双龙丸对大鼠实验性心肌梗死血管新生的影响与分子学机制

目的探讨双龙丸对缺血心肌血管新生的影响和分子学机制。方法 63只Wistar大鼠参照Drexler法结扎冠状动脉左前降支 ,制成急性心肌梗死 (AMI)模型。随机分为双龙丸大剂量组 (6 72 g/kg)、双龙丸小剂量组 (3 36g/kg)、AMI对照组 (生理盐水灌胃 ) ,另取 11只大鼠为正常对照组 (生理盐水灌胃 ) ,各组治疗观察半数至 2w、半数至 4w结束。应用免疫组化两步法检测AMI大鼠缺血心肌新生血管数量、免疫组化SP法检测缺血心肌血管内皮生长因子 (VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)的表达、逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)法检测缺血心肌VEGFmRNA和bFGFmRNA的表达。结果双龙丸大、小剂量组各期的缺血心肌新生血管数均比AMI对照组增多 ,且第 4w比第 2w更显著 ;第 2w时 ,大剂量组VEGF较AMI对照组、bFGF较小剂量组和AMI对照组均增高 ,大剂量组 4w时VEGF较 2w降低 ;大、小剂量组各期VEGFmRNA的表达均比AMI对照组增高 ,其第 4w均较第 2w为低 ;而bFGFmRNA的表达则仅见大剂量组第 2w时高于其他组 ;以上各组比较均具有显著性差异 (P <0 0 5— 0 0 1)。结论双龙丸能够促进缺血心肌血管新生 ;大剂量应用对VEGF。

双龙接骨丸含药血清促进成骨细胞的增殖及其分子机制的研究

目的在体外研究骨伤药双龙接骨丸含药血清对成骨细胞增殖活动的影响,并对其分子机制进行初步探讨。方法制备双龙接骨丸含药血清,MTT 法观察体外含药血清对成骨细胞株 HFOB 1.19的促增殖作用,cDNA 微阵列技术分析含药血清导致的基因表达差异,寻找双龙接骨丸的可能作用途径。结果高、中、低剂量双龙接骨丸含药血清组较对照组均有明显促进 HFOB 1.19增殖的作用(P<0.01),此过程中至少有8种基因的表达量发生明显变化,其中 cAMP 依赖的磷酸激酶Ⅰ型调节亚基β(PKAP Ⅰβ)表达量上调1.8倍,GC 盒结合蛋白表达降低73%。结论初步判定双龙接骨丸含药血清在体外有促进人成骨细胞增殖的作用,并有可能是通过 cAMP 介导的信号传导途径进行的。

双龙丸抗动脉粥样硬化及血管内皮保护作用的临床研究

为研究中药双龙丸治疗冠心病的机理 ,将 64例冠心病患者以单盲法随机分为治疗组和对照组 ,分别给予中药双龙丸、西药开博通合长效异乐定治疗 ,疗程为 1～ 3M ,观察治疗前后心肌缺血总负荷 (TIB)、一氧化氮(NO)、内皮素 (ET)、血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )、颈动脉内中膜 (IMI)及颈动脉斑块厚度、面积的变化。结果 :治疗组TIB、ET、AngⅡ降低 ;NO升高 ;IMI、颈动脉斑块与面积缩小 ,与治疗前比较均有显著性差异 ;与对照组比较 ,ET、NO、IMI和斑块厚度 ,治疗后有显著差异。提示双龙丸有抗动脉粥样硬化和血管内皮保护的作用 。

双龙接骨丸配合手法复位治疗中老年桡骨远端骨折的临床疗效观察

【目的】观察双龙接骨丸配合手法复位治疗中老年桡骨远端骨折的临床疗效。【方法】将131例中老年桡骨远端骨折患者随机分为观察组63例和对照组68例。2组患者均采用郑氏手法复位,达到解剖或临床复位标准后用小夹板外固定,观察组在此基础上给予双龙接骨丸内服治疗,疗程1个月。比较2组患者外固定拆除时间、腕关节功能Cooney评分和治疗的优良率情况。【结果】(1)治疗后,观察组的优良率为85.7%,明显高于对照组的70.6%,组间比较,差异有统计学意义(P <0.05)。(2)观察组的外固定拆除时间较对照组明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)治疗后,观察组的腕关节功能Cooney评分明显高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。【结论】双龙接骨丸配合手法治疗能够显著改善中老年桡骨远端骨折患者腕关节功能,缩短骨折愈合时间。

中药双龙丸对血管平滑肌细胞血小板衍化生长因子-A及单核细胞趋化蛋白-1mRNA表达的影响

目的 :探讨中药双龙丸干预动脉粥样硬化的分子学作用机制 ,主要是对血小板衍化生长因子 A(PDGF A)、单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)mRNA表达的影响。方法 :采用培养的家兔动脉粥样硬化细胞模型 ,用高脂血清造成动脉粥样硬化细胞模型 ,用中药血清药理学方法将药物血清作用于细胞模型 ,采用逆转录 -聚合酶链式反应 (RT PCR)方法 ,观察双龙丸对PDGF A、MCP 1mRNA表达水平的影响。结果 :高脂血清能刺激细胞表达PDGF A、MCP 1mRNA ,双龙丸药物血清能使PDGF A、MCP 1mRNA表达水平降低。结论 :双龙丸能抑制细胞自分泌生长因子功能 ,这是其干预动脉粥样硬化的药理作用机制之一。

反义封闭PKARⅠβ基因表达对双龙接骨丸含药血清体外促成骨细胞增殖作用的影响

目的进一步明确cAMP依赖的磷酸激酶Ⅰ型调节亚基β(PKARⅠβ)在双龙接骨丸含药血清促进体外培养成骨细胞增殖过程中的作用。方法构建表达PKARⅠβ基因反义序列的重组子pcDNA-antiPKARⅠβ,脂质体法转导成骨细胞HFOB119,MTT法检测其增殖状况。结果高剂量含药血清处理的反义基因封闭组中,HFOB1.19的增殖能力与空白血清对照组无显著差异(P>005)。结论双龙接骨丸含药血清的体外促成骨细胞增殖作用与PKARⅠβ基因的表达密切相关。

双龙丸对实验性心肌梗死形态学和血流动力学的影响

目的探讨活血通络类中药双龙丸对心肌梗死后心脏血流动力学和心肌梗死面积的影响。方法参照Drexler法结扎冠脉左前降支 ,制成急性心肌梗死 (AMI)模型。 66只大鼠分为双龙丸大剂量组 (18只 )、双龙丸小剂量组 (19只 )、正常对照组 (10只 )和心肌梗死对照组 (19只 )。各组半数治疗 2周 ,半数治疗至 4周 ,治疗结束时分别行股动脉和颈总动脉插管 ,应用 8导生理记录仪检测心脏血流动力学参数 ,Masson’s染色测定心肌梗死面积。结果治疗 2周和 4周 ,双龙丸大、小剂量组较同期心肌梗死对照组的左室最大收缩速率增高 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,且大剂量 2周组较心肌梗死对照组的左室最大舒张速率亦增高 (P <0 .0 5 ) ;大剂量组在 2周和 4周时均较心肌梗死对照组的梗死面积减小 (P <0 .0 5 )。结论双龙丸能提高实验性心肌梗死大鼠的左室最大收缩速率 ,大剂量应用还可改善心肌梗死早期左室舒张功能 。

双龙接骨丸促进兔骨折愈合的生物力学和截面几何性质研究

目的:观察双龙接骨丸促进兔骨折愈合的作用。方法:48只雄性兔造成桡骨骨折模型,按随机原则分为双龙接骨丸组、空白对照组。按照1.0g双龙接骨丸药粉加5ml蒸馏水的比例溶解配成混悬液,每只兔按照0.50g·kg-1双龙接骨丸的剂量灌胃,2次·d-1。空白对照组同法10ml蒸馏水灌胃。术后30日、60日,每组12只兔手术取出桡骨,进行放射学评定、三点弯曲生物力学与骨折截面几何性质的测试和计算。结果:术后30日、60日,按照X线观察骨折愈合的衡量标准评定,双龙接骨丸组桡骨的骨折愈合程度与空白对照组比较具有显著性差异(P<0.05);双龙接骨丸组桡骨的最大载荷、最大弯矩、弯曲刚性系数、最大正应力均较空白对照组明显增高(P<0.05);术后30日、60日,双龙接骨丸组桡骨断面的截面模量、惯性矩均较空白对照组增大(P<0.05);术后30日,双龙接骨丸组桡骨骨折断面的截面面积较对照组明显增大(P<0.05);术后60日,两组桡骨骨折断面的截面面积无显著性差异(P>0.05)。结论:通过对兔桡骨骨折愈合过程中的放射学、三点弯曲生物力学和骨折断面的截面几何性质的研究证明双龙接骨丸可能具有促进骨折愈合的作用。

双龙丸对实验性心肌梗死大鼠血流动力学的影响

目的 探讨活血通络类中药双龙丸对心肌梗死后心脏血流动力学的影响。方法 结扎左冠状动脉的大鼠 76只随机分为双龙丸大剂量组、双龙丸小剂量组、双嘧达莫组和心梗对照组 ,另将 1 0只未造模的同龄鼠作为正常对照组。分组治疗至观察终点 (每组半数治疗至 2周、半数治疗至 4周时结束 ) ,分别于股动脉和颈总动脉插管 ,应用八导生理记录仪检测心脏血流动力学参数。结果 治疗 2周和 4周 ,双龙丸大、小剂量组和双嘧达莫组较心梗对照组+dp/dtmax显著增高 ,但仍较正常对照组为低。 2周时 ,双龙丸大剂量组尚较心梗对照组 -dp/dtmax也显著增高。 结论 双龙丸治疗心肌梗死能提高心脏左室最大收缩速率 。

双龙丸对稳定性心绞痛患者颈动脉内中膜厚度的影响

为观察双龙丸对颈动脉内中膜厚度 (IMT)的影响 ,将 13 1例诊断为冠心病稳定性心绞痛患者分为两组 :双龙丸组 ( 82例 )服用双龙丸 1 5克 /次 ,每日 3次 ,治疗 6月 ;开搏通组 ( 4 9例 )服用开搏通 12 5mg/次 ,每日 2次 ,治疗 6月。观察患者血压、心率 ,2 4小时动态心电图 ,颈动脉IMT和斑块面积变化。结果 :两组均非常显著性降低收缩压、舒张压和心率 (P <0 0 1)。两组治疗前后ST↓max有非常显著性差异 (P <0 0 1) ,ST↓ >1mm时间有显著性降低 (P <0 0 5 ) ;双龙丸组ST↓ >1mm的次数有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,两组ST↓max和ST↓ >1mm时间比较有显著性差异 (P <0 0 5 )。两组治疗前后IMT均有非常显著性改变 (P <0 0 1) ,两组间比较无显著性差异。两组治疗前后斑块面积均无显著性改变。提示双龙丸可能通过改善颈动脉内中膜厚度延缓动脉粥样硬化 (AS)

双龙丸对兔主动脉粥样斑块内血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子表达的影响

目的观察双龙丸对兔主动脉粥样硬化斑块内血管内皮生长因子 (VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)表达的影响。方法免疫损伤加高脂喂养建立兔动脉粥样硬化 (AS)模型 ,分为空白对照组 (Ⅰ组 ,6只 )、实验对照组 (Ⅱ组 ,6只 )、开搏通对照组 (Ⅲ组 ,6只 ,10mg/kg·d ,灌胃 12周 )和双龙丸组 (Ⅳ组 ,6只 ,2 5 2 g/kg·d ,灌胃 12周 )。免疫组织化学法定性和定量观察VEGF和bFGF在主动脉粥样斑块内表达。结果Ⅲ组和Ⅳ组VEGF和bFGF表达面积、密度和密度指数比Ⅱ组显著降低 (P <0 0 1) ;Ⅳ组VEGF表达面积、密度和密度指数比Ⅲ组显著降低 (P <0 0 1)。病理染色示 ,Ⅰ组内中膜未见泡沫细胞形成 ,无bFGF和VEGF黄染。Ⅱ组 ,粥样斑块内大量泡沫细胞形成 ,广泛淡黄染。Ⅲ组和Ⅳ组 ,内膜少量泡沫细胞形成 ,呈轻微淡黄染。结论双龙丸和开搏通一样 ,可通过抑制VEGF和bFGF在动脉粥样斑块内表达 ,延缓或逆转动脉粥样硬化进展。

应用基因表达谱芯片研究中药复方对心肌梗死的药效机制

目的:麝香保心丸、双龙方等具有益气活血的中药复方均可有效治疗心肌梗死,该文以麝香保心丸、双龙方为研究对象,从基因表达的角度探讨该类中药复方治疗心肌梗死的药效机制。方法:建立大鼠左冠状动脉结扎心肌梗死模型,药物干预7 d后取心肌梗死区边缘缺血组织,建立基因表达谱,筛选治疗前后的差异表达基因,进行生物信息学分析,同时采用RT-PCR对芯片数据进行验证。结果:两种益气活血方干预后,大鼠心肌组织的基因表达谱发生改变,筛选得到224个共有的差异表达基因,涉及能量代谢相关的甘油三磷酸脱氢酶活性、糖酵解/糖质新生等通路。结论:心肌梗死是一种多基因表达异常的心血管疾病,益气活血中药在发挥其治疗作用时,对224个共有差异表达基因具有相似调节作用,且主要通过改善大鼠心肌能量代谢异常,达到治疗心肌梗死的作用。

双龙接骨丸联合正骨紫金丹治疗脑卒中偏瘫侧桡骨远端闭合性骨折的临床效果

目的探讨双龙接骨丸联合正骨紫金丹对脑卒中偏瘫侧桡骨远端闭合性骨折患者神经和腕关节功能的影响。方法入选脑卒中偏瘫侧桡骨远端闭合性骨折患者以随机数表法分为试验组和对照组。对照组采用正骨紫金丹治疗,每晨餐后30 min服用1次,每次15 g,连服8周。试验组在对照组的基础上联合双龙接骨丸治疗,温水送服,每天1次,每次15 g,早餐后30 min服用,连续用药8周。对比2组美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)和临床疗效;用Gartland Werley评分评估治疗后1和2个月腕关节功能;用酶联免疫吸附试验法检测血清基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)与基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达量;观察并统计2组药物不良反应发生率。结果试验组和对照组分别纳入44例受试者。试验组和对照组的总有效率分别为93.18%(41例/44例)和86.37%(38例/44例),差异有统计学意义(P<0.05);对照组残余畸形、客观评价、主观评价和并发症评分分别是2.00±0.78、4.00±0.56、4.00±0.12和4.00±0.46;试验组残余畸形、客观评价、主观评价和并发症评分分别是1.00±0.67、2.00±0.12、1.00±0.98和2.00±0.23;组间比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。治疗后,试验组和对照组的NIHSS评分分别为1.42±0.47和3.65±0.74,试验组和对照组的腕关节功能Gartland Werle评分分别为2.92±0.48和4.76±0.89,试验组和对照组血清TIMP-1表达量分别为(425.61±15.57)和(362.94±13.25)μg·L^(-1),血清MMP-9表达量分别为(46.25±3.34)和(57.82±4.18)μg·L^(-1),试验组上述指标与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);治疗后,试验组和对照组的总药物不良反应发生率分别为6.82%和27.27%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论双龙接骨丸联合正骨紫金丹治疗脑卒中偏瘫侧桡骨远端闭合性骨折患者疗效显著,可改善患者的神经功能和腕关节功能,下调MMP-9水平和上调TIMP-1水平,减轻脑屏障受损情况与炎症反应的发生,降低药物不良反应发生率。