miR-27b-3p联合miR-215对早期胃癌内镜黏膜下剥离术后复发的预测效能

目的探讨微小RNA(miR)-27b-3p联合miR-215对早期胃癌内镜黏膜下剥离术(ESD)后复发的预测效能。方法2021年1月~2022年2月医院收治的早期胃癌病人122例,所有病人均接受ESD术,随访10~15个月,平均(12.57±1.83)个月,根据早期胃癌病人ESD术后是否复发分为复发组与非复发组。对比两组miR-27b-3p、miR-215相对表达量及临床资料,分析早期胃癌病人ESD术后复发的影响因素,分析miR-27b-3p、miR-215相对表达量及二者联合对早期胃癌病人ESD术后复发的预测价值。结果随访10~15个月,平均(12.57±1.83)个月,122例病人失访3例,随访率为97.54%,其中12例复发,剩余107例均未复发。复发组miR-27b-3p低于非复发组(P<0.05),复发组miR-215相对表达量高于非复发组(P<0.05)。复发组病变大小≥3 cm、浸润深度为SM2~SM3例数占比高于非复发组(P<0.05),复发组R0切除例数占比低于非复发组(P<0.05)。Logistic多因素回归分析结果显示病变大小≥3 cm、浸润深度为SM2~SM3、miR-27b-3p相对表达量、miR-215相对表达量为早期胃癌病人ESD术后复发的影响因素(P<0.05)。miR-27b-3p、miR-215相对表达量及二者联合预测早期胃癌病人ESD术后复发的曲线下面积(AUC)AUC分别为0.783、0.845、0.935。结论miR-27b-3p、miR-215可用于预测早期胃癌病人ESD术后复发风险,二者联合具有更高的预测价值。

缺氧状态下has-miR-215-5p通过抑制BLCAP的表达调控子宫内膜腺上皮细胞增殖和迁移

目的探究缺氧状态下的子宫内膜腺上皮细胞(EEC)增殖和迁移的可能机制。方法分别提取缺氧(1%氧浓度,缺氧组)和常氧(21%氧浓度,常氧组)条件下EEC的RNA进行高通量测序(RNA-sequence),分析两组细胞中微小RNA(microRNA,miRNA)的差异表达。利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)的方法对差异表达的miRNA即has-miR-215-5p进行鉴定,通过miRNA靶基因数据库网站(Target Scan)分析has-miR-215-5p的靶基因。Western Blot检测两组细胞中靶基因膀胱癌相关蛋白(BLCAP)的蛋白表达水平,细胞计数实验检测两组EEC的增殖情况,划痕实验检测两组EEC的迁移能力。结果测序结果显示,缺氧组EEC中has-miR-215-5p表达显著上升(P<0.001),RT-qPCR验证结果与测序结果一致。miRNA Target Scan数据库检索结果显示,BLCAP是has-miR-215-5p的下游靶基因,双荧光素酶报告基因实验结果显示has-miR-215-5p与BLCAP-3’-UTR结合,结合位点突变后结合活性消失。Western Blot结果显示,与常氧组相比,缺氧组EEC中的BLCAP蛋白表达显著下降(P<0.001)。CCK-8及划痕实验分别提示与常氧组相比,缺氧组的EEC增殖能力显著降低、迁移能力显著增强(P<0.001)。结论缺氧条件下EEC中has-miR-215-5p可能通过与BLCAP-3’-UTR结合,抑制BLCAP的表达活性,导致EEC的增殖降低与迁移增强。

FGF-2及miR-215对早期胃癌患者经内镜黏膜下剥离术后复发的预测价值分析

目的探讨成纤维细胞生长因子2(FGF-2)及miR-215对早期胃癌的诊断价值,并分析两者对患者经内镜黏膜下剥离术后复发的预测价值。方法2018年1月到2021年1月,选取我院收治的90例早期胃癌患者,将其分为观察组,另选取同期90例经病理活检确定为正常胃粘膜的志愿者,将其分为对照组。对比两组受检者FGF-2及miR-215表达水平,并建立受试者工作特征(ROC)曲线,分析FGF-2及miR-215对早期胃癌的诊断效能。90例早期胃癌患者均经内镜黏膜下剥离术治疗。术后对患者进行随访依照是否复发情况判定为复发组(n=20)和非复发组(n=70)两个亚组,对比两组患者一般临床情况,并应用logistic回归分析分析FGF-2及miR-215对早期胃癌患者经内镜黏膜下剥离术后复发的预测价值。结果观察组患者胃黏膜组织FGF-2阳性率、表达水平,miR-215阳性率、表达水平明显高于对照组(P<0.05);FGF-2对早期胃癌的诊断效能明显高于miR-215(P<0.05),其中FGF-2诊断早期胃癌的曲线下面积为0.852,最佳诊断界限值为1.11,miR-215曲线下面积为0.735,最佳诊断界限值为0.86;复发组与非复发组患者浸润深度、组织分化程度、FGF-2及miR-215水平对比差异显著(P<0.05);logistic回归分析结果表明:FGF-2及miR-215为胃癌患者预后的独立影响因素(P<0.05)。结论FGF-2及miR-215对于早期胃癌的诊断价值较高,且FGF-2、miR-215水平升高为早期胃癌经内镜黏膜下剥离术后复发的独立预测因素。

miR-215-5p调控YY1通过TGF-β1/Smad信号通路对PCOS大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响

目的探究MicroRNA-215-5p(miR-215-5p)在多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠中的表达及其对卵巢颗粒细胞(GC)凋亡的影响,并分析潜在机制。方法采用脱氢表雄酮(DHEA)建立PCOS大鼠模型,分离并培养原代PCOS大鼠卵巢GC,分为对照组(control组)、sh-NC组、sh-YY1组、sh-YY1+LY2109761组、miR-NC组、miR-215-5p mimic组、miR-215-5p mimic+pc-NC组、miR-215-5p mimic+pc-YY1组。TUNEL法检测PCOS大鼠卵巢组织GC凋亡;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测卵巢组织/GC中miR-215-5p、阴阳-1(YY1)mRNA表达;CCK-8法和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot检测PCOS大鼠卵巢组织/GC中YY1、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad4蛋白表达。结果miR-215-5p在PCOS大鼠卵巢组织中低表达,YY1 mRNA和蛋白水平在PCOS大鼠卵巢组织中显著升高(P<0.05);敲低YY1或上调miR-215-5p可显著增强PCOS大鼠卵巢GC增殖能力,抑制GC凋亡,升高TGF-β1、Smad4蛋白水平(均P<0.05);TGF-β/Smad4信号通路抑制剂LY2109761可显著减弱敲低YY1对卵巢GC凋亡的抑制作用(P<0.05);在过表达miR-215-5p的基础上,上调YY1可抑制TGF-β1/Smad信号通路的激活,显著减弱miR-215-5p mimic对PCOS大鼠卵巢GC凋亡的抑制作用(P<0.05)。结论miR-215-5p在PCOS中呈低表达,过表达miR-215-5p可能通过下调YY1,激活TGF-β1/Smad信号通路,促进PCOS大鼠卵巢GC增殖并抑制其凋亡。

lncRNASOX2-OT调节miR-215-5p/ZEB2轴抑制人前列腺癌细胞系增殖和上皮间质转化研究

目的探讨长非编码RNA SRY盒转录因子2重叠转录本(lncRNA SOX2-OT)调节miR-215-5p/E盒结合锌指蛋白2(ZEB2)轴对前列腺癌细胞增殖和上皮间质转化(EMT)的影响。方法将PC-3细胞分为对照组、si-SOX2-OT组、si-NC组、si-SOX2-OT+anti-miR-215-5p组,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中SOX2-OT、miR-215-5p与ZEB2表达。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)及5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色法检测PC-3细胞增殖;流式细胞术检测PC-3细胞凋亡率;Transwell检测PC-3细胞迁移、侵袭;qRT-PCR检测PC-3细胞miR-215-5p、ZEB2 mRNA、凋亡蛋白与EMT标志蛋白转录表达;Western blot检测PC-3细胞ZEB2、凋亡蛋白与EMT标志蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证PC-3细胞中SOX2-OT对miR-215-5p及miR-215-5p对ZEB2的靶向调节作用。结果与人前列腺上皮细胞相比,人前列腺癌组织源细胞和人前列腺癌细胞株PC-3、DU 145、22RV1中SOX2-OT、ZEB2 mRNA表达升高,miR-215-5p表达降低(P<0.05)。与对照组相比,si-SOX2-OT组细胞活力、EdU阳性率、迁移细胞数、侵袭细胞数、细胞ZEB2、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)及Vimentin mRNA和蛋白表达均降低,细胞凋亡率、miR-215-5p及Bcl-2相关X基因(Bax)、E-cadherin mRNA和蛋白表达均升高(P<0.05)。下调miR-215-5p表达可减弱敲低SOX2-OT对PC-3细胞的影响。结论敲低SOX2-OT可通过促进miR-215-5p表达而下调ZEB2的表达,从而抑制前列腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和EMT,并诱导细胞凋亡。

MAP添加液对冰冻解冻去甘油红细胞保存的质量影响

目的观察冰冻解冻去甘油红细胞悬浮于MAP添加液中对保存效果的影响,探索最佳保存方式。方法本研究将采集后d 3的400 mL全血,离心制备成浓缩红细胞,使用ACP 215全自动血细胞仪,加入40%复方甘油溶液,置于-65℃超低温冰箱中保存30 d,解冻去甘油洗涤后,等量分离成两袋,以添加0.9%氯化钠溶液为对照组;添加MAP为实验组,两组保存于2~6℃冷藏条件下,分别于0、1、3、5、7、14 d取样检测血液学参数指标、溶血指标、细胞代谢指标,观察两组在14 d保存期内的质量变化情况。结果研究发现两组红细胞在解冻去甘油后6项质控项目包括容量、血红蛋白含量、游离血红蛋白含量、白细胞残留量、甘油残留量、无菌试验的检测值均符合《全血及成分血质量要求》(GB18469-2012);压积、红细胞计数、Hb洗涤后回收率、MCV符合《冰冻红细胞质量评价指标专家共识》检测限值,血小板残留量超过检测限值(≤1%);在14 d保存期内,两组的RBC、Hct、MCV和血红蛋白含量值无统计学意义;两组游离血红蛋白、溶血率和K+值随保存时间延长而增加,分别于3、5、7、14 d;3、5、7、14 d;14 d组间有统计学意义(P<0.05),两组红细胞渗透脆性于14 d组间有统计学意义(P<0.05);两组ATP、pH值随保存时间延长而下降,分别于3、5、7 d;1、3、5、7、14 d组间有统计学意义(P<0.05)。结论悬浮于MAP添加液中的冰冻解冻去甘油红细胞可将血液保存期延长至7 d,本研究为相关标准的制定提供参考依据。

猪miR-192/-215的组织表达谱及其关键靶基因分析

【目的】在前期通过Illumina Solexa高通量测序技术并结合荧光定量验证筛选出断奶仔猪E.coliF18菌株感染下表达量极显著上调的micro RNAs—miR-192和miR-215的基础上,为了解miR-192和miR-215的组织表达情况,进一步筛选确定miR-192和miR-215靶向调控E.coli F18菌株感染的关键靶基因,为探讨miR-192和miR-215调控断奶仔猪E.coli F18感染的分子调控机制奠定基础。【方法】试验采用Real-time PCR方法检测miR-192和miR-215在35日龄梅山仔猪各个组织中的分布情况,同时利用MEGA 5.0分析了其保守性,Target Scan预测miR-192和miR-215的靶基因,并对靶基因分别进行Gene Ontology和Pathway通路的富集分析,进一步利用DAVID对靶基因蛋白进行功能分类,最后将预测的靶基因与课题组前期筛选出的断奶仔猪E.coli F18感染抗性相关的调控基因取交集。【结果】miR-192和miR-215在35日龄梅山仔猪十二指肠和空肠中均高度表达,二者成熟序列在脊椎动物中高度保守。miR-192和miR-215对应的靶基因相同,具有156个靶基因,只在轴突导向通路(axon guidance pathway)显著富集(P-value<0.05)以及25个GO功能中显著富集(P-value<0.05)。靶基因蛋白按功能分为12类,其中信号转导功能的磷蛋白(phosphoprotein)和DNA结合蛋白(dna-binding)占主要部分。靶基因与前期筛选的E.coli F18感染抗性相关的调控基因(GEO登录号:GSE26854)取交集,发现DLG5、ALCAM、FRMD4B、MIPOL1和ZFHX3等5个基因为miR-192和miR-215的重要靶基因,其中DLG5为维持小肠上皮细胞结构完整性的重要因子。【结论】miR-192与miR-215是参与维持断奶仔猪肠道正常功能与抗F18大肠杆菌感染的重要因子,DLG5可能是miR-192和miR-215靶向调控E.coli F18菌株感染中关键的靶基因,今后需要进一步验证其能否作为梅山猪抗F18大肠杆菌的有效遗传标记。

三峡工程F_(215)断层复合灌浆效果分析

介绍了三峡工程 F2 1 5 断层带化灌处理的浆材工艺 ,并对灌后效果进行了检查与分析。实践证明 ,运用水泥化学复合灌浆技术处理类似三峡工程 F2 1 5 断层地质缺陷问题能满足设计要求。长江科学院研制的 CW浆材的各项技术指标优良。

微小RNA-215在胃癌中的表达及其临床意义

目的探讨微小RNA-215参与胃癌中的表达及其临床意义。方法应用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测微小RNA-215在胃癌细胞和组织中的表达,分析其表达与胃癌细胞分化程度、临床病理特征的关系。结果微小RNA-215的表达在胃癌细胞中高于正常胃黏膜细胞株,其表达量与胃癌细胞的分化程度之间无明显相关性;在胃癌组织中微小RNA-215与胃癌的分化程度、临床病期分类分期及淋巴结转移等密切相关。结论微小RNA-215可能发挥癌基因的作用参与胃癌的发生、发展进程。

miR-192、miR-215及ERCC3在NSCLC细胞系A549放疗后的表达变化及意义

目的探讨非小细胞肺癌细胞系A549放疗后,miR-192、miR-215及ERCC3的表达变化及意义。方法体外常规培养的A549细胞分为对照组、20 Gy剂量放疗组及40 Gy剂量放疗组,采用RT-qPCR检测miR-192和miR-215变化,Western blot检测ERCC3蛋白表达情况。结果 A549细胞受不同剂量(20 Gy和40 Gy)的射线照射后,miR-192、miR-215表达上调。在20 Gy剂量组中,miR-192上调(4.27±0.56)倍,miR-215上调(6.58±0.56)倍。在40 Gy剂量组中,miR-192上调(4.94±0.39)倍,miR-215上调(7.48±0.47)倍。而ERCC3蛋白水平下调,相较于对照组(1.35±0.23),40 Gy剂量组中ERCC3表达量(0.28±0.08)呈5倍下降,与20 Gy组(0.63±0.14)相比,其值约呈2倍下降。结论在非小细胞肺癌中,放疗可上调miR-192和miR-215的表达,下调其下游靶基因ERCC3的表达,从而对放疗后DNA损伤及修复发挥调控作用。

三峡F_(215)断层化学灌浆现场试验研究

针对三峡工程坝基地质特性 ,通过在多次室内模拟灌浆试验和三峡工程 F2 1 5 断层施工现场中 ,采用自行开发研制的 HGB- 1(2 )型自动调速稳压变量泵及长江科学院研制的 CW1 ～ CW4系列化学灌浆浆材和中化 798系列化灌浆材 ,对其进行了高压水泥化学复合灌浆处理。经过现场取芯检查 ,各项参数均达到了设计要求的指标 :(1)变形模量 E≥ 15 GPa;(2 )抗拉强度 R≥ 1.3 MPa;(3)抗剪参数 C≥ 1.5 MPa,f≥ 1.3;(4 )轴心抗压强度 Ra≥ 10 .5 MPa;(5 )泊桑比μ≤ 0 .2 5 。

miRNA 452-5P及miRNA 215-5P在结直肠癌中的表达及意义

目的研究miRNA 452-5P及miRNA 215-5P在结直肠癌中的表达及其与临床病理特征的关系,并分析其诊断价值。方法收集30组结直肠癌患者的结直肠癌组织及癌旁正常肠黏膜组织,采用实时荧光定量PCR技术检测全部患者结直肠癌组织及癌旁正常肠黏膜组织中miRNA 452-5p、miRNA 215-5p的表达,分析其与临床病理资料之间的关系,并进行ROC分析。结果 miRNA 452-5P在结肠癌组织中表达显著下调(P<0.001),miRNA 215-5p在结肠癌组织中表达显著上调(P<0.001),两种miRNA与结直肠癌患者年龄、性别、分化程度、肿瘤位置、浸润深度、淋巴转移、Dukes分期等均不相关。miRNA 452-5p曲线下面积AUC=0.859(95%CI:0.719～0.999),miRNA 215-5p曲线下面积为AUC=0.879(95%CI:0.757～1.0)。2-miRNAs panel曲线下面积为AUC=0.930(95%CI:0.833～1.0)。结论 miRNA 452-5p在结肠癌组织中表达显著下调,miRNA 215-5p在结直肠癌组织中表达显著上调。2-miRNAs panel对结直肠癌诊断价值较高,可作为潜在的结直肠癌诊断价值的分子标志物和治疗靶点。

ISO/TC215传统医学信息标准跟踪研究

调研了ISO/TC 215健康信息学技术委员会的传统医学信息标准化工作,介绍了"中医药语言系统的语义网络框架"、"中医药文献元数据"、"传统医学中临床所见的描述结构"、"草药术语系统的分类结构"等4个ISO/TC 215正在进行的标准项目,可供传统医学信息标准研究人员参考。

microRNA-215对人视网膜母细胞瘤细胞生长及抑癌基因Rb1表达的调控作用

目的研究micro RNA-215(mi R-215)在视网膜母细胞瘤(RB)组织中的表达及其临床意义,并探讨其对RB细胞活力、增殖及凋亡的影响。方法采用q RT-PCR检测51例RB患者及相应癌旁组织中mi R-215的表达并分析其与患者临床病理特征的相关性。在RB细胞中转染mi R-215类似物或mi R-215抑制物,采用噻唑蓝比色法(MTT)、溴脱氧尿苷(Brd U)细胞增殖分析、Caspase3活性检测及流式细胞仪检测细胞活力、增殖及凋亡的影响。Western blot检测视网膜母细胞瘤蛋白1(Rb1)表达变化。结果 mi R-215在RB组织中的表达水平显著高于对应的癌旁组织(P<0.01);mi R-215表达与视神经浸润(P=0.002)及分化程度(P=0.041)有关;mi R-215在RB细胞系Y79及HXO-Rb44中的表达水平显著高于其在正常视网膜血管内皮细胞ACBRI^(^(-1))81中的表达水平(P<0.01);mi R-215抑制物显著降低HXO-Rb44细胞中mi R-215的表达水平并导致细胞活力降低、增殖能力下降、胞内Caspase3活性增加及凋亡细胞百分比增加;mi R-215类似物显著升高Y79细胞中mi R-215的表达水平并导致细胞活力升高、增殖能力增强及凋亡细胞百分比降低。同时,下调HXO-Rb44细胞中mi R-215水平显著升高细胞内Rb1蛋白表达水平,过表达Y79细胞中mi R-215水平显著降低细胞内Rb1蛋白表达水平。结论 mi R-215在视网膜母细胞瘤组织中表达升高且与恶性临床病理特征相关。mi R-215可增强视网膜母细胞瘤细胞活力、增殖能力并减少细胞凋亡,并可降低细胞内Rb1蛋白表达,提示mi R-215在视网膜细胞瘤的发生发展中发挥重要作用。

文215断块滚动勘探开发新认识

针对复杂断块油气田构造复杂，具多套含油气层系等特点，必须有一套适合于这种地质条件的勘探开发方法。本文介绍了中原油田文215断块滚动勘探开发的主要思路，作法及效果，并说明滚动勘探开发一体化是复杂断块油气田实现少投入、多产出、早回收的一种最优化的程序和方法。文215断块的成功开发，为其它复杂断块油田所借鉴。

血清miR-215和miR-34a表达水平与非小细胞肺癌患者术后复发或转移的关系

目的探究血清微小核糖核酸(miR)-215、miR-34a表达水平与非小细胞肺癌(NSCLC)患者复发或转移的关系。方法选取113例NSCLC患者,根据随访期间是否发生复发或转移分为无复发或转移组(n=54)和复发或转移组(n=59),同期收集113例体检健康志愿者作为对照组。对比3组对象血清miR-215和miR-34a表达水平,对比有无复发或转移组的临床病理参数,分析复发或转移的影响因素,使用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-215和miR-34a预测NSCLC复发或转移的价值。结果血清miR-215在复发或转移组中的表达水平显著低于无复发或转移组和对照组,且无复发或转移组低于对照组(P<0.05)。血清miR-34a在复发或转移组中的表达水平显著高于无复发或转移组和对照组,且无复发或转移组高于对照组(P<0.05)。复发或转移组和无复发或转移组间性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤病理类型、吸烟情况比较差异无统计学意义(P>0.05),复发或转移组和无复发或转移组间肿瘤分化程度、TNM分期比较差异有统计学意义(P<0.05)。TNM高分期、肿瘤低分化及miR-215低表达、miR-34a高表达是NSCLC复发或转移的危险因素(OR>1、P<0.05)。血清miR-215和miR-34a联合预测NSCLC复发或转移的AUC为0.835,准确度为0.845(98/116)。结论NSCLC患者血清miR-215呈低表达,miR-34a呈高表达,且与NSCLC复发或转移密切相关,miR-215、miR-34a对NSCLC术后复发或转移具有一定的预测价值,联合检测对NSCLC复发或转移的预测价值更高。

miR-215抑制骨肉瘤细胞生长及其分子机制

目的:研究miR-215对骨肉瘤细胞143B生长的影响及其分子机制。方法:通过转染miR-215 agomir稳定升高143B细胞内miR-215表达水平,CCK-8实验、平板克隆形成实验以及流式细胞术检测143B细胞的增殖状况以及周期分布。利用生物信息学分析miR-215潜在的靶基因,并通过双荧光素酶报告基因实验、qPCR实验、Western blot实验验证miR-215靶基因。结果:在143B细胞内将miR-215表达水平上调数倍。CCK-8实验、平板克隆形成实验表明miR-215能够抑制143B细胞生长,流式细胞术实验表明miR-215能够延缓143B细胞周期进程。生物信息学、qPCR实验和Western blot实验表明转化生长因子β受体1(transforming growth factorβreceptor 1,TGFβR1)是miR-215潜在的靶基因。结论:miR-215能够抑制骨肉瘤细胞生长,并且该抑制作用可能通过miR-215靶向抑制TGFβR1实现,为骨肉瘤早期诊断和靶向治疗提供了理论依据。

ACP215型血液处理仪制备冰冻红细胞的方法学评价

目的应用ACP 215型血液处理仪制备甘油化红细胞、去甘油化红细胞,观察去甘油化红细胞的质控指标,并对操作方法和制备效果进行评价。方法随机取10袋红细胞悬液(2U/袋),于采血后10天应用215型血液仪处理制备甘油化红细胞,-70℃冰箱保存30天,37℃融化,再应用215型血液处理仪制备去甘油化红细胞。解冻红细胞洗涤前后留取样本检测冰冻红细胞质量。结果红细胞回收率(84±4)%,游离血红蛋白浓度(0.31±0.12)g/L,体外溶血试验(33±15)%,甘油残余量(6.3±2.4)g/L。细菌培养试验阴性。结论ACP 215型血液处理仪可全程自动化无菌制备冰冻红细胞,人为操作误差小,产品质量保证,值得推广。

微小RNA-215-5p靶向eIF2a负向调控结肠癌细胞增殖

目的:探讨微小RNA-215-5p(miR-215-5p)与真核细胞翻译起始因子2a(eIF2a)的靶向关系,分析其通路对结肠癌细胞增殖的调节作用。方法:选择结肠癌患者手术切除标本55例,以肿瘤组织作为观察组,以癌旁正常结肠黏膜组织作为对照组。应用实时荧光定量PCR法(qPCR)检测miR-215-5p的表达,应用免疫组化法检测结肠癌中eIF2a和Ki67的表达。选择结肠癌SW480细胞系,构建空白对照组、空载体转染组、miR-215-5p转染组、miR-215-5p和eIF2a共转染组,应用蛋白印迹法检测各组中eIF2a和Ki67的表达。应用双荧光素酶报告基因实验观察miR-215-5p与eIF2a的结合情况。结果:观察组miR-215-5p的表达明显低于对照组,miR-215-5p表达与肿瘤最大径大小及浸润深度相关;生存分析显示miR-215-5p与预后有关,MiR-215-5p均与eIF2a、Ki67呈负相关性,双荧光素酶报告基因实验显示miR-215-5p与eIF2a具有靶向关系。与空白对照组和空载体转染组比较,miR-215-5p转染组中eIF2a和Ki67的表达下降,共转染组能逆转上述改变。结论:miR-215-5p靶向eIF2a负向调控结肠癌细胞的增殖,miR-215-5p低表达与肿瘤形成及进展密切相关,检测miR-215-5p表达可能对结肠癌预后有提示意义。

视网膜母细胞瘤miRNA-215和Rb1蛋白表达及意义

目的 探讨视网膜母细胞瘤组织microRNA-215(miRNA-215)、视网膜母细胞瘤蛋白(Rb1蛋白)表达及其与临床病理学特征的相关性。方法 选取视网膜母细胞瘤病人65例(73眼)手术切除的癌组织及其配对的癌旁正常组织,采用RT-PCR法检测两者miRNA-215表达、Westernblot方法检测两者Rb1蛋白水平,并分析miRNA-215与Rb1蛋白相关性及二者与病人临床病理特征的相关性及预后的关系;进行细胞转染实验,采用噻唑蓝比色法(MTT)、Caspase-3活性检测、流式细胞术分析miRNA-215类似物及miRNA-215抑制物对人视网膜母细胞瘤细胞(Y79细胞)活力、增殖及凋亡的影响。结果 视网膜母细胞瘤肿瘤组织中miRNA-215的表达水平显著高于癌旁组织,Rb1蛋白表达水平显著低于癌旁组织,差异有显著性(t=-14.14、92.80,P<0.01)。分化型肿瘤组织中miRNA-215表达低于未分化型,Rb1蛋白表达高于未分化型;伴随神经浸润和淋巴结转移病人肿瘤组织中miRNA-215表达高于未出现神经浸润和淋巴结转移病人,Rb1蛋白表达低于未出现神经浸润和淋巴结转移病人(t=-55.30~344.30,P<0.05)。细胞转染结果显示,miRNA-215类似物能显著升高Y79细胞中miRNA-215的表达水平并导致细胞活力升高、增殖能力增强及凋亡细胞百分比降低,同时显著降低细胞内Rb1蛋白表达水平;miRNA-215抑制物则显著降低Y79细胞中miRNA-215的表达水平并导致细胞活力降低、增殖能力下降、胞内Caspase-3活性增加及凋亡细胞百分比增加,同时升高细胞内Rb1蛋白表达水平,差异有显著性(F=148.5~3938.0,P<0.01)。结论 视网膜母细胞瘤组织中miRNA-215和Rb1蛋白表达与临床病理学特征相关,可作为视网膜母细胞瘤预后的监测指标。