桑黄游离酚提取物体外降尿酸活性研究

为研究桑黄游离酚提取物体外降尿酸活性,以野生瓦宁木层孔菌、栽培粗毛纤孔菌、栽培瓦宁木层孔菌和野生粗毛纤孔菌4个不同来源的桑黄为研究对象,分析不同来源桑黄游离酚提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制活性,及其在高尿酸细胞模型中的降尿酸作用。筛选出降尿酸活性强的桑黄游离酚提取物,并通过超高效液相色谱-串联质谱(ultra performance liquid chromatography/tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)对其降尿酸活性物质进行分析。研究结果表明,栽培粗毛纤孔菌、栽培瓦宁木层孔菌和野生粗毛纤孔菌的游离酚提取物对黄嘌呤氧化酶具有显著的抑制作用(P<0.05),IC_(50)值分别为(94.63±2.73)μg/mL、(99.69±2.50)μg/mL和(106.32±5.06)μg/mL;栽培粗毛纤孔菌和野生瓦宁木层孔菌的游离酚提取物可显著抑制高尿酸细胞模型中尿酸生成(P<0.05)。进一步通过UPLC-MS/MS分析活性较强的栽培粗毛纤孔菌游离酚中主要成分发现,其黄酮类物质中金丝桃苷、表儿茶素、茶黄素、地奥司明及木犀草苷等,可能是其降尿酸的主要活性物质。该研究可为桑黄降尿酸产品的研究与开发提供部分理论参考。

桑黄类大型真菌中多酚类物质研究进展

桑黄类真菌是隶属于锈革孔菌目的一类具有相似外形与药用价值的大型真菌的总称。因具有抗肿瘤、抗氧化、保肝、抗炎等功效,深受消费者特别是亚洲人的推崇。多酚类物质作为桑黄类真菌中重要的次级代谢产物,是其关键活性物质之一,一直是医药保健领域关注的研究热点。在明确桑黄类真菌类群的基础之上,综述了桑黄类真菌中不同多酚物质及其药理活性、提取方法与代谢调控方面的研究进展,并展望了未来桑黄类真菌多酚类物质的研究方向。

桑黄类真菌多糖的生物活性研究现状及展望

桑黄类真菌是一类珍稀食药用真菌,作为传统保健品在多个国家被广泛使用。多糖是桑黄类真菌的主要活性物质。大量研究表明,多糖具有抗肿瘤、抗氧化、抑菌、免疫调节、降血糖、护肝等多种生物活性。该文结合国内外相关文献,对桑黄多糖的化学成分、生物活性及其相应机制进行综述,并对桑黄多糖研究存在的问题和开发利用前景进行展望,以期更好地研究和利用这一新型食药菌类功能食品资源。

十一个桑黄菌株的形态学观察与分子鉴定

为明确桑黄菌株的种属,对采集自国内不同地区的11个桑黄类似菌株开展分子鉴定和形态学特性观察,主要采用核糖体基因rDNA内转录间隔区(ITS)对桑黄菌株进行基因鉴定和遗传性状分析,运用Mega7.0软件的neighbor-joining(NJ)法构建基于桑黄rDNA ITS序列的系统发育进化树,结合桑黄菌株的形态学观察(菌丝生长情况、菌丝的显微结构、孢子形态特征、子实体电镜扫描结构)进行分析鉴定。结果表明:11个桑黄菌株分为两大类群,其中菌株SH-1为一类,属于纤孔菌属(Inonotus);其他菌株(SH-2、SH-3、SH-4、SH-5、SH-6、SH-7、SH-8、SH-9、SH-10、SH-11)属于另一类,为桑黄孔菌属(Sanghuangporus),菌株SH-3和SH-6属于桑树桑黄(S.sanghuang),其余8个菌株属于暴马桑黄(S.baumii)。通过rDNA ITS序列分析技术结合桑黄菌丝形态特征、孢子形态特征和子实体显微结构特征分析,能明确桑黄的种属与遗传性状,可为今后桑黄品种选育与人工规模化生产提供理论依据。

粗毛纤孔菌炮制工艺优化及抗肿瘤活性

依据古代本草记载方法,采用单因素实验和响应面实验优化粗毛纤孔菌(Inonotus hispidus)子实体蒸制、酒炙条件,测定多糖、麦角甾醇、酚酸含量,使用归一法计算综合成分含量,确定蒸制和酒炙最佳工艺条件,并研究粗毛纤孔菌子实体未炮制组(高、低剂量分别为600、300 mg·kg^(-1),)、蒸制组(高、低剂量分别为600、300mg·kg^(-1))、酒炙组(高、低剂量分别为600、300 mg·kg^(-1))对小鼠的抗肿瘤活性。结果表明:粗毛纤孔菌子实体蒸制最佳工艺条件为切片厚度15 mm、119℃、18 min,处理后综合成分含量为2.18;酒炙最佳工艺条件为料液比100︰19(g︰mL)、110℃、18 min,处理后综合成分含量为2.15。与酒炙比较,蒸制粗毛纤孔菌多糖含量较高,麦角甾醇含量较低。与模型组比较,蒸制组和酒炙组的肿瘤体积较小;未炮制组、蒸制组和酒炙组体质量、肿瘤质量均极显著减小;未炮制和酒炙高、低剂量组,蒸制高剂量组的胸腺指数显著增大;未炮制、蒸制、酒炙高剂量组脾脏指数显著减小;未炮制和蒸制高剂量组,酒炙高、低剂量组肝脏指数显著减小。研究结果可为粗毛纤孔菌中药饮片改进、炮制规范制定以及临床应用提供参考。

药用桑黄化学成分和药理作用的研究进展

桑黄是一类珍稀的药用菌类,具有多种生物活性成分,不同成分具有多种优异的生物活性,包括抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、免疫调节、抗炎、抗糖尿病、保肝和抗菌等多种功能。在过去的数十年中,从其子实体、菌丝体中提取到了不同成分,其表现出来的生物活性引起了广泛的兴趣。因此,本文对近年来有关桑黄提取物组分的结构、生物活性的报道进行综述,为促进其临床合理应用提供参考。

桑树桑黄液体发酵及多糖提取工艺优化

桑树桑黄是一种具有良好药效的药用多孔菌,其多糖是主要活性成分之一,具有抗肿瘤、抗氧化、免疫调节和其他药理作用。为提高桑树桑黄菌丝体干重及桑黄多糖得率,采用单因素和正交试验对影响桑黄菌丝体干重的培养基配方及液体发酵培养条件进行优化;利用超声波辅助提取法对桑黄多糖提取工艺条件进行优化。结果表明,桑树桑黄最佳培养基配方为马铃薯(去皮)200 g·L^(-1)、乳糖32 g·L^(-1),胰蛋白胨10 g·L^(-1),NaCl 2.00 g·L^(-1),MgSO 4·7H 2 O 1 g·L^(-1),VB 110.0 mg·L^(-1),获得菌丝体干重为2.82 g·L^(-1)。在温度28℃,接种量9%,转速180 r·min-1,pH6.0条件下,最大菌丝量为3.12 g·L^(-1)。桑黄多糖最佳提取工艺为超声波功率200 W,料液比1∶60 g·mL^(-1),提取时间40 min,温度50℃,此时桑黄多糖得率为5.54%。说明本研究优化的桑树桑黄培养基配方、发酵条件及多糖提取工艺合理、可行。

桑黄多糖提取工艺优化、结构表征及抗氧化活性研究

目的以临清桑黄为研究材料,优化桑黄多糖(Sanghuangporus sanghuang polysaccharide-hot water extraction,SSP-W)的制备工艺并研究其结构特征和抗氧化活性。方法以SSP-W提取得率为指标,采用单因素和响应面实验对制备工艺进行优化,采用高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法(high performance anion exchange chromatography-pulsed amperometric detection,HPAEC-PAD)、傅里叶变换红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FT-IR)、扫描电镜(scanning electron microscopy,SEM)和X射线衍射(X-ray diffraction,XRD)对其结构进行初步表征。结果最佳制备工艺为:提取时间2.4 h、提取温度95℃、液料比27:1(m L/g),在此条件下,SSP-W提取得率为2.34%。其结构特征为:SSP-W以吡喃环为基本骨架,由岩藻糖、氨基葡萄糖、葡萄糖和甘露糖4种单糖组成。扫描电镜结果表明,SSP-W形状不规则,有明显的孔洞。X-衍射结果表明,SSP-W以结晶态聚合物和非结晶态聚合物的形式共存。抗氧化实验表明,SSP-W具有较强的抗氧化活性,其羟自由基和2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐[2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)ammonium salt,ABTS]阳离子自由基的半最大效应浓度(concentration for 50%of maximal effect,EC50)值分别为488μg/m L和75μg/m L,当质量浓度为250.0μg/m L时,ABTS阳离子自由基清除率达到96.27%。结论SSP-W是一种具有抗氧化潜力的活性物质。本研究结果将为临清桑黄多糖的精深加工和高值化利用提供科学依据。

桑黄子实体多糖的提取工艺优化分析

桑黄作为珍稀的食药用真菌,在疏通血脉、去除瘀血、缓解腹痛上效果突出,现代医学不断发展,桑黄其他的药理活性也被挖掘出来,如抗肿瘤、抗氧化、降血糖等方面。但在实际发展过程中,想要得到桑黄多糖,还需要对具体的提取工艺进行分析,以此实现除杂纯化,为后续的实际应用奠定良好基础。基于此,从应用现状入手,结合具体的案例和数据分析不同提取工艺优缺点,进而结合具体的实验,根据实际的结果进一步判断最优的提取工艺条件。

桑黄的人工栽培及药用功效研究进展

桑黄是一类珍稀的药用真菌,市场需求量大,人工栽培桑黄及其药用功效也随之成为研究热点。目前人工栽培桑黄的方法主要有桑黄菌丝发酵培养、袋料栽培桑黄子实体,采用这2种方法能够有效解决野生桑黄生长周期长、产量低以及药性不稳定等问题,提高桑黄的产量和产品质量及生产效益。桑黄具有的抗肿瘤、抗氧化、降血糖和调节免疫等多种功效也已被研究证实,并得到了国内外医药与保健行业的关注,显示出桑黄的开发利用深度将会进一步加强,应用范围也将拓宽。

桑黄中化学成分的免疫调节活性研究进展

近年来,随着菌类药物有效成分生物活性的发现及不断开发,越来越多菌类药物的免疫调节活性被逐渐关注,桑黄中富含多种化学成分并具备广泛的药理作用,对桑黄中多糖、酚类、萜类成分以及桑黄提取物的免疫调节作用及作用机制进行归纳总结,以期为其日后桑黄药用价值的研究和开发提供理论依据。

基于桑黄对肺炎的治疗作用及其机制的网络药理学分析

目的:基于网络药理学筛选中药桑黄治疗肺炎的活性成分,分析桑黄治疗肺炎的有效成分和靶点。方法:利用中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)软件搜索中药桑黄的成分和作用靶点;通过Uniprot数据库得到基因名称(Gene Name);通过GeneCards找出肺炎对应的靶点,将桑黄和肺炎的靶点进行比对,得到关键靶点。利用Cytoscape 3.9.1软件绘制出桑黄化学成分-肺炎-靶点网络图;通过String平台构建蛋白-蛋白互作(PPI)网络图,采用Cytoscape软件中ClueGo插件对桑黄关键基因进行基因本体论(GO)生物功能富集分析和京都基因和基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析。结果:桑黄主要活性成分有21种,(E)-4-(3,4-dihydroxyphenyl)but-3-en-2-one成分所含靶点最多,包括细胞色素P450家族(CYP450)、人表皮生长因子受体(EGFR)和基质金属蛋白酶(MMP)等。筛选出桑黄的化合物靶点358个,其中217个基因为桑黄-肺炎共同靶点,与肺炎有关的关键基因包括含铜胺氧化酶3(AOC3)、DNA连接酶1(LIG1)、谷氨酰胺肽酶(ENPEP)、乙醛脱氢酶2(ALDH2)、组蛋白甲基化酶8(PHF8)、基因-溶质载体家族11成员2(SLC11A2)和CYP50等。GO和KEGG富集分析,桑黄主要通过17条代谢途径发挥作用,包括磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路、癌症中的微小RNA(miRNA)、化学致癌-受体激活、前列腺癌、癌症中蛋白多糖和脂质、动脉粥样硬化及化学致癌物-活性氧(ROS)等相关途径。结论:(E)-4-(3,4-dihydroxyphenyl)but-3-en-2-one是桑黄成分中对肺炎治疗最有效的化学物质,其作用机制主要与CYP450家族有关。

桑黄饮片联合化疗治疗晚期胃癌临床观察及其对免疫功能的影响

目的:观察桑黄饮片联合化疗治疗对晚期胃癌患者的疗效及其对免疫功能的影响。方法:数字法将60例入组对象随机分至观察组及对照组,各为30例。对照组予紫杉醇(白蛋白结合型)静滴联合替吉奥口服的化疗方案,观察组则在其化疗基础上加服桑黄饮片。每21d为1周期,连续观察2周期。比较2组治疗前后近期疗效、中医证候疗效、生活质量(QLQ-C30)评分、免疫功能指标(IgG、IgM、IgA、IFN-γ、IL-2、IL-4、TNF-α)及不良反应发生率的变化情况。结果:观察组DCR为73.3%(22/30),与对照组DCR[67.9%(19/28)]无差5/异(P<0.05;观察组总有效率83.3%(25/30)优于对照组[57.1%(16/28)](P<0.05);观察组躯体、情绪、总体健康功能分数[(60.00,11.67),(58.34,16.67),(41.67,33.33)]优于对照组[(46.67,26.67),(50.00,25.00),(33.33,25.00)](P<0.05),且在疲倦、恶心呕吐、失眠、腹泻单项评分[(33.33,38.89),(33.33,33.33),(33.33,58.34),(33.33,33.34)]低于对照组[(44.44,33.33),(50.00,33.34),(33.33,33.34),(66.67,33.34)](P<0.05);观察组Ig G、Ig A表达[(9.54±2.35)g/L,(1.93±0.64)g/L]高于对照组[(8.36±1.49)g/L,(1.59±0.45)g/L](P<0.05),但在Ig M上[(1.23±0.62)g/L,(1.16±0.40)g/L]变化不大(P>0.05);观察组IFN-γ、IL-2水平[(15.04±4.26)pg/ml,(20.39±8.67)ng/L]优于对照组[(12.47±2.70)pg/ml,(15.07±8.09)ng/L](P<0.05),但IL-4[(7.53±3.79)ng/L,(8.24±3.39)ng/L]和TNF-α[(88.56±21.40)pg/mL,(79.36±23.13)pg/mL]治疗后2组间比较变化不大(P>0.05);对照组的不良反应发生率53.6%(15/28)显著高于观察组[13.3%(4/30)](P<0.05)。结论:桑黄饮片联合化疗治疗方案与化疗治疗方案在近期疗效上相近,但桑黄饮片配合化疗能有效纠正晚期胃癌患者血清免疫因子表达,改善免疫功能,降低血清IL-4、TNF-α水平,上调IFN-γ、IL-2水平,缓解IgG、IgA表达低下,提高生活质量、减少化疗不良反应。

桑黄水提物诱导黑色素瘤细胞系B16-F10 G_(0)/G_(1)期阻滞的研究

通过噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞分析、转录组测序和蛋白印迹等手段,探究桑黄水提物(SH)对黑色素瘤细胞系B16-F10的抑制作用及分子作用机制。MTT实验结果显示,SH能够抑制B16-F10细胞系增殖,且呈剂量依赖性。流式细胞分析发现,SH能够诱导细胞G_(0)/G_(1)期阻滞,但对细胞凋亡无明显影响。RNA-seq、qRT-PCR和Western blot分析发现,SH主要通过上调p53信号通路中p21的表达,进而抑制细胞周期通路中CyclinD3、CDK2和CDK6的表达来影响细胞周期阻滞。研究结果证明SH对黑色素瘤细胞增殖具有显著的抑制作用,p21-CyclinD3-CDKs信号通路介导的G_(0)/G_(1)期阻滞是其作用机制之一。

桑黄水提物对U14荷瘤小鼠的肿瘤抑制作用及对肠道菌群的影响

探讨不同浓度的桑黄水提物对U14荷瘤小鼠的肿瘤抑制作用及对肠道菌群的影响。昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、桑黄水提物(SHWE)低剂量组、SHWE中剂量组、SHWE高剂量组,每组各12只。皮下移植构建U14宫颈癌荷瘤小鼠模型,SHWE组小鼠灌胃不同剂SHWE,1次/d,连续给药21 d。末次给药24 h后观察记录各组小鼠的体质量、检测肿瘤组织抑瘤率、肿瘤体积变化,计算生存率。采集小鼠肠道内容物,通过16srDNA扩增子测定肠道菌群含量。结果显示:SHWE具有很好的抗肿瘤作用,SHWE高、中、低剂量组的抑癌率分别为44.26%、67.54%和62.30%,并且毒副作用小,在中剂量的SHWE干预下小鼠整体状态更好,死亡率低,小鼠体质量和体重变化和空白组趋于一致;在SHWE的干预作用下,总的来看小鼠肠道菌群的丰度和多样性要高于模型组。研究显示,在U14宫颈癌荷瘤小鼠模型中,SHWE具有很好的抗肿瘤作用并能通过改变肠道菌群的构成来影响肿瘤的发展。

不同来源桑黄菌种的鉴定及主要化学成分比较

从菌落形态、显微结构、分子水平对来自不同产地的4个桑黄菌株进行分类鉴定,并测定各菌株的主要活性成分含量等,为药用桑黄真菌资源的高效利用提供依据。在相同培养条件下,来自云南的YNS菌株、来自广西的GXS菌株和来自重庆的SHG菌株的菌落形态与镜检特征较为相似,其生长后期均能产生黄褐色圆轮状菌落和孔状结构,菌丝有分支和隔膜,而来自重庆的SHW菌株的菌丝生长最慢,后期可产生蓬松鹅黄色菌落,质地坚硬,菌丝无分支和隔膜;基于内转录间隔区(ITS)基因序列分析表明YNS、GXS和SHG3菌株的亲缘关系较近,而与SHW的亲缘关系较远。综合形态学特征和分子生物学鉴定结果,将YNS、GXS和SHG菌株鉴定为粗毛纤孔菌Inonotus hispidus,SHW菌株鉴定为桑树桑黄Sanghuangporus sanghuang。对菌株活性成分含量的测定结果表明,YNS菌株的粗多糖含量最高,SHW菌株的黄酮含量最高,SHG菌株的总三萜含量最高,桑黄产品生产中可根据需要选择不同的菌株。

桑黄类真菌活性代谢产物的研究进展

"桑黄"是一类珍贵的食药用真菌,笔者对桑黄类真菌的种属进行梳理,对其中的多酚类、萜类、甾体类、多糖类等代谢产物及其生物活性进行了归纳和总结,讨论了桑黄类真菌活性代谢产物研究开发中存在的问题,并展望了今后的研究方向,旨在为桑黄类真菌资源的开发利用提供参考。

抗氧化桑黄真菌筛选及抗氧化能力评价

本文比较桑黄真菌活性物质含量差异、抗氧化能力差异,并分析抗氧化方法间及抗氧化方法与含量间的相关性。结果表明,sh8在粗多糖含量、黄酮含量、总酚含量显著高于其他菌株,同时sh8有较强的羟自由基、DPPH、超氧阴离子自由基清除能力及较高螯合能力和还原力,表明sh8为较优菌株。不同抗氧化能力检测方法所得的结果间,具有不同的统计学相关性。总酚与不同抗氧化检测方法间的相关性最强,黄酮相关性次之,粗多糖与其相关性较低,以上说明,酚类物质对抗氧化能力起着最主要贡献,黄酮类物质贡献次之,粗多糖对抗氧化能力的影响较低。

药用真菌桑黄抗氧化物质及其活性研究

【目的】探索杨树桑黄、鲍姆桑黄和桑树桑黄3个菌株的抗氧化活性成分和抗氧化能力,为药用真菌桑黄的充分利用提供依据。【方法】以桑黄孔菌属的杨树桑黄(Sanghuangporus vaninii)、鲍姆桑黄(S.baumii)和桑树桑黄(S.sanghuang)为研究对象,液体培养21 d,每隔3 d测定菌丝生长量及发酵液中多糖、多酚、黄酮和抗坏血酸含量,并分析发酵上清液的DPPH自由基、ABTS自由基、羟自由基和超氧阴离子清除能力以及铁离子还原能力、亚铁离子螯合能力、总抗氧化能力和超氧化物歧化酶(SOD)活性,分析抗氧化物质含量与抗氧化指标间的相关性。【结果】3个桑黄菌株发酵液均具有较强的抗氧化能力,但不同菌株的抗氧化活性成分含量和抗氧化指标的强弱存在很大差异。其中杨树桑黄的DPPH、ABTS自由基和超氧阴离子清除能力、亚铁离子螯合能力及SOD活性更强,鲍姆桑黄的铁离子还原能力更强,桑树桑黄的羟自由基清除能力、总抗氧化能力更强,杨树桑黄的抗氧化活性整体优于鲍姆桑黄和桑树桑黄。Pearson分析结果显示,多糖含量与DPPH自由基清除能力、铁离子还原能力、亚铁离子螯合能力呈极显著正相关,多酚含量与DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力、铁离子还原能力、超氧阴离子清除能力、亚铁离子螯合能力和SOD活性呈极显著正相关;黄酮含量与铁离子还原能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子清除能力和总抗氧化能力呈极显著正相关;抗坏血酸含量与DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子清除能力和SOD活性呈极显著正相关。【结论】杨树桑黄、鲍姆桑黄和桑树桑黄均具有较强的抗氧化活性,且杨树桑黄表现更好。多酚、黄酮和抗坏血酸含量均可作为评价桑黄抗氧化活性的主要指标。

基于rDNA ITS序列分析的桑黄真菌菌株分子鉴定

对6份桑黄真菌菌株的rDNA ITS区段进行克隆测序和序列特征比较分析,并与GenBank中获得的桑黄基源物种相关序列进行同源性比对,进一步将从GenBank检索获得的桑黄基源物种的ITS序列、复合外组ITS序列连同6份桑黄菌ITS序列一起作系统发育分析。结果表明:Sh-03、04、05、06与Phellinus linteus亲缘关系最近,Sh-01与Phellinus baumii亲缘关系最近,Sh-02与Phellinus baumii、Phellinus linteus、Phellinus igniarius的亲缘关系相差甚远,为一错误菌种。本实验的研究结果可以提供一种准确可靠且简单易行的桑黄真菌分子鉴定技术。