血清5-HT、NGF水平与原发性早泄患者阴茎背神经选择性切除术后复发的关系

目的探究血清5-羟色胺(5-HT)、神经生长因子(NGF)水平变化与原发性早泄患者阴茎背神经选择性切除术后复发的关系。方法选择原发性早泄患者200例,均行阴茎背神经选择性切除术治疗,术后6个月根据患者是否复发分为复发组(n=23)与未复发组(n=177),比较两组患者的临床资料、血清5-HT、NGF水平,分析5-HT、NGF与中国早泄问卷调查表(CIPE-5)、国际勃起功能(IIEF-5)评分、射精潜伏期(IELT)的相关性及术后复发影响因素,并构建列线图模型评价含血清指标模型预测术后复发与实际观察的一致性,用决策曲线评价该模型的临床获益。结果复发组术后3个月血清5-HT水平、IELT、CIPE-5评分均低于未复发组,NGF水平高于未复发组(P均<0.05);原发性早泄患者术前、术后1个月、术后3个月,血清5-HT水平与CIPE-5评分、IELT呈正相关(P均<0.05),与IIEF-5评分无相关性(P均>0.05);血清NGF水平与CIPE-5评分、IELT呈负相关(P均<0.05),与IIEF-5评分无相关性(P均>0.05);术后3个月IELT、CIPE-5评分及血清5-HT、NGF水平均为原发性早泄患者术后复发的独立影响因素(P均<0.05);列线图模型预测原发性早泄患者术后复发相关因素的一致性指数为0.775(95%CI=0.674~0.802);决策曲线显示,当含血清指标的模型预测原发性早泄患者术后复发的值为0.20~0.85时,可提供附加临床获益。结论原发性早泄患者阴茎背神经选择性切除术后3个月血清5-HT水平下降、NGF水平升高,二者水平变化对预测患者术后复发有一定参考价值。

基于5-HT及其受体的中医药干预消化系统疾病研究进展

5羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)是一种重要的单胺类神经递质,具有广泛的生物学效应。血清和胃肠道中的5-HT含量可占人体5-HT总量的95%以上,血液循环中的5-HT也主要来源于肠道。5-HT在消化系统疾病发生发展中的作用历来受到关注。此文从5-HT特征、5-HT受体以及基于5-HT及其受体探讨中医药对消化系统疾病的干预作用进行了概述,以期进一步为消化系统疾病的防治、临床与基础研究提供新思路。

四神丸对腹泻型肠易激综合征大鼠5-HT信号通路表达的影响

目的通过研究四神丸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠5-羟色胺(5-HT)信号通路表达的影响,进一步揭示其治疗IBS-D的内脏敏感机制。方法SD大鼠32只,随机分为正常组、模型组、四神丸组和得舒特组,采用番泻叶灌胃联合避水应激法制备IBS-D大鼠模型,给药14d后进行Bristol粪便性状量表评分,依据腹壁撤退反射评定内脏疼痛阈值,ELISA法检测血清5-HT、SERT含量,免疫组化法检测结肠组织5-HT的阳性表达,Westernblotting法检测结肠组织5-HT4R的蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠Bristol粪便性状量表评分升高,内脏疼痛阈值降低,血清中5-HT含量增加、SERT含量减少,结肠组织中5-HT的阳性表达升高、5-HT4R的蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,四神丸组大鼠Bristol粪便性状量表评分降低、内脏疼痛阈值升高,血清5-HT含量减少,SERT含量增加,结肠组织5-HT的阳性表达降低、5-HT4R的蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01),且对5-HT、5-HT4R表达的影响四神丸组优于得舒特组(P<0.05)。结论四神丸治疗IBS-D的内脏敏感机制可能与调节5-HT信号通路的表达有关。

RVM致炎细胞因子上调导致5-HT释放参与调控慢性术后疼痛

【目的】探讨延髓头端腹内侧部(RVM)内致炎细胞因子肿瘤坏死因子α(TNFα)和白介素-1β(IL-1β)释放增多导致5-羟色胺(5-HT)向脊髓释放增多在慢性术后疼痛(CPSP)模型中的作用。【方法】按照随机方式将SD大鼠进行如下分组:对照组、皮肤/肌肉切开和牵拉(SMIR)(1d,7d)组、SMIR+RVM内注射TNFα或IL-1β中和性抗体组、SMIR+RVM内注射TNFα或IL-1β组、SMIR+RVM内注射溶剂组,用up-down方法测量大鼠50%机械刺激撤足阈值,免疫组化检测RVM内TNFα或IL-1β表达情况,酶联免疫吸附测定法(ELISA)方法观察RVM及脊髓背角内5-HT含量的变化。【结果】SMIR可引起大鼠机械痛敏,表现为50%机械刺激撤足阈值下降,持续至少3周。SMIR后,RVM内神经元和星形胶质细胞中的TNFα和IL-1β表达上调。TNFα或IL-1β中和抗体(每天一次行SMIR术前30 min给予,共4次))微量注射入RVM可阻断SMIR引起的50%机械刺激撤足阈值下降,并可降低RVM及脊髓背角5-HT的含量。正常动物RVM内注射TNFα和IL-1β也可导致50%机械刺激撤足阈值下降,且引起RVM及脊髓内5-HT含量增加。【结论】RVM中致炎细胞因子增多可能通过引起5-HT释放增多参与调控SMIR后慢性术后疼痛的发生发展。

清化饮对脾胃湿热证抑郁大鼠血清5-HT与海马组织的影响

目的探究清化饮对脾胃湿热证抑郁大鼠血清5-羟色胺(5-HT)与海马组织的影响。方法取30只SPF级SD雄性大鼠,随机选择其中5只作为空白组,其余25只采用高脂高糖饮食和慢性不可预知温和应激方法建立脾胃湿热证抑郁模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组6只、清化饮组6只、舍曲林组6只、清化饮+舍曲林组7只。清化饮组给予清化饮27.5 g/kg灌胃,舍曲林组给予舍曲林片5.21 mg/kg灌胃,清化饮+舍曲林组给予清化饮27.5 g/kg和舍曲林片5.21 mg/kg灌胃,模型组给予等体积的生理盐水灌胃,均1次/d,连续灌胃28 d。末次灌胃结束后,应用强迫游泳实验评价大鼠的抑郁状态,记录大鼠灌胃前后的体重,ELISA法检测血清5-HT水平,HE染色观察海马组织病理形态。结果模型组大鼠的强迫游泳静止时间明显长于空白组(P<0.05),清化饮组、舍曲林组、清化饮+舍曲林组均明显短于模型组(P均<0.05);各组间大鼠体重比较差异无统计学意义(P>0.05),但清化饮组大鼠体重变化量明显低于舍曲林组(P<0.05);模型组大鼠血清5-HT水平与空白组比较差异无统计学意义(P>0.05),舍曲林组和清化饮+舍曲林组均明显高于模型组(P均<0.05),清化饮+舍曲林组明显高于清化饮组(P<0.05)。模型组大鼠海马体积减小,CA2~CA3区神经元细胞减少,沟回带厚度变薄;各药物组大鼠海马组织CA1~CA3区神经元细胞紧密排列,细胞形态未见异常,沟回带厚度较模型组厚;其中清化饮组、清化饮+舍曲林组海马组织CA1~CA3区神经元细胞紧密均匀排列优于舍曲林组。结论清化饮可改善脾胃湿热证大鼠抑郁样行为,其机制可能与提高血清5-HT水平,恢复海马组织病理形态有关。

养荣润肠舒合剂对慢性传输型便秘SD大鼠结肠5-HT、VIP的影响

目的探讨慢性传输型便秘大鼠结肠黏膜5-羟色(5-hydroxytryptophan,5-HT)、血管活性肠多肽(vasoactive intestinal polypeptide,VIP)的含量,以明确中药制剂养荣润肠舒合剂对大鼠结肠5-HT、VIP表达的调节作用。方法将60只健康的SD大鼠随机分为空白组10只,造模组50只(模型组10只、莫沙必利组10只、养荣润肠舒合剂高、中、低剂量组各10只)。应用复方地芬诺酯灌胃(2 mL/200 g体质量)以复制慢性传输型便秘大鼠模型(每天1次,连续10 d)。期间记录大鼠首次排便时间,并收集粪便、测量粪便剂量、含水量以判断造模是否成功。复制模型成功后进行药物治疗,每天1次,连续10 d。然后采用间接酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)观测大鼠结肠5-HT、VIP的光密度(optical density,OD)值。结果①与空白组比较,模型组SD大鼠的首次排便时间延后,且新鲜粪便的剂量、含水量减少,差异有显著统计学意义(P<0.01)。②与模型组比较,莫沙必利组和养荣润肠合剂低、中、高剂量组治疗后大鼠的首次排便时间均提前,且粪便的含水率、重量除使用养荣润肠低组外均有所增长(P<0.01)。③与莫沙必利组比较,养荣润肠舒合剂中组剂量组大鼠的一般状况最好,首次排便时间最接近莫沙必利组且较短于莫沙必利组,差异无统计学意义(P>0.05),新鲜粪便剂量最接近莫沙必利组且较重于莫沙必利组,差异无统计学意义(P>0.05),含水量明显优于莫沙必利组,差异有统计学意义(P<0.05);养荣润肠舒合剂高剂量组大鼠排便状况与莫沙必利组相差不大,差异无统计学意义(P>0.05);莫沙必利组大鼠排便状况明显优于养荣润肠舒合剂低剂量组,差异有显著统计学意义(P<0.01)。④养荣润肠舒合剂中剂量组的大鼠一般状况更佳,而低剂量组的大鼠状况较差,新鲜粪便的剂量、含水量较小。⑤与空白组比较,模型组大鼠近端结肠组织5-HT、VIP的含量显著降低,OD值缩小(P<0.01)。⑥治疗后与模型组比较,莫沙必利组及养荣润肠舒合剂低、中、高剂量SD大鼠结肠5-HT、VIP含量显著升高,OD值增加,差异有明显统计学意义(P<0.01)。⑦治疗后与莫沙必利组比较,养荣润肠舒合剂中剂量大鼠结肠的5-HT、VIP含量及OD值增加,最接近莫沙必利组且较高于莫沙必利组,差异无统计学意义(P>0.05);养荣润肠舒合剂高剂量组大鼠状况及大鼠结肠5-HT、VIP含量与莫沙必利组相差不大,差异无统计学意义(P>0.05)。⑧与养荣润肠舒合剂高剂量组比较,养荣润肠舒合剂中剂量组大鼠结肠5-HT、VIP含量更高,OD值差异无统计学意义(P>0.05),而养荣润肠舒合剂低剂量组大鼠结肠的5-HT、VIP含量相对较低,与养荣润肠舒合剂中剂量组相比OD值也较低,具有统计学意义(P<0.01)。结论5-HT作为脑—肠轴的关键神经递质,VIP作为存在于中枢神经和肠神经系统中的神经递质,在慢性传输型便秘的发病中起着重要的作用;中药方剂养荣润肠舒合剂能有效提高慢性传输型便秘大鼠结肠5-HT、VIP含量,增强5-HT、VIP的表达有关;因此,作者认为养荣润肠舒合剂可能是通过这一机制改善慢性传输型便秘的临床症状,从而达到“以补治秘”的目的。

5-HT受体在瘙痒中的作用研究进展

由组胺介导的经典瘙痒信号通路以及非组胺介导的其他瘙痒信号通路对于瘙痒的产生和感知具有重要作用。5-羟色胺(5-hydroxytrptamine,5-HT)又称血清素,是一种神经递质和血管活性胺类物质,可以引起明显的瘙痒行为。大量研究揭示了5-HT及其多种受体在急性和慢性瘙痒发生中的重要性,然而介导5-HT能瘙痒的信号机制尚不完全清楚。本文对5-HT及其受体家族在瘙痒中的作用及其相关信号机制进行简要梳理总结,为瘙痒相关疾病的临床诊疗或药物开发提供一定的参考。

长期服用普芦卡必利对慢传输型便秘雌性大鼠肠道组织及5-HT受体表达水平影响的研究

目的:探究长期口服普芦卡必利对慢传输型便秘雌性大鼠肠道组织及5-HT受体表达水平的影响,为该药在临床治疗中的规范应用提供理论支持。方法:选用成年雌性SD大鼠,将其随机分为正常组、模型组以及普芦卡必利(力洛)组,并进行为期2个月的干预。观察指标包括大鼠首次白便排出时间、粪便含水率、结肠含水量、肠道组织病理和黏液分泌情况,以及5-羟色胺(5-Hydroxytryptamine,5-HT)、5-羟色胺3受体(5-Hydroxytryptamine Receptor 3,5-HT3R)、5-羟色胺4受体(5-Hydroxytryptamine Receptor 4,5-HT4R)蛋白表达等变化。结果:长期服用普芦卡必利显著改善了慢传输型便秘大鼠的排便时间、结肠含水量和粪便含水率等指标(P<0.05)。结肠病理组织染色和黏液染色结果表明,该药物能够改善大鼠结肠组织的病理状态和结肠黏液分泌情况。酶联免疫吸附(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)和免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)检测显示,与模型组相比,力洛组的5-HT、5-HT3R、5-HT4R蛋白表达水平显著升高(P<0.05),而与空白组相比,力洛组的蛋白表达水平无显著差异(P>0.05)。结论:长期服用普芦卡必利有助于改善慢传输型便秘模型大鼠的疾病状态、肠道组织病理状态和结肠黏液分泌情况,同时提高了5-HT受体的表达水平。

养血清脑颗粒联合艾司西酞普兰治疗卒中后抑郁的临床效果及对血清5-HT和NE水平影响

目的:研究养血清脑颗粒联合艾司西酞普兰治疗卒中后抑郁(Post-stroke depression,PSD)的临床效果及对血清5-羟色胺(5-Hydroxy tryptamine,5-HT)和去甲肾上腺素(Norepinephrine,NE)水平影响。方法:选取我院收治的卒中后抑郁患者400例。随机分为2组各200例。对照组给予艾司西酞普兰,治疗组在此基础上联用养血清脑颗粒。分析对比两组的疗效、汉密顿抑郁量表(Hamilton depression scale,HAMD)评分、简易精神状态检查量表(Mini-mental state examination,MMSE)评分和Barthel指数评分及血清5-HT和NE水平。结果:治疗后,治疗组总有效率显著高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组HAMD各条目评分均较治疗前显著降低(P<0.05);并且治疗组降低程度较大(P<0.05)。治疗后,两组MMSE评分和Barthel指数评分及血清5-HT和NE水平均显著升高(P<0.05);且治疗组升高程度较大(P<0.05)。结论:采用养血清脑颗粒联合艾司西酞普兰治疗PSD可提高临床疗效,能够改善认知功能。

颐脑解郁方联合五行音乐对轻中度卒中后抑郁患者血清5-HT、NE的影响研究

【目的】探讨颐脑解郁方联合五行音乐对轻中度卒中后抑郁(PSD)患者的治疗效果及对血清5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)的作用。【方法】将120例轻中度PSD患者随机分为西药组、颐脑解郁方组、五行音乐组、联合组4组,每组各30例,各组患者在常规脑卒中康复治疗基础上,分别给予盐酸氟西汀胶囊、颐脑解郁方、五行音乐、颐脑解郁汤联合五行音乐治疗,疗程为4周。观察各组患者治疗前后汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)神经功能评分、改良Rankin量表(mRS)评分、Barthel指数(BI)评分及血清5-HT、NE水平的变化情况,并评价各组患者的临床疗效。【结果】(1)治疗4周后,西药组、五行音乐组、颐脑解郁方组、联合组的总有效率分别为86.67%(26/30)、76.67%(23/30)、73.33%(22/30)、93.33%(28/30);组间比较,联合组的总体疗效优于其他3组(P<0.05),西药组优于五行音乐组和颐脑解郁方组(P<0.05),而五行音乐组与颐脑解郁方组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)治疗后,各组患者的HAMD评分、NIHSS评分、m RS评分和BI评分均较治疗前明显改善(P<0.05);组间比较,联合组对各项量表评分的改善作用优于其他3组,西药组优于五行音乐组和颐脑解郁方组,五行音乐组又优于颐脑解郁方组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)治疗后,各组患者血清5-HT、NE水平均较治疗前明显升高(P<0.05);组间比较,联合组的血清5-HT、NE水平高于其他3组,西药组高于五行音乐组和颐脑解郁方组,五行音乐组又高于颐脑解郁方组,差异均有统计学意义(P<0.05)。【结论】颐脑解郁方联合五行音乐疗法治疗轻中度PSD患者疗效确切,可有效调控血清5-HT、NE水平,改善患者抑郁症状,促进患者神经功能恢复,改善患者预后,提高患者生活质量。

血清GABA、BDNF、5-HT、DA及NE在胃食管反流病中的表达及临床意义

目的探讨血清γ-氨基丁酸(GABA)、脑源性营养因子(BDNF)、5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)及多巴胺(DA)在胃食管反流病(GERD)中的表达及临床意义。方法选取100例GERD患者作为GERD组、40例同期健康体检者为对照组,GERD组患者给予药物治疗8周,根据治疗效果分为效果良好组和效果不良组;对照组于体检时、GERD组于治疗前、治疗后(8周时)取外周静脉血,检测血清GABA、BDNF、5-HT、DA、NE、胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)、胆囊收缩素(CCK)水平;采用匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、焦虑自评量表(SAS)、日常生活能力量表(ADL)评分评估GERD组治疗前后、对照组体检时的睡眠质量、抑郁程度、焦虑状态、日常生活能力;比较GERD患者治疗前后、效果良好及效果不良组食管括约压力、立位返流时间比、卧位反流时间比、总反流时间;采用Pearson分析GERD患者治疗前GABA、BDNF、5-HT、NE及DA水平与患者食管括约肌压力、立位返流时间比、卧位返流时间比、总返流时间比、MTL、GAS、CCK的相关性。结果GERD组治疗后血清GABA、BDNF、5-HT、NE、DA、MTL、GAS水平高于治疗前、但低于对照组,血清CCK水平及各量表评分均低于治疗前、但高于对照组(P<0.05);GERD组患者治疗后食管括约压力高于治疗前,立位返流时间比、卧位反流时间比、总反流时间均低于治疗前(P<0.05);30例疗效不良组GERD患者血清GABA、BDNF、5-HT、NE、DA、MTL、GAS水平及食管括约肌压力均低于70例疗效良好组,血清CCK水平、各量表评分、立位返流时间比、卧位反流时间比、总反流时间比均高于疗效良好组(P<0.05);GERD患者治疗前血清BDNF、5-HT、DA水平与MTL、GAS、食管括约肌压力呈正相关,与立位返流时间比、卧位反流时间比、总反流时间比、CCK呈负相关,GABA、NE与MTL、GAS、食管括约肌压力呈正相关,NE与立位返流时间比、CCK呈负相关性,GABA与立位返流时间比、总反流时间比、CCK呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论GABA、BDNF、5-HT、NE及DA水平与胃内激素MTL、GAS、CCK的合成分泌及胃动力相关指标关系密切,这些神经递质可能参与GERD的发生和发展过程。

自拟安神方对心肾不交证失眠大鼠皮质区和海马区5-HT和DA信号通路影响

目的探索自拟安神方(简称安神方)对大鼠不同脑区5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)和多巴胺(dopamine,DA)信号通路的影响,揭示安神方抗大鼠心肾不交证失眠的机制。方法将SD雄性大鼠随机分为正常组,模型组,阳性对照组,安神方高、中、低剂量组,每组10只。除正常组外,其他各组采用多因素方法制备改良的心肾不交证失眠大鼠模型,灌胃治疗2周。HE染色观察大鼠脑组织形态结构。高效液相色谱-电化学法(HPLC-ECD)检测大鼠皮质区和海马区DA和5-HT的含量。免疫蛋白印迹法检测5-HT信号通路上5-HT_(1A)受体、5-HT_(2A)受体、磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP-response element binding protein,CREB)、蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)和DA信号通路上D_(1)R_(1)在皮质区和海马区的蛋白表达。结果HE染色显示模型组皮质区神经元有少量的凋亡,海马结构区变化不明显;安神方组皮质区神经元凋亡有所减轻。HPLC-ECD结果显示,与正常组比较,模型组皮质区和海马区DA含量均升高(P<0.05),5-HT含量均显著下降(P<0.05);与模型组比较,安神方组皮质区和海马区DA含量显著降低(P<0.05),同时海马区5-HT含量有所提高(P<0.05)。免疫印迹结果显示,与正常组比较,模型组皮质区5-HT_(1A)和CREB蛋白表达降低(P<0.05),海马区D_(1)R_(1)蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,安神方组皮质区5-HT_(1A)和信号通路上关键蛋白CREB的蛋白表达上调(P<0.05),并且海马区D_(1)R_(1)的蛋白表达下调(P<0.05),其信号通路上CREB蛋白表达差异虽无统计学意义,但各给药组仍有上调趋势。结论安神方抗心肾不交证失眠的机制可能与抑制皮质区神经元凋亡,并促进皮质区和海马区5-HT通路功能、抑制DA通路功能有关。

射干止咳胶囊镇咳作用及对RARs受体、HA、5-HT的影响

目的探讨射干止咳胶囊镇咳作用部位及潜在的作用机制。方法采用浓氨水诱发小鼠咳嗽模型,观察射干止咳胶囊镇咳作用的量效关系;采用电刺激豚鼠喉上神经引咳模型,观察射干止咳胶囊中枢性镇咳作用;采用机械刺激致辣椒素脱敏豚鼠咳嗽模型,观察射干止咳胶囊外周性镇咳作用;采用烟熏建立豚鼠慢性支气管炎模型,观察射干止咳胶囊对血管活性胺类物质组胺(HA)和5-羟色胺(5-HT)的影响。结果射干止咳胶囊在43.00、86.00、172.00 mg提取物·kg^(-1)剂量下具有降低小鼠咳嗽次数的作用(P<0.05或P<0.01)。射干止咳胶囊低、中、高剂量组在给药后30 min、60 min时,均无明显抑制电刺激豚鼠喉上神经引咳作用。射干止咳胶囊低剂量组在给药60 min,中剂量组在给药30 min,高剂量组在给药30 min、60 min时可显著抑制机械刺激所致的辣椒素脱敏豚鼠咳嗽(P<0.05)。与模型对照组比较,射干止咳胶囊低、中、高剂量组豚鼠血清中HA含量明显减少(P<0.05或P<0.01);射干止咳胶囊高剂量组豚鼠血清5-HT含量明显减少(P<0.05)。结论射干止咳胶囊的镇咳作用部位不在中枢,其外周性镇咳作用与抑制RARs受体有关,同时HA、5-HT等血管活性胺类物质也参与其中。

清郁和降汤抑制反流性食管炎大鼠5-HT释放及TGR5/TRPA1通路蛋白表达

【目的】探讨清郁和降汤对反流性食管炎(RE)大鼠的治疗作用及机制。【方法】将48只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,中药低、中、高剂量组及西药组,每组8只。除假手术组,其余5组大鼠采用前胃结扎联合外置幽门部分结扎术建立反流性食管炎模型。成功造模后,中药低、中、高剂量组分别对应给予清郁和降汤7.9、15.8、31.6 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,西药组给予泮托拉唑蒸馏水混悬液8.4 mg·kg^(-1)·d^(-1)、莫沙比利蒸馏水混悬液0.19 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,假手术组与模型组给予等体积蒸馏水灌胃。连续灌胃14 d后,将所有大鼠处死取材。采用苏木素-伊红(HE)染色法观察食管组织病理学改变,采用酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血清中5-羟色胺(5-HT)、色氨酸羟化酶1(TPH1)、P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)的含量,分别采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法、蛋白免疫印迹(Western Blot)法对应检测食管组织G蛋白偶联胆汁酸受体5(TGR5)、瞬时受体电位锚蛋白1(TRPA1)、瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)、磷脂酶C(PLC)、蛋白酶激活受体2(PAR2)mRNA或蛋白表达水平。【结果】与假手术组比较,模型组大鼠可见食管黏膜出现较为明显的损伤及炎细胞浸润,血清中5-HT、TPH1、SP、CGRP含量显著增高(P<0.01),食管组织中TRG5、TRPA1、TRPV1、PLC、PAR2 mRNA及蛋白表达水平显著增高(P<0.01);与模型组比较,中药低、中、高剂量组及西药组大鼠食管黏膜病理损伤得到明显改善,血清中5-HT、TPH1、SP、CGRP含量显著降低(P<0.01),食管组织中TRG5、TRPA1、TRPV1、PLC、PAR2 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。【结论】清郁和降汤可有效改善大鼠反流性食管炎,其机制可能与抑制TGR5/TRPA1通路,减少5-HT释放,进而降低食管敏感性有关。

P2X3受体介导电针调节肠易激综合征内脏痛大鼠结肠5-HT、SERT的作用研究

目的探讨嘌呤能配体门控离子通路3(purinergicligand-gatedionchannel 3,P2X3)受体介导电针对肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)内脏痛大鼠结肠5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、5-HT再摄取转运蛋白(serotonnin transporter,SERT)的调节作用。方法选取SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、电针组、P2X3受体激动剂组、P2X3受体激动剂+电针组,通过三硝基苯磺酸(trinitrobrnzen sulfonic acid,TNBS)灌肠液灌肠制备IBS内脏痛大鼠模型。模型制备3周后运用电针、髓鞘内注射、电针和髓鞘内注射相结合等方法进行干预。采用结肠组织病理染色、腹部回撤反射(abdominal withdrawal reflex,AWR)评分观察IBS内脏痛模型是否制作成功,运用AWR评分、酶联免疫吸附法、蛋白质印迹法、实时荧光定量PCR等方法检测IBS大鼠内脏痛敏的变化及IBS大鼠结肠5-HT、SERT的表达变化。结果(1)电针能降低IBS大鼠在40、80 mmHg压力结直肠扩张(colorectal distention,CRD)刺激下的AWR评分(P<0.05,P<0.01);(2)电针能够下调IBS大鼠结肠5-HT的表达(P<0.01),上调结肠SERT蛋白和mRNA的表达(P<0.01);(3)P2X3受体被激活后,电针能够下调IBS大鼠结肠5-HT的表达(P<0.05),上调结肠SERT蛋白和mRNA的表达(P>0.05)。结论P2X3受体介导电针调节IBS内脏痛大鼠结肠中5-HT、SERT蛋白及mRNA的异常表达,可能是电针缓解IBS大鼠内脏痛外周敏化的机制之一。

棉铃虫5-HT1和5-HT2基因的克隆及表达模式分析

5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)是昆虫体内一种重要的生物胺,其通过结合特异性的G蛋白偶联受体在昆虫体内发挥不同的神经调控作用。本研究基于转录组测序数据结合RT-PCR技术鉴定克隆了棉铃虫5-HT受体基因5-HT1和5-HT2,采用生物信息学方法分析其序列特征,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测了其在幼虫和成虫不同组织内的表达特征。结果显示,棉铃虫体内分别表达5-HT的2类受体基因:5-HT1A、5-HT1B、5-HT2A和5-HT2B。系统进化树分析表明,棉铃虫5-HT受体基因分为3个不同分支,而5-HT1和5-HT2可明显分别分成2个不同分支,各分支均与家蚕和烟草天蛾5-HT相应受体基因具有较高的同源性。RT-qPCR结果显示,在幼虫期,4种5-HT受体基因都在头部显著高表达,成虫期除在脑部高表达外,在触角或腹部也有高表达。其中5-HT1A和5-HT1B在雌成虫触角表达量显著高于雄成虫触角,5-HT1A和5-HT2B在雌成虫腹部表达量显著高于雄成虫腹部,而5-HT1B在雄成虫腹部表达量显著高于雌成虫腹部。以上结果表明5-HT1和5-HT2可能参与棉铃虫脑部神经调控,触角嗅觉感受及生殖发育等活动。该结果为进一步明确棉铃虫5-HT受体的功能奠定了基础。

基于脑肠轴探究半夏泻心汤对DSS-UC小鼠肠道菌群及5-HT的影响

目的观察半夏泻心汤对采用葡聚糖硫酸钠(Dextran sulfate sodium,DSS)自由饮用诱导建立的溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)模型小鼠肠道微生物及5-HT的影响,从脑肠轴角度分析半夏泻心汤治疗UC的作用机制。方法将40只C57BL6/J雄性小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药(美沙拉嗪)组及半夏泻心汤组,除空白组外的各小鼠采用2.5%DSS水溶液自由饮用7天诱导建立UC小鼠模型。自实验第8天起,分别采用灭菌水、美沙拉嗪水溶液、半夏泻心汤水溶液给上述各组别小鼠灌胃。采用HE染色观察结肠组织病理学变化,ELISA方法检测血清、结肠及脑组织中5-HT含量,16S rRNA测序技术进一步检测模型小鼠粪便中菌群的变化。结果经半夏泻心汤干预后,与模型组比较,实验组小鼠较模型组小鼠的DAI指数显著降低(P<0.05);抑炎因子IL-2、IL-4及致炎因子IFN-γ水平均有显著恢复(P<0.05);结肠近端及远端病理组织学评分亦均有显著降低(P<0.01);外周5-HT水平显著降低(P<0.05),中枢5-HT水平有升高趋势;Clostridium_sensu_stricto_1、unclassified_p__Firmicutes相对丰度升高(P<0.05),Lachnospiraceae_NK4A136_group、Lachnoclostridium、norank_f__Oscillospiraceae、Eubacterium_xylanophilum_group相对丰度降低(P<0.05)。同时研究发现,众多肠道微生物菌属与机体外周及中枢5-HT水平存在显著相关性。结论半夏泻心汤可以通过改善UC小鼠肠道微生物组成结构,以降低外周5-HT水平、升高中枢5-HT水平,进而改善肠道炎症反应、缓解焦虑情绪,从而发挥治疗溃疡性结肠炎的作用。

白芍总苷对腹泻型肠易激综合征大鼠5-HT信号通路的影响

目的:探讨白芍总苷对腹泻型肠易激综合征(diarrhea predominant irritable-bowel syndrome,IBS-D)大鼠5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)信号通路的影响。方法:选无特定病原体健康成年Wistar大鼠68只,雌雄各半,随机分为正常组13只和造模组55只。造模采用束缚联合慢性不可预见性刺激建立IBS-D大鼠模型,正常组大鼠正常饲养。将造模成功的52只大鼠随机分为模型组、匹维溴铵组及白芍总苷低、高剂量组,每组13只。模型组、正常组分别给予蒸馏水灌胃;匹维溴铵组给予匹维溴铵混悬液灌胃;白芍总苷低、高剂量组分别给予对应剂量白芍总苷溶液灌胃。各组大鼠均给药14天。检测比较各组大鼠粪便含水量,不同压力下腹壁撤退反射(abdominal withdrawal reflex,AWR)评分,结肠组织5-HT阳性细胞数及色氨酸羟化酶1(Tryptophan hydroxylase1,TPH-1)、5-羟色胺受体3(5-HT3 receptors,5-HT3R)、5-羟色胺转运蛋白(serotonin transporter,SERT)表达水平。结果:与模型组比较,各组大鼠粪便含水量较低,40 mm Hg(1 mm Hg≈0.133 kpa)、60 mm Hg压力下AWR评分较低,结肠组织5-HT阳性细胞数及TPH-1、5-HT3R表达水平较低,且白芍总苷低剂量组>白芍总苷高剂量组和匹维溴铵组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与模型组比较,各组大鼠结肠组织SERT表达水平较高,且白芍总苷低剂量组<白芍总苷高剂量组和匹维溴铵组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:白芍总苷能剂量依赖性地改善IBS-D大鼠腹泻症状,降低肠道敏感性,抑制结肠组织5-HT表达,其作用可能与调节5-HT信号通路中的TPH-1、5-HT3R、SERT表达有关。

银莱汤对胃肠积热合并肺炎大鼠5-HT水平及Th17/Treg细胞平衡的影响

目的探究银莱汤对胃肠积热合并肺炎大鼠5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)水平,以及辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)与调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)细胞平衡的影响,阐明银莱汤治疗胃肠积热合并肺炎的相关机制。方法将30只4周龄SPF级大鼠随机分为正常组、胃肠积热组、肺炎组、胃肠积热合并肺炎组、银莱汤组治疗组,每组6只。正常组给予大鼠维持饲料、纯水灌胃、纯水雾化;胃肠积热组给予高热量饲料配合牛奶灌胃制备胃肠积热模型;肺炎组采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)(0.5 mg/mL)雾化吸入制备肺炎模型;胃肠积热合并肺炎组以特制高热量饲料联合LPS雾化制备胃肠积热合并肺炎模型;银莱汤治疗组在胃肠积热合并肺炎模型的基础上给予银莱汤(每100g体重按照0.56 g/mL)灌胃。每日监测大鼠进食量、体质量、肛温等指标。采用HE染色观察肺组织病理学改变;酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组大鼠血清中5-HT及白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β、IL-17A、IL-10、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)等细胞因子水平;蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测肠系膜淋巴结(mesenteric lymph nodes,MLNs)中Th17细胞、Treg细胞特异性转录因子Rorγt和Foxp3的表达水平;RT-PCR和WB检测结肠组织色氨酸羟化酶(tryptophan hydroxylase,Tph)1的表达。结果与肺炎组相比,胃肠积热合并肺炎组大鼠肺部炎性损伤明显;血清5-HT、IL-10水平降低,IL-17A水平升高,TNF-α、IL-1β、IL-6等促炎因子水平升高;结肠Tph1的mRNA及蛋白表达水平降低;MLNs中Rorγt蛋白表达升高、Foxp3蛋白表达降低。与胃肠积热合并肺炎组相比,银莱汤治疗组大鼠肺部炎性损伤减轻,血清5-HT水平、IL-10水平升高,IL-17A水平降低,TNF-α、IL-1β、IL-6等促炎因子水平降低;结肠Tph1 mRNA及蛋白表达水平升高;MLNs中Rorγt蛋白表达降低、Foxp3蛋白表达升高。结论胃肠积热合并肺炎可导致大鼠机体炎性因子水平升高、5-HT水平降低以及Th17/Treg细胞失衡;银莱汤可以通过调节胃肠积热合并肺炎大鼠5-HT水平,调节Th17/Treg细胞平衡,进而起到治疗作用。

附子-肉桂对慢传输型便秘大鼠5-HT信号通路及c-Kit表达的影响

目的研究不同比例附子-肉桂配伍通过调控STC大鼠5-HT信号通路及c-Kit表达改善肠道动力的作用机制。方法运用盐酸洛哌丁胺灌胃建立STC大鼠模型,随机分为空白组、模型对照组、附子-肉桂(2∶1)组,附子-肉桂(1∶2)组、附子-肉桂(1∶1)组、莫沙必利组。各组按照对应药物或蒸馏水灌胃14天。观察大鼠一般情况,计算大鼠粪便粒数、肠道推进率,HE观察大鼠结肠病理改变,ELISA法测定大鼠血清、结肠5-HT含量,免疫荧光染色检测结肠CgA阳性表达,免疫组化法检测结肠5-HT3R/5-HT4R、c-Kit表达情况,RT-PCR法检测5-HT3R/5-HT4R mRNA表达水平。结果各组大鼠结肠无明显病理改变,与空白组相比,模型对照组大鼠粪便含水率、肠道推进率显著降低(P<0.01),5-HT含量明显下调,CgA、5-HT3R/5-HT4R蛋白与基因表达水平均显著下降(P<0.01),c-Kit表达减少。与模型组相比,附子-肉桂(2∶1)组、附子-肉桂(1∶1)组、莫沙必利组粪便粒数、肠道推进率、5-HT含量、c-Kit、CgA阳性表达显著增加(P<0.01),5-HT3R/5-HT4R蛋白与基因表达水平显著上调(P<0.01)。结论附子-肉桂2∶1及1∶1比例配伍能明显增加粪便粒数,提高肠推进率,其作用可能与通过调节结肠c-Kit、CgA表达,增加Cajal间质细胞数及5-HT含量,从而上调5-HT3R/5-HT4R表达有关。