糖尿病合并甲状腺功能亢进患者血清miR-122、miR-195表达及意义

目的分析糖尿病合并甲状腺功能亢进(甲亢)患者血清微小RNA-122(miR-122)和微小RNA-195(miR-195)的表达水平,并探讨其临床诊断价值。方法选取我院2020年3月至2023年3月98例糖尿病合并甲亢患者为糖尿病合并甲亢组,选取同期收治的98例甲状腺功能正常的糖尿病患者为糖尿病组,另选本院同期98例体检健康志愿者为健康对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清miR-122和miR-195表达水平。Pearson相关性分析糖尿病合并甲亢患者血清miR-122、miR-195水平与游离三碘甲状腺原氨酸(FT_(3))、游离四碘甲状腺原氨酸(FT_(4))、促甲状腺激素(TSH)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的相关性;血清miR-122、miR-195水平对糖尿病合并甲亢的临床诊断价值分析采用ROC曲线进行判断。结果健康对照组、糖尿病组、糖尿病合并甲亢组患者血清miR-122、miR-195表达水平逐渐增加(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,糖化血红蛋白、FT_(3)、FT_(4)、TSH、HOMA-IR及miR-122、miR-195表达是糖尿病合并甲亢的影响因素(P<0.05)。Pearson分析显示,糖尿病合并甲亢患者血清miR-122、miR-195水平与FT_(3)、FT_(4)、FBG、FINS及HOMA-IR呈正相关(P<0.05),与TSH呈负相关(P<0.05)。ROC曲线分析显示,miR-122和miR-195联合诊断糖尿病合并甲亢的AUC显著大于miR-122单独诊断的AUC(Z=2.245,P=0.025)及miR-195单独诊断的AUC(Z=2.182,P=0.029)。结论糖尿病合并甲亢患者血清miR-122、miR-195表达水平明显升高,二者联合检测对糖尿病合并甲亢具有较高的诊断价值。

miR-647、miR-122、KMT2D表达与前列腺癌临床病理特征及预后的相关性分析

目的探讨前列腺癌组织中微小RNA-647(miR-647)、微小RNA-122(miR-122)、组蛋白赖氨酸甲基转移酶2D(KMT2D)与其临床病理特征及预后的相关性。方法选取100例前列腺癌患者作为研究对象,均于术中采集肿瘤组织及癌旁正常组织标本送检,统计肿瘤组织及癌旁正常组织内miR-647、miR-122、KMT2D表达水平差异;分析miR-647、miR-122、KMT2D表达与肿瘤分期、肿瘤直径、淋巴结转移、微血管侵犯等的关系;并随访2年,比较复发转移与未复发转移患者miR-647、miR-122、KMT2D表达间差异。结果肿瘤组织内miR-647表达水平为(0.62±0.13),低于癌旁正常组织的(1.02±0.19),miR-122、KMT2D表达水平为(6.45±1.24)、(1.45±0.23),低于对照组的(1.23±0.22)、(0.89±0.12)(P<0.05);肿瘤分期Ⅲ期、肿瘤直径≥3 cm、有淋巴结转移及有微血管侵犯患者miR-647表达水平低于肿瘤分期Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤直径<3 cm、无淋巴结转移及无微血管侵犯患者,miR-122、KMT2D表达水平高于肿瘤分期Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤直径<3 cm、无淋巴结转移及无微血管侵犯患者(P<0.05);100例患者术后随访2年,共出现24例复发转移,复发转移率为24.00%(24/100);复发转移患者miR-647表达水平为(0.51±0.11),低于未复发转移患者的(0.73±0.15),miR-122、KMT2D表达水平为(8.42±1.39)、(1.89±0.32),高于未复发转移患者的(4.68±1.02)、(1.12±0.15)(P<0.05)。结论前列腺癌组织内miR-647、miR-122、KMT2D存在不同程度表达,均与肿瘤分期、肿瘤直径及淋巴结转移等关系密切,且可明显影响患者预后,还需临床高度重视。

lncRNA HOTAIR靶向miR-122促进口腔鳞癌细胞的增殖及迁移

目的 探究长链RNA(lncRNA)同源盒基因转录反义(HOTAIR)对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、迁移的影响及潜在的分子机制。方法 人舌癌细胞(CAL27)分为正常对照组、NC组(转染pcDNA空白质粒)、HOTAIR组(转染pcDNA-HOTAIR质粒)及HOTAIR+miR-122组(转染pcDNA-HOTAIR质粒+miR-122 mimic)。采用RT-PCR法检测细胞中HOTAIR和miR-122表达水平,采用CCK-8法检测细胞活力,通过划痕实验检测细胞迁移水平,采用双荧光素酶报告基因实验检测HOTAIR对miR-122基因表达的调控作用。结果 CAL27细胞转染pcDNA-HOTAIR质粒后,miR-122水平降低(P <0.05)。与NC组比较,HOTAIR组细胞活力及细胞划痕愈合率显著提高(P<0.05)。与HOTAIR组相比,HOTAIR+miR-122组细胞活力和细胞划痕愈合率明显降低(P <0.05)。双荧光素酶报告基因结果表明HOTAIR能够抑制miR-122基因表达。结论 过表达HOTAIR能够促进CAL27细胞增殖和迁移,其机制可能与HOTAIR靶向抑制miR-122基因表达有关。

胰腺癌外周血miR-122-5p、NOC2L表达与临床病理特征及预后的相关性

目的研究胰腺癌(PAC)外周血miR-122-5p、NOC2类核仁相关转录阻遏物(NOC2L)表达与临床病理特征及预后的相关性。方法选择2020年1月—2023年1月荆州市第一人民医院肝胆胰外科诊治的胰腺癌患者(PAC组,97例)及胰腺良性疾病患者(对照组,53例)为研究对象,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测外周血miR-122-5p、NOC2L表达;比较不同临床病理特征中miR-122-5p、NOC2L表达差异;Spearman秩相关分析miR-122-5p、NOC2L与临床病理特征的相关性;采用ROC曲线及DeLong法比较miR-122-5p、NOC2L在胰腺癌预后不良预测中的敏感度及特异度;多因素Cox回归分析胰腺癌预后不良的危险因素。Kaplan-Meier生存模型分析并Log Rank比较不同外周血miR-122-5p和NOC2L表达中生存期的差异。结果PAC组患者外周血miR-122-5p表达低于对照组,NOC2L表达高于对照组(t/P=28.061/<0.001、29.701/<0.001)。组织学分级3级、原发肿瘤直径≥4 cm、淋巴结转移N2、远处转移M1及TNM分期Ⅲ~Ⅳ期患者外周血miR-122-5p表达低于组织学分级1~2级、原发肿瘤直径<4 cm、淋巴结转移N0~1、远处转移M0及TNM分期Ⅰ~Ⅱ期患者(t/P=5.935/<0.001、2.801/0.006、3.284/0.001、3.583/<0.001、6.567/<0.001),NOC2L表达高于组织学分级1~2级、原发肿瘤直径<4 cm、淋巴结转移N0~1、远处转移M0及TNM分期Ⅰ~Ⅱ期患者(t/P=2.039/0.044、3.318/0.001、2.287/0.024、2.417/0.018、3.943/<0.001);胰腺癌患者外周血miR-122-5p表达与组织学分级、原发肿瘤直径、淋巴结转移、远处转移及TNM分期呈负相关(r_(s)/P=-0.713/0.016、-0.678/0.021、-0.764/0.009、-0.695/0.011、-0.732/0.004),NOC2L表达与组织学分级、原发肿瘤直径、淋巴结转移、远处转移及TNM分期呈正相关(r_(s)/P=0.657/0.039、0.701/0.014、0.726/0.019、0.672/0.028、0.717/0.015);miR-122-5p、NOC2L及二者联合预测胰腺癌预后不良的AUC分别为0.735、0.719、0.863,二者联合优于各自单独预测效能(Z/P=9.412/<0.05、10.013/<0.05);miR-122-5p≤0.69、NOC2L≥1.21、组织学分级3级、原发肿瘤直径≤4 cm、淋巴结转移N2、远处转移M1、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期为胰腺癌预后不良的独立危险因素[HR(95%CI)=4.051(1.217~6.885)、4.063(1.159~6.968)、1.723(1.013~2.433)、1.831(1.022~2.641)、2.036(1.141~2.932)、2.300(1.097~3.503)、2.474(1.115~3.834)]。miR-122-5p≤0.69且NOC2L≥1.21胰腺癌患者中位生存期显著短于其他患者(miR-122-5p>0.69或NOC2L<1.21)(Log Rank=12.573,P<0.001)。结论胰腺癌外周血miR-122-5p及NOC2L表达与临床病理特征及预后密切相关,在预后及病情预测中具有一定临床价值,两者联合检测时可提高在胰腺癌预后不良预测中的敏感度及特异度。

miR-122在肝病中的研究进展

肝脏有着独特的再生功能,同时,肝脏在人体很多重要的需要相互协调、相互制约的生物学过程中都扮演着举足轻重的角色。越来越多的证据表明,miRNA参与调节肝脏的生长、再生和代谢。因此,肝内的miRNA网络的改变与包括肝炎、肝硬化、脂肪肝、肝癌等诸多肝脏疾病有关。其中,miR-122是肝脏miRNA中含量最丰富也是肝脏生物学和疾病的最关键因子。目前,miR-122已经被证实是丙型肝炎关键宿主因子和药物靶标。这对使用直接靶向药物治疗和干扰素治疗是个有力的补充。文章综述总结了目前所了解到的miR-122在肝脏生理学和疾病中所扮演的角色,其在丙肝和乙肝中的作用以及基于miRNA的治疗肝脏疾病的方法。

miR-122-5p靶向调控人骨髓间充质干细胞诱导成骨分化的分子机制研究

目的:研究miR-122-5p对人骨髓间充质干细胞hBMSCs细胞成骨分化诱导的作用分子机制。方法:运用茜素红S、碱性磷酸酶活性ALP染色试剂盒检测hBMSCs成骨分化的钙结节与成骨活性;使用双荧光素酶报告基因实验验证miR-122-5p与BRCC3之间的靶向关系;运用qRT-PCR分别检测Runx2、Osterix、wnt3a、β-catenin、GSK3-β、miR-122-5以及BRCC3基因的表达情况;Western印迹检测β-catenin蛋白的表达量。结果:过表达miR-122-5p对人骨髓间充质干细胞hBMSCs细胞成骨分化诱导21天后的钙结节与干细胞成骨活性均有明显促进作用,对成骨分化中wnt/β-catenin信号通路主要转录因子Runx2、Os‐terix及wnt3a、β-catenin、GSK3-β主要基因均激活作用,过表达BRCC3对干细胞成骨分化中wnt/β-catenin信号通路主要转录因子Runx2、Osterix及wnt3a、β-catenin、GSK3-β主要基因有抑制作用;并且通过双荧光素酶报告基因与回复性实验确定miR122-5p与BRCC3之间的靶向关系,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-122-5p靶向抑制BRCC3的表达诱导hBMSCs细胞通过wnt/β-catenin通路进行成骨分化诱导。

彩色多普勒超声检查联合血清miR-122-5p、miR-106b水平对卵巢癌的诊断价值

目的 探讨彩色多普勒超声检查联合血清微小RNA(miRNA)-122-5p、miR-106b水平对卵巢癌的早期诊断价值以及与卵巢癌周围血管侵袭的相关性。方法 回顾性选取2019年5月至2021年12月沧州市中心医院收治的102例卵巢肿瘤患者为研究对象,所有患者均行彩色多普勒超声检查,采用实时定量聚合酶链反应测定血清中miR-122-5p和miR-106b的表达水平。以病理诊断结果作为金标准,将研究对象分为卵巢癌组(n=51)和良性卵巢肿瘤组(n=51);卵巢癌组又分为侵袭组(n=32)和非侵袭组(n=19)。比较卵巢癌组与良性卵巢肿瘤组的临床资料(年龄、体重指数、生育和绝经)、彩色多普勒超声图像特征(实性包块、伴腹水、乳头状结构≥4、肿瘤最大直径>10 cm)、彩色多普勒超声血流参数[搏动指数(PI)和血流阻力指数(RI)]、血清miR-122-5p、miR-106b水平。应用多因素Logistic回归模型探究相关变量对卵巢癌的独立预测作用。应用受试者工作特征(ROC)曲线评估彩色多普勒超声检查联合血清miR-122-5p、miR-106b水平对卵巢癌的诊断价值。并比较侵袭组与非侵袭组彩色多普勒超声血流参数及血清miR-122-5p、miR-106b水平,采用Pearson相关性分析对彩色多普勒超声血流参数、miR-122-5p、miR-106b与卵巢癌周围血管侵袭的相关性进行分析。结果 卵巢癌组实性包块、伴腹水、乳头状结构≥4以及肿瘤最大直径>10 cm所占比例分别为80.39%、76.47%、74.51%、78.43%,均高于良性卵巢肿瘤组(9.80%、11.76%、29.41%、45.10%),PI、RI、血清miR-122-5p表达水平分别为0.94±0.27、0.48±0.11、1.01±0.27,均低于良性卵巢肿瘤组(1.47±0.32、0.71±0.19、1.42±0.30),miR-106b表达水平为4.57±1.13,高于良性卵巢肿瘤组(2.86±0.65),差异均有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归模型分析显示,PI、RI、miR-122-5p、miR-106b是卵巢癌的独立预测因子,OR值分别为1.080、1.116、1.689、1.301(P<0.05)。ROC曲线分析显示,PI、RI、miR-122-5p和miR-106b以及联合诊断卵巢癌的曲线下面积(AUC)分别为0.869、0.874、0.859、0.898、0.969,其联合诊断的价值高于单独应用。侵袭组PI、RI和血清miR-122-5p表达水平均低于非侵袭组,血清miR-106b表达水平高于非侵袭组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,彩色多普勒超声血流参数PI、RI及血清miR-122-5p水平与卵巢癌周围血管侵袭呈负相关(r=-0.743、-0.696、-0.822,P<0.05),血清miR-106b水平与卵巢癌周围血管侵袭呈正相关(r=0.863,P<0.05)。结论 彩色多普勒超声检查联合血清miR-122-5p、miR-106b水平可以提高卵巢癌的早期诊断价值,并且可根据这些指标评估卵巢癌周围血管侵袭程度,值得应用推广。

MiRNA-122在运动改善非酒精性脂肪肝中的作用

背景:近年来,随着人们生活水平的提高,非酒精性脂肪肝有逐渐增多的趋势。miRNA-122是肝脏中最丰富的miRNA之一,在维持肝脏内环境稳定和分化中起重要作用。运动训练是非酒精性脂肪肝的非药物治疗手段,运动可能通过调节肝脏miRNA-122的表达改善肝脏脂代谢等过程。目的:综述miRNA-122对非酒精性脂肪肝相关病理因素的影响,以及运动对miRNA-122表达和非酒精性脂肪肝发生发展的影响。方法:第一作者检索中国知网、万方数据库和维普数据库、PubMed、Geenmedical、EBSCO、Medline、Web of Science和Elsevier数据库,以“non-alcoholic fatty liver disease,microRNA,microRNA-122,lipid metabolism,inflammatory response,insulin resistance,exercise,physical exercise,exercise training”为英文检索词,以“非酒精性脂肪肝,microRNA,microRNA-122,脂代谢,炎症反应,胰岛素抵抗,运动,体育活动”为中文检索词,检索2022-06-05前发表的所有相关文献,并对其进行了筛选、归纳、分析、总结,最后纳入68篇文献进行综述。结果与结论:①与健康对照组相比,非酒精性脂肪肝患者循环miRNA-122表达升高,miRNA-122在非酒精性脂肪肝的不同阶段表现出不同的表达情况。②miRNA-122可通过靶向mRNA上的碱基互补配对位点或直接作为某些RNA受体的生理配体调控下游相关蛋白的表达,影响非酒精性脂肪肝脂代谢、炎症反应和胰岛素抵抗等致病因素。③不同的运动方式对非酒精性脂肪肝均有改善作用,对于非酒精性脂肪肝患者,每周需要完成至少120 min的中等强度运动才可产生积极作用;对于能够耐受各种运动的非酒精性脂肪肝患者,应优先考虑每周进行四五次有氧和抗阻运动结合的训练。运动强度应为最大心率的50%-70%,并持续>3个月;而对于耐受力较差的非酒精性脂肪肝患者,抗阻运动可能比有氧运动更可行;此外,非酒精性脂肪肝患者还可根据自身的疾病情况(如肝酶、脂质水平)选择运动方式。④运动可作为防治非酒精性脂肪肝、减轻肝脂肪变性、降低肝脏炎症反应和胰岛素抵抗的可行策略。⑤运动训练可调控机体miRNA-122的表达,但在非酒精性脂肪肝患者中,运动对miRNA-122及其相关信号通路的影响还有待研究。

miR-122-5p和miR-183-5p在脑出血患者中的表达水平及其与神经损伤的相关性

目的 分析脑出血患者神经损伤的影响因素和微小RNA-122-5p(miR-122-5p)、微小RNA-183-5p(miR-183-5p)血清水平对患者神经损伤的诊断价值,探讨二者水平与患者神经损伤的关系。方法 选取2021年6月至2023年7月于绵阳市中心医院住院治疗的146例脑出血患者作为研究对象,依据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)将患者分为轻度损伤组(85例)和中重度损伤组(61例)。实时荧光定量PCR检测两组患者血清miR-122-5p、miR-183-5p水平;比较两组患者的一般临床资料和血清水平;分析患者血清miR-122-5p、miR-183-5p水平与神经损伤之间的相关性;多因素Logistic回归分析脑出血患者神经损伤程度的影响因素,并分析血清miR-122-5p、miR-183-5p水平对患者神经损伤程度的诊断价值。结果 中重度损伤组患者NIHSS评分和血清miR-122-5p水平均高于轻度损伤组,血清miR-183-5p水平则低于轻度损伤组。miR-122-5p与miR-183-5p水平之间、miR-183-5p水平与NIHSS评分之间均呈负相关;miR-122-5p水平与NIHSS评分呈正相关。多因素Logistic回归分析表明,血肿体积、NIHSS评分、血清miR-122-5p水平为脑出血患者中重度神经损伤的危险因素,miR-183-5p血清水平为其保护因素。ROC曲线分析表明,miR-122-5p和miR-183-5p血清水平可作为脑出血患者中重度神经损伤程度的诊断指标,联合诊断的ROC曲线下面积(AUC)和Youden指数更高。结论 脑出血患者的血清miR-122-5p、miR-183-5p水平与神经损伤密切相关,二者联合检测对脑出血患者神经损伤具有较高的临床诊断价值。

miRNA-122在冠心病合并非酒精性脂肪性肝病患者血清中的表达以及临床意义

目的:探讨miRNA-122在冠心病合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血清中的表达以及临床意义。方法:选取2021年1月至2022年12月在我院就诊的200例冠心病患者作为研究对象,按是否合并NAFLD分为单纯冠心病组100例和冠心病合并NAFLD组100例,比较两组患者一般临床资料以及血清miRNA-122表达水平,多因素Logistic回归分析获得影响冠心病患者合并NAFLD的独立预测因素,重点分析miRNA-122与冠心病合并NAFLD的相关性,并构建相关列线图模型,按冠心病合并NAFLD患者miRNA-122的中位数将100例冠心病合并NAFLD患者划分为高miRNA-122组62例(62.0%)和低miRNA-122组38例(38.0%),分析冠心病合并NAFLD患者miRNA-122与临床指标的相关性。结果:多因素Logistic回归分析结果显示,SYNTAX评分、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)以及miRNA-122为影响冠心病患者合并NAFLD的独立预测因素(P<0.05),基于多因素分析获得的3个独立预测因素:SYNTAX评分、HOMA-IR以及miRNA-122,构建冠心病患者合并NAFLD的列线图模型;列线图模型的校准曲线显示,冠心病患者合并NAFLD概率的预测值与实际观测值符合度良好(P>0.05),ROC分析结果显示,SYNTAX评分、HOMA-IR以及miRNA-122预测冠心病患者合并NAFLD的曲线下面积(AUC)分别为0.775(95%CI:0.721~0.856)、0.752(95%CI:0.711~0.813)以及0.822(95%CI:0.784~0.873),3者联合预测的AUC最大为0.918(95%CI:0.878~0.959);低miRNA-122组患者甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、肝脏硬度、SYNTAX评分、C反应蛋白(CRP)以及HOMA-IR明显高于高miRNA-122组(P<0.05)。结论:基于SYNTAX评分、HOMA-IR以及miRNA-122构建的列线图模型对于冠心病患者合并NAFLD具有较高的预测价值,冠心病合并NAFLD患者中血清miRNA-122表达水平较低者,其肝纤维化和冠状动脉粥样硬化病变程度较重。

冠心病患者血清miR-122-5p变化及与斑块稳定程度、预后的关系

目的分析冠心病(CHD)患者血清微小RNA-122-5p(miR-122-5p)变化及与斑块稳定程度、预后的关系。方法选取2019年8月至2021年8月张家口市第五医院186例CHD患者作为研究组,根据斑块稳定程度分为不稳定斑块组(n=58)及稳定斑块组(n=128),另取同期健康体检者90名作为对照组,检测比较所有受试者血清miR-122-5p水平,采用ROC曲线分析血清miR-122-5p水平对CHD患者斑块稳定程度的诊断价值。记录CHD患者治疗后随访1年内心血管不良事件发生情况,并将心血管不良事件发生情况作为评估预后的标准,将研究组分为预后不良组(n=50)及预后良好组(n=136),采用单因素及多因素Logistic分析影响CHD患者预后的因素。结果研究组血清miR-122-5p水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);不稳定斑块组血清miR-122-5p水平均高于稳定斑块组,差异有统计学意义(P<0.05);由ROC曲线可知,血清miR-122-5p诊断CHD患者斑块稳定程度的AUC为0.845(P<0.05);预后不良组血清miR-122-5p水平高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05);Logistic分析显示,血清miR-122-5p水平过高是CHD患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论miR-122-5p在CHD患者血清中呈高表达,对斑块稳定程度具有一定的诊断价值,其水平过高是CHD患者预后不良的独立危险因素。

miR-122在PM_(2.5)诱导的肺损伤中的作用机制

目的探索PM_(2.5)引起的肺损伤的分子机制,以期为肺损伤的诊疗提供新的靶点。方法对PM_(2.5)诱导下肺损伤的多组学数据进行差异基因筛选及分子功能分析,确定肺损伤相关的分子靶标,构建PM_(2.5)诱导的SD大鼠肺损伤模型并进行初步验证。结果HE染色结果显示,暴露组的大鼠肺泡间隔增宽,肺泡腔增大,部分肺泡断裂、融合;Masson染色结果发现暴露组大鼠肺部呈现出少量纤维化。本次实验结果发现,在PM_(2.5)诱导条件下,miR-122表达显著上调,其靶基因胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor 1,IGF1R)表达显著下调。结论PM_(2.5)会导致大鼠的肺损伤,推测miR-122通过调控其靶基因IGF1R进而影响PI3K-AKT信号通路并引起细胞凋亡,加剧肺损伤。

妊娠期糖尿病患者血清microRNA-122联合microRNA-7047-5p预测不良围生儿结局价值

目的探讨妊娠期糖尿病患者血清microRNA-122(miR-122)联合microRNA-7047-5p(miR-7047-5p)预测不良围生儿结局价值。方法选取2018年4月—2023年4月亳州市人民医院接收的100例妊娠期糖尿病患者作为观察组,选取同期该院孕检的90例健康孕妇作为对照组。检测两组血糖水平、血清miR-122、miR-7047-5p,采用Pearson法分析评估血清miR-122、miR-7047-5p水平与血糖水平的相关性;根据随访结果将观察组围生儿结局分为良好组(85例)与不良组(15例),比较两组血清miR-122、miR-7047-5p相对表达量,构建受试者工作特征(ROC)曲线评估血清miR-122、miR-7047-5p联合预测妊娠期糖尿病患者不良围生儿结局的价值。结果观察组空腹血糖(FBG)、2 h餐后血糖(2 hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)水平高于对照组(P<0.05)。观察组miR-122相对表达量高于对照组(P<0.05),miR-7047-5p相对表达量低于对照组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,miR-122与FBG、2hPG、HbA1c均呈正相关(r=0.167、0.228和0.255,均P<0.05),miR-7047-5p与FBG、2 hPG、HbA1c均呈负相关(r=-0.358、-0.408和-0.386,均P<0.05)。不良组miR-122相对表达量高于良好组(P<0.05),miR-7047-5p相对表达量低于良好组(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-122和miR-7047-5p联合预测GDM患者不良围生儿结局的敏感性为73.3%(95%CI:0.449,0.922),特异性为85.9%(95%CI:0.766,0.925),曲线下面积为0.836(95%CI:0.720,0.952)。结论在妊娠期糖尿病患者中,血清microRNA-122和microRNA-7047-5p与血糖水平相关,且两者联合检测可以有效预测GDM患者的不良围生儿结局,具有较高的预测敏感性和特异性。

体外药物性肝损伤模型中miR-122的作用及相关研究

目的研究体外药物性肝损伤肝细胞模型miR-122干预后肝损伤指标、肝细胞增殖以及IL-6水平的变化,探索miR-122在药物性肝损伤肝细胞的可能作用及机制。方法将肝细胞分为Ctrl组、APAP组、APAP+mimic-NC组、APAP+miR-122 mimic组、APAP+inhibitor-NC组、APAP+miR-122 inhibitor组6组,分别取各组细胞上清液,通过PCR法、免疫组化法等分别检测miR-122、AST、ALT、IL-6表达水平及细胞增殖水平。结果(1)miR-122水平比较:APAP+miR-122 mimic组miR-122表达水平最高,APAP+miR-122 inhibitor组miR-122表达水平最低,提示细胞转染成功,APAP组miR-122表达水平与APAP+mimic-NC组、APAP+inhibitor-NC组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)细胞增殖水平比较:Ctrl组细胞增殖水平最高,APAP+miR-122 inhibitor组细胞增殖水平最低,APAP组与APAP+mimic-NC组、APAP+inhibitor-NC组细胞增殖水平差异无统计学意义(P>0.05),与APAP+miR-122 mimic组细胞增殖水平差异有统计学意义(P<0.05)。(3)肝损伤指标比较:Ctrl组AST、ALT水平最低;APAP+miR-122 inhibitor组AST、ALT水平最高;APAP组与Ctrl组、APAP+miR-122 mimic组、APAP+miR-122 inhibitor组AST、ALT水平之间差异有统计学意义(P<0.05);与APAP+mimic-NC组、APAP+inhibitor-NC组AST、ALT水平之间差异无统计学意义(P>0.05)。(4)IL-6表达水平比较IHC结果显示:Ctrl组IL-6表达水平最低,APAP+miR-122 inhibitor组IL-6表达水平最高;APAP组与APAP+miR-122 mimic组、APAP+miR-122 inhibitor组之间IL-6表达水平差异有统计学意义(P<0.05),与APAP+mimic-NC组、APAP+inhibitor-NC组之间IL-6表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论miR-122可能通过调控IL-6实现对DILI肝细胞的保护作用。

慢性心力衰竭患者血清miR-122和miR-558水平表达与心功能及心率变异性的相关性研究

目的探讨慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)患者血清微小RNA-122(miR-122)和微小RNA-558(miR-558)水平表达与心功能及心率变异性的关系。方法收集2019年1月~2022年1月武汉市东西湖区人民医院收治的100例慢性心力衰竭患者作为研究组,同期在该院进行体检的健康者100例作为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测两组血清miR-122和miR-558表达水平;比较两组心率变异性指标及心功能指标;采用Pearson法分析慢性心力衰竭患者血清miR-122,miR-558表达水平与心率变异性指标、心功能指标的相关性;用Logistic回归分析影响慢性心力衰竭的危险因素。结果与对照组相比,慢性心力衰竭患者血清miR-122(0.86±0.19 vs 1.07±0.16)及心率变异性指标、左室射血分数(LVEF)均明显降低(t=3.844~15.448),miR-558(1.28±0.27 vs 1.02±0.12)表达水平及左室舒张末期容积指数(LVEDVI)、左室收缩末期容积指数(LVESVI)均明显升高(t=6.794~9.358),差异具有统计学意义(均P<0.05);不同心功能分级I,II级组患者血清miR-122(1.19±0.23,1.04±0.21)表达水平显著高于III,IV级组(0.68±0.16,0.53±0.15),miR-558(0.93±0.24,1.21±0.26)表达水平显著低于III,IV级组(1.42±0.27,1.64±0.29),差异具有统计学意义(qmiR-122=3.751~14.568,qmiR-558=3.929~11.194,均P<0.05)。慢性心力衰竭患者血清miR-122与心率变异性指标、LVEF均呈正相关性(r=0.337~0.573),与LVEDVI,LVESVI呈负相关性(r=-0.385,-0.323),血清miR-558与心率变异性指标、LVEF均呈负相关性(r=-0.646~-0.246),与LVEDVI,LVESVI呈正相关性(r=0.528,0.547);血清miR-122[OR(95%CI)=0.528(0.328~0.850)],miR-558[OR(95%CI)=2.845(1.364~5.933)]是慢性心力衰竭的影响因素(P<0.05)。结论慢性心力衰竭患者血清miR-122,miR-558表达水平与心功能、心率变异性密切相关,且血清miR-122和miR-558是慢性心力衰竭的影响因素。

GDF15、miR-122、AFP和PIVKA-Ⅱ联合评估在HBV感染肝硬化患者肝细胞癌发生风险中的预测价值

目的评估血清生长分化因子15(GDF15)、microRNA-122(miR-122)、甲胎蛋白(AFP)和异常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)联合检测在监测乙肝病毒(HBV)感染肝硬化患者中肝细胞癌(HCC)的风险预测价值。方法将2017年12月至2022年1月在首都医科大学附属北京友谊医院就诊的45例HBV相关肝硬化患者、50例HCC患者纳入横断面研究,设为肝硬化组和HCC组;另选22例监测期间新确诊HCC的HBV肝硬化患者纳入纵向研究队列,分别对肝硬化组和HCC组患者以及监测期间新确诊HCC的HBV肝硬化患者的系列血清标本[新确诊HCC前12~18个月(T_(1))、新确诊HCC前6~12个月(T_(2))以及HCC诊断时(T_(3))]进行检测,测定GDF15、miR-122、AFP和PIVKA-Ⅱ水平。比较各组患者每项标志物的检测水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析GDF15、miR-122、AFP和PIVKA-Ⅱ单独或联合检测对HCC患者的诊断价值,评估标志物的组合预测HBV感染肝硬化患者的HCC风险。结果横断面研究中,HCC组患者血清GDF15、AFP和PIVKA-Ⅱ水平分别为1760.64 pg/mL、40.24 ng/mL、106.37 mAU/mL,均显著高于肝硬化组患者(1357.63 pg/mL、9.07 ng/mL、22.59 mAU/mL),miR-122水平为38.72,则显著低于肝硬化组患者(75.70),差异均有统计学意义(P<0.05)。GDF15、miR-122、AFP和PIVKA-Ⅱ单独诊断HCC时,曲线下面积(AUC)分别为0.734、0.644、0.776、0.823;AFP和GDF15两项联合,AUC为0.835;GDF15、AFP和PIVKA-Ⅱ三项联合,AUC为0.860;GDF15、miR-122、AFP和PIVKA-Ⅱ四项联合,AUC最佳为0.876。区分肝硬化和HCC时,PIVKA-Ⅱ具有较高的敏感度(72.5%);GDF15具有较高的特异度(83.2%);AFP和PIVKA-Ⅱ联合,特异度最高(92.0%);四项联合,敏感度增加(82.2%),约登指数最高(0.622)。纵向研究结果未观察到每种单一生物标志物随时间的变化,而GDF15、AFP和PIVKA-Ⅱ三项联合以及GDF15、miR-122、AFP和PIVKA-Ⅱ四项联合,在三个时间点的检测值差异有统计学意义(P<0.01)。肝硬化患者横截面和纵向(T_(1))之间观察到四项组合的差异有统计学意义(P<0.05),提示标志物的联合应用可有效区分即将发生HCC和不会发生HCC的肝硬化患者。结论GDF15、miR-122、AFP和PIVKA-Ⅱ联合检测可以提高对HBV相关肝硬化和HCC患者的分辨力,且在HBV相关的肝硬化中,GDF15、miR-122、AFP和PIVKA-Ⅱ的组合能够识别HCC发展风险较高的患者,具有临床价值。

UCA1/miR-122-5p/CPEB1轴促进肺腺癌的顺铂耐药发生机制研究

目的探讨尿路上皮癌胚抗原1(UCA1)/miR-122-5p/pcDNA-胞质多聚腺苷酸元件结合蛋白1(CPEB1)轴促进肺腺癌的顺铂耐药发生机制研究。方法通过实时荧光反转录定量PCR(RT-qPCR)检测UCA1相关miRNA分子,并通过细胞转染获得miR-122-5p和CPEB1相关细胞株。通过双荧光素酶报告实验分别验证UCA1与miR-122-5p、CPEB1与miR-122-5p的结合。药物敏感性实验获得顺铂药物半抑制浓度(IC50);通过肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库分析CPEB1在肺腺癌中的表达情况以及与免疫细胞功能的关系。结果miR-122-5p在肺腺癌细胞中的表达水平明显升高,并通过双荧光素酶报告实验以验证UCA1与miR-122-5p结合,构建miR-122-5p抑制物和模拟物转染肺腺癌细胞株,发现miR-122-5p抑制后,顺铂IC50浓度下降,而miR-122-5p过表达后,顺铂IC50浓度升高。CPEB1在肺腺癌细胞中的表达水平明显降低,双荧光素酶报告实验证实CPEB1是与miR-122-5p结合,CPEB1过表达后,顺铂IC50浓度减低;对TCGA数据库分析显示肺腺癌组织CPEB1 mRNA明显低于癌旁组织,ROC曲线分析显示CPEB1表达水平能较好地用于诊断肺腺癌(AUC=0.849),进一步分析显示CPEB1表达水平与肺腺癌患者的细胞功能如T细胞、B细胞、CD8+T细胞、自然杀伤细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、树突状细胞、肥大细胞存在密切关联。结论UCA1与miR-122-5p存在结合位点,后者可影响肺腺癌的顺铂耐药,并与靶基因CPEB1结合;肺腺癌中CPEB1呈低表达,降低肺腺癌顺铂药物的敏感性。UCA1/miR-122-5p/CPEB1轴有望为干预肺腺癌顺铂耐药的靶点。

血清miR-122-5p、miR-618、miR-202联合检测对原发性肝癌的诊断价值分析

目的分析血清微小核糖核苷酸-122-5p(miR-122-5p)、微小核糖核苷酸-618(miR-618)、微小核糖核苷酸-202(miR-202)联合检测对原发性肝癌的诊断价值。方法选取应急总医院2022年1月~2023年1月收治的原发性肝癌患者118例纳入原发性肝癌组,另择同期120例良性肝脏疾病患者纳入良性组,120例健康体检者为健康对照组,回顾性收集临床资料。比较3组研究对象血清miR-122-5p、miR-618、miR-202水平,通过Pearson相关性分析分析血清miR-122-5p、miR-618、miR-202水平之间的相关性;以原发性肝癌组作为阳性组,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-122-5p、miR-618、miR-202单独及联合检测对原发性肝癌的诊断价值。结果原发性肝癌组血清miR-122-5p、miR-618、miR-202水平低于良性组和健康对照组,良性组低于健康对照组,差异有统计学意义(F=193.644、88.486、105.045,P<0.05)。年龄≥60岁、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、乙型肝炎病毒(HBV)感染、肿瘤数目多发的原发性肝癌患者血清miR-122-5p、miR-618、miR-202水平更低,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,原发性肝癌患者血清miR-122-5p、miR-618、miR-202间表达水平均呈正相关(P<0.05)。ROC曲线结果显示,miR-122-5p、miR-618、miR-202单独及联合检测对原发性肝癌的预测价值分析曲线下面积(AUC)分别为0.839、0.814、0.807、0.932,灵敏度分别为85.59%、84.75%、79.66%、88.98%,特异度分别为75.00%、68.75%、70.00%、85.42%,联合检测均为最高。结论随着原发性肝癌发生及病情进展患者血清miR-122-5p、miR-618、miR-202表达水平降低,联合检测对原发性肝癌的诊断价值较高。

microRNA-122与非酒精性脂肪性肝病研究进展

非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)作为一种代谢性肝脏病变,其主要病理学表现为肝细胞内过量脂肪积聚[1,2]。NAFLD可由单纯性脂肪肝逐步演化为非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH),继而导致肝脏纤维化,甚至肝硬化,这一进展显著增加了NAFLD患者发展为终末期肝病的风险[3]。近20年来,NAFLD发病率显著上升,尤其在西方,患病比例达到人口的三分之一[4]。NAFLD的发生与超重、肥胖、胰岛素抵抗和高脂血症紧密关联,并增加了心血管、内分泌和消化系统疾病的发生风险[5]。微小RNA(microRNA,miRNA)是一类在进化上高度保守、内源性的单链非编码RNA分子。

《民法典》第122条评注

《民法典》颁行后,源自《民法通则》第92条的《民法典》第122条不可再作请求权基础,宜视为定义性规定。尽管如此,本文仍从事实构成、法律效果和证明责任三个方面做一简要评释。应区分类型确定不当得利请求权的事实构成。实践中最为重要的是给付型不当得利和侵害型不当得利。给付型不当得利的积极事实构成为一方获利、因给付、无法律上原因(给付目的落空或被法律否定)。侵害型不当得利的事实构成为一方得利、因他人(专属)权益被侵害(借他人之代价)、无法律上原因。在返还不当利益上,应以原初所获为客体,在原状返还不能或没有必要时,应折价补偿,其基准时点应为折价补偿请求权发生时。在双务合同的不当得利返还中,若返还义务人财产上决定受不当影响,则在现存利益范围内返还。否则,应全额偿还。在证明责任方面,给付型不当得利的原告就无法律上原因承担证明责任,侵害型不当得利的原告就专属性权益受侵害承担证明责任,被告就获益有法律上原因承担证明责任。