益肾清利活血泄浊方治疗慢性肾脏病3~5期患者的临床疗效及对其血清细胞因子的影响

目的观察益肾清利活血泄浊方治疗慢性肾脏病(Chronic kidney disease,CKD)3~5期患者的临床疗效及对其血清细胞因子的影响。方法选取2020年7月-2021年7月期间南京中医药大学附属医院(江苏省中医院)肾内科收治的89例CKD 3~5期患者,采用随机数字表法分为对照组45例和治疗组44例。对照组给予西医基础治疗,治疗组在对照组治疗基础上加用益肾清利活血泄浊方。治疗3个月后,观察比较两组患者临床疗效、不良反应情况,治疗前后中医临床证候总积分、肾脏疾病相关指标[血清肌酐(Serum creatinine,Scr)、血尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)、肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR)、血红蛋白(Hemoglobin,HGB)、白蛋白(Albumin,ALB)、24小时尿蛋白定量(24-Hour urinary total protein,UTP)]、细胞因子[白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白介素-2(Interleukin-2,IL-2)、白介素-4(Interleukin-4,IL-4)、白介素-10(Interleukin-10,IL-10)、白介素-12P70(Interleukin-12P70,IL-12P70)、白介素-17(Interleukin-17,IL-17)、γ-干扰素(Interleukin-γ,INF-γ)及肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)]水平。结果治疗后治疗组临床总有效率84.09%(37/44)明显高于对照组55.56%(25/45),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者中医临床证候总积分较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组中医临床证候总积分明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后对照组BUN、Scr、UTP水平较治疗前降低,Hb水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);eGFR、ALB较治疗前升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组BUN、Scr、UTP水平均较治疗前降低,eGFR、ALB及Hb水平均较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05),且治疗组患者BUN、Scr、UTP水平均明显低于对照组,eGFR、ALB及Hb水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者促炎因子IL-2、IL-12P70、IL-17、IFN-γ及纤维化因子TNF-α水平均较治疗前降低,抗炎因子IL-4、IL-5、IL-10水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组促炎因子IL-2、IL-12P70、IL-17、IFN-γ和纤维化相关因子TNF-α水平明显低于对照组,抗炎因子IL-4、IL-5、IL-10水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗期间,两组患者均未发生严重的药物相关性胃肠道症状及过敏等不良反应。结论益肾清利活血泄浊方可有效改善CKD 3~5期患者临床症状,降低蛋白尿,延缓肾功能衰竭,调节外周血炎症及纤维化细胞因子,且具有较高的安全性。

培本清利通络方治疗慢性肾脏病3~5期伴CKD-MBD脾肾两虚兼湿瘀证的临床研究

目的:观察基于吴门医派“络病理论”创立的培本清利通络方联合骨化三醇胶丸治疗慢性肾脏病(CKD)3~5期伴CKD-矿物质及骨代谢紊乱(CKD-MBD)脾肾两虚兼湿瘀证患者的效果。方法:选择2022年7月—2023年6月于南京中医药大学附属苏州市中医医院就诊的脾肾两虚兼湿瘀证CKD 3~5期合并有CKD-MBD的患者60例,随机分为治疗组和对照组,每组30例。对照组予控制血压、控制血糖、改善贫血等基础治疗,同时口服骨化三醇胶丸;治疗组在对照组治疗基础上加服培本清利通络方,两组疗程均为12周。比较两组患者治疗前后肾功能[血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、尿酸(UA)]、矿物质及骨代谢[钙(Ca)、磷(P)、全段甲状旁腺激素(iPTH)、碱性磷酸酶(ALP)]、中医症候积分、生活质量评分,并评估临床疗效;治疗前后检测两组血常规、肝功能、血钾,以评估用药安全性。结果:两组治疗后中医症候积分均较治疗前降低,且治疗组低于对照组(P<0.05);治疗组总有效率为93.33%,明显高于对照组的73.33%(P<0.05);治疗后,治疗组BUN、UA均明显低于治疗前,且Scr、BUN均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗后,治疗组P、iPTH均明显低于治疗前,Ca明显高于治疗前,且治疗组Ca高于对照组,iPTH低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗后,治疗组生活质量评分较治疗前明显下降,且治疗组低于对照组(P<0.05);两组治疗后安全性指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:培本清利通络方可改善CKD 3~5期合并CKD-MBD脾肾两虚兼湿瘀证患者Ca、P、iPTH指标,延缓肾功能减退,减轻患者腰脊酸痛、皮肤瘙痒、倦怠乏力等症状,并可提高患者生活质量。

庆历新政失败的主要原因:士大夫与天子“共治天下”的破裂

庆历新政是宋朝士大夫与天子“共治天下”的一次可贵实践。其失败的主要原因,不是由于保守派势力强大,或由于党争,而是由于范仲淹、富弼等士大夫与宋仁宗“共治天下”的破裂。具体表现在宋仁宗认为范仲淹、富弼等士大夫是朋党,结党营私,朋比为奸;认为范仲淹“密请建立皇太弟侄”,捕风捉影地怀疑范仲淹、富弼等士大夫“欲谋废立”,企图废黜仁宗,另立皇帝;捕风捉影地怀疑范仲淹、富弼等士大夫勾结契丹和登、莱金坑无赖凶恶数万人,起兵叛乱,直接对仁宗的皇位和专制独裁统治构成极大威胁。如此,士大夫与天子“共治天下”必然破裂,宋仁宗不再支持范仲淹、富弼等士大夫实施庆历新政,庆历新政必然失败。

基于机器学习建立“益肾清利活血”法治疗的CKD4-5期患者透析时机预测模型

目的借助机器学习方法构建CKD4-5期患者进入肾脏替代治疗的时间点预测模型,为临床治疗方案的选择提供指导。方法采用回顾性队列研究,纳入2010年1月-2021年3月期间孙伟教授运用益肾清利活血法治疗的CKD5期的患者,收集患者CKD4-5期的临床资料,筛选人口统计学资料、实验室检查结果、中医症状、辨证分型以及中药使用情况等相关变量,以进入肾脏替代治疗为终点事件,采用线性回归模型联合随机森林模型对自变量(预测因子)进行三阶段降维,筛选有统计学意义(P<0.05)的变量,建立基于症状、方药、理化检查指标等多维度的多重线性预测模型,调整决定系数(Adjusted R-Square,Adjusted R2)和Bland-Altman图对模型进行评价。结果从预测变量中筛选到5个预测因子,并构建多重线性模型方程为lnDay=5.058+0.031×白蛋白-0.004×肌酐+0.010×血红蛋白-0.412×使用积雪草-0.715×皮肤瘙痒;利用Bland-Altman图对预测值进行了评价,结果表明Bland-Altman图中的散点均较好的分布在差值的95%正常值范围内,预测值与实际值的一致性较好。结论构建的多重线性预测模型,可用于辅助临床对于肾功能进展时长的预测,利于识别高危人群,为进入肾脏替代治疗前的方案选择提供参考。

基于TLR7-MyD88-IRAK4信号通路的解表清里方体内抗甲型流感病毒的实验研究

目的:探讨中药复方解表清里方体内抑制甲型H1N1流感病毒株复制的作用及机制。方法:使用随机数字法,将132只SPF级小鼠平均分为空白组、模型组、磷酸奥司他韦组(剂量为0.0375 g/kg)、解表清里方高、中、低剂量组(剂量分别为6.05、3.02和1.51 g/kg),每组22只。空白组不进行任何操作,用甲型流感病毒[A/Brisbane/02/2018(H1N1),pdm09-like virus(H1N1)]滴鼻法感染其他组小鼠,在造模2 h后,空白组和模型组用生理盐水灌胃,其他组给予相应剂量的药物,各组灌胃7 d。给药期间每日定期检测小鼠体质量及活动状态,在造模第3天和第7天取材,检测小鼠肺指数和肺部病理改变;qPCR法检测肺组织中病毒核酸载量;蛋白质印迹法检测造模第7天小鼠肺组织中TLR7、MyD88和IRAK4蛋白表达水平。结果:解表清里方可以减轻全身症状,降低肺指数,延缓小鼠体质量下降(P<0.05,P<0.01),改善肺组织病理损伤,降低鼠肺病毒滴度(P<0.01),上调肺组织中TLR7、MyD88和IRAK4蛋白表达量(P<0.05,P<0.01),其中解表清里方高剂量组的疗效最优。结论:解表清里方可剂量依赖性改善小鼠肺部感染、降低病毒复制,其机制可能与TLR7-MyD88-IRAK4信号通路有关。

解表清里方干预甲型H1N1流行性感冒小鼠的抗病毒作用机制

目的:探讨解表清里方对甲型H1N1流行性感冒小鼠的抗病毒作用机制。方法:用随机数字法将36只7周龄雌性BalB/c小鼠随机分为空白组、模型组、西药组及解表清里方高剂量组、中剂量组、低剂量组,每组6只。空白组给予等量生理盐水滴鼻,其余组小鼠给予甲型流感病毒液于左侧鼻孔滴鼻,每只50μL。造模2 h后,西药组给予0.037 5 g/(kg·d)磷酸奥司他韦灌胃;解表清里方高剂量组、中剂量组、低剂量组分别给予6.05 g/(kg·d)、3.02 g/(kg·d)、1.51 g/(kg·d)解表清里方灌胃。空白组及模型组同时给予生理盐水0.2 mL灌胃,均1次/d,连续5 d。对比各组肺指数、胸腺指数和脾脏指数,肺组织病理变化,肺组织中乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达,肺悬液中病毒基因及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、糖原合酶激酶3β(GSK-3β)mRNA表达,肺组织中PI3K、AKT、GSK-3β蛋白表达。结果:动物实验结果显示,与模型组相比,西药组和中药高剂量组能降低小鼠肺指数(P<0.05),其他组别能降低肺指数、升高胸腺指数和脾脏指数,但差异无统计学意义(P>0.05);解表清里方高、中剂量组能减轻小鼠肺部病变程度,西药组、解表清里方高、中剂量组能降低小鼠肺组织中M、NS2病毒基因复制水平(P<0.01或P<0.05);西药组和解表清里方高剂量组能降低小鼠肺组织中mTOR表达水平;西药组、解表清里方高剂量和中剂量组均能显著下调PI3K、AKT和GSK-3β蛋白和mRNA的表达水平(P<0.01或P<0.05)解表清里方低剂量组在各个方面与模型组相差不显著。结论:解表清里方甲型H1N1流感小鼠有抗病毒作用,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT/GSK-3β信号通路中关键蛋白PI3K、AKT、GSK-3β、mTOR表达有关。

基于转录组学探讨益肾清利活血方对马兜铃酸Ⅰ诱导肾损伤的作用机制

目的:益肾清利活血方是邹燕勤国医大师以“肾虚湿瘀”为基本病机的临床验方,本研究旨在通过动物实验与转录组测序分析探讨其作用机制与靶点。方法:48只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、模型组、低剂量组和高剂量组,每组各12只。除正常对照组外,其余各组小鼠均腹腔注射马兜铃酸Ⅰ(AAⅠ)0.1 mL[5 mg/(kg·3d),AAⅠ溶解在0.5%羧甲基纤维素钠中]造模,低剂量组灌胃给予益肾清利活血方冻干粉11 g/(kg·d),高剂量组给予益肾清利活血方冻干粉22 g/(kg·d),正常对照组和模型组每天灌胃0.3 mL含0.5%羧甲基纤维素钠的PBS溶液,均灌胃30 d。实验结束后留取小鼠血尿和双侧肾脏,测定小鼠血肌酐、尿酸、尿蛋白的水平,进行HE、Masson肾组织染色。正常对照组、模型组和低剂量组各取4只肾脏,通过转录组谱分析其作用机制与靶点,最后通过qPCR对核心靶点进行验证。结果:益肾清利活血方各剂量组可以降低AAⅠ小鼠的尿酸、尿蛋白、血肌酐水平;病理染色结果显示,AAⅠ诱导小鼠存在大量的炎症细胞的浸润,胶原沉积增多,经益肾清利活血方干预后有明显改善作用。转录组学分析结果显示,模型组与低剂量组分析得到的368个差异基因,功能富集分析发现与炎症密切相关,KEGG富集分析显示其主要参与PPAR、谷胱甘肽代谢、脂肪酸降解、IL-17等信号通路,枢纽基因为Ppara、Fabp1、Apoa2、Acox1和Hspa5等37个,qPCR法验证前8个核心基因显示各组之间有统计学差异。结论:益肾清利活血方可以保护肾功能,降低肾脏组织中炎症和胶原沉积,转录组分析发现其与脂肪酸代谢、铁死亡、IL-17信号通路等密切相关。

庆历四年太学独立建校的原因及影响探赜

庆历四年太学的独立设置,标志着北宋的教育重心从品官子弟向平民子弟转移,开启了宋代教育发展的新纪元。为弥补宋初人才培养和选拔体制的缺陷,顺应教育下移的时代发展趋势,仁宗朝廷在借鉴西汉至五代各朝中央官学体制架构的基础上,结合历代朝廷重臣所提的兴学建议,延续了当朝初期的太学馆制度,专为八品以下及庶民子弟建立太学,以期实现为国育才的目的。庆历四年独立设置太学受当时教育改革环境影响,是仁宗朝廷改革不合时宜的人才培养和选拔体制所取得的代表性成就,对当时及以后教育的发展产生了重要影响。

益气清利化瘀方治疗原发性IgA肾病

目的探讨益气清利化瘀方对脾肾气虚兼湿瘀证IgA肾病患者症状改善和炎性因子水平的影响。方法选取2020年3月—2021年3月在我院接受治疗的264例脾肾气虚兼湿瘀证原发性IgA肾病患者作为研究对象,依据治疗方法不同分为对照组与治疗组,各132例。对照组予以氯沙坦钾治疗,治疗组在对照组基础上予以益气清利化瘀方治疗。分析益气清利化瘀方对该证型肾病患者中医症状改善状况、肾功能及炎症因子变化情况,以及治疗的有效性和安全性分析。结果治疗后,2组尿红细胞数、24 h-UTP、Scr、BUN、UA水平均降低;与对照组比较,益气清利化瘀方组降低幅度更显著(P<0.05);治疗后,2组中医证候积分均降低,益气清利化瘀方组积分低于对照组(P<0.05);益气清利化瘀方组治疗有效率(95.45%)高于对照组(68.18%),治疗后,2组hs-CRP、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6水平降低,IFN-γ、IL-10水平升高;与对照组比较,益气清利化瘀方组变化幅度更显著(P<0.05);组间比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论益气清利化瘀方对脾肾气虚兼湿瘀证原发性IgA肾病患者的中医症状、尿红细胞计数及肾功能改善作用明显,可降低炎性反应,安全性可靠。

文学与法律的张力:《罪与罚》的情理之辨与法律之维

陀思妥耶夫斯基的《罪与罚》既蕴含文学层面情与理的故事矛盾,又兼具法学层面法律与道德的关系探讨。作品通过塑造拉斯柯尔尼科夫这一主角形象,反映了时代的思潮变迁与人们的内心思考,可从文学角度剖析出情理矛盾的核心线索。同时,文学又是历史事实的反映投射。独特的时代背景塑造了独特的法律观,主角的思想行为亦可从道德与法律的关系视角进行检视分析。本研究从文学和法学的双重角度,通过解读《罪与罚》,旨在揭示这部作品丰富的内涵与深远的意义,揭示情理矛盾与法律道德之间的复杂关系,为跨学科研究提供新的视角和思考路径。

庆历党争与欧阳修《朋党论》之关联探析

北宋庆历四年,范仲淹等士大夫对新政的持续推行触发了新旧两党的激烈党争。这次党争有着深刻的起源和鲜明的特征。在庆历党争的关键时刻,欧阳修通过对历史上数次党争的反思,写成《朋党论》一文并上奏宋仁宗,提出对朋党问题的理论认识。

中西视野下的自然法:比较与思考

西方自然法内部可以划分为三个略有不同的派别。第一个派别是斯多亚一罗马法学派,这一派认为自然法是宇宙理性的造物。第二个派别是阿奎那的基督教神学自然法,这一派认为自然法是上帝理性的命令。第三个派别是古典自然法学派,这一派逐渐将自然法世俗化,并创造了自然权利学说。中国本土文化中也有自己的自然法思想,仁爱原则、道义原则、礼让原则、是非原则和诚信原则,是儒家伦理学的五大原则,也构成了中国本土自然法体系的核心内容。中西自然法思想的第一个差别是西方自然法体现着“真理”,通过人的理性去把握;而中国自然法则体现着“道理”,通过经验直观来把握。中西自然法的第二个差别是西方自然法背后预设了上帝,是超越性的;而中国自然法背后是万物中的自在之理,是世俗性的。

涌泉穴贴敷合清利活血解毒汤治疗急性痛风性关节炎的疗效观察

目的 分析涌泉穴贴敷合清利活血解毒汤治疗急性痛风性关节炎的临床疗效。方法 200例急性痛风性关节炎患者,按照随机数字表法分为治疗A组与治疗B组,各100例。治疗B组应用洛索洛芬钠片治疗,治疗A组在治疗B组基础上应用涌泉穴贴敷合清利活血解毒汤治疗。对比两组治疗效果及炎性因子水平、中医证候积分、疼痛评分、生活质量评分。结果 治疗A组治疗总有效率97.00%高于治疗B组的85.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,治疗A组血清C反应蛋白、血尿酸、血沉、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6水平分别为(11.45±2.34)mg/L、(423.45±56.78)μmol/L、(10.43±2.34)mm/h、(43.25±2.34)ng/dl、(32.14±4.36)pg/ml,均低于治疗B组的(32.14±6.53)mg/L、(545.32±34.56)μmol/L、(26.78±3.56)mm/h、(54.32±4.53)ng/dl、(42.36±3.25)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,治疗A组关节疼痛、关节压痛、关节急性红肿、关节活动障碍评分分别为(1.45±0.45)、(1.47±0.32)、(1.65±0.32)、(0.54±0.21)分,均低于治疗B组的(2.67±0.34)、(2.87±0.32)、(2.54±0.32)、(1.57±0.34)分,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,治疗A组疼痛评分(2.15±0.32)分低于治疗B组的(3.45±0.46)分,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,治疗A组生活质量评分(86.53±1.54)分高于治疗B组的(75.46±2.78)分,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 对急性痛风性关节炎患者采用涌泉穴贴敷合清利活血解毒汤治疗,对炎症改善作用较为显著,同时能够降低中医证候积分,且治疗效果较好,在急性痛风性关节炎患者的治疗中有着重要意义。

基于证效相关研究清利湿热方中医功效及降血尿酸作用机制

目的:建立湿热内蕴证候大鼠模型,研究具有降血尿酸作用的清利湿热方的中医功效,以证测效揭示清利湿热降血尿酸作用机制。方法:将48只SD大鼠随机分为空白组、模型组、四妙丸组以及清利湿热方低、中、高剂量组,每组8只。采用饲喂高脂高糖饲料,自由饮用蜂蜜水,并隔天灌胃猪油脂或酒,建立湿热内蕴证候大鼠模型,观察清利湿热方对大鼠一般状态的影响。采用酶联免疫吸附试验检测血清热激蛋白70(HSP70)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β),促胃液素(GAS)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)含量以及血浆胃动素(MTL)、肝脏组织Na+-K+-ATP酶含量,免疫组织化学法检测胃肠组织水孔蛋白3(AQP3)、水孔蛋白4(AQP4)含量,采用蛋白质印迹法检测结肠组织中TOLL样受体4(TLR4)、核因子κBp65表达量。结果:模型组体质量下降(P<0.05,P<0.01),HSP70、TNF-α、IL-1β升高(P<0.05,P<0.01,P<0.001),胃肠组织中AQP3表达量下降(P<0.05),AQP4表达量上升(P<0.01,P<0.001),GAS含量下降(P<0.01),IgM含量升高(P<0.01),结肠组织TLR4表达量增加(P<0.01)。清利湿热方能增加大鼠体质量,降低HSP70、TNF-α、IL-1β含量(P<0.05,P<0.01,P<0.001),升高胃肠组织AQP3表达量(P<0.05,P<0.01,P<0.001),降低AQP4表达量(P<0.05),升高GAS、Na^(+)-K^(+)-ATP酶含量(P<0.05,P<0.001),降低IgM含量(P<0.05,P<0.01)。结论:饲喂高脂高糖饲料,自由饮用蜂蜜水,并隔天灌胃油脂/酒,可以成功建立高尿酸血症湿热内蕴证候模型,清利湿热方可以从大鼠一般状态、体质量、热激蛋白以及炎症介质、水孔蛋白、胃肠激素、免疫等多方面改善大鼠湿热状态,发挥清利湿热功效。清利湿热方具有降血尿酸作用,其作用机制可能与下调TLR4,核因子κBp65有关。

益肾清利活络方治疗腹膜透析患者的效果及对残余肾功能、腹膜功能的影响

目的:观察益肾清利活络方治疗腹膜透析(peritoneal dialysis,PD)患者的效果及对残余肾功能、腹膜功能的影响,并探讨其可能作用机制。方法:选择2018年12月—2022年8月在南京中医药大学附属苏州市中医医院肾病科腹透门诊就诊及住院的PD患者共80例,采用随机数字表法分为治疗组与对照组,各40例,两组均进行常规治疗,治疗组在常规治疗的基础上服用益肾清利活络方3个月。对两组患者的治疗结果进行观察对比。结果:治疗组患者治疗总有效率相较于对照组显著提升(P<0.05)。与治疗前比较,治疗组治疗后前白蛋白(PAB)、血白蛋白(ALB)、血红蛋白(Hb)水平均升高,超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-6(IL-6)水平均下降(P<0.05),且与对照组治疗后相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗组治疗后血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、β_(2)-微球蛋白(β_(2)-MG)水平均下降,残余肾小球滤过率(rGFR)提高(P<0.05),同对照组治疗后比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗组患者治疗后腹膜功能指标均显著提升,且治疗组同对照组比较提升程度明显(P<0.05)。结论:益肾清利活络方可以改善PD患者临床症状,改善营养状态,减轻炎症状况,保护残余肾功能,改善腹膜超滤功能,提高腹透充分性,延缓腹膜纤维化进程。

基于超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱技术的清利湿热颗粒入血成分分析

目的:阐明灌胃给予清利湿热颗粒后大鼠体内吸收入血的化学成分。方法:借助超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术,采用Agilent ZORBAX RRHD Eclipse XDB-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相体系,梯度洗脱,进样量为2μL,在正、负离子模式下对处理后的空白血清和给药后0.5、1、2、4 h不同时间点的血清进行质谱检测。结果:通过与Natural Products HR-MS/MS Spectral Library 1.0数据库对比、文献分析以及质谱裂解规律从血清样品中鉴定出15个原型成分。结论:本研究为清利湿热颗粒标志性成分的选择提供了依据,初步确定了该产品发挥药效的物质基础,也为进一步揭示清利湿热颗粒的作用机制奠定基础。

基于超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱技术分析清利湿热颗粒化学成分

目的:采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术初步鉴定经水提、浓缩、干燥、制粒后的清利湿热颗粒中的化学成分并确定其药味归属。方法:采用Agilent ZORBAX RRHD Eclipse XDB-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相体系,梯度洗脱,进样量为5μL,在正、负离子模式下对处理后的清利湿热颗粒进行质谱检测。结果:通过与Natural Products HR-MS/MS Spectral Library 1.0数据库对比、文献分析以及质谱裂解规律从清利湿热颗粒样品中鉴定出54个化合物。结论:本研究为清利湿热颗粒质量控制及确定该产品可能的药效物质基础提供了依据。

培补清利方对多囊卵巢综合征伴胰岛素抵抗大鼠肠道菌群作用的观察

目的基于肠道菌群新靶点的角度,探讨培补清利方对多囊卵巢综合征(PCOS)伴胰岛素抵抗(IR)大鼠的影响。方法将3周龄SD雌性大鼠随机分为对照组8只及造模组18只,造模组大鼠每日以来曲唑-羧甲基纤维素钠(CMC)混悬液灌胃并持续高脂喂养,对照组每日CMC灌胃并以普通饲料喂养。两组连续灌胃13周。造模结束后将造模成功的15只大鼠随机分为模型组7只、治疗组8只。治疗组予培补清利方浓缩药液灌胃;对照组、模型组以蒸馏水灌胃。各组均干预42 d。称量各组大鼠体质量,采用HE染色法观察卵巢组织形态学变化,以口服葡萄糖耐量试验观察大鼠血糖变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清空腹胰岛素水平及胰岛素抵抗指数,观察肠道菌群的变化并预测分析肠道微生物的功能。结果与模型组比较,治疗组大鼠卵巢组织形态改善、卵巢质量减轻。与模型组比较,治疗组大鼠餐后120 min血糖(PBG 120')、空腹胰岛素(FINS)水平,以及稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)均降低(P<0.05);治疗组肠道中微生物的相对丰度出现变化(P<0.05),厚壁菌门/拟杆菌门(F/B)比值下降(P<0.05)。利用PICRUSt2软件进行功能预测显示,PCOS-IR大鼠异常的肠道菌群结构与氨基糖代谢、柠檬酸循环、脂质代谢以及戊糖磷酸途径等相关。经培补清利方干预后,大鼠的脂肪酸生物合成、柠檬酸循环、糖酵解等基因丰度下调。结论培补清利方可减少机会致病菌的数量,增加有益菌,改善异常的菌群结构,改善IR及PCOS表型;其机制可能与介导糖酵解途径及三羧酸循环、降低脂质脂肪酸生物合成有关。

益肾清利方治疗肾虚湿热型特发性膜性肾病30例

目的 观察益肾清利方治疗肾虚湿热型特发性膜性肾病(Idiopathic membranous nephropathy, IMN)的临床疗效。方法 将肾虚湿热型IMN患者60例按随机数字表分为试验组、对照组,各30例。对照组予ACEI/ARB、泼尼松0.5 mg/(kg·d)、小剂量雷公藤多苷片10 mg,每日2次。试验组在此基础治疗上加用自拟益肾清利方,分别于治疗前、治疗后4周、治疗后8周检测24 h UTP、白蛋白及血常规、肝功能。结果 2组患者24 h UTP定量均较前下降,白蛋白均较前升高(P<0.05);且试验组24 h UTP低于对照组,ALB高于对照组(P<0.05);试验组总有效率明显高于对照组(P<0.05),表明试验组优于对照组。结论 益肾清利方能降低患者尿蛋白,提高血白蛋白,稳定患者病情,改善中医临床症状,安全有效。

益气清利化瘀方对梗阻性肾病大鼠肾间质纤维化作用机制研究

目的:研究益气清利化瘀方对单侧输尿管梗阻(UUO)模型大鼠肾间质纤维化的影响及可能作用机制。方法:将48只SD大鼠随机分为6组,每组8只,分别为假手术组、模型组、科素亚组、中药小剂量组、中药中剂量组、中药大剂量组;大鼠采用UUO模型;中药组用益气清利化瘀方小、中、大剂量配方颗粒,西药用氯沙坦钾片,术后2 d开始给药,2周后处死大鼠,肾脏组织予光镜观察及免疫组化法检测α-SMA、TGF-β_(1)、Smad2和Smad7的表达;Western Blot方法检测肾组织TGF-β_(1)、Smad7蛋白的表达;血清予检测血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、尿酸(UA)和白蛋白(Alb)。结果:与模型组比较,中药大剂量组肾小管正常结构存在,炎症细胞浸润少。治疗后各组Scr、UA较模型组均有下降,其中血Scr下降明显,中药大剂量组和中剂量组优于其他组(P<0.01);免疫组化显示各治疗组α-SMA、TGF-β_(1)减少,Smad2表达减弱,Smad7的表达升高,以中药大剂量组改变最明显(P<0.01);Western Blot检测显示各治疗组Smad7蛋白表达均增强,以中药大剂量组表达最强(P<0.01)。各治疗组TGF-β_(1)蛋白表达均减弱,中药大剂量组、中剂量组改善最显著(P<0.01)。结论:益气清利化瘀方具有修复受损肾组织,维持肾脏皮质髓质、肾小管正常结构的作用,其机制可能与抑制α-SMA表达,调节TGF-β/Smads信号通路有关,其正向作用与剂量的梯度递增存在正相关,为进一步开展对CRF梯度诊治方案的研究与推广提供了实验依据。