5,7,3',4',5'-五甲氧基黄酮的镇痛抗炎作用研究

目的研究5,7,3',4',5'-五甲氧基黄酮的镇痛抗炎作用。方法本实验采用热板法和冰醋酸扭体法观察镇痛作用,采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法和冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高法观察抗炎作用。结果 5,7,3',4',5'-五甲氧基黄酮中、高剂量组均能明显延迟小鼠舔后足时间(P<0.05),并能减少冰醋酸引起的小鼠扭体反应,抑制率分别为50.94%、64.55%;且该化合物中、高剂量组对冰醋酸诱发小鼠腹腔毛血管通透性增高的抑制率分别为38.81%、49.70%;对二甲苯诱发的小鼠耳廓肿胀有明显的抑制率分别为45.00%、65.27%。结论 5,7,3',4',5'-五甲氧基黄酮不具有物理及化学刺激具有镇痛作用,对急性炎症有明显抑制作用。

黄草乌Av-F3'5'H基因的克隆与表达分析

根据已发表的川乌头F3'5'H基因序列,通过RT-PCR方法从黄草乌(Aconitum vilmorinianum)花朵中克隆到了1个类黄酮3',5'羟基化酶(F3’5’H)基因的c DNA序列,该序列长1563 bp,包含1个编码506个氨基酸的完整开放阅读框,命名为Av-F3'5'H(Gen Bank登录号:JQ806761)。序列比对分析显示Av-F3'5'H蛋白与其它物种的F3'5'H蛋白序列有很高的序列相似性,包含有已确定的CYP基序、I螺旋区和血红素结合区等保守基序等。以川乌头18sRNA基因(FJ748878)为内参,通过RT-PCR对Av-F3'5'H基因的时空表达模式进行了分析,结果显示Av-F3'5'H基因的表达水平随花朵发育进程而呈递增趋势,在第3时期的花朵中达到最高,随后又逐渐降低,而在根、茎和叶中均不表达,推测该基因可能在调节黄草乌花朵蓝色形成过程中起重要作用。

中国樱桃新品种'中樱圆黄'的选育

‘中樱圆黄'是通过中国樱桃实生选育获得的新品种。该品种树势强健,树姿较直立,枝条密度中等,树冠丛状;果实圆球形,不裂果,单果重2.02 g,果柄长2.46 cm;果实乳黄色,有光泽,皮较薄,成熟后着红晕;果肉黄色,肉质较软,汁液多,可溶性固形物含量13.6%,味甜酸,品质中上;果核近圆形,平均核重0.19 g,果实可食率达90.6%。嫁接树第2年开花,第3年开始结果,4年生树平均产量1 348.5 kg/hm^2。以中短枝结果为主,较丰产;抗寒性较好,抗旱力差,喜土层深厚的土壤,适宜在山东、安徽、江苏、浙江等中国樱桃适宜栽培区域栽植。

4',5,7-三羟基二氢黄酮与人血清白蛋白相互作用的光谱学研究

应用紫外吸收光谱、荧光光谱和红外光谱等方法对人血清白蛋白(HSA)与4',5,7-三羟基二氢黄酮(naringenin,NAR)相互作用的机理进行了研究.紫外光谱显示,在生理pH下NAR分子中A环7位的酚羟基发生部分解离,7位酚羟基的解离使A环与B环上羰基形成的共轭体系的紫外吸收峰发生明显红移;药物与蛋白质的相互作用使该谱带发生了进一步的红移,说明该共轭体系参与了与蛋白质的相互作用.在药物与蛋白质浓度比(cNAR/cHSA)为0.1～10的范围内,NAR在HSA上只有一个结合位点(可能位于site I),结合常数为1.27×105L·mol^(-1)(n=5,RSD小于5%).研究了不同pH值条件下药物对蛋白质荧光猝灭的影响,发现药物分子中的没有解离的活性基团在结合过程中发挥着主导作用.在缓冲水溶液和重水溶液中分别测定了与药物作用前后蛋白质二级结构的变化.随着药物浓度的增加,NAR和HSA之间的相互作用使HSA的α-螺旋结构的含量明显降低,而β-折叠和β-转角结构的含量增加,无轨结构在药物浓度较高时也有少量的增加.结合紫外吸收光谱、荧光光谱和红外光谱结果,探讨了HSA与NAR相互作用的模式.

花粉直感对‘圆黄'梨果实品质的影响

用‘西子绿'、‘翠冠'、‘黄冠'等11个梨品种与‘圆黄'梨进行授粉试验,研究花粉直感对‘圆黄'果实品质的影响。结果表明:‘圆黄'果实在坐果率、单果重、种子数、可溶性固形物含量等方面表现明显的花粉直感现象,而在果形指数、肉质、汁液等方面表现不明显。因此,‘圆黄'梨最适宜的授粉品种是‘翠冠'、‘新酥'、‘金晶'和‘丰水'。

5,2',4'-三羟基-6,7,5'-三甲氧基黄酮通过线粒体途径诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡

目的探讨5,2',4'-三羟基-6,7,5'-三甲氧基黄酮(5,2',4'-trihydroxy-6,7,5'-trimethoxyflavone,TTF1)诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的诱导作用及机制。方法 TTF1作用HepG-2细胞后,采用流式细胞术测定细胞周期及凋亡率,采用Western blot检测bcl-2、bax、cyt-c、caspase-3和caspase-9蛋白表达。结果 TTF1能够抑制人肝癌HepG-2细胞增殖、诱导凋亡。Western blot结果显示,TTF1明显降低bcl-2 mRNA及蛋白表达,增加bax、胞质cyt-c、caspase-3和caspase-9 mRNA及蛋白表达。结论 TTF1可以通过线粒体途径诱导人肝癌HepG-2细胞发生凋亡。

桃极晚熟黄肉新品种'金黄金3号'的选育

‘金黄金3号’是从‘金黄金’的实生种中选育而成的极晚熟黄肉桃新品种。平均单果重310g,最大果重718g。果实圆形,果形指数0.89。果面茸毛短,不套袋果实底色黄色,阳面着少量红晕;套袋果果面黄色。果肉金黄色,汁液适中,半溶质,硬度7.2 kg/cm^2,脆甜爽口,香味浓,可溶性固形物含量15.0%,可滴定酸含量0.23%,维生素C含量89.6 mg/kg,适于鲜食。果实9月下旬成熟,果实发育期160~170 d。‘金黄金3号’丰产稳产。

4',5,7-三羟基异黄酮对蛛网膜下腔出血大鼠的神经保护和抗氧化作用研究(英文)

目的探讨4',5,7-三羟基异黄酮对蛛网膜下腔出血(SAH)后的神经保护作用。方法对大鼠单次枕大池注血模型分别以10 mg/kg、50 mg/kg浓度腹腔注射4',5,7-三羟基异黄酮,观察大鼠脑水肿、血脑屏障(BBB)的通透性、氧化应激和血红素氧合酶-1(HO-1)的变化情况。结果 4',5,7-三羟基异黄酮可以减轻SAH后脑水肿,降低BBB通透性、缓解氧化应激状态及减少HO-1的表达。结论 4',5,7-三羟基异黄酮可能是通过提高内源性抗氧化酶的表达和抑制自由基的产生,从而在SAH中产生神经功能保护作用。

3,5,7,3',4',5'-六羟基黄酮分子印迹聚合物制备及性能表征

采用分子印迹技术合成了对3,5,7,3',4',5'-六羟基黄酮具有高效选择性的分子印迹聚合物,通过静态吸附的方法,利用Scatchard模型,研究了分子印迹聚合物的特异性识别能力。实验表明,以甲基丙烯酸为功能单体,在甲苯溶剂中聚合得到的分子印迹聚合物对3,5,7,3',4',5'-六羟基黄酮具有较大的吸附富集能力和识别特性。其饱和吸附容量达到30.8 mg/g。

绿色棉纤维类黄酮3',5'羟基化酶基因GhF3'5'H的克隆及实时定量表达分析

以发育18 d的天然绿色棉及其近等基因系白色棉纤维细胞为材料,利用cDNA-AFLP结合cDNA末端快速扩增技术,克隆了1个绿色棉纤维优势表达基因的全长cDNA。序列分析结果表明,该cDNA全长1873bp,含有一个编码509个氨基酸残基的开放阅读框。Blast分析表明,该基因的编码产物为一个类黄酮3',5'羟基化酶,将该基因命名为GhF3'5'H,序列提交到GenBank,登录号为GU062184。实时荧光定量PCR检测结果显示:GhF3'5'H在绿色棉不同组织中的表达量均显著高于其近等基因系白色棉,而且主要在纤维细胞中表达。在纤维发育过程中,GhF3'5'H在纤维发育的早期表达量最高,并随纤维发育逐渐降低。推测该基因可能在绿色棉纤维色素前体物质的形成中发挥作用。

龙须藤总黄酮中5,7,3',4',5'-五甲氧基黄酮在大鼠体内的药动学研究

目的建立测定大鼠血浆中5,7,3＇,4＇,5＇-五甲氧基黄酮浓度的HPLC法,并研究其药动学行为。方法 2组大鼠分别灌胃给予龙须藤总黄酮（给药剂量为60 mg/kg）和5,7,3＇,4＇,5＇-五甲氧基黄酮（给药剂量为113 mg/kg）,采用高效液相色谱法测定血浆中5,7,3＇,4＇,5＇-五甲氧基黄酮的浓度,以软件DAS2.0计算药动学参数。结果大鼠灌胃5,7,3＇,4＇,5＇-五甲氧基黄酮和龙须藤总黄酮后,5,7,3＇,4＇,5＇-五甲氧基黄酮的体内过程均符合单室模型,主要药动学参数如下：AUC0~∞分别为（5.502±1.302）、（4.192±0.232）（mg·h）/L,Cmax分别为（0.689±0.065）、（0.758±0.157）mg/L,Tmax分别为（3.111±0.434）、（1.430±0.365）h,T1/2分别为（2.444±0.287）、（2.700±0.890）h。结论以小剂量龙须藤总黄酮给药较单体给药时5,7,3＇,4＇,5＇-五甲氧基黄酮血药浓度峰值高,吸收速率常数大,达峰时间短,龙须藤总黄酮中共存的其他成分可能有促进5,7,3＇,4＇,5＇-五甲氧基黄酮吸收的作用。

4',5,7-三羟基异黄酮对LPS同时诱导的THP-1细胞向HAEC细胞迁移的影响

目的探讨4',5,7-三羟基异黄酮对脂多糖(LPS)同时诱导的人单核细胞(THP-1)向人主动脉内皮细胞(HAEC)迁移能力的影响。方法用不同浓度4',5,7-三羟基异黄酮预处理两种细胞30 min,然后用LPS同时作用两种细胞4 h,Transwell迁移实验检测THP-1细胞向HAEC细胞的迁移能力;将THP-1细胞加入到HAEC细胞中共培养1 h,用酶联免疫吸附法检测共培养细胞培养液上清中MCP-1蛋白的浓度。结果加入不同浓度4',5,7-三羟基异黄酮预处理两种细胞30 min后,THP-1细胞的迁移数量及共培养细胞上清液中MCP-1含量和细胞MCP-1 mRNA的表达水平与LPS组比较均呈浓度依赖性减少(P<0.01)。结论 LPS可诱导THP-1细胞与HAEC细胞迁移且促进MCP-1表达;4',5,7-三羟基异黄酮预处理后可明显抑制LPS诱导的THP-1细胞向HAEC细胞的迁移,并明显降低THP-1细胞与HAEC细胞MCP-1的表达。

不同条件对‘巴西蕉’和‘南天黄’香蕉后熟的影响

‘南天黄’为性状优良且抗枯萎病的香蕉新品种,其后熟条件与传统栽培品种‘巴西蕉’不同,然而生产中常以统一做法对‘南天黄’进行催熟,易造成生产误判。为提高香蕉品质,延长货架期,本研究以500 mg/L乙烯利喷雾处理后的‘南天黄’与‘巴西蕉’果实为材料,实验分为(22±2)℃处理组(T2)、(22±2)℃+双向拉伸聚丙烯(biaxially oriented polypropylene,BOPP)薄膜包装处理组(T-2)、17℃处理组(T1)、17℃+BOPP薄膜包装处理组(T-1),观察果皮色差、果肉硬度、果实质量损失率、可溶性固形物质量分数的变化和货架期的特点,以此制定‘南天黄’合理催熟方案。T1、T-1处理组‘南天黄’褪绿转黄(催熟时间)比‘巴西蕉’早1 d,T1处理组‘南天黄’比‘巴西蕉’货架期长2 d;T2处理组‘南天黄’褪绿转黄比‘巴西蕉’迟1 d,货架期长2 d;与T2处理组相比,T1处理组香蕉后熟末期硬度、色差L*值、C*值、a*值更大,货架期长2 d,但后熟后颜色不如T2处理组的鲜黄;BOPP包装延缓了褪绿转黄,使催熟时间延长4 d,货架期缩短。因此前期高温(21℃)后期低温(17℃)是‘南天黄’获得较好的货架品质和货架期的后熟条件。

早熟鲜食黄肉桃新品种‘金陵黄露’的选育

‘金陵黄露’是以‘99-8-3’(‘霞晖7号’×(‘锦绣’ב黄金蟠桃’))为母本,‘Springbaby’为父本杂交育成的早熟黄肉桃新品种。该品种果实圆形,平均单果质量226 g,大果383 g,果皮底色黄色,果面60%以上着红色。果肉黄色,肉质为硬溶质,风味甜,可溶性固形物含量12.1%,含可溶性糖9.5%,可滴定酸0.27%,黏核。树体生长健壮,花蔷薇型,有花粉,萌芽率与成枝力中等。南京地区6月下旬成熟,果实发育期92 d左右。在江苏张家港、盱眙、溧水、徐州等地生长结果良好,适应能力强,一般定植后第2年可开花结果,第5年进入盛果期,丰产性好。

黄肉鲜食桃品种‘黄金蜜桃3号’的选育

白肉桃占据我国鲜食桃品种的主导地位,黄肉桃由于富含类胡萝卜素等健康有益成分,近年来受到部分消费者的青睐。‘黄金蜜桃3号’是中国农业科学院郑州果树研究所选用桃优系‘92-3-39’(母本)和‘91-2-2’(父本),通过人工杂交培育出的黄肉鲜食桃品种。该品种果实近圆形,果顶圆平,偶有小突尖,平均单果质量258 g,大果质量363 g,成熟时果皮底色黄,茸毛长度中等,大部分果面着深红色,套袋果呈金黄色。果肉橙黄色,可溶性固形物含量(w,后同)11.8%~13.6%,近核处红色素多,肉质致密,味甜,黏核。花铃型,花粉多,自花结实,丰产。郑州地区2月底花芽萌动,3月下旬开花,果实7月底至8月初成熟。

甜瓜‘黄蛋子’子叶再生完整植株研究

为了通过不定芽发生途径建立甜瓜‘黄蛋子’体细胞再生完整植株的技术体系,并了解掌握该品种的再生能力和再生特点,以‘黄蛋子’的幼龄子叶作为外植体,进行了组织培养条件下的再生试验。试验结果表明,在MS+6-BA2.0mg/L不定芽诱导培养基上外植体发出的再生芽(丛)为不定芽来源。58块外植体的不定芽分化频率平均为44.8%,并产生质地、数量不等的愈伤组织。在MS+6-BA0.05mg/L不定芽伸长培养基上,分化的不定芽(丛)能够伸长长大,但存在程度不同的玻璃化现象。在1/2MS+IAA0.5mg/L生根培养基上无根苗发根,生根率可达99%。与相关文献中报道过的其他甜瓜厚皮品种相比较,‘黄旦子’属再生能力弱的品种,但品种内个体之间存在再生能力上的明显差异,通过选择自交技术有可能获得再生能力得到提高的纯化株系。

优质鲜食黄肉猕猴桃新品种‘金圆’的选育及特性分析

‘金圆’是以种间杂交品种‘金艳’(Actinidia chinensis×A. eriantha)为母本、中华猕猴桃(A. chinensis Planch.)为父本,从回交F1代群体中选育出的中熟黄肉猕猴桃新品种。通过对‘金圆’植物学性状、特异性、营养成分、贮藏性等进行研究,结果显示:‘金圆’果实为短圆形,单果重80～100 g,软熟时果肉橙黄色,质细味浓;‘金圆’的花瓣数和花丝数与母本‘金艳’接近,花冠直径和柱头数较‘金艳’分别增大了9.31%和52%,而花柄长度比‘金艳’短16.75%;萌芽率和果枝率略低于‘金艳’,但比‘海沃德’高出55.26%和43.33%;‘金圆’的可溶性固形物、总糖和可滴定酸含量与‘金艳’相当,但维生素C含量比‘金艳’高4.63%,是‘海沃德’的2.2倍;‘金圆’矿质元素含量丰富,P和K含量分别比‘金艳’高30.86%和22.53%,Mg含量比‘海沃德’高24. 86%;‘金圆’的总氨基酸含量丰富(8 mg/g),E/N和E/T值均高于‘金艳’和‘海沃德’,更接近于理想模式;‘金圆’在低温下(1～2℃,相对湿度90%～95%)贮藏150 d时,好果率在80%以上,200 d后,好果率仍有65%,贮藏性略低于‘金艳’,但显著高于‘海沃德’。利用Geo7-223分子标记扩增‘金圆’基因组得到3个条带,表明其与‘金艳’和‘金桃’在分子水平上具有一定差异。本研究表明‘金圆’具有良好的农艺性状和品质特性。

‘黄天霸’百合鳞茎低温解除休眠过程中形态和生理的变化

研究了4℃冷藏过程OT百合(Lilium hybrids)品种‘黄天霸’(‘Manissa’)鳞茎形态及相关生理生化指标的变化,结果表明:49 d后顶芽生长点距鳞茎顶端小于1 cm,淀粉含量明显下降,可溶性糖、蔗糖和还原性糖含量呈上升趋势(在第49天出现峰值);ABA含量在贮藏初期略有上升,第35天开始明显下降;IAA含量的变化则与ABA相反;GA3与ZR含量的变化规律不明显;激素含量之间比值均在29-35 d明显上升.表明‘黄天霸’百合鳞茎4℃解除休眠的合适时间为49 d,冷藏后29-35 d为其打破休眠的关键时期.

‘黄天霸’百合花器官愈伤组织诱导及植株再生

以‘黄天霸’百合花器官为外植体,采用正交试验,进行愈伤组织诱导及再分化研究,获得再生植株。结果表明,‘黄天霸’百合花器官的不同部位,其分化能力不同,出愈率由高到低依次是花丝>花柱>子房>花瓣>花药,花丝是较适宜诱导产生愈伤组织的外植体。花丝愈伤组织诱导的适宜培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+0.3 mg/L 2,4-D,出愈率为69.56%,适宜愈伤组织增殖培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA;适宜芽分化的培养基为MS+0.6 mg/L 6-BA+0.6 mg/L NAA,芽诱导率达100%;最适生根培养基为MS+0.1 mg/L NAA,生根率达100%;试管苗移栽于草炭:蛭石:珍珠岩:园土:河沙=2:1:1:1:1的基质中,成活率达92%。

利用DGE对黄肉猕猴桃果实着色过程中相关差异基因表达的解析

【目的】构建数字基因表达谱(DGE),寻找调控黄肉猕猴桃果实呈色的潜在关键基因。【方法】以中华猕猴桃(Actinidia chinensis Planch)黄肉品种‘金丰’为试材,利用Illimina/Hisseq测序技术构建其果实发育中3个不同转色期DGE文库,以转录组数据为参考数据库,进行GO功能富集以及Pathway功能富集分析。【结果】结果表明,DGE文库构建转色前期、转色期和成熟期分别获得4 724 009,4 565 159和4 626 730个标签。转色期与转色前期之间差异表达基因的个数为2 641个,成熟期与转色前期有差异表达的基因个数是2 671,成熟期与转色期之间有1457个基因有表达差异。通过GO功能富集及Pathway功能富集分析,分别获得了102条叶绿素Unigenes与111条类胡萝卜素Unigenes,其中12条叶绿素Unigenes及14条类胡萝卜素Unigenes在果实的3个不同转色期有显著差异表达(P<0.05)。【结论】黄肉猕猴桃呈色的关键基因可能存在于具有显著差异表达的12条调控叶绿素合成以及14条调控类胡萝卜素合成的Unigenes之中。