^(131)Ⅰ-大黄素和^(131)Ⅰ-大黄素酸的坏死靶向性及成像坏死心肌的研究

探讨^(131)Ⅰ-大黄素和^(131)Ⅰ-大黄素酸的坏死靶向性及成像坏死心肌的潜能。用放射性^(131)Ⅰ标记大黄素、大黄素酸,在小鼠肌肉坏死和大鼠心肌梗死(MⅠ)模型上评估这两个示踪剂的坏死靶向性及成像潜能。分别在给药2、12和24 h后处死小鼠,并用γ-计数器测量主要脏器、坏死肌肉的放射量。给药6 h后,SPECT/CT成像大鼠梗死心肌,测量组织分布,并对心脏切片进行病理学分析。小鼠分布数据表明^(131)Ⅰ-大黄素和^(131)Ⅰ-大黄素酸具有良好的坏死靶向性,同时从正常组织清除较快。SPECT/CT图像显示这两个化合物在MⅠ大鼠的心脏部位有高摄取("热点"成像),而在假手术大鼠的心脏区域没有明显的摄取。磷屏定量数据表明:^(131)Ⅰ-大黄素和^(131)Ⅰ-大黄素酸的坏死/正常心肌比分别为9.72和13.14。以上结果说明这两个示踪剂都具有坏死靶向性及成像坏死心肌的潜能。

^(131)Ⅰ-抗AFP抗体导向治疗肝癌的临床观察

１９８０～１９９３年，用（１３１）Ⅰ－抗ＡＦＰ抗体治疗不能切除肝癌７２例（１５３例次），治疗≥２次占４７例，平均（１３１）Ⅰ量为３１．８７（６．４～９７．４）Ｍｃｉ，中位数２７．４ｍｃｉ（１０１３．８ＭＢｑ）。结果：总有效率２０．８％（１５／７２），治后一年生存率３３．３％（２２／６６）；治疗≥２，≥３，≥４次者有效率分别为２９．８％（１４／４７）、６０．０％（９／１５）和７０．０％（７／１０）；一年生存率依次为４５．７％、７３．３％和８０．０％；瘤大小：≤７ｃｍ，７．１～１０ｃｍ和＞１０ｃｍ患者，治后瘤缩小率分别为１００．０％、７６．９％和５３．９％；一年生存率８７．５％、４８．０％和１５．４％；经肝动脉灌注治疗有效率高于ｉｖ给药者（６４．３％：１５．２％），一年生存率亦高于ｉｖ（６４．３％：３７．５％）。本研究表明，（１３１）Ⅰ－抗ＡＦＰ抗体导向治疗肝癌具有明显疗效。

分化型甲状腺癌手术联合^(131)Ⅰ清甲治疗后复发与乏氧诱导因子-lα表达的关系

目的:研究分化型甲状腺癌手术联合131I清除剩余甲状腺(清甲)治疗后复发与乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的相关性,探讨HIF-1α对治疗后复发的可能机制。方法:依据甲状腺球蛋白(Tg)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、B超、X线及全身131I显像的复发判定标准,观察分析173例分化型甲状腺癌手术联合131I清甲治疗成功后3年复发率,将复发病例作为复发组;随机选取相同数量未复发病例作为无复发组。采用免疫组织化学法和RT-PCR技术检测复发组和无复发组患者癌组织中HIF-1α阳性细胞率和HIF-1α基因表达水平。结果:分化型甲状腺癌手术联合131I清甲治疗成功后3年内复发率为5.20%(9/173)。其中乳头状癌复发率为4.90%(5/102),滤泡状癌复发率为5.63%(4/71),2组间比较差异无显著性(P>0.05)。复发组乳头状癌和滤泡状癌组织HIF-1α阳性细胞率和HIF-1α基因表达水平明显高于无复发组(P<0.05)。结论:分化型甲状腺癌手术联合131I清甲治疗成功后仍有少数患者复发,其机制之一可能与癌组织中HIF-1α表达水平明显增高有关。

敲降miR-222-3p靶向PTEN对甲状腺癌^(131)Ⅰ放疗抵抗的影响及其机制

目的:探讨miR-222-3p通过人第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白合同源基因(PTEN)对甲状腺癌细胞增殖和凋亡的影响,阐明miR-222-3p在甲状腺癌131Ⅰ放疗抵抗中的作用及机制。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测人甲状腺癌细胞和人正常甲状腺滤泡上皮Nth-ori 3-1细胞中miR-222-3p表达水平。以人甲状腺癌K1细胞和放射抗性K1(K1R)细胞为研究对象,实验分为空白对照组、131Ⅰ处理组、131Ⅰ+miR-222-3p敲降组、131Ⅰ+PTEN过表达组和131Ⅰ+PTEN过表达+miR-222-3p过表达组。空白对照组K1和K1R细胞不经任何处理,131Ⅰ处理组K1和K1R细胞经1和3 Gy131Ⅰ处理,131Ⅰ+miR-222-3p敲降组K1和K1R细胞转染miR-222-3p inhibitor后再经1和3 Gy131Ⅰ处理,131Ⅰ+PTEN过表达组K1和K1R细胞转染PTEN过表达载体后再经1和3 Gy131Ⅰ处理,131Ⅰ+PTEN过表达+miR-222-3p过表达组K1和K1R细胞同时转染PTEN过表达载体和miR-222-3p mimic后再经1和3 Gy131Ⅰ处理。克隆形成实验检测K1和K1R细胞克隆形成数,CCK-8实验检测K1和K1R细胞增殖活性,AnnexinⅤ-FITC/PI双染法流式细胞术检测K1和K1R细胞凋亡率,Western blotting检测K1和K1R细胞中PTEN蛋白表达水平,双荧光素酶报告基因实验验证miR-222-3p与PTEN的靶向关系。结果:与Nth-ori 3-1细胞比较,甲状腺癌细胞中miR-222-3p表达水平升高(P<0.01);且甲状腺癌K1R细胞中miR-222-3p表达水平高于甲状腺癌K1细胞(P<0.01)。与131Ⅰ处理组比较,131Ⅰ+miR-222-3p敲降组K1和K1R细胞克隆形成数减少(P<0.01),细胞增殖活性降低(P<0.01),细胞凋亡率升高(P<0.01)。与miR-NC-PTEN-WT组比较,miR-222-3p-PTEN-WT组HEK-293细胞中荧光素酶活性降低(P<0.01)。与敲降前比较,敲降miR-222-3p后K1和K1R细胞中PTEN蛋白表达水平升高(P<0.01)。与131Ⅰ+PTEN过表达组比较,131Ⅰ+PTEN+miR-222-3p过表达组K1和K1R细胞克隆形成数增加(P<0.01),细胞增殖活性升高(P<0.01),细胞凋亡率降低(P<0.01)。结论:敲降miR-222-3p靶向PTEN并上调其表达水平可以缓解甲状腺癌131Ⅰ的放疗抵抗。

脑胶质瘤病人^(131)Ⅰ-chTNT单抗放射免疫治疗的临床初步应用

目的:应用131Ⅰ-chTNT(131I-肿瘤细胞核人鼠嵌合单抗)通过局部化疗囊注入脑胶质瘤残瘤腔内,探讨其治疗复发性脑胶质瘤患者的临床疗效及安全性。方法:12例复发性脑胶质瘤病人,均经手术病理证实为WHO分级Ⅲ~Ⅳ。所有病人均行手术切除肿瘤后,于肿瘤残腔内放置Ommaya化疗囊,手术后2周囊内注入131Ⅰ-chTNT1110MBq,14d后重复注入一次。治疗期间对患者的一般情况、症状改善、毒副反应等进行观察和记录,并进行KPS评分;治疗前、治疗后3个月和6个月观察血常规、肝肾功能、甲状腺功能及CT和MR的肿瘤影像学变化。结果:131Ⅰ-chTNT治疗脑胶质瘤的总有效率为66.67%,CR:50%,PR:16.67%。MR和CT影像观察到有不同程度的放射性脑水肿。131Ⅰ-chTNT治疗前后血常规、肝功能、肾功能等观察指标均在正常值范围内波动,未观察到严重的肝功能损害。而甲状腺功能在治疗期间有波动。结论:131Ⅰ-chTNT通过局部化疗囊注射给药是安全、可靠的给药途径,具有疗效高、毒副反应轻的优点,是一种治疗恶性脑胶质瘤的新型放射免疫治疗制剂,值得进一步的临床使用。

分化型甲状腺癌肺转移患者-131Ⅰ治疗临床数据分析

目的通过随访分析分化型甲状腺癌（DTC）肺转移患者-131Ⅰ治疗的临床资料，探讨影响DTC肺转移患者-131Ⅰ疗效、发展及转归因素。方法从2007年1月至2011年12月给予-131Ⅰ治疗的5361例DTC患者中筛选单纯肺转移患者，随访〉5年，观察患者疾病的发生、发展及转归。分析影响患者-131Ⅰ疗效及生存的因素。结果符合筛选条件的患者共109例，男43例，女66例。肺部转移灶摄Ⅰ患者79例，不摄1的患者30例。疗效评价完全缓解（CR）患者19例（19／109，17．4％），部分有效（PR）患者23例（23／109，21．1％），稳定（SD）患者38例（38／109，34．9％）；PD患者29例，其中摄Ⅰ但疗效评价进展（PD）的患者15例（16／109，13．8％）。年龄和病灶大小与患者的-131Ⅰ治疗疗效相关（P〈0．01，OR值分别为0．056和0.036）；年龄、Tg水平、病灶大小、病灶摄碘情况是影响DTC肺转移患者生存的相关因素（P〈0．05，OR值分别为4．5、O．356、8．8和2．5）。结论-131Ⅰ是治疗DTC的有效手段；-131Ⅰ治疗抵抗涉及碘代谢功能障碍和固有放疗敏感性两个方面；年龄和病灶大小与-131Ⅰ疗效相关；患者年龄、Tg水平、肺部病灶大小、病灶摄碘与否和患者生存相关。

甲亢^(131)Ⅰ治疗后垂体-甲状腺轴平衡的恢复过程初探

目的 :探讨甲亢13 1Ⅰ治疗后垂体 -甲状腺轴平衡的恢复过程 ,以指导甲亢13 1Ⅰ治疗后的随访治疗。方法 :对我科 1997～ 2 0 0 0年行住院13 1Ⅰ治疗的甲亢病人 32 2例定期随访 ,并测定血清T3 、T4和TSH ,随访时间 3年。结果 :13 1Ⅰ治疗后 ,甲亢病人血清甲状腺激素和TSH浓度恢复正常的百分概率均逐渐升高 ,TSH恢复正常的时间明显落后于甲状腺激素恢复正常的时间 ;部分病例在 4～ 6月有一过性甲低 ,但绝大多数病例在 1年左右恢复正常。结论 :甲亢病人经13 1Ⅰ治疗后 ,甲亢症状基本在1年内得到控制 ,但其垂体

^(131)Ⅰ-碘化油预防原发性肝细胞癌术后复发的应用

肝癌根治性切除术是原发性肝癌惟一的根治性治疗方法,然而术后的复发率很高。目前,临床上预防原发性肝癌根治性切除术后复发的方法有很多,术后经肝动脉注入131Ⅰ-碘化油是预防复发方法中的一种。尽管世界上首次报道这种应用方法至今已10余年,且有一定的疗效,但术后具体开始时间、使用剂量及次数等尚无统一意见。同时,适应证、禁忌证及其他一些问题亦限制了131Ⅰ-碘化油预防肝癌术后复发的开展。

姜黄素对APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠海马神经元SR-BⅠ和ABCA1表达的影响

目的:观察姜黄素对β-淀粉样前体蛋白swe基因/早老蛋白1dE9基因(APPswe/PSEN1dE9)双转基因小鼠海马神经元B类Ⅰ型清道夫受体(scavenger receptor class B typeⅠ,SR-BⅠ)和三磷酸腺苷结合盒A1(ATP-binding cassette transporter,ABCA1)表达的影响,探讨姜黄素在阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)防治中的机制。方法:将10只6月龄的APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠随机分为对照组和姜黄素饲喂组,每组5只。姜黄素饲喂组每天饲喂500 ppm姜黄素,6个月后采用免疫组化法检测小鼠海马神经元SR-BⅠ和ABCA1表达的变化。结果:与对照组相比,姜黄素饲喂组小鼠海马神经元ABCA1表达明显增加(t=-10.805,P=0.000),但2组小鼠海马神经元中均未见SR-BⅠ表达。结论:姜黄素能提高APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠海马神经元ABCA1的表达,而SR-BⅠ在神经元中未见表达。

姜黄素对转化生长因子-β1诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖及Smads信号通路的影响

目的:观察姜黄素对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖及TGF-β1/Smads信号通路的影响。方法:采用TGF-β1诱导肾小球系膜细胞增殖和分泌胶原,实验分为空白对照组、单纯TGF-β1刺激组、姜黄素组3组。MTT法检测药物对肾小球系膜细胞增殖的抑制率,ELISA法检测肾小球系膜细胞Ⅰ型胶原的表达,Western blot法检测肾小球系膜细胞pSmad2的表达。结果:姜黄素能够显著抑制TGF-β1诱导的肾小球系膜细胞增殖(P<0.01)及Ⅰ型胶原分泌,并明显下调pSmad2蛋白表达。结论:姜黄素能部分阻断TGF-β/Smads信号传导通路的激活,抑制Ⅰ型胶原分泌及肾小球系膜细胞增殖。

β-淀粉样蛋白斑块显像剂^(131)I-IMPY的合成与生物分布

为了找到合适的123I标记的脑内β淀粉样蛋白(Aβ)斑块的显像剂,根据文献资料,合成了2-(4′-二甲基氨基苯基)-6-三正丁基锡咪唑并[1,2-α]吡啶(IMPY),并采用双氧水标记法进行了131I标记,得到标记物131I-IMPY,放射化学纯度大于95%。方法对合成原料和条件作了相应的改进,提高了合成的收率。正常小鼠体内分布试验表明,在注射131I-IMPY后2 min和60 min,小鼠脑摄取率分别为(7.374±4.797)%/g和(0.967±0.409)%/g。说明131I-IMPY在小鼠脑中初始摄取很高,清除很快1。31I-IMPY可能是一个很有发展潜力的Aβ斑块SPECT显像剂。

高效液相内标法同时测定保健食品中叶黄素和β-胡萝卜素的含量

目的建立一种用内标法同时测定叶黄素和13-胡萝卜素的方法。方法色谱柱为Thermo—C18柱（250mmx4．6mm，5μm），流动相A：甲醇，B：水，C：四氢呋喃，梯度洗脱，流速1．0mL·min-1，检测波长450nm，柱温：30~C，内标物苏丹红I。结果叶黄素和β-胡萝卜素在1．00～100μg·mL-1线性良好，回收率在分别为104．3％和99．5％，相对标准偏差为1．79和4．43，检出限分jq为0．03和0．04μg·g-1结论该方法简便准确、高效灵敏，能准确的同时测定叶黄素和B-胡萝卜素。

^(131)I-17-AAG治疗荷卵巢癌裸鼠的毒副作用的初步研究

目的:观察131I-17-丙烯胺基-17-脱甲基格尔德霉素(131I-17-AAG)治疗卵巢癌移植瘤模型的骨髓及肝脏毒副作用。方法:40只BALB/c裸鼠,制成荷卵巢癌模型后,按完全随机原则分为两组,一组(治疗组):20只,3mCi131I-17-AAG尾静脉注射。二组(对照组):20只,为未经治疗的荷瘤裸鼠。一、二组荷瘤裸鼠均于1周及二周眶静脉采血,进行血常规(白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板)及酶学(谷草转氨酶、谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、谷氨酰转移酶)检查。数据用SPSS14.0进行统计学分析。结果:白细胞、红细胞和血红蛋白2周时无显著差异(P>0.05),血小板2周有显著差异(P<0.05)。谷丙转氨酶、谷草转氨酶2周有显著差异(P<0.05),碱性磷酸酶、谷氨酰转移酶2周时无显著差异(P>0.05)。结论:131I-17-AAG对骨髓造血干细胞及肝功能各项指标有不同程度的影响,且随时间逐步得到恢复。

超高效液相色谱串联质谱法同时检测禽蛋中的角黄素、对位红和苏丹红Ⅰ～Ⅳ

目的建立超高效液相色谱串联质谱法(ultraperformanceliquidchromatography-tandemmass spectrometry, UPLC-MS/MS)同时测定禽蛋中角黄素、对位红和苏丹红残留量的方法。方法禽蛋样品用乙腈超声提取,加入氯化钠迚行盐析脱水,提取液加等体积水混合后经C_(18) 固相萃取小柱净化,采用Waters C_(18)色谱柱(50mm×2.1mm,1.7μm)以0.1%甲酸水和乙腈溶液为流动相梯洗脱分离,电喷雾电离(electrospray ionization,ESI)正离子多反应监测模式迚行定量分析。结果角黄素、对位红和苏丹红质量浓度在0.2～100.0μg/L范围内线性关系良好,相关系数均在0.999以上;在低、中、高3个加标水平的平均回收率为80.5%～106.2%,相对标准偏差(relative standard deviation, RSD)为0.68%～7.15%;角黄素、对位红和苏丹红的检出限为0.2μg/kg。结论该方法操作简单、准确,回收率较好,方法检出限较低,可应用于禽蛋中角黄素、对位红和苏丹红Ⅰ～Ⅳ的检测。

姜黄素抗肾纤维化的分子生物学机制实验研究

目的探讨姜黄素抗肾纤维化的分子生物学机制，为临床治疗提供可靠的实验依据。方法以人肾小管上皮细胞（HKC）为研究对象，采用不同浓度的姜黄素（0、0．780、1．563、3．125、6．250、12．500、25．000、50．000和100．000p．mol／L）刺激HKC72h，倒置相差显微镜下观察细胞形态变化，并应用MTT比色法检测姜黄素对HKC生长的影响；应用不同浓度TGF-β1（0、1、5、10ng／mL）单独或联合姜黄素（6．250、12．500、25．000、50．000μmol／L和100．000μmol／L）共同刺激HKC细胞72h，观察细胞形态变化，应用逆转录PCR（RT-PCR）检测TGF-β1、骨形态发生蛋白-7（BMP-7）和Ⅰ型胶原基因表达变化。结果HKC贴壁生长，呈铺路石样外观。姜黄素刺激对细胞形态无影响；TGF-β1刺激能明显促进细胞由上皮样形态向纤维样细胞形态转化，且发生形态转变的细胞数量和TGF-β1基因表达呈TGF-β1浓度依赖性增加（P〈0．05，P〈0．01）；MTT结果显示：姜黄素在3．125-25．000μmol／L浓度范围内，能显著促进HKC增殖（P〈0．05，P〈0．01）；姜黄素能对抗TGF-β1诱导的细胞形态转变，以12．500-50．000μmol／L的姜黄素作用最明显，同时，下调TGF-β1基因和蛋白的表达，相反上调BMP-7基因和蛋白表达，并伴随着Ⅰ型胶原基因和蛋白的表达下降（P〈0．05，P〈0．01）。结论姜黄素能促进HKC增殖并维持其表型，能对抗TGF-β1诱导的HKc向梭形细胞转化，抑制细胞上皮TGF-β1和Ⅰ型胶原的表达，而促进BMP-7表达。

姜黄素对单侧输尿管梗阻大鼠细胞外基质表达影响的实验研究

目的观察姜黄素对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织细胞外基质成分胶原蛋白-Ⅰ(Collagen-Ⅰ,Col-Ⅰ)、胶原蛋白-Ⅲ(Collagen-Ⅲ,Col-Ⅲ)和纤维连接蛋白(Fibronectin,FN)表达的影响,分析其抗纤维化的机制。方法采用大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型。将32只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,姜黄素1组和姜黄素2组。对模型组和治疗组大鼠行左侧输尿管结扎建立单侧输尿管梗阻的动物模型。姜黄素1治疗组于术后第2天给予姜黄素100mg.kg-1.d-1灌胃,姜黄素2治疗组于术后第10天给予姜黄素100 mg.kg-1.d-1灌胃。术后28 d处死大鼠,取梗阻侧肾组织行HE和Masson染色以观察各组大鼠肾组织病理改变。用免疫组化染色方法观察Col-Ⅰ,Col-Ⅲ和FN的表达分布。结果模型组肾小管间质损伤程度、胶原的表达均高于假手术组。姜黄素能明显改善大鼠肾脏病理改变,减少细胞外基质沉积。结论姜黄素可通过下调Col-Ⅰ,Col-Ⅲ和FN在肾组织的表达,从而减少细胞外基质的过度聚集,抑制或减缓肾小管间质纤维化的发生发展。

眼挫伤的血-房水屏障改变

目的探讨外伤性葡萄膜炎与血-房水屏障破坏的关系。方法新西兰白兔18只，以自由落体打击力制备双眼重型闭合性眼球挫伤模型；以131I为示踪剂进行房水免疫学测定。并与正常兔眼作对照。结果房水中131I的含量在伤后1天最高，3天时减半，1周时减至1／11，4周时为0.正常对照组均为0。结论兔眼钝伤后可致较严重的血-房水屏障破坏。伤后1周为快速修复期,4周时完全修复。

甲状腺乳头状癌肺转移患者^(131)Ⅰ治疗效果及与乏氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子表达的关系

目的探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)肺转移患者应用放射性^(131)Ⅰ清灶治疗的效果及与PTC组织乏氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)阳性表达的关系。方法 PTC肺转移患者48例,行甲状腺全切术联合颈部中央区和/或单/双侧淋巴结清扫术,术后3~4周口服^(131)Ⅰ 3.70~5.55GBq(100~150mCi)+左旋甲状腺素钠片行清甲治疗,3~6个月后口服^(131)Ⅰ7.40GBq(200mCi)+左旋甲状腺素片行清灶治疗,6个月后评价疗效;取手术切除PTC组织及癌旁组织行免疫组织化学染色检测HIF-1α、VEGF阳性表达情况;分析^(131)Ⅰ清灶治疗效果与HIF-1α、VEGF阳性表达的关系。结果 ^(131)Ⅰ清灶治疗6个月时,治疗敏感30例(62.50%),治疗抵抗18例(37.50%);治疗敏感与治疗抵抗者在性别、肿瘤直径、病灶数量上差异均无统计学意义(P>0.05),年龄≤45岁、肺转移灶呈弥漫性摄碘者治疗敏感比例(76.00%、85.71%)高于年龄>45岁、肺转移灶呈局灶性摄碘者(47.83%、52.94%)(P<0.05);PTC组织中HIF-1α、VEGF阳性表达率(64.58%、62.50%)高于癌旁甲状腺组织(16.67%、13.33%),且HIF-1α、VEGF阴性表达者^(131)Ⅰ清灶治疗敏感比例(82.35%、94.44%)高于阳性表达者(51.61%、43.33%)(P<0.05)。结论 PTC肺转移患者^(131)Ⅰ清灶治疗效果与年龄、肺转移灶摄碘特征及HIF-1α、VEGF阳性表达有关。