基于多交叉置换扩增和纳米生物传感技术快速检测肺炎支原体方法的建立

目的建立一种简单、灵敏、快速的肺炎支原体(MP)检测方法,并对其应用性进行验证和评价。方法利用多交叉置换扩增(MCDA)技术对肺炎支原体特异基因CARDS毒素基因进行扩增,利用侧流免疫层析生物传感(LFB)技术读取扩增结果,命名该方法为MP-MCDA-LFB。分析扩增反应在60~67℃(间隔1℃)的扩增效率,筛选最适反应温度;分析分别扩增10、20、30、40 min时能够检测到的最低核酸浓度,筛选最佳反应时间。利用10倍系列稀释的肺炎支原体核酸分析MP-MCDA-LFB方法的灵敏度和检测限,利用35株非肺炎支原体菌株分析MP-MCDA-LFB方法的特异性。利用MP-MCDA-LFB方法检测80份疑似MP感染的临床样本,并与RT-PCR法检测结果进行比较,分析MP-MCDA-LFB方法的临床应用性。结果MP-MCDA-LFB能够实现对肺炎支原体CARDS毒素基因的快速检测。其最佳反应温度为63℃,最短反应时间为40 min,整个检测过程可在1 h内。MP-MCDA-LFB方法具有较高的灵敏度和特异性,其检测限低至45 ng/L,与其他临床表现相似的病原体无交叉反应,特异性为100%。MP-MCDA-LFB方法从80份临床样本中检出45份阳性样本(56.3%),检出率与RT-PCR方法一致。结论本研究建立的以CARDS毒素基因为靶标的MP-MCDA-LFB检测方法具有简单、快速、灵敏度高、特异性强的优点,在基层医疗机构和现场检测具有较好的应用潜力。

肺炎克雷伯菌研究专题

肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,Kpn)是一种能够引起院内感染和社区获得性感染的重要病原微生物。2018年,肺炎克雷伯菌被世界卫生组织列入了全球最具威胁力的病原体。根据菌株毒力的强弱,肺炎克雷伯菌常被分为经典肺炎克雷伯菌(classical K.pneumoniae,c Kpn)与高毒力肺炎克雷伯菌(hypervirulent K.pneumoniae,hv Kpn)。能够感染年轻健康人群的高毒力肺炎克雷伯菌往往被认为对大多数抗生素敏感。但近年来,有关兼具多重耐药与高毒力两种特性的肺炎克雷伯菌的报道越来越多,这迫使研究者应更深入了解耐药菌株的特性并努力探索能够替代抗生素的新型治疗策略。2019年,研究者报道了具有高产乙醇能力的肺炎克雷伯菌(high-alcohol-producing K.pneumoniae,HiAlc Kpn),该类菌株能够在患者肠道内产生大量内源性乙醇,被认为是非酒精性脂肪肝病的新病因。这一发现提醒了研究者们,人类对病原微生物危害性的了解还远远不够。

高产乙醇肺炎克雷伯菌的危害及感染应对策略

高产乙醇肺炎克雷伯菌(HiAlc Kpn)能够在患者肠道内产生大量内源性乙醇,是非酒精性脂肪肝(NAFLD)的新病因,严重危害着人类健康。抗生素治疗是应对细菌感染的主要方式,然而肺炎克雷伯菌的耐药问题日益严重,且抗生素往往破坏人体肠道菌群的平衡。噬菌体疗法有望在不破坏健康肠道菌群的基础上,通过靶向杀伤HiAlc Kpn治疗NAFLD。同时,应积极寻找影响HiAlc Kpn产乙醇能力的目标靶点,为开发“抗毒力药物”提供理论基础。本文主要阐述HiAlc Kpn的危害性并提出治疗HiAlc Kpn感染的一些应对策略。

全髋关节置换术后镇痛与快速康复的研究进展

随着老龄化社会的到来,以及外科麻醉领域的进步,全髋关节置换术(THA)这种治疗终末期髋关节疾病的手术开展得越来越多,其疗效显著,可以有效地提高患者的生活质量。然而,大多数THA患者术后承受着中到重度的疼痛,不利于患者术后进行功能锻炼,甚至发展为慢性疼痛,严重影响患者的康复。目前的镇痛方法包括椎管内镇痛、区域神经阻滞、局部浸润镇痛以及口服或静脉注入镇痛药物等。近年来,在超声可视化工具的辅助下,区域麻醉技术取得了很大进步。本文对THA目前采用的镇痛方式与快速康复相关指标作一综述,旨在进一步探索最佳的镇痛方案以促进医疗质量提升。

参附注射液联合血必净注射液对脓毒症心肌病患者循环和毛细血管充盈时间的影响

目的 评价参附注射液加血必净注射液对(脓毒症心肌病SIC)患者循环和毛细血管充盈时间的影响。方法 将87例SIC患者随机分为治疗组和对照组,对照组44例,治疗组43例。对照组患者给予脓毒症集束化治疗;治疗组在对照组的基础上给予血必净注射液加参附注射液静脉滴注,两组疗程均为3 d。评估病情和预后指标(APACHEⅡ评分、SOFA评分)、心肌损伤标志物(cTnT、NT-ProBNP)、血流动力学指标(MAP、CVP、CI)、微循环指标(Lac、24 h Lac清除率、CRT)。结果 治疗后,两组APACHEⅡ评分、SOFA评分、cTnT、NT-ProBNP、Lac、CRT均降低(P<0.05),均以治疗组更明显(P<0.05),24 h Lac清除率治疗组高于对照组(P<0.05)。治疗后两组患者MAP、CVP较治疗前均升高,治疗后24、48、72 h,治疗组CI高于照组;治疗后第6、24 h,治疗组患者Lac低于对照组(P<0.05);治疗后第3、6、24 h,治疗组患者CRT低于对照组(P<0.05)。结论 在西医常规集束化治疗的基础上,加用参附注射液和血必净注射液治疗,可改善微循环及血流动力学,抑制心肌损伤,有利于改善SIC患者的心功能。

人工智能迭代重建算法对超低剂量胸部CT图像质量和计算机辅助肺结节检测的影响

目的 探讨人工智能迭代重建(AIIR)算法对超低剂量胸部CT图像质量和计算机辅助(CAD)肺结节检测的影响。方法 前瞻性纳入2023年9月至10月于我院行胸部CT检查的患者41例,同时采集常规剂量(120 kVp),采用管电流调制技术,剂量等级2级,参考管电流(106 mAs)和超低剂量(120 kVp,15 mAs)胸部CT,记录辐射剂量参数。常规剂量CT采用Karl迭代重建,超低剂量CT采用Karl和AIIR(1、3、5级)重建,测量5组图像的主动脉、脂肪、肌肉区域的CT均值、噪声指数(SD)并计算信噪比(SNR)和对比噪声比(CNR),主观评价5组图像的整体图像质量。以2名胸部影像诊断医师共同阅片确定的≥4 mm非钙化实性肺结节作为参考标准,记录5组图像CAD肺结节检测的真阳性、假阳性(误诊)和假阴性(漏诊)数量并与参考标准比较,记录超低剂量Karl重建组图像人工阅片时间和CAD阅片时间。结果 5组图像CT值差异无统计学意义(P>0.05),超低剂量AIIR 5重建的SD、SNR和CNR值均优于常规剂量和超低剂量Karl重建,差异均有统计学意义(P<0.005)。超低剂量AIIR 5重建的胸部CT整体图像质量与常规剂量Karl重建相当,优于超低剂量Karl重建(P<0.005)。5组图像CAD肺结节检测的灵敏度差异无统计学意义(P>0.05),超低剂量AIIR重建CAD肺结节检测的假阳性率低于常规剂量和超低剂量Karl重建,差异均有统计学意义(P<0.005)。超低剂量组辐射剂量较常规剂量组降低约89.3%,CAD阅片时间较人工阅片减少63.3%。结论 AIIR在改善超低剂量胸部CT图像质量的同时可以保持CAD肺结节检测的灵敏度,降低CAD肺结节检测的假阳性。

香叶木素抗甲型H1N1流感病毒研究

目的筛选香叶木素与甲型H1N1相关蛋白的结合位点,评价香叶木素抗甲型H1N1病毒的效果,分析抗病毒作用效果和机制,筛选备选的抗病毒单体药物。方法应用分子对接软件Discovery Studio预测香叶木素分子与甲型H1N1病毒相关蛋白的结合位点,筛选可能结合的蛋白位点,并利用等离子共振法对香叶木素分子与初步筛选的甲型H1N1病毒的相关蛋白进行体外分子对接实验,进一步明确香叶木素分子的抗H1N1作用靶点。利用ELISA法以及xCELLigence RTCA DP实时细胞分析技术检测香叶木素对病毒的抑制作用。结合两部分检测结果综合评价香叶木素对甲型H1N1病毒的抗病毒药效,明确作用机制。结果香叶木素与甲型H1N1病毒的HA、NP、NA蛋白均有一定程度的结合,且在无毒计量下对H1N1病毒HA蛋白具有靶向性。香叶木素对甲型H1N1病毒的体外抑制率高达91.97%,其抑制效果在24 h内相对稳定。结论香叶木素通过靶向甲型H1N1流感病毒,可发挥高效的抗甲型H1N1流感病毒活性,为香叶木素等传统中药单体成分在抗甲型流感的药物开发上提供了新的思路。

同种异体骨与异种骨对牙周骨下袋缺损再生治疗的疗效对比

目的对比同种异体的Bio-Gene和异种的Bio-Oss骨修复材料应用于引导组织再生术(GTR)联合植骨术在牙周骨下袋缺损的临床疗效。方法选取牙周基础治疗后仍有骨下袋缺损的牙周炎患者34例进行研究,行GTR联合植骨术的牙周再生手术,分为两组:Bio-Gene组(n=16)和Bio-Oss组(n=18)。比较两组牙周再生术前(T0)和术后12个月(T1)的探诊深度(PD)、临床附着水平(CAL)、牙龈退缩(GR)、探诊出血(BOP)、牙齿松动度(TM)、骨缺损深度(BD)、骨内缺损深度(IBD)、剩余牙槽骨高度(RBH)及骨缺损角度(α)。结果与T0相比,T1期两组的PD、CAL、BOP、TM、BD、IBD及RBH均有显著改善(P<0.05);T1期两组相比,Bio-Gene组的BD和RBH差异显著优于Bio-Oss组(P<0.05)。结论Bio-Gene和Bio-Oss骨移植材料在短时间内均能有效改善牙周骨内缺损。值得注意的是,在降低影像学骨缺损深度方面,Bio-Gene相较于Bio-Oss表现更为优越,为牙周骨内缺损的治疗及临床应用提供新的证据。

九香虫水煎液经口急性毒性试验

目的 明确九香虫水煎液对小鼠的急性毒性,初步评价其安全性,为安全用药提供依据。方法 根据《中药、天然药物急性毒性研究的技术指导原则》([Z]GPT2-1),采用最大耐受量法观察九香虫水煎液对小鼠的急性毒性。将昆明小鼠随机分为对照组和给药组,每组20只,雌雄各半;连续灌胃14 d,每天1次;对照组给予生理盐水,给药组给予20 g/kg九香虫水煎液;观察小鼠中毒症状和活动反应,每2天称量小鼠体重,进食进水量。14 d后解剖小鼠,称量器官重量并进行HE染色,收集血清检测丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、肌酐(Cre)、尿素氮(BUN)指标。结果 与对照组相比,实验组小鼠无中毒症状和异常活动反应,体重、进食量和进水量、各器官脏器系数、血液ALT、AST、Cre、BUN指标无显著差异。给药后小鼠肝、脾、肾、胃、睾丸、卵巢未见病理性异常。结论 九香虫水煎液MTD(最大耐受剂量)>20 g/kg,无致死作用,具有较高的安全性。

中医药治疗慢性肾脏病合并肿瘤的用药规律

目的基于数据挖掘方法探讨中医药治疗慢性肾脏病(CKD)合并肿瘤临床遣方用药规律。方法收集2017年10月至2022年9月天津中医药大学第一附属医院国医堂专家门诊治疗慢性肾脏病合并肿瘤的处方,应用Microsoft Excel 2022、SPSS 26.0及SPSS Modeler 18.0进行中药使用频数、性味、分类、归经、关联规则及核心药对分析。结果最终纳入180个处方进行统计分析,涉及中药214味,药物频次3017次。药性以寒温平为主,药味以甘苦辛为主,归经多为肝脾肺胃经,其中药物频次较高的是补虚药、清热药、活血化瘀药、利水渗湿药。基于关联规则分析提示核心药物为四君子汤、五苓散、当归补血汤、生脉散加入补气升阳、活血化瘀药物加减而成,聚类分析得到4个核心药物组合。结论中医药治疗慢性肾脏病合并肿瘤以扶正祛邪为总的治则,以疏利少阳三焦为治疗大法,融合补肾健脾、调理中焦、疏肝理气、利湿泄浊、活血化瘀、清热解毒等治法,标本兼顾,临证疗效显著,值得借鉴与学习。

孕中期前置胎盘患者超声表现及对提早剖宫产的临床决策

目的 探讨孕中期前置胎盘患者超声表现及对提早剖宫产的临床决策。方法 选取2020年8月至2022年8月于我院就诊的前置胎盘孕妇296例,均行多普勒超声对孕妇产前检测,依据是否为提早剖宫产分为两组,提早剖宫产组(165例)和足月择期剖宫产组(131例),比较两组孕妇的一般临床资料、妊娠结局、围生儿结局、超声表现等情况,影响提早剖宫产的相关危险因素进行单因素Logistic回归分析;采用多因素Logistic回归分析超声指标PI、PS、VI、VIF、IF指标与不良妊娠风险的相关性;R软件构建列线图预测模型;利用建模组数据集作受试工作者特征(ROC)曲线和校准曲线对模型区分度和准确度进行评价,利用验证组数据集对模型进行外部评价。结果 提早剖宫产组的孕妇产前出血和转儿科治疗比例明显高于足月择期剖宫产组,而新生儿体重、5 min Apgar评分明显低于足月择期剖宫产组(P<0.05)。提早剖宫产组的超声指标PI、PS、VI、VIF、IF均高于足月择期剖宫产组,而RI低于足月择期剖宫产组(P<0.05)。入院出血、宫颈内口上方胎盘的厚度≥5 cm、怀孕次数<3次、宫颈长度<31 mm、流产史、宫颈受累、PI≥3.14、PS≥25.61、VI≥9.87、VFI≥3.41、FI≥33.52和RI<0.76均为孕妇提早剖宫产的独立影响因素(P<0.05),且PI、PS、VI、VIF、IF从低到高五分位数组趋势性检验差异有统计学意义(P<0.001);建模组和验证组ROC曲线和校准曲线结果均显示预测模型具有较好的区分度和准确度。结论 孕中期前置胎盘患者超声表现对前置胎盘孕妇紧急提早剖宫产有重要的预测价值,此外,有高危因素者,应该加强围产期管理,避免妊娠不良结局。

N^(6)-甲基腺苷(m6A)转移酶METTL3和m6A调控LINC01465在肝细胞癌增殖转移中的作用机制

目的探讨甲基转移酶样3(METTL3)在肝癌细胞中调控m6A水平,影响长链非编码(lncRNA)LINC01465的表达,促进肝癌细胞增殖转移的机制。方法利用人类癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析METTL3在肝癌组织和正常肝组织中的表达差异及与患者预后的关系;用Western blot、RT-qPCR分析验证METTL3在细胞、组织中的表达;用m6A比色法验证肝癌细胞及正常肝细胞中的m6A水平;敲低METTL3后进行CCK-8、克隆形成、Transwell迁移、侵袭实验,研究METTL3对肝癌增殖转移的调控作用;转录组RNA m6A甲基化测序确定METTL3的下游调控基因LINC01465。RT-qPCR验证沉默METTL3后LINC01465的表达量,以及LINC01465在肝细胞癌中的表达水平。结果METTL3在肝癌组织和细胞中明显高表达且与患者预后较差相关;高表达的METTL3促进HCC细胞增殖、迁移和侵袭;METTL3影响LINC01465的m6A水平及其表达量来促进肝细胞癌的发展进程。结论METTL3可通过m6A依赖的方式来影响LINC01465的表达水平,促进肝癌细胞增殖转移,METTL3可能成为肝癌预后及治疗的靶向标志物。

人工智能迭代重建算法在腹部低剂量增强CT中的临床应用价值

目的探究人工智能迭代重建(AIIR)算法在腹部低剂量增强CT中的临床应用价值。方法前瞻性纳入2023年1-8月于我院行腹部增强CT检查的患者31例,男/女(24/7);平均年龄(60.5±10.8)岁。同时采集常规剂量(100 KVp,采用管电流调制技术,剂量等级3级,参考管电流213 mAs)和低剂量(80 KVp,采用管电流调制技术,剂量等级1级,参考管电流47 mAs)门静脉期腹部增强CT图像并记录辐射剂量参数。常规剂量(SD)CT采用迭代(Karl)重建,低剂量(RD)CT采用Karl和AIIR算法1、3、5级强度重建。测量5组图像门静脉、肝实质、肌肉、脂肪的CT值、噪声指数、信噪比(SNR)和对比度噪声比(CNR),主观评价5组图像的整体图像质量和“蜡质感”。选择长径大于5 mm的肝脏病变共61个,测量病变的SNR及CNR并进行病变显著性主观评价。结果SD腹部增强CT的有效剂量(ED)为(7.06±2.50)mSv,RD腹部增强CT的ED为(1.18±0.54)mSv,RD组辐射剂量较SD组降低约83.3%。5组图像中肝实质、肌肉、脂肪的CT值无差异(P>0.05),门静脉CT值在SD Karl组与RDKarl组之间、RDKarl组与RDAIIR各组之间存在差异(P<0.005)。RDAIIR重建图像的噪声指数、SNR和CNR值均显著优于RD和SD Karl重建图像(P<0.005),RD AIIR 5级重建在整体图像质量和“蜡质感”方面与SD Karl重建相当,符合临床诊断要求。RDAIIR各组病变的SNR和CNR值均显著高于RDKarl组(P<0.005),RD AIIR 5组病变显著性主观评分与SD Karl组相当,高于RDKarl、RD AIIR 1、RD AIIR 3组(P<0.005)。结论AIIR算法可有效降低腹部低剂量增强CT的图像噪声,改善图像质量,提高病变显著性。

基于糖原合成酶激酶-3β及内质网应激探讨Renalase抗肾脏纤维化的作用机制

目的 探讨糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)在Renalase抗肾脏纤维化过程中的作用及其可能的机制。方法 选用C57BL/6小鼠,予以下分组:(1)Sham+Ad-β-gal组;(2)Sham+Ad-Renalase组;(3)UUO+Ad-β-gal组;(4)UUO+Ad-Renalas组。观察GSK-3β表达的变化,其中UUO组为单侧输尿管结扎致肾脏纤维化模型组,Sham组为假手术对照组,Ad-Renalase为过表达Renalase腺病毒,Ad-β-gal为对照腺病毒。然后应用病毒转染技术上调(UUO+Ad-Renalase+AAV-GSK-3β组)及下调(UUO+Ad-Renalase+Ad-GSK-3β-RNAi组)GSK-3β后观察Renalase抗纤维化作用的变化。结果 与假手术(Sham)组相比,UUO组GSK-3β表达增加;与UUO+Ad-β-gal组相比,UUO+Ad-Renalase组纤维组织沉积减少、纤维化标志蛋白Col-Ⅰ和FN表达下降的同时GSK-3β表达下调;当上调GSK-3β后,Renalase抗纤维化作用被抵消,而当下调GSK-3β后,与UUO+Ad-Renalase组相比,UUO+Ad-Renalase+Ad-GSK-3β-RNAi组纤维化没有进一步改善。同时观察到与Sham组相比,UUO组内质网应激激活明显,过表达Renalase后,内质网应激被抑制。当加入内质网应激激动剂TM后,与UUO+Ad-Renalase组相比,UUO+Ad-Renalase+TM组纤维化加重,GSK-3β表达升高;但无论GSK-3β升高或者降低,内质网应激均无明显变化。结论 本研究证实在单侧输尿管结扎致肾脏纤维化过程中,Renalase通过抑制内质网应激下调GSK-3β表达从而延缓肾脏纤维化。

超声在胸膜疾病诊治中的临床应用进展

目的胸膜疾病是临床上常见的疾病之一,其诊治仍存在一些难点,比如诊断的准确性有待提高、治疗难度大且容易复发等,给临床带来挑战。近年来,超声在胸膜疾病诊治领域的运用日益增多,从仅用于胸腔积液的发现与定位,到现在逐渐推广到临床胸腔操作的引导、临床疗效的预测与临床治疗的指导,在一定程度上影响了胸膜疾病的诊疗模式。本文就超声在胸膜疾病诊治中的临床应用进展进行综述,分析超声在胸膜疾病诊治方面的应用,探讨其优点和不足,以期为临床胸膜疾病的诊治提供新的思路和方法。

基于RNA-Seq技术初步探索顺铂在口腔鳞状细胞癌的相关耐药机制

目的 探索口腔鳞状细胞癌(简称口腔鳞癌)顺铂化疗耐药的相关基因及信号通路。方法 建立顺铂诱导的口腔鳞癌细胞耐药模型,将顺铂耐药细胞(HN6-R)与非顺铂耐药细胞(HN6-WT_Control)进行转录组RNA-Seq测序分析,筛选两组中差异表达的基因(DEGs),利用生物信息学方法分析差异基因及相关信号通路。结果 测序结果显示顺铂耐药细胞与非顺铂耐药细胞有216个基因发生显著变化(log_(2)Fold Change, log_(2)FC>1;adjusted P value<0.05),其中55个基因下调,161个基因上调。对耐药细胞中上调的基因进行了基因富集分析(GSEA)确定了潜在的耐药相关通路,其中包括IL6/JAK2/STAT3信号通路、TNF-α和NF-κB信号通路、低氧通路、干扰素-γ应答和干扰素-α的应答通路等,其中变化最显著的基因为CXCL10、CXCL11、NR4A3和IGFBP3等。结论 IL6/JAK2/STAT3等信号通路在口腔鳞癌顺铂耐药细胞株中显著上调,可能成为预测口腔鳞癌化疗疗效的标志物及潜在的治疗靶点。

Apo A5、Alarin、C5a在单纯肥胖儿童高胰岛素血症中评估价值及临床意义

目的探讨载脂蛋白A5(Apo A5)、脂肪因子Alarin、补体C5a(C5a)在单纯肥胖儿童高胰岛素血症(HINS)中评估价值及意义。方法根据是否有HINS将2020年9月至2023年8月我院收治的302例单纯肥胖儿童分为HINS组、无HINS组,比较两组基线数据与血清Apo A5、Alarin、C5a水平,对相关数据进行统计分析。结果HINS组有糖尿病家族史患儿占比及FINS高于无HINS组(P<0.05);HINS组Apo A5低于无HINS组,Alarin、C5a高于无HINS组(P<0.05);相关性分析显示,Apo A5与FINS呈负相关(r=-0.759,P<0.05),Alarin、C5a与FINS呈正相关(r=0.816、0.829,P<0.05);Apo A5与Alarin、C5a呈负相关(r=-0.841、-0.827,P<0.05),Alarin与C5a呈正相关(r=0.860,P<0.05);线性回归分析显示,控制了糖尿病家族史等混杂因素后,Apo A5、Alarin、C5a仍与单纯肥胖儿童HINS呈显著的相关性(P<0.001);Apo A5、Alarin、C5a评估HINS的AUC依次为0.705、0.725、0.717,Apo A5+Alarin+C5a评估HINS的AUC最高为0.932,敏感度为79.17%,特异度为94.17%(P<0.05)。结论Apo A5、Alarin、C5a是单纯肥胖儿童HINS独立相关影响因素,联合检测三者水平有望成为预测HINS的一个有效方案,三者或可为儿童肥胖及HINS的预防提供新思路。

呼吸道病毒混合感染的临床特征和研究进展

由于呼吸道病毒具有相似的组织嗜性、传播途径、易感人群,当多种呼吸道病毒叠加流行时,常发生混合感染。特定呼吸道病毒之间的混合感染会引发更为严重的疾病后果,增加临床治疗的难度。目前,病毒混合感染的致病机制仍不明确,也缺少针对呼吸道病毒混合感染的有效防治策略。在宿主细胞内,不同病毒间的相互作用存在正向促进或负向抑制的差异,相同的信号通路和宿主因子也可能参与了多个病毒的感染周期。本文综述了呼吸道病毒混合感染的临床研究进展及其危害,总结了呼吸道病毒混合感染的相互作用关系和致病机制,提出了广谱疫苗和抗病毒药物在防治病毒混合感染方面的应用前景,为呼吸道病毒混合感染的防治提供了可参考的科学见解。

酒精及高脂饮食双重诱导下脂肪肝的转录组学变化分析

目的通过酒精灌胃和高脂饮食诱导脂肪肝小鼠模型,观察小鼠肝脏表型和转录组学的改变,分析酒精、高脂饮食和联合饮食对肝脏的危害性。方法实验小鼠分为对照组(PBS)、高脂饲喂组(高脂饲料)、酒精灌胃组(40%酒精)、联合饲喂组(酒精+高脂饲料)。HE染色观察各组小鼠肝脏组织病理形态。提取肝脏RNA进行转录组测序,并针对各组转录组学的变化进行分析,观察在单一风险因素作用下和双重风险因素作用下对肝脏的影响。构建基因表达调控网络锁定网络核心基因,并对其进行验证。结果在病理层面,联合饲喂组肝脏相较于单一风险因素各组表现出更为严重的脂质累积和炎症。转录组学分析结果显示,联合饲喂组的基因表达相较于单纯的高脂饲喂组和酒精灌胃组表现出了更为明显的脂质累积通路的活跃和恶化倾向。对单风险因素和双重风险因素的差异表达基因取交集,筛选出了导致脂肪肝肝损伤的主要风险基因。功能分析结果显示高脂饮酒小鼠肝脏的基因表达变化不仅包括脂肪代谢异常,同时也和药物的不良代谢有关,最终导致肝脏炎症增加。通过网络分析可以确定Acacb,Cyp2b10和Cd36可能是高脂饮群体肝脏基因表达变化的主要靶点。结论饮酒和高脂饮食对肝脏的影响虽然都和脂肪累积引起脂肪肝相关,但并不完全一样,高脂饮食人群饮酒会对肝脏产生更严重的影响。然而关于高脂饮食和饮酒对肝脏的具体作用机制有待于进一步深入探索。

实时荧光定量PCR检测猴痘病毒的方法研究

目的建立猴痘病毒(mpox virus)的实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测方法。方法以猴痘病毒F3L基因为靶序列,设计特异性引物和探针,建立猴痘病毒RT-PCR检测方法,并对方法的灵敏度、特异性和重复性进行检测;对疑似猴痘阳性的人脓拭子临床样本核酸进行检测,对RT-PCR方法检测临床样本能力进行评价。结果本研究建立的RT-PCR检测方法可实现猴痘病毒的特异性检测,与天花、痘苗、牛痘等其他正痘病毒无交叉反应,检测重复性好,最低检测限为103copies/μL。可以对人皮肤拭子样本中的猴痘病毒进行准确检测。结论本研究建立了猴痘病毒的RT-PCR检测方法,可在临床样本中快速、特异、灵敏的检测猴痘病毒。