.050 g/L甲氧咪草烟的愈伤组织生长培养基中,观察愈伤组织生长状况,统计愈伤组织褐化率、成活率,再移入分化生根培养基中,统计成活愈伤组织分化率、生根率。结果:水稻愈伤组织甲氧咪草烟致死质量浓度为0.05 g/L。甲氧咪草烟是影响水稻幼胚愈伤组织成活的重要因子,其次是叠氮化钠,再次为它们的交互作用,处理间差异显著。随着叠氮化钠、甲氧咪草烟质量浓度的增加,水稻愈伤组织由白色变为淡黄色,直至褐色,褐化率逐渐增加,愈伤组织成活率逐渐减小,A_(1)、A_(2)、A_(3)与B_(1)、B_(2)、B_(3)各处理组合,水稻幼胚愈伤组织呈白色或淡黄色,褐化率较小,为6.67%~50.00%,成活率较大,为23.33%~96.67%;A_(4)与B_(1)、B_(2)、B_(3)、B_(4)各处理组合,愈伤组织大部分或全部褐化,褐化率较大,为86.67%~100.00%,成活率较小,为0.00%~6.67%;B_(4)与A_(1)、A_(2)、A_(3)、A_(4)各处理组合,愈伤组织褐化较多,褐化率较大,为66.67%~100.00%,成活率较小,为0.00%~16.67%。随着NaN_(3)、甲氧咪草烟质量浓度的增加,水稻愈伤组织丛生芽分化率有逐渐减少的趋势,处理组合间差异显著,其中A_(1)B_(2)、A_(2)B_(2)分化率最高,A_(4)B_(2)有部分分化,但较低,分化率只有5.56%;A_(4)B_(1)、A_(4)B_(3)不能分化出丛生芽。丛生芽经培养,生根率均达100.00%,无统计学意义。结论:NaN_(3)处理的愈伤组织在0.05 g/L甲氧咪草烟中培养,有0.00%~6.67%的成活率,与对照相比降低90.00%~96.67%,并有5.56%成活愈伤组织能分化出丛生芽并生根,即A_(4)B_(2)组合(0.05 g/L甲氧咪草烟、2 mmol/L NaN_(3))为诱导水稻幼胚愈伤组织抗甲氧咪草烟变异、成活、丛生芽分化及生根的最佳处理组合,可为今后水稻抗除草剂育种奠定一定的理论和实践基础。