“红阳”猕猴桃采后乙烯生成系统Ⅰ、Ⅱ转变中的关键基因

以“红阳”猕猴桃为原料,采用乙烯进行干预,探究采后果实贮藏期内后熟理化指标、乙烯生成速率和乙烯生成关键酶ACS和ACO活性的变化差异。利用实时荧光定量PCR结合生物信息学分析研究影响ACS和ACO的基因家族各成员的表达差异,克隆乙烯生成系统Ⅰ到Ⅱ转变的关键基因。结果表明:“红阳”猕猴桃在采后贮藏期间硬度从8.7 kg/cm^(2)下降至0.02 kg/cm^(2)、可溶性固容物从8.1%上升至16.9%,乙烯干预和未干预组猕猴桃果实的ACS、ACO活性都呈先上升后下降的趋势,与呼吸强度、乙烯释放速率的变化趋势具有一致性。未干预组样本果实ACS、ACO活性、呼吸强度同时在第9天达到峰值,而乙烯释放速率第7天达到峰值,乙烯处理组则同时第5天达到峰值,表明乙烯处理可以加快猕猴桃果实呼吸高峰、乙烯释放速率高峰和ACS、ACO活性变化峰值的到来。从“红阳”猕猴桃果实中克隆得到6个ACO基因,命名为AcACO1-6。AcACO1-6编码区序列为1101~1270 bp,编码352~402个氨基酸,核苷酸序列同源性为28.3%~99.3%,且均有相同保守结构域PLN02299,该结构域具有ACO酶活性。qRT-PCR结果表明ACO相对表达量是ACS的500倍,ACO基因家族中的AcACO1和AcACO3表达量的变化,和乙烯生成、酶活性变化有高度一致性(R>0.85),且其启动子序列富含涉及转录调控的顺式作用元件,提示AcACO1和AcACO3基因是乙烯生成系统Ⅰ到系统Ⅱ转变的关键基因。

广西不同地区红阳猕猴桃果实香气分析

【目的】探讨广西不同地区的自然条件和土壤条件等对猕猴桃香气的影响,筛选出自然条件和土壤条件适合猕猴桃香气形成的区域,为广西种植猕猴桃选择适宜地区提供参考。【方法】采用顶空固相萃取(HS-SPME)和气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析广西龙胜、乐业果形指数南丹、全州等19个红阳猕猴桃产区的香气种类和含量。【结果】从19个产区的红阳猕猴桃中共检测出71种挥发性香气物质,其中含26种酯类、24种萜类、2种C13衍生物、2种C6化合物、4种醇类、4种醛类、2种酮类、7种烯烃类。19个地区的红阳猕猴桃香气种类介于9~26种之间,香气种类最多的是百色乐业县,恭城县次之,最少的是桂林龙胜县飘里镇,只检测到9种香气物质。红阳猕猴桃中含量较高的主要是酯类和萜类物质,有12个地区的红阳猕猴桃酯类物质占总香气的50%以上,7个地区的萜类物质占总香气的50%以上。含量较高的香气成分有丁酸乙酯、丁酸甲酯、己酸乙酯、苯甲酸甲酯、乙酸乙酯、桉油精等。19个地区的红阳猕猴桃香气含量(w,后同)介于32~215μg·kg^(-1)之间,其中桂林市兴安县溶江镇香气含量最高,灵川县下辖乡香气含量最低。主成分分析(PCA)表明桂林市的龙胜县泗水乡、兴安县溶江镇、临桂区南边山乡、河池市南丹县、罗城县红阳猕猴桃的香气综合得分较高。【结论】综合分析表明,广西桂林市兴安县溶江镇、龙胜县泗水乡和临桂区南边山乡及河池市南丹县、罗城县的红阳猕猴桃香气含量较高、种类也较多,主成分分析综合得分也较高,说明香气较优,气候环境和土壤条件等都比较有利于猕猴桃的香气形成,结果可为广西种植猕猴桃选择适宜地区提供参考。

猕猴桃电商包装随机振动响应及果品损伤研究

目的 研究猕猴桃在5种不同电商包装形式内的振动响应和损伤情况,为猕猴桃电商包装提供理论基础和科学指导。方法 以“红阳”猕猴桃为研究对象,对目前市场常见的5种形式的猕猴桃电商包装(EPE衬垫、EPS衬垫、PET带盖托盘、瓦楞隔板和EPE网套)分别进行扫频振动和随机振动试验研究,获得各包装内猕猴桃的共振频率、振动传递率、果品损伤面积、硬度、质量损失率、可溶性固形物含量等参数,分析包装形式对猕猴桃果实振动响应和振后损伤的影响。结果 PET带盖托盘和EPE网套包装下猕猴桃的共振频率较小,在20~30Hz,处于公路运输振动范围内,易发生共振受损。瓦楞隔板包装的猕猴桃共振频率最大,在50~75Hz内,受到的振动能量较低。5种包装下猕猴桃的振动传递率从大到小为EPE网套、EPE衬垫、瓦楞隔板、EPS衬垫、PET带盖托盘,PET带盖托盘包装的振动传递率最低,为1.68,隔振效果最好;EPE网套和EPE衬垫包装的振动传递率较高,为3.16~3.72,隔振效果较差。振后24 h果实硬度下降了13.5%~48.7%、软化率提高了9.0%~40.4%、质量损失率提高了6.7%~100.0%、可溶性固形物含量(SCC)提高了3.2%~15.0%、损伤面积为981~6 931 mm2。结论 5种包装中PET带盖托盘包装对果实的保护效果最佳,瓦楞隔板和EPE网套包装的保护效果较差。

1-甲基环丙烯对即食“红阳”猕猴桃货架寿命与风味的影响

为探究1-甲基环丙烯(1-methylcyclopropene,1-MCP)处理对猕猴桃货架寿命与风味的影响,以“红阳”猕猴桃为研究对象,果实经250μL/L乙烯催熟后进行1-MCP(0、0.25、0.5μL/L)处理,并进行4℃、14 d的低温贮藏及后继20℃、7 d的常温货架。分析腐烂率、硬度、固酸比、感官评价和香气等生理品质指标的变化,采用主成分分析法(principal component analysis,PCA)进行可食窗口期内货架寿命与风味综合评价。结果表明,与对照组相比,1-MCP可有效维持“红阳”猕猴桃可食窗口期的硬度,延缓固酸比和感官品质的下降。随着货架时间的延长,与对照组和0.25μL/L 1-MCP处理组相比,0.5μL/L 1-MCP处理延缓了酯类物质(丁酸乙酯、丁酸甲酯、苯甲酸甲酯、苯甲酸乙酯)的生成,且保持了较高的醛类物质,经PCA分析发现1-MCP处理后的可食“红阳”猕猴桃可较长保持果实固有风味。因此,1-MCP处理可有效维持可食窗口期内的“红阳”猕猴桃果实中的货架品质,保持了果实的“青草”、“甜香”、“果香”香味,而0.5μL/L 1-MCP处理可对维持即食“红阳”猕猴桃的货架寿命和风味效果最佳。

不同栽培模式对红阳猕猴桃果实生长发育及品质的影响

为探究不同栽培模式对猕猴桃果实生长发育及品质的影响,以渝西地区红阳猕猴桃为研究对象,利用Logistic函数方程对露地和避雨栽培模式下果实单果重量、纵径和横径进行拟合,构建非线性回归方程,并绘制导函数曲线,确定猕猴桃生长发育的关键时期和各指标的理论生长极值,在此基础上,对比分析果实品质指标的动态变化规律。结果表明,不同栽培模式下,猕猴桃果实单果重量、纵径和横径都呈近“S”形增长。Logistic函数方程模型的决定系数R^(2)最高可达0.99978,与实测数据相关性达到极显著水平(P<0.001),避雨栽培下果实单果重量、纵径和横径的理论生长极值k值分别为97.7611 g、62.7504和52.9184 mm,均高于露地栽培,说明避雨栽培理论上具有较大的增产潜力。随着授粉后时间的延长,猕猴桃果实纵径和横径均呈现“快速-缓慢-停滞”的变化规律,果实纵径的增长速率大于横径。避雨栽培下果实生长发育的关键时期为授粉后49~51 d,此时果实单果重量、纵径和横径的增长速率达到最大值,分别为1.64 g·d^(-1)、2.42和1.23 mm·d^(-1),均高于露地栽培。在授粉25 d后,随着时间的延长,猕猴桃果实的可溶性固形物和可溶性糖含量都呈增加的趋势,维生素C和可滴定酸含量则先增加,后减小。避雨栽培下果实的各项品质指标都优于露地栽培。本研究结果可为制定红阳猕猴桃优质高产的栽培管理措施提供技术支撑。

不同雄株花粉组合对“红阳”猕猴桃果实品质的影响

采用雄株优株1号(A)、雄株优株2号(B)、雄株优株3号(C) 3个猕猴桃雄株花粉,对“红阳”猕猴桃进行授粉试验,研究不同雄株花粉组合对“红阳”猕猴桃果实品质的影响。结果表明,不同雄株花粉混合授粉“红阳”猕猴桃后,其果实外观品质和主要内含物质含量均有差异,其中单果重、横径、纵径平均值最大的组合均为BC,果形指数最大的为ABC,可滴定酸含量最低的组合为BC,可溶性固形物含量最高的组合为ABC,ASA(抗坏血酸)含量最高的组合为AC,固酸比最高的组合为ABC。总体上混合授粉后果实的外观品质和内含物质比单一花粉授粉的果实品质好,但具体每一种花粉在混合组合中的作用仍需要进一步研究。

氯吡脲和糖醇螯合钙对红阳猕猴桃产量和品质的影响

为了明确氯吡脲(CPPU)和糖醇螯合钙对猕猴桃果实产量和品质的影响,筛选出改善猕猴桃果实品质的最优处理,以红阳猕猴桃为试验材料,于果实膨大期,采用不同浓度CPPU与糖醇螯合钙及两者组合浸果,果实成熟期测定果实品质各项指标,并对指标进行主成分分析。结果表明:CPPU与糖醇螯合钙处理会不同程度地增加果心空腔率与畸形果率,降低裂果率;不同浓度CPPU与糖醇螯合钙及两者组合对猕猴桃果实品质及产量的影响不同,C4处理(10.0 mg/L CPPU+1 000 mg/L糖醇螯合钙)的增产效果最显著,其次是A3处理(7.5 mg/L CPPU),增产率分别达96.52%与84.88%;基于主成分分析的综合评价得出,A3处理(7.5 mg/L CPPU)对果实产量的提升及品质的改善效果最优,其次是C4处理,其余处理综合得分均高于CK(清水)。综上,氯吡脲和糖醇螯合钙处理能在保证猕猴桃果实品质的前提下,显著提高果实产量。

冷藏期内红阳猕猴桃软腐病病原菌的分离与鉴定

为明确导致贮藏期红阳猕猴桃果实软腐的病原菌种类,本研究以冷藏期红阳猕猴桃病果为试材,采用组织块分离法分离软腐病病原菌,按照科赫法则确定分离病株的致病性,同时采用形态学结合分子鉴定技术对病原菌种类进行鉴定。结果表明,共有4种软腐病病原菌被鉴定,分别是拟茎点霉菌(Phomopsis sp.)、间座壳菌(Diaporthe sp.)、互隔链格孢菌(Alternaria alternata)和细极链格孢菌(A.tenuissima)。上述4种病原菌是新鉴定的冷藏期红阳猕猴桃果实软腐病的病原菌,其中细极链格孢菌作为猕猴桃果实软腐病病原菌被首次报道。

红阳猕猴桃及其杂交后代的ISSR指纹图谱构建及遗传多样性分析

本文采用ISSR标记分析红阳（HY）及其杂交后代共14份材料的遗传多样性，并构建其ISSR指纹图谱。结果表明：从100条ISSR随机引物中筛选出7条引物，在14个供试材料中扩增出92条多态性条带，遗传相似系数在0．308-0．904之间；在相似系数水平为0．607时，可将所有供试材料聚为三类。本研究构建的指纹图谱可有效鉴别供试材料，为今后猕猴桃育种和杂交亲本的选择提供依据。

气调贮藏对‘红阳’猕猴桃果胶含量及相关酶活的影响

摘要研究了气调对采后‘红阳’猕猴桃贮藏期间果实硬度、果胶（可溶性果胶、原果胶）含量及果胶代谢相关酶（果胶甲酯酶PE、多聚半乳糖醛酸酶PG和纤维素酶CX）活性的影响。在温度（1-t-O．5）℃、相对湿度80％～98％的条件下，以空气为对照（CK），采用了4种不同的气调组分CA．（2％0：＋3％CO：）、CA：（2％O2＋6％CO：）、CA，（5％0：＋3％CO：）、CA。（5％O2＋6％CO2）。试验表明：红阳猕猴桃后期贮藏过程中，果实软化与PG和CX有密切联系，而与PE可能无直接联系。气调贮藏可显著延长果实贮藏期，其中CA．和CA，处理的果实贮藏期长达120d，而CA，可更有效地延缓果实硬度的下降，抑制细胞壁降解酶的活性，更好地保持‘红阳’猕猴桃的商品性。

红阳猕猴桃杂交F_1代果实主要经济性状遗传倾向分析

为探讨猕猴桃杂交后代果实性状的遗传特点,以红阳猕猴桃杂交F1代为材料,分析研究了果实大小,可溶性固形物等主要性状遗传倾向特点。结果表明,果实大小呈现趋小的遗传趋势,群体遗传水平呈退化负向趋势;杂交后代果实被毛程度呈趋向中粗偏离母本光滑的遗传趋势;可溶性固形物含量表现超亲遗传倾向;果实子房红色着色程度表现趋向于非红色偏离母本的遗传倾向,也有少量超亲个体,表现一定的杂种优势;果实干物质呈现超亲遗传趋势,且偏向母本性状。果实大小、可溶性固形物含量、果实子房红色着色程度以及干物质含量都表现为数量性状连续变异遗传的特征,果皮表面被毛程度属多基因控制性状。

‘红阳’猕猴桃cDNA文库构建及F3H基因的表达初探

利用SMART（switching mechanism at 5’end of the RNA transcript）技术构建了红肉猕猴桃品种‘红阳’（Actinidia chinesis cv‘Hongyang’）内果皮组织的全长cDNA文库，此文库的构建有助于克隆与次生代谢相关的基因，特别是红肉猕猴桃花青素特异合成代谢的基因。文库滴度为6．7×10^4cfu／mL，库容为2．72×10^8cfu／mL，文库重组率99．8％，插入片段多数分布在700～1000bp。随机挑选1014个克隆进行测序，测序成功963个，经过序列拼接去除低质量序列后获得632个unigenes，包括92个contigs和540个singletons，获得已知功能unigenes共441个。从所测克隆中得到一个花青素途径的结构基因AcF3H，其cDNA序列长1369bp（GenBank登录号：FJ542819），CDS区为1101bp，编码366个氨基酸的多肽。与拟南芥、葡萄及龙胆已知乃日氨基酸序列比对，发现该基因十分保守。通过RT—PCR技术对苍溪栽培的不同发育时期‘红阳’猕猴桃果实AcF3H基因的表达进行了分析。结果表明，果肉转色前AcF3H基因表达量较高，而转色初期表达量降低，此后随着果实着色加深表达量维持在较高水平。

枯草芽孢杆菌Cy-29菌悬液处理对红阳猕猴桃贮藏期品质的影响

采用枯草芽孢杆菌Cy-29对数期菌悬液处理红阳猕猴桃后,在2℃、湿度75%~85%风冷条件下贮藏,每隔7d取样分别测定其果实硬度、可溶性固形物、总糖、可滴定酸以及VC含量的变化。结果表明,枯草芽孢杆菌Cy-29对数期菌悬液处理红阳猕猴桃贮藏前期,显著延缓果实硬度下降;在贮藏前期和中期可溶性固形物含量和总糖变化显著低于对照组;整个贮藏期显著抑制可滴定酸和VC含量下降。综上所述,枯草芽孢杆菌Cy-29菌悬液处理果实后能较好保持果实良好的品质,适当延缓果实的成熟衰老。

不同浓度氯吡脲对红阳猕猴桃质量及其安全性的影响

【目的】分析不同浓度氯吡脲处理的红阳猕猴桃产量、品质及其安全性,筛选适合红阳猕猴桃生产应用的氯吡脲使用方案。【方法】分别对开花后10 d的红阳猕猴桃花朵喷施5.0、6.7、12.5和50.0 mg/L氯吡脲溶液,以喷清水为对照（CK）,喷施后0、6、24、72、120和168 h分别测定各处理氯吡脲在红阳猕猴桃花体中的残留量;喷施后95 d测定果实平均单果重,采果后1~12 d测定各处理果实的失重率和可溶性固形物、有机酸、维生素C（Vc）含量及果实中氯吡脲的残留量。【结果】红阳猕猴桃花朵喷施5.0~50.0 mg/L氯吡脲后,其成熟果实内的氯吡脲残留量均低于国家标准（0.050mg/kg）。6.7 mg/L氯吡脲处理猕猴桃的平均单果重极显著轻于12.5 mg/L处理（P〈0.01,下同）,极显著重于CK及其他氯吡脲处理。6.7 mg/L氯吡脲处理的果实储存时间最长,且与CK及其他氯吡脲处理差异显著（P〈0.05,下同）;可溶性固形物、有机酸含量极显著高于其他氯吡脲处理,Vc含量显著高于其他氯吡脲处理。【结论】6.7 mg/L氯吡脲处理红阳猕猴桃的平均单果重较重、储存时间长、果实外观较好,可溶性固形物、有机酸及Vc含量较高,食用安全,可在红阳猕猴桃花期推广使用。

4种砧木嫁接的红阳猕猴桃光合特性比较

【目的】比较不同砧木嫁接的红阳猕猴桃光合特性,为筛选更适合红阳猕猴桃嫁接的砧木提供参考。【方法】用Li-6400光合测定系统分别测定阔叶砧木（A.latifolia）、桂林砧木（A.guilinensis）、长果砧木（A.longicarpa）和中华砧木（A.chinensis）嫁接的两年生红阳猕猴桃成熟叶片的光响应曲线和光合日变化特征,采用非直角双曲线方程拟合光响应曲线及各光合参数。【结果】4种砧木嫁接的红阳猕猴桃最大净光合速率（Pmax）在17.6853-24.8340μmol/m^2·s变化,表观量子率（AQY）为0.0465-0.0538,光饱和点（LSP）为433.60-494.79μmol/m^2·s,光补偿点（LCP）为33.19-61.79μmol/m^2·s;长果砧木嫁接的红阳猕猴桃光合性能最好,其Pmax、AQY和LSP均最高。红阳猕猴桃的净光合速率（Pn）日变化曲线为双峰型,光合最高峰出现在上午9：30左右,在13：00-14：00,因高温和空气湿度下降引起气孔关闭,发生光合‘午休’现象;长果砧木嫁接的红阳猕猴桃净光合速率（Pn）、水分利用效率（WUE）、光能利用效率（LUE）和羧化效率（CE）均最高。【结论】从光合效率角度评价,选择长果砧木作为红阳猕猴桃的嫁接砧木效果较佳。

都江堰猕猴桃主产区果园土壤肥力状况调查与评价

为全面了解都江堰猕猴桃主产区果园土壤肥力状况以及科学评价土壤环境质量，以该地区处于盛产期的9个果园为研究对象，分析果园表层土壤的pH、有机质以及有效态的N、P、K含量。结果显示：土壤明显偏酸性；土壤有机质含量较为充足，70．7％的土壤样本有机质含量超过了30g／kg；79．3％的土壤样品碱解N含量超过120mg／kg，仅有4．8％的土壤样品碱解N表现缺乏；18．3％的土壤样本速效P含量表现缺乏，仅有8．5％的土壤样品缺乏K素。从整体上看，果园的土壤pH和有机质空间变异较小，而有效P和有效K分布不均衡。此外，本次调查结果显示都江堰猕猴桃主产区果园的土壤环境质量不容乐观．56．1％土壤样本的pH〈5．5，在猕猴桃适宜生长范围pH5．5～7．0的样本数只有32．9％。76．9％的土壤样品碱解N含量超过了150mg／kg；62．2％的土壤样品速效P含量超过了50mg／kg。因此，需要及时提高果园土壤养分管理水平，建议适当调整施肥策略，根据果树生长需肥规律施肥，提高肥料利用率，避免果园施肥造成的面源污染和土壤环境质量恶化。

不同套袋对红阳猕猴桃采后品质及贮藏品质的影响

以红阳猕猴桃为试材,研究不同套袋处理对果实单果重、腐烂率、硬度、可溶性固形物、可滴定酸、香气成分相对含量、多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)酯氧合酶(lipoxygenase,LOX)活性、醇酰基转移酶(acyltransferase,AAT)活性等主要指标的变化规律,并对各项指标进行主成分分析。结果表明,双层袋处理能促进果实早熟,使得果实采摘品质较高,但耐贮性差;白色单层木浆纸处理的果实品质综合表现较好;黄色单层疏水纸袋处理的果实采摘品质较差,但耐贮性较好。主成分分析结果表明,总方差89.09%的贡献率来自于前2个成分,其中决定第一主成分的大小主要是硬度、可滴定酸、淀粉、AAT、醛类香气成分和Vc,贡献率为78.40%,决定第二主成分的大小主要是酯类香气成分,贡献率为10.69%。研究结果显示,套袋技术在红阳猕猴桃产业的应用具有可行性。

红阳猕猴桃引种试验示范

为了优化贵州猕猴桃品种结构,提高猕猴桃果品质量,使猕猴桃产业能更好地发展。2000年在贵州省水城县引种试验示范,2003年开始初花初果,2005年进入盛果期。4个试验点在中等肥水条件下,平均产量2006年1 382.3 kg/667m2、2007年1 555 kg/667m2。可溶性固形物含量高达19%,口感好,品质佳,丰产稳产。从试验结果看,红阳猕猴桃早实、丰产、优质,适宜在贵州类似地区推广。

响应面法优化红阳猕猴桃花色苷提取工艺及抗氧化活性研究

为了研究红阳猕猴桃中花色苷提取的最佳工艺条件,以提取温度、液料比和提取时间为响应变量,以提取液吸光度为响应值,采用三因素三水平的响应面分析法进行试验。结果表明:红阳猕猴桃中花色苷在水中溶解性较好,在所选的优化因素中,对红阳猕猴桃花色苷提取效果的影响按主次顺序排列为:液料比>提取温度>提取时间,最佳工艺条件为提取温度59℃,液料比19(mL/g),提取时间3.3h,在此条件下,红阳猕猴桃水提取液中花色苷的预测吸光值为0.525,实际验证值为0.517。抗氧化活性试验表明:红阳猕猴桃花色苷具有较强的清除DPPH和ABTS自由基能力,其EC50值分别为54.29,34.66μg/mL,同时也显示了较强的还原能力。

1-MCP处理对冷藏‘红阳’猕猴桃果实香气成分的影响

探讨1-MCP处理对红阳猕猴桃果实冷藏期间香气成分的影响。以‘红阳’猕猴桃为试材,固相微萃取(SPME)技术为香气富集方法,气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析其香气成分。试验共检测出92种香气成分,分属于醇类,醛类,酯类,酮类和烃类等,其中醇类、醛类、酯类和酮类物质数量总体上呈先上升后下降趋势,酮类和醇类香气成分含量先上升后下降,与种类变化趋势一致。1-MCP处理果实酮类香气成分相对含量明显低于对照,醇类物质在贮藏后期高于对照。醛类香气含量在总体上呈上升趋势,与酯类香气含量变化相反,烃类是先降低后升高。表明‘红阳’猕猴桃果实在冷藏过程中香气数量变化与香气含量变化并不是总是相对应的,不同贮藏期对照和处理猕猴桃果实中各类芳香物质的种类和相对含量存在很大差异,1-MCP处理在贮藏过程中抑制了猕猴桃果实酯类香气的产生,并在贮藏后期积累了大量的醇类和醛类香气含量,对果实的整体感官质量有一定的影响。