Structure,Binding Characteristics,and 3D Model Prediction of a Newly Identified Odorant-Binding Protein from the Cotton Bollworm,Helicoverpa armigera (Hübner)

The full-length sequence of the odorant binding protein 5 gene,HarmOBP5,was obtained from an antennae cDNA library of cotton bollworm,Helicoverpa armigera （Hübner）.The cDNA contains a 444 bp open reading frame,encoding a protein with 147 amino acids,namely HarmOBP5.HarmOBP5 was expressed in Escherichia coli and the recombinant protein was purified by affinity chromatography.SDS-PAGE and Western blot analysis demonstrated that the purified protein can be used for further investigation of its binding characteristics.Competitive binding assays with 113 odorant chemicals indicated that HarmOBP5 has strong affinity to some special plant volatiles,including （E）-β-farnesene,ethyl butyrate,ethyl heptanoate,and acetic acid 2-methylbutyl ester.Based on three-dimensional （3D） model of AaegOBP1 from Aedes aegypti,a 3D model of HarmOBP5 was predicted.The model revealed that some key binding residues in HarmOBP5 may play important roles in odorant perception of H.armigera.This study provides clues for better understanding physiological functions of OBPs in H.armigera and other insects.

棉铃虫对氰戊菊酯等杀虫剂抗性的选育及其生化机理

从用药水平低的棉田采集棉铃虫Helicoverpaarmigera（Hubner），在室内恒温条件下以人工饲料饲养，用氰戊菊酯等4种杀虫剂和1种混合剂经点滴法分别逐代处理棉铃虫幼虫，以选育其抗药性。用氰戊菊酯选择15代，抗性达311倍；而用灭多威、甲基对硫磷和辛硫磷分别选择13代、14代及13代，抗性仅分别达10．8倍、3．5倍及5．2倍，抗性发展较慢；甲基对硫磷与辛硫磷的混合剂选择12代，抗性也只有4．8倍。氰戊菊酯和溴氰菊酯、三氟氯氟菊酯间存在明显的交互抗性。用生测法测定酶抑制剂和生化法测定酶活性的结果表明，棉铃虫对氰戊菊酯的抗性主要与幼虫体内多功能氧化酶和羧酸酯酶的活性提高有关。

棉铃虫的谷胱甘肽S-转移酶(GSTs):杀虫药剂和植物次生性物质的诱导与GSTs对杀虫药剂的代谢

棉铃虫Helicoverpaarmigera（Hubner）中肠谷胱甘肽S-转移酶（GSTs）对甲基对硫磷和灭多威的代谢能力明显高于对马来酸二乙酯（DEM）和两个混剂。LD5剂量的对硫磷和灭多威对棉铃虫3龄幼虫GSTs的活性均没有诱导增加的影响，用LD50的选择剂量仅对硫磷组GSTs活性增加15％。用含0．01％的芸香苷、2-十三烷酮和槲皮素的人工饲料饲养棉铃虫经1～4代后，GSTs活性提高4～18倍。3种植物次生性物质诱导组对灭多威和溴氰菊酯的敏感度均没有明显的变化，而槲皮素组对甲基对硫磷的敏感度则降低近一半，芸香苷和2-十三烷酮组对甲基对硫磷的敏感度略有降低。这种对甲基对硫磷敏感度的变化可能与上述GSTs活性的变化有关。

棉铃虫对菊酯类杀虫剂抗药性的神经电生理研究

本文用神经电生理方法研究了氰戊菊酯、氯菊酯对棉铃虫Helicoverpaarmigera（Hubner）相对敏感（HD－S）种群和抗性（HJ－R）种群的神经毒理作用。10－5mol／L的氰戊菊酯、10－5mol／L，的氯菊酯诱发腹神经索自发发放频率的增加和随后的神经传导阻断，10-4mol／L的氯菊酯抑制HD－S种群的神经兴奋，直接阻断神经传导。以兴奋时间、神经传导阻断时间、对药剂作用反应时间的个体分布频率3个参数比较两种群对杀虫剂的反应，均发现HJ－R种群比相对HD-S种群表现了2～3倍的神经不敏感机制，并且发现这种神经不敏感机制对毒理Ⅰ型和Ⅱ型拟除虫菊酯同样有作用。

棉铃虫各龄期酯酶同工酶的比较

用高分辨率的薄层等电聚焦对棉铃虫各龄期幼虫的酯酶同工酶进行了比较，结果发现棉铃虫各龄幼虫都有10种相同的酯酶同工酶，它们的pl集中在pH3．5—5，5范围内。本文还从方法学的几个方面进行了探讨。

不同照度对棉铃虫蛾活动的影响

棉铃虫蛾分别在五个日龄（第二至第六天），各经过五个光照梯度的光照处理，结果表明，10－1～10－3lX照度范围是棉铃虫蛾比较合适的活动范围，计算同时表明，棉铃虫蛾在不同照度下的活动反应量差异显著，尤以在10-3lX照度下的活动反应量为最大，约88％左右。

棉铃虫多胚跳小蜂生物学特性研究

棉铃虫多胚跳小蜂是棉铃虫的一种寄生性天敌。该蜂一年1代，以幼虫在土内越复越冬（在棉铃虫幼虫体内），当5月份棉铃虫在麦田产卵时，该峰也同时羽化，并在棉铃虫卵内产卵寄生，当棉铃虫幼虫老熟入土后，该蜂突然行多胚生殖，一个棉铃虫幼虫体内有峰高达800～900头，棉铃虫则很快死亡。本文对该蜂的昼夜活动，田间消长、交配和产卵行为等都作了报道。

基于熵权的灰色关联度分析天敌对棉铃虫的控制作用

天敌对棉铃虫(Helicoverpa armigera(Hbner))的控制作用存在时空上的序列性和阶段性。根据群落种群的发展规律,将天敌对棉铃虫的控制作用分为4个时期,然后利用基于熵权的灰色关联度分析,得到天敌与棉铃虫的动态关联度,以及天敌之间的关联系数。实例分析表明所得到的结果更加客观,可广泛用于昆虫生态研究。

粘虫棉铃虫对杀虫剂活性的相关性

研究了37种杀虫剂对粘虫、棉铃虫活性的相关性。结果表明，粘虫对杀虫剂的活性和棉铃虫是一致的，其直线回归式：Y＝164．36＋0．646X相关系数（R）为0．953。R值受棉铃虫对拟菊酯抗性的影响。

积雪和冬季气候条件对棉铃虫年发生程度的影响

为揭示积雪厚度及冬季气候条件对棉铃虫年发生程度的影响,通过对2002—2008年新湖总场棉铃虫发生情况和气象资料进行统计分析,结果表明,积雪厚度与年发生程度呈显著正相关,2月气温和冬季气温与年发生程度呈显著负相关,年发生程度与11月和12月的降水呈正相关,与1月降水呈负相关,偏最小二乘回归法分析表明,12月降水的相对影响率最大为93.7%。这些结果可作为预测棉铃虫年发生程度的气象指标。

应用灰色系统模型对第二代棉铃虫灾变性预测的研究

本文应用灰色系统理论与方法，对山东省曹县1965～1986年第二代棉铃虫卵发生量构成的离散数列进行数据处理，用微分方程进行拟合，建立了第二代棉铃虫灰色系统GMI，l）长期灾变预测模型：X（’）（t）＝989773ie’“‘””（’－）－8997731并应用该模型对1987～1992年进行预测，结果与实况相吻合。

一步法同时提取棉铃虫中肠RNA和蛋白质

利用一步法从单个棉铃虫(Helicoverpa armigera(Hübner))的中肠样品中分离出RNA和蛋白质。进一步试验证明提取的RNA纯度和完整性较高,能应用于RT-PCR;所获得的棉铃虫中肠蛋白的SDS-PAGE电泳显示,蛋白条带清晰且能应用于Western blot分析。该方法具有简便和快速的特点,并能够实现核酸和蛋白水平上的相互验证。

降雨量与棉铃虫发生的关系研究

本研究利用同一地点连续10年的棉铃虫[Helicoverpa armigera(Hübner)]数量和降水的资料,对降雨量与棉铃虫数量的关系进行分析。结果表明,2-4月的月降雨量和一日最大降雨量均与二代棉铃虫百株卵量呈正相关,其中2月月降雨量与二代棉铃虫百株卵量呈显著正相关,2月中旬降雨量与二代棉铃虫百株卵量呈极显著正相关,3月的日最大降雨量、中旬降雨量与二代棉铃虫百株卵量呈显著正相关,3月降雨量≥0.1 mm的日数与二代棉铃虫百株卵量呈极显著正相关。8月的月降雨量与三代棉铃虫百株卵量呈负相关。8月的降雨量、一日最大降雨量及日最大降雨量≥5.0 mm日数与四代棉铃虫百株卵量均呈极显著正相关。8月下旬的降雨量与四代棉铃虫百株卵量的正相关度最高。9月各旬的旬降雨量均与四代棉铃虫百株卵量呈负相关。10月日最大降雨量≥25.0 mm的日数与次年二代棉铃虫百株卵量呈负相关。11月的降雨量和日最大降雨量≥5.0 mm的日数均与次年二代棉铃虫百株卵量呈极显著负相关,且最重要的降雨旬是11月中旬。建立了18个棉铃虫百株卵量与降雨因子相关达显著以上水平的回归方程。

对粘虫棉铃虫具有速杀活性的新有机磷杀虫剂T-751

T－751（0-甲基-o-苯基-s-正丙基硫代磷酸酯）对粘虫具有高速击倒活性，在所试验的5种杀虫剂中，T－751对粘虫击倒最快。在14·11mg／m2的剂量下，KT50值为5.32分钟，比杀螟松、喹噁磷分别高8倍和1倍。T－751对棉铃虫的击倒活性也是所试验的杀虫剂中最快的。T－751对粘虫具有胃毒和触杀活性，不具有内吸作用。

湿度与棉铃虫发生的关系研究

利用同在半径5 km区域内连续10年的湿度和棉铃虫（Helicoverpa armigera Hübner）百株卵量的调查资料,分析研究了湿度与棉铃虫发生的关系。结果表明,2月平均绝对湿度和最小绝对湿度均与二代棉铃虫百株卵量呈极显著正相关,11月的定时最小相对湿度与次年二代棉铃虫百株卵量呈显著负相关,11月的月平均绝对湿度和月平均相对湿度与次年二代棉铃虫百株卵量呈极显著负相关,10~12月的5种湿度资料均与次年二代棉铃虫百株卵量呈负相关。建立了5个棉铃虫百株卵量与湿度因子呈显著或极显著相关的回归方程。

关中棉区2～4代棉铃虫发生的相关性研究

采用陕西连续37年的棉铃虫(Helicoverpa armigera Hübner)调查资料,研究了关中棉区2~4代棉铃虫之间的关系、发生年频率及各代不同发生程度的年发频率。结果表明,二、三代棉铃虫的相关系数为0.400 3,相关达显著水平,回归方程为y1=34.85+0.400 6x1;二、四代棉铃虫之间的相关系数为0.267 1,相关不显著;三、四代棉铃虫的相关系数为0.667 0,相关达显著水平,回归方程为y2=43.74+0.382 2x2;二代和三代棉铃虫每年都有发生,发生年频率为100%;四代棉铃虫发生年频率为18.9%;二、三、四代棉铃虫中度以上发生的年频率依次是83.8%、46.0%和16.2%;特大发生的年频率依次是2.7%、13.5%和2.7%;四代棉铃虫中度以上发生年频率占四代棉铃虫发生年频率的85.7%,特大发生的年频率占四代棉铃虫发生年频率的14.3%。

转Bt基因棉对棉铃虫影响的研究进展

综述了国内转Bt基因棉对棉铃虫生长发育、行为习性、种群消长、天敌影响的研究进展,探讨其成因机制并提出了建议。

大棚番茄生长发育与棉铃虫危害的模拟模型研究

根据1993～1994年大田资料建立了塑料大棚番茄的生长发育动态模型和棉铃虫Helicoverpaarmigera（Hubner）取食为害模型。动态模拟了番茄的净光合产量和各器官的干物质消长，以及植株的形态建成和产量形成过程。模型把番茄繁殖器官的脱落按其成因归纳为生理的、环境的及病虫害引起的脱落，容易与棉铃虫取食为害模型偶联。棉铃虫对番茄的取食为害模型揭示了第一代、第二代棉铃虫取食不同时期番茄各发育阶段的繁殖器官的组成和数量以及其中的脱落量。番茄蕾、花和小果在试验条件下被棉铃虫为害后分别具有超越补偿、完全补偿和部分补偿的能力。为此在模型中设立了补偿系数，反映番茄的真实损失量。本文的番茄生长发育模型和棉铃虫取食模型，与棉铃虫种群动态模型相偶联，即构建成番茄-棉铃虫管理系统的基本部分。