PGE_(2)通过EP4/PKA信号通路调控滑膜细胞OAT1的表达及CP-25的作用

目的明确前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE_(2))对滑膜细胞有机阴离子转运体1(organic anion transporter 1,OAT1)膜表达的调控机制及芍药苷-6'-O-苯磺酸酯(CP-25)的作用。方法免疫荧光法检测不同浓度CP-25对PGE_(2)处理后滑膜细胞OAT1和前列腺素E受体4(prostaglandin E receptor 4,EP4)表达的影响;使用EP4激动剂(TCS2510)与拮抗剂(GW627368X),探究EP4在OAT1调节中的作用;使用CP-25和蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)抑制剂H-89,探究CP-25和PKA对滑膜细胞OAT1表达的影响。结果PGE_(2)在0~10 min内明显下调EP4与OAT1的膜表达,20~60 min后明显上调(P<0.05);CP-25明显上调PGE_(2)处理后细胞膜OAT1和EP4的表达(P<0.05);EP4激动剂TCS2510明显上调细胞膜OAT1的表达(P<0.01);CP-25上调PGE_(2)处理的细胞中OAT1的表达,GW627368X和H-89均能下调PGE_(2)和CP-25处理的滑膜细胞中OAT1的表达(P<0.01)。结论PGE_(2)介导的EP4/PKA信号通路可以调控OAT1在滑膜细胞膜上的表达,CP-25可以通过活化EP4/PKA信号通路明显上调滑膜细胞中OAT1的膜表达。

急性药物性肝损伤患者血清核因子E2相关因子2、血红素加氧酶-1、脂肪酸结合蛋白4、缺氧诱导因子1α表达意义及其与肝功能指标相关性研究

目的:探讨急性药物性肝损伤患者血清核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、脂肪酸结合蛋白4(FABP4)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达意义及其与肝功能指标的相关性。方法:回顾性选取62例急性药物性肝损伤患者的临床资料作为病例组,另选80例健康体检者的临床资料作为对照组。比较两组血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α及肝功能指标水平,用Pearson相关性分析急性药物性肝损伤患者血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α水平与肝功能的相关性,并绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α水平联合检测对急性药物性肝损伤的诊断价值。结果:病例组血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α及谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、谷草转氨酶(AST)、谷氨酰转移酶(GGT)、总胆红素(TBIL)水平高于对照组(均P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,急性药物性肝损伤患者血清Nrf2水平与血清ALT、AST、TBIL水平呈负相关(r=-0.763、-0.741、-0.685,均P<0.05);血清HO-1水平与血清ALT、AST、TBIL水平呈负相关(r=-0.489、-0.524、-0.568,均P<0.05);血清FABP4水平与血清AST、TBIL水平呈正相关(r=0.509、0.512,均P<0.05);血清HIF-1α水平与血清ALT、AST、TBIL水平呈正相关(r=0.527、0.486、0.542,均P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α水平联合检测诊断急性药物性肝损伤的曲线下面积(AUC)值为0.919,高于血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α水平单独检测(0.787、0.822、0.824、0.772,均P<0.05)。结论:血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α在急性药物性肝损伤患者中呈高表达,其表达水平与患者肝功能损伤有关,且四者联合检测对急性药物性肝损伤的诊断价值更高。

两步法合成1,4-二(2-苯并咪唑)苯及其与不同溶剂分子的晶体结构

以邻苯二胺和对苯二甲醛为原料,在乙醇溶剂中于4℃的冰箱内反应制备新化合物1,4-二[苯胺-2-(E)-亚甲氨基]苯中间体,该中间体在体积比为5∶1的乙酸乙酯与甲醇的混合溶剂中于室温下与空气反应得到产物1,4-二[2-苯并咪唑基]苯,产物分别在N,N-二甲基甲酰胺及体积比为1∶1的三氟乙酸水溶液中析出晶体,其结构通过单晶X-射线衍射进行表征。实验结果表明,两步法合成实验操作简便、成本低廉,目标产物可与不同的溶剂及水分子形成三元结合物,且均为三斜晶系,P-1空间群。

Formation of (2E)-4-Hydroxy-2-nonenal and (2E)-4-Hydroxy-2-hexenal by Plant Enzymes: A Review Suggests a Role in the Physiology of Plants

It is demonstrated that (3Z)-nonenal (NON) and (3Z)-hexenal (HEX) are oxidized in a cascade by lipoxygenase (LOX) and hydroperoxide peroxygenase (HP peroxygenase) into (2E)-4-hydroxy-2- nonenal (HNE) and (2E)-4-hydroxy-2-hexenal (HHE), respectively. In turn, HNE inactivates LOX terminating the cascade. The hydroxy-alkenals produced serve to inhibit plant pathogens, which initiated the cascade. In addition to LOX, other unknown oxygenases may be involved in the cascade.

穿山龙总皂苷对膜性肾病大鼠肾组织M型PLA2R和IgG4表达的影响及其机制

目的 分析穿山龙总皂苷对膜性肾病大鼠肾组织M型磷脂酶A2受体(Phospholipase A2 receptor, PLA2R)和免疫球蛋白G亚型4(Immunoglobulin G4,IgG4)表达影响及可能机制。方法 将40只SPF级雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、贝那普利组(10 mg/kg)、低和高剂量穿山龙总皂苷组(80 mg/kg、160 mg/kg),每组各8只。除对照组,其余4组采用Border法制备膜性肾病模型,造模成功后,贝那普利组灌胃给予贝那普利10 mg/(kg·d),低和高剂量穿山龙总皂苷组分别灌胃给予穿山龙总皂苷80 mg/(kg·d)、160 mg/(kg·d),对照组、模型组灌胃给予10 ml/(kg·d)生理盐水。连续给药4周后,检测24 h尿蛋白、白蛋白、血肌酐、血尿素氮、尿酸水平,HE染色观察肾脏病理改变,蛋白免疫印迹法检测肾脏中M型PLA2R、IgG4、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(Phosphorylated phosphoinositide 3-kinase, p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(Phosphorylated protein kinase B,p-AKT)、核因子E2相关因子2(Nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)、血红素加氧酶(Heme oxygenase-1,HO-1)表达水平。结果 与模型组比较,贝那普利组、高剂量穿山龙总皂苷组白蛋白水平明显升高,血肌酐、血尿素氮、尿酸水平明显降低,差异均有统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,贝那普利组、低剂量和高剂量穿山龙总皂苷组肾脏病理改变明显改善,24 h尿蛋白水平及肾脏中M型PLA2R、IgG4、p-PI3K、p-AKT表达水平明显降低,肾脏中Nrf2、HO-1表达水平明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 穿山龙总皂苷对膜性肾病大鼠的肾脏具有保护作用,其机制可能与降低PLA2R、IgG4表达,抑制PI3K/AKT通路,激活Nrf2/HO-1通路相关。

PGE2抑制TDO2表达和活性调控巨噬细胞功能变化的机制

目的探究色氨酸-2,3-双加氧酶(TDO2)在胶原诱导型关节炎(CIA)小鼠中的表达以及前列腺素E2(PGE2)抑制TDO2表达和活性调控巨噬细胞功能的机制。方法Ⅱ型胶原诱导DBA/1J小鼠制备CIA模型。X射线检测CIA小鼠踝关节损伤变化;免疫组化检测小鼠踝关节、脾脏中TDO2表达;qPCR和免疫荧光检测小鼠腹腔巨噬细胞中TDO2表达变化。通过在RAW264.7细胞中分别小干扰TDO2、给予TDO2抑制剂680C91、给予不同浓度PGE2(0.1、1、10μmol/L)刺激和给予前列腺素受体4(EP4)激动剂CAY10598后,qPCR和Western blot检测TDO2表达;流式细胞术检测巨噬细胞吞噬和极化功能;比色法检测TDO2活性。结果与正常组小鼠比较,CIA小鼠踝关节软组织肿胀变大,关节滑膜、脾脏及腹腔巨噬细胞中TDO2表达增加。在RAW264.7细胞中分别小干扰TDO2、给予TDO2抑制剂680C91、给予PGE2刺激、给予EP4受体激动剂CAY10598后TDO2表达明显被抑制,巨噬细胞吞噬功能下降,M1/M2比值下降(P<0.05);比色法结果显示RAW264.7细胞中分别给予PGE2刺激以及EP4激动剂CAY10598后TDO2的活性被抑制(P<0.05)。结论巨噬细胞TDO2表达升高可能促进了CIA小鼠关节滑膜损伤,PGE2通过激活EP4受体抑制TDO2表达和活性从而调节巨噬细胞功能。

E2F2和SDC4在急性胰腺炎患者中的表达及临床意义

目的探讨E2F转录因子2(E2F2)和多配体蛋白聚糖-4(SDC4)对急性胰腺炎患者病情评估及预后诊断的价值。方法将2018年4月至2020年4月西安市中心医院收治的45例轻症急性胰腺炎患者作为轻症组,56例重症急性胰腺炎患者为重症组;将同期20名来我院进行健康体检者作为对照组。比较各组研究对象的一般资料及临床特征;比较三组研究对象的E2F2、SDC4 m RNA和蛋白表达水平;分析E2F2、SDC4表达水平与急性胰腺炎患者JPN评分的相关性;分析血清SDC4、E2F2水平和JPN评分对急性胰腺炎的诊断价值。结果轻症组和重症组的腹痛、恶心呕吐发生率无明显差异(P>0.05);重症组的腹胀、全身性并发症发生率高于轻症组(P<0.05);轻症组和重症组的血清淀粉酶、脂肪酶、降钙素原、乳酸脱氢酶(LDH)以及C反应蛋白(CRP)水平高于对照组(P<0.01);重症组的血清淀粉酶、脂肪酶、降钙素原、LDH、CRP水平及JPN评分高于轻症组(P<0.01)。轻症组和重症组的E2F2、SDC4 m RNA和蛋白表达水平显著高于对照组,且重症组高于轻症组(P<0.05)。E2F2和SDC4表达水平与急性胰腺炎患者JPN评分呈正相关(P<0.001);E2F2表达水平与SDC4表达水平呈正相关(P<0.001)。血清E2F2和SDC4水平对急性胰腺炎的诊断价值较高,与JPN评分相似。结论E2F2和SDC4可作为评估急性胰腺炎患者发病及预后的潜在指标。

松油烯-4-醇调节SIRT1/Nrf2信号抑制慢性肾病血管氧化应激损伤

目的探讨松油烯-4-醇(T4O)对慢性肾脏疾病(CKD)模型小鼠血管氧化应激损伤的作用及信号机制。方法采用高磷饲料联合腺嘌呤制备CKD小鼠模型,正常对照组给予等体积生理盐水灌胃。通过尾静脉注射慢病毒SIRT1 RNAi,建立SIRT1体内低表达的CKD小鼠模型用于信号机制研究。给药组以T4O低、高剂量(10 mg/kg和20 mg/kg)连续灌胃给药6周。收集小鼠血清检测尿素氮(BUN)和肌酐(CRE)水平,采用HE染色观察小鼠胸主动脉和肾脏组织形态,试剂盒检测血管组织丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量,免疫荧光检测血管组织ROS水平;Western blot法检测Nrf2、HO-1、NQO-1及SIRT1的表达。结果T4O可降低CKD小鼠血清BUN和CRE水平,改善肾脏病理损伤和主动脉血管形态结构,降低血管组织MDA含量,增加SOD含量,降低ROS水平;T4O干预能够促进Nrf2核易位及上调HO-1、NQO-1以及SIRT1的蛋白表达。分子机制研究表明,LV-SIRT1 RNAi+T4O+CKD组能够抑制T4O对CKD诱导的MDA和SOD含量的影响,部分抵消T4O上调Nrf2核易位以及SIRT1、HO-1、NQO-1的蛋白表达水平的作用。结论T4O对CKD小鼠胸主动脉氧化应激损伤具有保护作用,其分子信号机制可能与调节SIRT1/Nrf2级联信号有关。

慢性自发性荨麻疹血清脱氢表雄酮硫酸酯与总IgE,IL-2,IL-4,IFN-γ的相关性

目的通过研究慢性自发性荨麻疹(CSU)患者与健康对照组血清脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)及总IgE,IL-2,IL-4,IFN-γ水平的差异,探讨CSU患者外周血DHEA-S是否与总IgE、Th1/Th2细胞失衡相关。方法 162例CSU患者为实验组,68例健康人为对照组。应用放射免疫分析法测定血清中DHEA-S水平;采用ELISA法检测外周血总IgE,IL-2,IL-4,IFN-γ水平。采用t检验和直线相关性分析分析各组检测值。结果 CSU组外周血DHEA-S,IL-2,IFN-γ水平明显低于健康对照组,血清总IgE,IL-4水平明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。CSU病情分级与DHEA-S水平呈负相关,与总IgE水平呈正相关(r=-0.664,-0.419,P均<0.01),与IL-2,IL-4,IFN-γ水平无明显相关性。CSU组DHEA-S与IL-2,IFN-γ呈显著正相关,与IgE,IL-4呈显著负相关(r=0.409,0.397,-0.319,-0.367,P均<0.001)。结论 CSU患者体内可能存在内分泌免疫系统失衡,外周血DHEA-S水平下降可能与总IgE水平升高及Th1/Th2细胞失衡相关。

4-[(E)-2-(3,4-二甲氧基苯基)乙烯基]苯氧基乙酸乙酯的合成及其NMR研究

以对硝基甲苯、3,4-二甲氧基苯甲醛为起始原料,经过缩合,还原,重氮化水解,亲核取代反应,最终合成了新的化合物4-[(E)-2-(3,4-二甲氧基苯基)乙烯基]苯氧基乙酸乙酯,用1H和13C NMR及多种二维核磁共振谱确定了该化合物的结构,完成了1H和13C NMR的归属,给出了分子中各氢,碳原子的准确化学位移.

2-(E)-(4-甲磺酰氨基)亚苄基环戊酮Mannich碱类化合物的合成及抗炎活性

目的设计合成 2 (E) (4 甲磺酰氨基 )亚苄基环戊酮Mannich碱类化合物 ,并对其抗炎活性进行初步评价。方法以环戊酮、4 硝基苯甲醛及胺类化合物为原料 ,经多步反应合成目标化合物 ,并以二甲苯致小鼠耳肿胀模型测试目标化合物的抗炎活性。结果与结论共合成 11个新化合物 ,经IR、1H NMR和MS确证其结构。初步药理实验结果显示 ,化合物 6f、6i具有一定的抗炎活性。

慢性阻塞性肺疾病患者IL-8、LTB4、PGE2水平及与肺功能受损严重程度的相关性

目的探究白细胞介素-8(IL-8)、白三烯B4(LTB4)、前列腺素E2(PGE2)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者中的表达水平及与肺功能受损严重程度的相关性。方法前瞻性选择2018年5月—2019年5月廊坊市人民医院收治的98例急性期COPD患者作为病例组,另取同期该院健康体检者50例作为对照组。比较两组血清IL-8、LTB4、PGE2水平,比较不同肺功能受损严重程度患者血清IL-8、LTB4、PGE2水平,分析其与肺功能受损严重程度的相关性,采用多因素Logistic回归分析COPD的影响因素。结果病例组血清IL-8、LTB4、PGE2水平高于对照组(P<0.05)。不同肺功能受损严重程度患者血清IL-8、LTB4、PGE2水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),Ⅳ级>Ⅲ级>Ⅱ级>Ⅰ级。COPD患者血清IL-8、LTB4、PGE2水平与肺功能受损严重程度均呈正相关(r_s=0.712、0.561、和0.476,P<0.05)。血清IL-8[OlR=2.268(95% CI:1.272,3.948)]、LTB4[OlR=1.847(95% CI:1.161,2.746)]、PGE2[OlR=2.108(95% CI:1.202,3.326)]是COPD的危险因素(P<0.05)。结论 IL-8、LTB4、PGE2在COPD患者血清中高表达,与COPD发生及肺功能受损严重程度相关,有望成为预测COPD发生、发展的指标之一。

(E)-3-(4-羟苯基)-1-(哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮衍生物核磁共振特征与构象分析(英文)

设计并合成了一系列(E)-3-(4-羟苯基)-1-(哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮衍生物.通过一维和二维核磁共振实验完成了1H和13C信号的指认.通过ROESY、变温实验和分子模拟技术对这类化合物的构象进行了分析.

[Cu(L-Ile)(Phen)(H_2O)(ClO_4)]的合成、结构及稳定性研究

合成了三元混配配合物[Cu(L-Ile)(Phen)(H_2O)(ClO_4)](L-Ile=L=异亮氨酸,phen=1,10-邻菲咯啉),通过红外光谱、紫外-可见光谱、摩尔电导率、X射线单晶结构分析,对配合物进行了表征。该晶体属单斜晶系,P2_1空间群,晶胞参数:a=1.1704(5)nm,b=0.8090(5)nm,c=2.1822(5)nm,β=98.061(5)°,Z=2,D_x=1.60Mg·m^(-3),R_1=0.0462,wR_2=0.1225。每个配合物分子中Cu(Ⅱ)离子与一个L-Ile(N,O)配体、一个Phen(N,N)配体、一个H_2O(O)配体及一个Cl_O^-(O)形成六配位的畸变八面体构型。本文还用电位滴定法测定了配合物的稳定常数,结果表明,配合物具有高的稳定性。

(E)-2-(2((6-环丙基-2-(苯胺基)嘧啶-4-基氧基)甲基)苯基)-3-甲氧基丙烯酸甲酯的合成与杀菌活性

以苯胍碳酸盐和3-环丙基-3-氧代丙酸叔丁酯为原料,经环合反应制得2-苯胺基-4-羟基-6-环丙基嘧啶,再与(E)-2-(2-(氯甲基)苯基)-3-甲氧基丙烯酸甲酯反应制得标题化合物,其结构经1HNMR进行确证。生测结果表明:该化合物在25mg/L下对水稻稻瘟病、番茄晚疫病、蔬菜灰霉病、玉米锈病、黄瓜霜霉病和黄瓜炭疽病等都具有100%的防治效果。

(E)-5-(4-氟苯乙烯)-2-异丙苯-1,3-二醇的合成

以叔丁醇钾为催化剂,由3,5-二甲氧基-4-异丙基苯甲基膦酸二乙酯和对氟苯甲醛经Witting-Hornor缩合,脱甲基反应首次合成了(E)-5-(4-氟苯乙烯)-2-异丙苯-1,3-二醇,采用傅里叶红外光谱(FT-IR)和核磁共振(1HNMR)对目标产物及其中间体进行了表征,结果表明:此方法合成反应时间短,操作简单,产物的收率高.

重组干扰素α-2β雾化吸入联合口服维生素D对毛细支气管炎患儿血清PDGF、ECP和尿LTE4水平的影响

目的:探讨重组干扰素α-2β雾化吸入联合口服维生素D对毛细支气管炎患儿血清血小板衍生因子(PDGF)、人嗜酸粒细胞阳离子蛋白(ECP)、白介素-4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)和尿白三烯E4(LTE4)水平的影响,旨在为临床治疗提供实验依据。方法:选择2017年4月至2018年3月淮南市第一人民医院儿科收治的60例毛细支气管炎患儿,随机分为观察组和对照组,各30例。对照组给予毛细支气管炎常规治疗并口服维生素D,观察组在对照组治疗基础上加用重组人干扰素α-2β注射液雾化吸入。比较两组的临床疗效,患儿治疗前及治疗5、12 d的血清PDGF、ECP、IL-4、IFN-γ和尿LTE4水平。结果:观察组总有效率为93.33%,对照组总有效率为73.33%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组血清PDGF、ECP、IL-4和IFN-γ和尿LTE4水平均差异均无统计学意义(均P>0.05);治疗5 d两组血清PDGF、ECP、IL-4和尿LTE4水平均有所下降,IFN-γ水平均有所上升,但两组差异无统计学意义(P>0.05);治疗12 d两组血清PDGF、ECP、IL-4和尿LTE4水平均有所下降,观察组下降更明显,IFN-γ水平均有所上升且比对照组上升更明显,差异有统计学意义(均P<0.05)。观察组患儿住院时间、咳嗽痰鸣消失时间、肺部干湿性啰音消失时间及体温恢复正常时间均明显短于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:重组干扰素α-2β雾化吸入联合口服维生素D治疗患儿毛细支气管炎效果良好,能有效改善患儿机体炎症状态、临床症状及体征,正向调节患儿机体免疫功能。

(E)-2-[2-(6-氯嘧啶-4-基氧基)苯基]-3-甲氧基丙烯酸甲酯的合成工艺改进

以3-(α-甲氧基)亚甲基苯并呋喃-2-(3H)-酮为原料,经3步反应合成了杀菌剂嘧菌酯的重要中间体——(E)-2-[2-(6-氯嘧啶-4-基氧基)苯基]-3-甲氧基丙烯酸甲酯(4),总收率61%。4的结构经NMR表征。

声门上型喉鳞状细胞癌组织VEGF、MMP-2、eIF4E的表达及临床意义

目的研究声门上型喉鳞癌及癌旁组织中VEGF、MMP-2、eIF4E的表达及与临床病理参数的关系。方法采用免疫组化SP法检测28例声门上喉鳞癌组织及癌旁组织中VEGF、MMP-2、eIF4E的表达。结果在声门上型喉癌组织中VEGF、MMP-2、eIF4E阳性表达率分别为78.57%,75%,89.28%;在癌旁组织中阳性表达率分别为21.42%,17.85%,42.85%。三者在肿瘤组织及癌旁组织中的表达差异有统计学意义(P<0.05),其表达与肿瘤淋巴结转移密切相关(P<0.05),三者间存在正相关。结论VEGF、MMP-2、eIF4E是声门上喉鳞癌组织表达较敏感的标志物,可作为反应喉癌生物学行为的客观参考指标,有助于判断患者预后,及有利于肿瘤治疗方案的制定。

反相高效液相色谱法测定(E)-3-(4-((3,5,6-三甲基吡嗪-2-基)甲氧基)-3-甲氧基苯基)丙烯酸在SD大鼠血浆中的浓度

目的建立测定SD大鼠血浆中(E)-3-(4-((3,5,6-三甲基吡嗪-2-基)甲氧基)-3-甲氧基苯基)丙烯酸浓度的反相高效液相色谱(LC-UV)方法,并用于其在SD大鼠体内的药动学研究。方法采用Diamonsil-C18(2)柱(100 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈∶水(含5 mM的醋酸铵,用醋酸调节pH至4.0)=30∶70为流动相,测定70只SD大鼠单剂量尾静脉给药15mg/kg后不同时刻血浆中药物的浓度,并由此计算其在SD大鼠体内的药动学参数。结果 SD大鼠血浆中(E)-3-(4-((3,5,6-三甲基吡嗪-2-基)甲氧基)-3-甲氧基苯基)丙烯酸测定的线性范围为0.020 16～10.08μg/ml,提取回收率大于95%,批内批间精密度均小于15%。大鼠尾静脉注射给药后,血浆中峰浓度(cmax)为35.60μg/ml,半衰期(t1/2)为3.36 h,0～12 h药时曲线下面积(AUC0～12)为17.12μg.h/ml,0～∞药时曲线下面积(AUC0～∞)为17.72μg h/ml。结论本法方便快捷,可用于(E)-3-(4-((3,5,6-三甲基吡嗪-2-基)甲氧基)-3-甲氧基苯基)丙烯酸的临床前药动学研究。