HPLC法同时测定真武汤中11种活性成分的含量

目的:建立同时测定真武汤中5-羟甲基糠醛、(+)-儿茶素、芍药苷、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰芍药苷、6-姜酚、8-姜酚、白术内酯Ⅱ、6-姜烯酚、茯苓酸含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Phenomenex Kinetex C18,流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为285 nm(4.4~7 min,5-羟甲基糠醛)、203 nm[7~12 min,(+)-儿茶素]、233 nm(12~50 min,芍药苷、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰芍药苷)、200 nm(50~62.3 min,6-姜酚、8-姜酚;62.9~90 min,6-姜烯酚、茯苓酸)、222 nm(62.3~62.9 min,白术内酯Ⅱ),柱温为35℃,进样量为20μL。结果:5-羟甲基糠醛、(+)-儿茶素、芍药苷、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰芍药苷、6-姜酚、8-姜酚、白术内酯Ⅱ、6-姜烯酚、茯苓酸检测质量浓度线性范围分别为0.62~12.47μg/mL(r=0.999 6)、2.36~47.25μg/mL(r=0.999 7)、200.80~4 016μg/mL(r=0.999 7)、4.45~89.04μg/mL(r=0.999 6)、4.28~85.54μg/mL(r=0.999 5)、5.16~103.13μg/mL(r=0.999 9)、5.53~110.66μg/mL(r=0.999 9)、0.84~16.89μg/mL(r=0.999 8)、0.60~12.04μg/mL(r=0.999 9)、0.53~10.62μg/mL(r=0.999 5)、1.04~20.78μg/mL(r=0.999 7);定量限分别为0.155、0.590、1.210、1.112、1.070、0.258、0.553、0.421、0.153、0.354、0.431μg/mL,检测限分别为0.047、0.179、0.134、0.337、0.324、0.078、0.168、0.128、0.046、0.107、0.131μg/mL,精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3%;加样回收率分别为96.06%~103.01%(RSD=2.64%,n=6)、95.11%~101.57%(RSD=2.58%,n=6)、97.22%~102.11%(RSD=1.93%,n=6)、96.43%~102.78%(RSD=2.35%,n=6)、96.42%~101.43%(RSD=2.15%,n=6)、96.86%~102.05%(RSD=2.10%,n=6)、95.32%~100.55%(RSD=1.87%,n=6)、97.04%~103.25%(RSD=2.22%,n=6)、96.78%~103.22%(RSD=2.62%,n=6)、97.04%~103.14%(RSD=2.28%,n=6)、97.08%~103.51%(RSD=2.94%,n=6)。结论:该方法准确、专属性好,可用于同时测定真武汤中11种活性成分的含量。