应用基因芯片技术研究白花蛇舌草豆甾醇抑制人肝癌细胞体外生长的靶基因调控

目的:应用基因芯片技术研究白花蛇舌草豆甾醇(Stigmasterol from Hedyotis diffusa willd.,SHD)抑制人肝癌细胞SMMC-7721生长的靶基因调控。方法:MTT法评价SHD在0、5、10、50、100mg/L浓度下,于24、48、72h对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制率变化。分别提取人正常肝细胞、人肝癌SMMC-7721细胞和SHD作用后的SMMC-7721细胞的总RNA,逆转录合成单链、双链cDNA后,体外转录合成生物素标记的cRNA与人HO4基因表达谱芯片杂交,扫描杂交芯片图像,利用软件获得SHD抑制人肝癌的靶基因,对其进行生物信息学分析。结果:SHD对SMMC-7721具有体外抑制作用,且呈剂量依赖性和时间依赖性;SHD使癌基因fos、myc、ras、pim-1、met、rel下调至正常水平,使抑癌基因NF-2和磷酸激酶MAP2K6的表达上调至正常水平。结论:SHD对人肝癌细胞SMMC-7721具有显著的体外抑制作用;SHD抑制SMMC-7721细胞的作用由多条靶基因协同,并通过胞内外信号转导途径协调完成。

高纯度α-亚麻酸抗血栓活性的初步研究

目的:评价从椒目中提取和纯化获得的高纯度α-亚麻酸的抗血栓药理活性。方法:采用小鼠和大鼠在体血栓形成和肺动脉栓塞等模型,分别观察试药对血小板在动-静脉旁路中丝线上的沉积、肺动脉栓塞小鼠的死亡率、体外血小板聚集和出凝血时间等指标。结果:1.50mg/kg,100mg/kg和250mg/kg高纯度α-亚麻酸及混合不饱和脂肪酸(α-亚麻酸/亚油酸=1/1)给小鼠灌胃治疗10天,显著延长出、凝血时间(P<0.01);明显降低胶原蛋白-肾上腺素诱发性肺动脉栓塞小鼠的死亡率(P<0.01)。2、35mg/kg,70mg/kg和175mg/kg高纯度α-亚麻酸及混合不饱和脂肪酸给大鼠灌胃治疗10天,明显抑制血小板在动-静脉旁路中丝线上的沉积(P<0.01)和大鼠体外血小板聚集(P<0.01)。结论:从椒目中提纯的高纯度α-亚麻酸,作为一种木本油脂新的药用资源和其混合不饱和脂肪酸均具有明显抗血小板聚集和溶栓药理作用,并具有一定量效关系;同时还发现,当α-亚麻酸/亚油酸=1/1时,其抗血栓药理活性优于同剂量高纯度的α-亚麻酸。

连翘酯苷抗感染、解热作用研究

本文观察了连翘酯苷的抗感染作用及解热作用,探讨其与中药连翘清热解毒作用的关系。制备小鼠三种细菌(绿脓杆菌、大肠杆菌、金黄色葡菌球菌)感染模型,观察动物的死亡数,计算死亡率；复制酵母致大鼠发热模型与内毒素致家兔发热模型,现察不同时间动物体温的变化。结果表明连翘酯苷各剂量组均可显著降低细菌感染模型动物的死亡数和死亡率；均可显著降低发热模型动物的体温。提示连翘酯苷具有明显的抗感染和解热作用。

原代培养骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型的建立

目的:观察高脂负荷在胰岛素抵抗形成中的意义。方法:用不同浓度棕榈酸、胰岛素分别培养骨骼肌细胞2h、6h、12h、24h,对棕榈酸诱导组的一部分细胞给予1×10^(-7)M胰岛素刺激2h,用血糖检测试剂盒(GOD-POD)检测各组培养液中的葡萄糖含量,研究不同浓度棕榈酸、胰岛素对骨骼肌细胞摄取葡萄糖的影响,观察胰岛素的生理功效的变化。结果:0.6mM棕榈酸诱导12h以上或者5×10^(-7)M胰岛素诱导24h后,培养液中的葡萄糖浓度比正常组高且有显著性差异,表明细胞的糖代谢能力降低。经1×10^(-7)M胰岛素刺激2h后的棕榈酸诱导组,培养液中葡萄糖的浓度与未经胰岛素刺激的棕榈酸诱导组相比无显著差异,胰岛素的生理功效降低,证实棕榈酸诱导组细胞已对胰岛素产生耐受。结论:高脂或高胰岛素条件均可诱导原代骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型。

川木香对实验性胃溃疡形成的抑制作用研究

目的:研究川木香对实验性胃溃疡形成的抑制作用。方法:采用利血平型小鼠胃溃疡模型、醋酸型大鼠胃溃疡模型,以雷尼替丁为对照药物,观察动物溃疡指数和溃疡抑制率。结果:川木香单体提取物(去氢木香内酯)、醋酸乙酯提取物、乙醇提取物,抑制利血平型溃疡存在统计学差异(与模型对照组比较,P<0.01);醋酸乙酯提取物,抑制醋酸型溃疡存在统计学差异(与模型对照组比较,P<0.05),其中高剂量组作用存在统计学差异(与模型对照组比较,P<0.01)。结论:川木香具有抑制实验性胃溃疡的形成作用,醋酸乙酯提取物可以作为川木香抑制胃溃疡形成的有效部位。

肝郁脾虚证模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质的变化

目的:探讨复合造模法复制肝郁脾虚证大鼠模型的HPA轴变化及特点。方法:大鼠采用慢性束缚+过度疲劳+饮食失节法,连续三周,自然恢复一周。观察造模期间各不同时间点大鼠肾上腺重量及指数、下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)及皮质酮(CORT)的变化。结果:与正常组比较,模型大鼠肾上腺重量第一周显著增加(P<0.001),第三、四周显著减低(P<0.001和P<0.01),其肾上腺指数在实验各周均显著高于正常组(P<0.05和P<0.01);下丘脑CRH第三周显著低于正常组(P<0.05),第四周回升并显著高于正常组(P<0.05);血浆ACTH在第一、三、四周均显著降低(P<0.05);血浆CORT第一周显著降低(P<0.05),第二周有所回复,第三、四周仍显著降低(P<0.05和P<0.001)。结论:该肝郁脾虚证大鼠模型存在HPA轴的功能减低,垂体对上位激素调节的反应能力减低可能是该模型的一个重要的生物学特征。

山茱萸的化学、药理及开发应用研究进展

本文就有关山茱萸中的挥发性成分、环烯醚萜苷、鞣质、有机酸等化学成分,山茱萸的抗菌消炎、调节免疫、降血糖、保肝、抗癌、抗休克、抗氧化、抗艾滋病等药理作用,以及国内外开发应用状况进行了文献综述,并对山茱萸的基础研究和进一步开发利用提出建议。

三七总皂苷对大鼠脑缺血再灌注后脑内NGF和bFGF表达的影响

目的:观察三七总皂苷(PNS)对局灶性脑缺血再灌注后脑组织神经生长因子(NGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)蛋白表达的影响。方法:采用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞局灶性脑缺血再灌注模型。实验动物随机分为假手术组、脑缺血再灌注模型组、模型+PNS治疗组和模型+尼莫地平治疗组。用免疫组织化学方法检测脑内皮质、海马等区域NGF和bFGF蛋白表达。结果:缺血2h再灌注46 h后,脑内海马和皮质区的NGF表达降低,PNS能显著上调海马、皮质区及丘脑区域NGF的表达。缺血2h再灌注46h后,bFGF的表达各脑区无明显差异;但PNS能显著上调缺血再灌注损伤后胼胝体区域内bFGF的表达。结论:局灶性脑缺血再灌注后,PNS能上调缺血脑组织内NGF和bFGF表达,尤其是促进了NGF的表达,这可能是PNS对脑缺血后损伤神经元的保护机制之一。

牛乳中的免疫球蛋白与健康的研究

牛乳是日常生活中不可或缺的营养品,它含有丰富的营养物质,如酪蛋白、乳清蛋白、补体、脂肪和免疫球蛋白等。牛乳中含有的免疫球蛋白主要为IgG,IgA和IgM。其中,IgG含量最高,约为免疫球蛋白总量的80％。母牛分娩后第一天内分泌的初乳中免疫球蛋白含量最高,研究表明,其IgG的平均浓度可达59．80mg/ml。然而,第5-7天的初乳中IgG浓度已接近常乳水平,约为0．7．1．0mg/ml。这些免疫球蛋白不仅对犊牛,而且对新生儿以及普通人群的免疫系统都具有重要的作用。初生的牛犊免疫系统比较脆弱,在其免疫系统功能完善之前,从牛乳中获得免疫球蛋白成为它们抵抗微生物侵袭的重要方式。同样地,婴儿免疫系统功能也不健全,牛乳中的免疫球蛋白能在一定程度上帮助他们抵抗微生物侵袭。在成年人体内,免疫球蛋白具有多种生物活性功能,主要是识别和抵抗入侵的细菌和病毒等病原体,在增强机体的免疫能力、防止细菌和病毒入侵、活化补体、中和毒素、杀死肿瘤细胞等方面发挥着重要作用。经常饮用富含免疫球蛋白的牛乳,可以预防和治疗肠道病原菌引起的感染。牛乳的不同加工过程对其中的免疫球蛋白也有一定的影响。本文就牛乳中免疫球蛋白的成分功能以及各种处理加工过程对其含量的影响进行综述。

山药蛋白多糖体外抗氧化作用的研究

目的:测定山药蛋白多糖体外抗氧化作用。方法:山药经破碎匀浆,水浸提,离心收集上清液减压浓缩,用Sevag法除去游离蛋白质,收集沉淀复溶,透析48 h,冷冻干燥得山药蛋白多糖。采用辣根过氧化酶法、核黄素光照法、Fenton反应2-脱氧-D-核糖法等生物化学方法分别测定了山药蛋白多糖对H_2O_2、O_2、OH的清除能力,用硫代巴比妥酸法、分光光度法分别测定山药蛋白多糖对小鼠肝组织脂质过氧化反应和小鼠红细胞溶血的抑制作用。结果:山药蛋白多糖对活性氧自由基如H_2O_2、O_2.OH具有良好的清除作用,可减少红细胞溶血和抑制小鼠肝匀浆脂质过氧化反应,在一定范围内和剂量成正比。结论:山药蛋白多糖具有明显的体外抗氧化作用,其体外抗氧化能力与蛋白多糖浓度呈正相关性。

三七总皂苷通过抗炎和调血脂作用抑制大鼠动脉粥样硬化形成

目的:利用高脂饮食叠加炎症刺激诱发大鼠动脉粥样硬化(AS)模型,在转录水平及信号转导方面探讨三七皂苷(PNS)防治炎性因素诱发AS的分子机制。方法:实验分为对照组、模型组和治疗组3组,分别腹腔注射给予无菌医用液体石蜡、酵母多糖(Zym,20mg/kg,1次/3天)、Zym(20mg/kg,1次/3天)+PNS(100mg/kg,1次/天)。所有大鼠均喂食含3%胆固醇的高脂饲料。9周后,取血测定血脂水平和血液粘度;应用定量PCR法测定腹主动脉组织中抑制性核转录因子(IκBα)mRNA、心房肽(ANF)mR- NA、基质金属蛋白酶7(MMP7)mRNA以及炎性因子和脂肪酸合成酶(FAS)mRNA的表达;用Western Blotting法检测IκBα的表达。结果:Zym刺激引起大鼠血清总胆固醇、甘油三酯、全血粘度与血浆比粘度均显著升高,IκBαmRNA及其蛋白表达均明显降低,ANF mRNA、MMP7 mRNA和FAS mRNA表达均明显升高。与模型组相比,PNS能明显升高血脂水平、全血及血浆粘度,促进IκBαmRNA与蛋白以及ANF mRNA表达,抑制MMP7 mRNA和FAS mRNA表达。结论:PNS对炎症免疫诱发的AS有显著防治作用,其作用机制与促进IκBα的表达从而抑制相关炎症因子的生成有关,PNS对FAS的表达调节可能是其降脂的主要机制之一。

以PBL为基础的情景教学在呼吸科临床见习中的应用

目的:研究培养学生将基础理论知识和临床实践有机结合,更有效的训练学生的临床思维和创新能力,促进教学质量改革和提高学生综合素质。方法:在教学中采用"以问题为基础"的学习模式(PBL)与情景教学结合的新的带教方法。结果:该方法有效地促进了由被动的学生型向主动的医生型角色的转变,接受PBL学习的学生普遍反应该模式有助于打下灵活的知识基础。结论:在临床见习中应用以PBL为基础的情景学习模式,既能充分利用临床资源,又锻炼了学生的临床思维,是一种非常好的适应当前医疗体制的教学方式,其中的体会和经验都值得进一步摸索和推广。

逍遥散对CUMS模型大鼠行为学及脑内单胺类神经递质的影响

目的:观察逍遥散对慢性温和不可预知应激(CUMS)模型大鼠的行为学及脑内单胺类神经递质含量的影响。方法:应用慢性温和不可预知应激程序对大鼠进行为期11周的造模,造模后3周,分别采用逍遥散(19.5g/kg、25.0g/kg)和丙咪嗪(15.0mg/kg)对模型大鼠进行为期8周的治疗。实验进程中,定期测定大鼠体重、糖水消耗量;应用开场实验测定大鼠爬行格子数和站立次数;造模、治疗结束后处死大鼠,解剖分离大鼠皮层和海马部位,采用荧光分光光度法测定5-HLAA、5-HT、DA和NE含量。结果:与正常对照组比较。大鼠造模后3周糖水消耗量、爬行格子数和站立次数均明显减少(P<0.01);与模型对照组比较,逍遥散19.5、25.0g/kg连续给药2周能显著增加糖水消耗量,但给药4周、7周对糖水消耗量影响不明显;与模型对照组比较,逍遥散25.0g/kg连续给药7周,对大鼠体重、爬行格子数和站立次数表现出提高趋势(P>0.05),逍遥散25.0g/kg连续给药8周,能明显提高模型大鼠皮层部位5-HT含量及海马部位5-HIAA含量(P<0.05,P<0.01)。结论:逍遥散对CUMS抑郁模型大鼠表现出抗抑郁作用,作用机制与影响脑内单胺类神经递质5-HT活性有关。

喉癌的流行病学病因学动态分析

目的:调查我省喉癌流行病学特征及影响喉癌预后的相关因素。为我省喉癌防治工作提供理论依据。方法:对1995年-2005年哈尔滨医科大学附属第二医院耳鼻咽喉-头颈外科收治的1172例喉癌患者进行回顾性调查研究。结果:喉癌发病男女比例为2．48:1,女性喉癌发病率较其他地区高。在年龄分布中,50-69岁患者占68．9％。城市居民比农村居民发明率偏高,是农民的1.35倍,在职业方面以工人最多。吸烟量越大、吸烟时间越长,患喉癌的例数越多。正常人与喉癌患者ABO血型构成比之间无显著差异。声门上型喉癌占喉癌总数的54．43%,声门型喉癌占喉癌总数的36．60％,声门下型喉癌占喉癌总数的1．96％。病理分型中鳞状细胞癌占95．6％。声门上型及喉咽癌颈淋巴结转移明显偏高。结论:我省喉癌发病女性患者较其他地区多,且以声门上型最显著、50-69岁年龄段发病最高。吸烟与喉癌的发生有一定关系。城市居民比农村居民发病率高。喉癌发病与ABO血型无明显关系。

黄芪甲甙对实验性肺纤维化大鼠Cathepsin B表达的影响

目的:探讨黄芪甲甙时实验性肺纤维化大鼠肺组织中组织蛋白酶B(Cathepsin B,CB)表达的影响。方法:36只SD大鼠,随机分为对照组、模型组和干预组。模型组和干预组气管内注射博来霉素(BLM,5mg/kg)诱导肺纤维化,对照组在相同条件下给予生理盐水。第二天起干预组大鼠每天经胃管灌服0．1g/L黄芪甲甙2ml,其余两组相同条件下给予助溶剂羧甲基纤维素钠。治疗的第7d和28d,处死动物取出肺组织,进行病理学观察;测定28d肺组织中羟脯氨酸含量;用免疫组化和RT-PCR观察各组鼠肺组织CB蛋白及mRNA表达的水平。结果:病理学观察显示:与模型组比较,干预组肺泡炎和纤维化程度均减轻;模型组羟脯氨酸含量显著增高,而干预组与模型组比较羟脯氨酸含量明显降低;与模型组比较,干预组CB蛋白及mRNA表达显著降低。结论:黄芪甲甙可能通过押制CB的过度表达,对实验性大鼠肺纤维化具有良好的治疗作用。

红枣的营养成分及其保健功能

主要介绍红枣含有丰富的营养物质及生物活性成分,具有抗衰老作用、cAMP样作用、抗变态反应、抗肿瘤作用、免疫增强作用、增强肌肉力量、抗疲劳、保护肝脏、降压、镇静安神、抗惊厥等保健作用。

实验性动脉粥样硬化家兔MIF、TNF-α和IL-6水平的研究

目的:对实验性动脉粥样硬化家兔血清中巨噬细胞移动抑制因子、肿瘤坏死因子、白介素-6含量进行分析,以探讨它们在冠心病发病过程中的意义。方法:研究对象为新西兰大白兔,随机分成对照组(10只)和实验组(10只)。对照组喂食基础饲料,实验组喂食高脂饲料(基础饲料中加入1%胆固醇+5%猪油)。均喂饲8周后采用ELISA法检测其血清MIF、TNF-α、IL-6水平。结果:组织病理切片结果显示实验组兔主动脉弓内膜增厚,动脉粥样斑块明显。与对照组比较,实验组MIF、TNF-α、IL-6水平均升高,其差别有显著性(p＜0．01)。结论:MIF、TNF-α、IL-6与动脉粥样硬化的发生有密切关系,这些细胞因子可通过相互诱导、相互协同共同参与冠心病的发生、发展过程。

苦参碱引起C6胶质瘤细胞凋亡及其对TRADD表达的影响

目的:应用一系列分子生物学检测技术来检测苦参碱对胶质瘤细胞中TRADD表达的影响,以进一步推测其诱导胶质瘤细胞凋亡的作用机制。方法:采用MTT法测定不同浓度苦参碱作用于C6胶质瘤细胞后的吸光值以计算其抑制率;采用Annex- in/FITC染色进行流式细胞术检测来测定不同浓度苦参碱诱导C6胶质瘤细胞的凋亡率;采用ICC(免疫细胞化学)、Western-blot- ting及Real-time PCR array(实时定量PCR芯片)方法来检测苦参碱对胶质瘤细胞TRADD表达的影响。结果:MTT结果显示细胞抑制率随着药物剂量的增加而增加;Annexin/FITC染色进行流式细胞术的检测结果显示胶质瘤细胞的凋亡率随着药物剂量的增加而增加;ICC、Western-bloning及Real-time PCR array结果显示苦参碱可诱导胶质瘤细胞TRADD基因及蛋白表达的上调。结论:苦参碱可以诱导胶质瘤细胞凋亡,其诱导胶质瘤细胞凋亡可能是通过上调TRADD的表达,以死亡受体途径来实现的。

慢性阻塞性肺疾病患者家庭长期氧疗的临床研究

目的:探讨家庭长期氧疗(LTOT)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的疗效。方法:将我院同期住院病人随机分为LTOT组(51人),对照组(52人)。全部病例在缓解期及治疗后每年测定PaO2、PaCO2、FVC、FEV1、HB、HCT的数值及每年住院次数。结果:①氧疗后12、、3、4、5年与氧疗前比较,低氧血症改善,FEV1明显提高,HB、HCT明显减少;每年住院次数减少;②LTOT组5年生存率62.75%,对照组5年生存率46.15%,差异有显著性(p<0.05)。结论:合理使用LTOT对COPD患者有良好的治疗作用,可提高患者的5年生存率。

腹腔镜手术联合孕三烯酮治疗卵巢子宫内膜异位症的临床观察——108例分析

目的:探讨腹腔镜手术联合孕三烯酮治疗卵巢子宫内膜异位症的远期疗效及安全性。方法:随机选择2003.08～2004.12我院经腹腔镜手术诊断的卵巢子宫内膜异位症患者108例(1例失访已除外),将术后给予孕三烯酮治疗的58例设为研究组,未给予的50例设为对照组。研究组于术后第一次月经后开始服用孕三烯酮2.5 mg,每周两次,连用3-6个月。对照组不用药。所有患者随访6个月～3年观察疗效。结果:两组患者均通过腹腔镜完成手术。随访率99.08%,研究组与对照组的总有效率分别为86.21%和64.00%,两组相比差异有显著性(P<0.01),复发率分别为10.34%和31.25%,两者相比有统计学意义(P<0.01)。34例不孕及要求妊娠者共有18例受孕。结论:腹腔镜术后联合孕三烯酮治疗卵巢子宫内膜异位症疗效确切,能降低复发率,提高受孕,且副反应小。